选择性鼠感觉运动区梗塞模型建立与缺血损伤定量分析技术
作者：向 敬 匡培根 蒲传强 张凤英
单位：100853 北京中国人民解放军总医院神经科(向警为博士研究生)
关键词：
中华医学杂志930914 脑血管疾病发病机制及有效药物的研究均需借助于理想的动物模型。我们利用光化学诱导血栓形成的原理，结合微刺激图和辣根过氧化物酶组织化学的研究结果，建立了选择性鼠感觉运动区梗塞模型。
1.资料和方法：SD鼠100只，体重 270～320g，随机分为8组：对照、单纯光照、单纯注射玫瑰红B(RB)及动脉血栓组(各组n=8)；实验Ⅰ～Ⅳ组(各组n=17)经静脉注射RB(分别为10、20、10及20mg/kg)后，再定向照射感觉运动区(分别照射10、10，20及20分钟)。硫喷妥钠麻醉(40mg/kg)。冷光源用光导纤维引导(孔径4mm)。Evans 蓝经尾静脉注射(2ml/kg)，TTC孵育37分钟(37℃)。TTC孵育后正常脑组织呈深红色，而梗塞区为白色；Evans 蓝静脉注射可使缺血区蓝染。应用下述方法定量分析苍白区或蓝染区的面积：(1)计算机图像处理系统；(2)刻度放大镜分格测定；(3)求积器。此外，尚可分别测定蓝染区或苍白区的重量。实验各组各取一只鼠用10%的甲醛灌注固定，常规 HE 染色，光镜观察病理改变。
2.结果与分析：(1)单纯注射 RB 或光照均不能诱发脑血栓形成，注射 RB 后再用冷光照射即可诱发血栓形成，且梗塞面积的大小与 RB 的剂量及光照时间相关。注射 RB 后定向照射大脑中动脉，可诱发大脑中动脉血栓形成，在大脑中动脉供血区域出现梗塞灶；(2)光镜观察在缺血区内血管中有血栓形成、红细胞瘀滞，神经元皱缩，胞浆中空泡形成，核染色过深，部分核固缩成三角形；(3)TTC 和 Evans 蓝均可显示缺血部位及范围；3种微量面积测定法与称重法均可有效区分不同的梗塞范围。其中 TTC 孵育后用计算机图像处理系统测量与 HE 染色后光镜观测最接近；(4)实验 IV 组各鼠均可见明显的肢体瘫痪，行为障碍及感觉减退等神经功能缺失症状。
用光化学诱导鼠脑感觉运动区梗塞模型简单方便，梗塞部位及范围恒定，神经功能缺失明显，结合上述定量分析方法，有助于脑缺血发病机制及治疗方法的研究。
(收稿：1993-01-30), 百拇医药
单位：100853 北京中国人民解放军总医院神经科(向警为博士研究生)
关键词：
中华医学杂志930914 脑血管疾病发病机制及有效药物的研究均需借助于理想的动物模型。我们利用光化学诱导血栓形成的原理，结合微刺激图和辣根过氧化物酶组织化学的研究结果，建立了选择性鼠感觉运动区梗塞模型。
1.资料和方法：SD鼠100只，体重 270～320g，随机分为8组：对照、单纯光照、单纯注射玫瑰红B(RB)及动脉血栓组(各组n=8)；实验Ⅰ～Ⅳ组(各组n=17)经静脉注射RB(分别为10、20、10及20mg/kg)后，再定向照射感觉运动区(分别照射10、10，20及20分钟)。硫喷妥钠麻醉(40mg/kg)。冷光源用光导纤维引导(孔径4mm)。Evans 蓝经尾静脉注射(2ml/kg)，TTC孵育37分钟(37℃)。TTC孵育后正常脑组织呈深红色，而梗塞区为白色；Evans 蓝静脉注射可使缺血区蓝染。应用下述方法定量分析苍白区或蓝染区的面积：(1)计算机图像处理系统；(2)刻度放大镜分格测定；(3)求积器。此外，尚可分别测定蓝染区或苍白区的重量。实验各组各取一只鼠用10%的甲醛灌注固定，常规 HE 染色，光镜观察病理改变。
2.结果与分析：(1)单纯注射 RB 或光照均不能诱发脑血栓形成，注射 RB 后再用冷光照射即可诱发血栓形成，且梗塞面积的大小与 RB 的剂量及光照时间相关。注射 RB 后定向照射大脑中动脉，可诱发大脑中动脉血栓形成，在大脑中动脉供血区域出现梗塞灶；(2)光镜观察在缺血区内血管中有血栓形成、红细胞瘀滞，神经元皱缩，胞浆中空泡形成，核染色过深，部分核固缩成三角形；(3)TTC 和 Evans 蓝均可显示缺血部位及范围；3种微量面积测定法与称重法均可有效区分不同的梗塞范围。其中 TTC 孵育后用计算机图像处理系统测量与 HE 染色后光镜观测最接近；(4)实验 IV 组各鼠均可见明显的肢体瘫痪，行为障碍及感觉减退等神经功能缺失症状。
用光化学诱导鼠脑感觉运动区梗塞模型简单方便，梗塞部位及范围恒定，神经功能缺失明显，结合上述定量分析方法，有助于脑缺血发病机制及治疗方法的研究。
(收稿：1993-01-30), 百拇医药