转染hVEGF165基因的骨髓间充质干细胞移植治疗兔心肌梗死
心肌梗死;,骨髓间充质干细胞;,血管内皮生长因子,,心肌梗死;骨髓间充质干细胞;血管内皮生长因子,1材料和方法,2结果,3讨论,【参考文献】
【关键词】 心肌梗死;骨髓间充质干细胞;血管内皮生长因子1 材料和方法
1.1材料
健康纯种新西兰大白兔48只,雌雄不拘,体质量2.0~2.5 kg,兔龄4~5 mo,由岭南科研动物中心提供. 低糖DMEM(Gibco产品);Percoll分离液(Pharmacia产品);VIII因子多克隆抗体及免疫组化检测试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司);BrdU mAb BrdU检测试剂盒(Roche产品);AdTrackCMVVEGF165真核表达质粒(由广东省人民医院中心实验室惠赠);LipofectamineTM 2000 reagent(GIBCOL).
1.2方法
1.2.1实验分组
将兔随机分为4组(n=12),心肌梗死2 wk后在梗死区心肌梗死组(MI组)注射生理盐水; MSCs移植组(MSC组)注射107个MSCs; VEGF组注射VEGF基因(100 μg溶于200 μL PBS中);MSCs+VEGF组(M+V组)注射107个转染VEGF基因的MSCs. 在移植前3 d进行VEGF基因转染.
1.2.2兔心肌梗死模型的建立结扎左前降支中段制作心肌梗死模型.
1.2.3兔骨髓干细胞的分离及培养于胫骨近端抽取骨髓血约4~6 mL ......
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