甲氰咪胍对人外周血单个核细胞产生白细胞介素2的调节作用
作者：闻勤生 张国治 孔宪涛 李 石
单位：710038 西安，第四军医大学唐都医院消化科(闻勤生)，上海第二军医大学长征医院内科(张国治、李 石)，实验诊断科(孔宪涛)
关键词：
中华医学杂志931019 为了解甲氰咪胍是否能调节肿瘤患者的免疫功能及其可能的作用机制，我们在体外观察了甲氰咪胍对胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)产生白细胞介素2(IL-2)的调节作用以及IL-2活性与外周血T细胞亚群的关系，旨在为肿瘤的免疫治疗提供新方法。
一、材料与方法
1.外周血标本来源：晚期胃癌31例，男22例，女9例，平均年龄51.5岁(39～71岁)。正常人32名，男21名，女11名，平均年龄53岁(40～70岁)。各取空腹脉血5ml，肝素抗凝。胃癌患者取血前未作过放疗、化疗和手术治疗。
, http://www.100md.com
2.IL-2诱生：用淋巴细胞分离液分离PBMC，洗涤后用RPMI-1640细胞培养液调细胞浓度为1×106/ml，加入20孔细胞培养板中，每孔1ml，部分实验孔内加入甲氰咪胍(上海第一制药厂产品)至终浓度为10μg/ml，每孔均加植物血凝素(PHA-P)(美国Difco Lab产品)至终浓度为10μg/ml，在37℃、5%CO2培养48小时后离心收集上清液，-20℃保存。
3.IL-2活性测定：方法见文献[1]。
4.T淋巴细胞亚群测定：方法见文献[2]。
二、结果
1.正常人与胃癌患者IL-2活性比较：正常人和胃癌患者IL-2活性分别为117±25U/ml和7121U/ml(P〈0.01)。
2.甲氰咪胍对IL-2生成的调节作用：加入甲氰咪胍后，正常人和胃癌患者的IL-2活性分别上升到141±31U/ml(P〈0.05)和134±32U/ml(P〈0.01)。
, 百拇医药
3.正常人与胃癌患者T细胞亚群比较：正常人和胃癌患者的OKT3(%)分别为74.0±2.2和72.2±3.2(P〉0.05)，OKT4(%)分别为41.0±3.8和39.7±5.0(P〉0.05)，OKT8(%)分别为29.6±4.0和39.5±5.3(P〉0.05)。
4.IL-2活性与T细胞亚群的相关性：正常人和胃癌患者的IL-2活性与OKT3和OKT4间相关不显著(P〉0.05)，与OKT8间呈直线负相关(P〉0.01)。
三、讨论
胃癌患者IL-2活性降低主要与抑制性T淋巴细胞(OKT8亚群)数量增多和活性增高有关。抑制性T细胞表面具有组织胺H2受体，组织胺具有多种免疫抑制功能[3]，应用甲氰咪胍后，通过阻断抑制性T细胞表面的组织胺H2受体而发挥免疫调节作用。促进IL-2等活性物质的合成。本实验表明，胃癌患者的OKT8亚群明显高于正常人，其与IL-2活性间呈显著直线负相关，应用甲氰咪胍后，因其通过阻断组织胺H2受体而阻止抑制性T细胞的激活，促进IL-2的生成，使胃癌患者的IL-2活性正常人比差异无显著性。
, http://www.100md.com
1985年Rosenberg等[4]报道了用LAK/IL-2治疗晚期肿瘤的结果后，引起了国外学者的极大兴趣。但LAK/IL-2治疗费用昂贵，有定毒副作用，因此，研究IL-2增强剂，促进机体自身产生IL-2，以减少外源性IL-2用量，减少治疗费用，减轻毒副作用，则是另一条可行途径。本实验结果表明，甲氰咪胍能增加PBMC的IL-2生成，具有免疫调节作用。甲氰咪胍价格低廉，来源方便，无明显毒副作用，因此可作为一种新的免疫增强剂试用于晚期肿瘤的治疗。但尚需进一步观察体内应用甲氰咪胍后免疫功能的改变和临床疗效。
注：本研究工作在上海第二军医大学长征医院完成
参考文献
1 Gillis S, Mary M, Winny O, et al. T cell growth factor. J Immunol, 1978, 120:2027.
, 百拇医药
2 张鲁榕，孔宪涛，张 浩，等.流式细胞仪分析100例正常成人T细胞亚群.上海免疫学杂志，1988，8：367.
3 Dohlsten M, Milam G, Levy M, et al. Histamine acts directly on human T cells to inhibit interleukin-2 and interferon-r production. Cell Immunol, 1987, 09:65.
4 Rosenberg SA, Michael TL, Lind MM, et al. Observa tions on the systemic administration of autologous lymphokine-activated killer cells and recombinant interleukin-2 to patients with metastatic cancer. New Engl J Med, 1985, 313:1485.
(收稿：1993-01-29 修回：1993-07-10), 百拇医药
单位：710038 西安，第四军医大学唐都医院消化科(闻勤生)，上海第二军医大学长征医院内科(张国治、李 石)，实验诊断科(孔宪涛)
关键词：
中华医学杂志931019 为了解甲氰咪胍是否能调节肿瘤患者的免疫功能及其可能的作用机制，我们在体外观察了甲氰咪胍对胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)产生白细胞介素2(IL-2)的调节作用以及IL-2活性与外周血T细胞亚群的关系，旨在为肿瘤的免疫治疗提供新方法。
一、材料与方法
1.外周血标本来源：晚期胃癌31例，男22例，女9例，平均年龄51.5岁(39～71岁)。正常人32名，男21名，女11名，平均年龄53岁(40～70岁)。各取空腹脉血5ml，肝素抗凝。胃癌患者取血前未作过放疗、化疗和手术治疗。
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2.IL-2诱生：用淋巴细胞分离液分离PBMC，洗涤后用RPMI-1640细胞培养液调细胞浓度为1×106/ml，加入20孔细胞培养板中，每孔1ml，部分实验孔内加入甲氰咪胍(上海第一制药厂产品)至终浓度为10μg/ml，每孔均加植物血凝素(PHA-P)(美国Difco Lab产品)至终浓度为10μg/ml，在37℃、5%CO2培养48小时后离心收集上清液，-20℃保存。
3.IL-2活性测定：方法见文献[1]。
4.T淋巴细胞亚群测定：方法见文献[2]。
二、结果
1.正常人与胃癌患者IL-2活性比较：正常人和胃癌患者IL-2活性分别为117±25U/ml和7121U/ml(P〈0.01)。
2.甲氰咪胍对IL-2生成的调节作用：加入甲氰咪胍后，正常人和胃癌患者的IL-2活性分别上升到141±31U/ml(P〈0.05)和134±32U/ml(P〈0.01)。
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3.正常人与胃癌患者T细胞亚群比较：正常人和胃癌患者的OKT3(%)分别为74.0±2.2和72.2±3.2(P〉0.05)，OKT4(%)分别为41.0±3.8和39.7±5.0(P〉0.05)，OKT8(%)分别为29.6±4.0和39.5±5.3(P〉0.05)。
4.IL-2活性与T细胞亚群的相关性：正常人和胃癌患者的IL-2活性与OKT3和OKT4间相关不显著(P〉0.05)，与OKT8间呈直线负相关(P〉0.01)。
三、讨论
胃癌患者IL-2活性降低主要与抑制性T淋巴细胞(OKT8亚群)数量增多和活性增高有关。抑制性T细胞表面具有组织胺H2受体，组织胺具有多种免疫抑制功能[3]，应用甲氰咪胍后，通过阻断抑制性T细胞表面的组织胺H2受体而发挥免疫调节作用。促进IL-2等活性物质的合成。本实验表明，胃癌患者的OKT8亚群明显高于正常人，其与IL-2活性间呈显著直线负相关，应用甲氰咪胍后，因其通过阻断组织胺H2受体而阻止抑制性T细胞的激活，促进IL-2的生成，使胃癌患者的IL-2活性正常人比差异无显著性。
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1985年Rosenberg等[4]报道了用LAK/IL-2治疗晚期肿瘤的结果后，引起了国外学者的极大兴趣。但LAK/IL-2治疗费用昂贵，有定毒副作用，因此，研究IL-2增强剂，促进机体自身产生IL-2，以减少外源性IL-2用量，减少治疗费用，减轻毒副作用，则是另一条可行途径。本实验结果表明，甲氰咪胍能增加PBMC的IL-2生成，具有免疫调节作用。甲氰咪胍价格低廉，来源方便，无明显毒副作用，因此可作为一种新的免疫增强剂试用于晚期肿瘤的治疗。但尚需进一步观察体内应用甲氰咪胍后免疫功能的改变和临床疗效。
注：本研究工作在上海第二军医大学长征医院完成
参考文献
1 Gillis S, Mary M, Winny O, et al. T cell growth factor. J Immunol, 1978, 120:2027.
, 百拇医药
2 张鲁榕，孔宪涛，张 浩，等.流式细胞仪分析100例正常成人T细胞亚群.上海免疫学杂志，1988，8：367.
3 Dohlsten M, Milam G, Levy M, et al. Histamine acts directly on human T cells to inhibit interleukin-2 and interferon-r production. Cell Immunol, 1987, 09:65.
4 Rosenberg SA, Michael TL, Lind MM, et al. Observa tions on the systemic administration of autologous lymphokine-activated killer cells and recombinant interleukin-2 to patients with metastatic cancer. New Engl J Med, 1985, 313:1485.
(收稿：1993-01-29 修回：1993-07-10), 百拇医药