摘要: 目的 从病理形态学观察蕲蛇酶对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其机制。 方法 采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞后再灌注模型，光镜及电镜观察缺血3h恢复血流再灌24h后脑组织形态学变化，TTC染色观察脑梗死面积，免疫组织化学方法检测脑组织碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达。用药组分别在缺血即刻或再灌即刻静脉给予不同剂量的蕲蛇酶，观察比较模型组和蕲蛇酶所有给药组之间上述指标的变化。 结果 缺血即刻给蕲蛇酶4U/kg组较再灌即刻给蕲蛇酶同剂量组显著减小梗死灶(P<0.001)，减轻脑组织病理改变，并使脑组织中bFGF蛋白表达明显增多。 结论 蕲蛇酶对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用可能与脑组织中bFGF表达增高有关;提示该药早期使用更为有效。

    关键词: 蕲蛇;蛇毒凝血酶;再灌注损伤;神经元;成纤维细胞生长因子，碱性;大鼠

    急性缺血性脑血管病占所有脑血管病的50%～70%，具有高发病率和高致残率的特点，因而对其有效的防治一直是医学研究的重要课题。临床缺血性脑梗死患者大多因血栓阻塞脑动脉所致，原先认为通过早期溶栓恢复缺血区血流是治疗的关键，但近来研究发现缺血再灌注可继续加剧脑的损伤，即发生缺血再灌注损伤 [1] 。蕲蛇酶(Acutobin)是从尖吻蝮蛇毒中分离纯化的凝血酶样酶，能降低纤维蛋白浓度，抑制血小板聚集，促使血管内皮细胞释放组织型纤溶酶原激活物，具有抗栓溶栓作用 [2] 。由于溶栓后血液再通也可能导致不同程度再灌注损伤，因此研究蕲蛇酶对再灌后的脑组织是否有保护作用对该药的临床推广显得尤为重要。笔者前期研究发现，蕲蛇酶对脑缺血再灌注大鼠的脑组织有保护作用 [3] ，本实验在大鼠大脑中动脉缺血/再灌注(mid-dle cerebral artery occulusion/reperfusion，MCAO/R)模型上观察形态学改变，进一步探讨蕲蛇酶的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 Sprague-Dawley大鼠53只，♂，体质量235～275g(福建医科大学实验动物中心提供)，术前12h禁食，自由饮水。

    1.1.2 药品与试剂 蕲蛇酶(0.75U/支，福建三明制药厂，批号970315，福建医科大学蛇毒研究所惠赠)。2，3，5-氯化三苯基四氮唑(2，3，5-Triphenyl tetrazolium chloride，TTC)(分析纯，上海医药集团上海化学试剂公司);兔抗碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)多克隆抗体(美国Santa Cruz公司);SP免疫组织化学染色试剂盒防脱片剂Poly-L-Lysine和DAB显色剂(北京中山生物技术有限公司);其他试剂均为国产分析纯 ......