脐带源间充质干细胞的分离和生物学性状
间充质干细胞；,脐带；,多能干细胞,,间充质干细胞；,脐带；,多能干细胞,1材料和方法,2结果,参考文献：
摘要: 目的 建立从脐带分离间充质干细胞的方法，并研究其生物学性状。 方法 脐带经酶消化后于DMEMLG/F12培养基中培养，倒置显微镜及电镜观察细胞形态学,细胞计数绘制细胞生长曲线，计数成纤维细胞集落形成单位(CFUF),流式细胞仪测定细胞周期及细胞免疫表型，免疫组织化学染色及RTPCR检测其体外诱导成脂肪和成骨分化的能力，RTPCR检测其细胞因子的分泌,与脐血来源CD34+细胞共同培养检测其支持造血的能力。 结果 经酶消化后，每cm脐带可得到中位数为1.01×106的有核细胞,CFUF产率为1/1 609有核细胞,经贴壁传代可分离出成纤维样细胞,细胞倍增时间为(28.02±10.53)h。流式细胞仪分析细胞周期显示，>80%的细胞处于G0/G1期，S+G2+M期的细胞仅占(13.04±4.31)%。免疫表型分析显示,CD13、CD29、CD44、CD105(SH2)、CD73(SH3)、CD166和MHCI阳性，CD45、CD34、CD38、CD31和MHCⅡ阴性。体外诱导实验证实,该细胞具有成脂肪和成骨分化的能力。RTPCR显示,该细胞表达干细胞因子、血小板生成素，酪氨酸激酶受体配基、白细胞介素6、巨噬细胞集落刺激因子、白血病抑制因子、 基质细胞衍生因子和血管内皮细胞生长因子，不表达白细胞介素3。与脐血来源CD34+细胞共同培养2周可见鹅卵石形成区,共培养8周证实其支持长期造血能力。 结论 建立从脐带中分离间充质干细胞的方法，脐带是间充质干细胞的新的来源。关键词: 间充质干细胞； 脐带； 多能干细胞
间充质干细胞(MSC)是来源于发育早期中胚层和外胚层的一类多能干细胞，因其在组织工程、造血干细胞移植以及基因治疗领域的潜在应用，成为干细胞研究的热点。目前MSC的主要来源为成人骨髓，但成人骨髓源MSC细胞数量及增殖分化潜能随年龄的增大而下降[1]，病毒感染率较高，且供者MSC的采集须行骨髓穿刺术，来源受到限制。笔者研究从足月胎儿脐带分离出MSC，并研究其形态学、生长特性、细胞周期、免疫表型、体外诱导分化能力及细胞因子分泌和体外支持造血的特征，旨在建立脐带MSC的富集方法，了解其生物学特性，寻找新的MSC来源。
1 材料和方法
1.1 材料 脐带取自足月剖宫产健康产妇，采集后6～12 h处理。
1.2 细胞分离和培养 脐带剪碎至约1 mm×1 mm×1 mm，经0.1%胶原酶和0.125%的胰酶37℃消化30 min，先后用100目及200目滤网过滤 ......
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