131I—抗人精浆蛋白抗体放射免疫显像诊断前列腺癌
作者：郝晓柯 梁国栋 张盈华 白玉杰 孙步洲 舒博学 周志耀 刘 璐
单位：710038西安，第四军医大学唐都医院中心实验室(郝晓柯、梁国栋、张盈华、张盈华、白玉杰)；西安医科大学附属二院核医学科(孙步洲、舒博学)；南京市鼓楼医院泌尿外科(周志耀)；南京铁道医学院附属医院核医学科(刘璐)
关键词：前列腺肿瘤；放射性核素成像
中华医学杂志931106 摘要 应用131I—抗人精浆蛋白(γ—Sm)抗体放射免疫显像对69例前列腺癌、37例前列腺增生症患者进行了诊断。采用SPECT及双核素示踪和计算机减影技术，结果最佳显像时间为96小时，肿瘤组织与非瘤组织摄取核素的放射比值(T/NT)为6.89，前列腺癌检出阳性率为95.7%，最小检出肿瘤直径0.5cm，其中13例盆腔淋巴结及骨转移灶同时被检出，而37例前列腺增生症仅2例呈弱阳性。本组病例同时用B超及CT对照检查的阳性率仅分别为70.8%和73.1%。证明此法不仅可以定性诊断，并能显示原发肿瘤灶及转移灶，作为前列腺癌的影像诊断，它还优于B超、CT等方法。
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近年来，应用放射性核素标记肿瘤特异性抗体进行放射免疫显像(RII)，为肿瘤的诊断开辟了新的途径〔1，2〕。我室自1989年以来，应用131I—抗人精浆蛋白抗体RII对前列腺癌及其转移癌的患者进行了早期定位诊断的研究。
资料及方法
一、临床病例
69例前列腺癌患者均经手术及病理证实，其中1例于1年前已做前列腺癌根治性切除，1例行前列腺全切，5例由于粘连严重仅切除部分前列腺。另外13例有骨及盆腔淋巴结转移。37例前列腺增生症、3例膀胱癌及21例其他肿瘤(13例肝癌、5例胃癌及3例骨肉瘤)患者为门诊及住院患者。患者于注射标记物前3天口服复方碘溶液，每次5滴，每天3次，连服7天，以封闭保护甲状腺。
二、抗体制备和标记
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抗人精浆蛋白(γ-Sm)抗体由本室制备，经IgG纯化，0.22μm滤膜无菌过滤处理。抗体标记采用氯胺-T法，取γ-Sm抗体800～1200μg，131I148百万克(MBq)，氯胺-T100μg，反应2分钟，偏重亚硫酸钠终止反应，过葡聚糖G50凝胶层析柱(瑞典Pharmacia公司)，以pH7.4,0.2MOL/L磷酸盐缓冲液洗脱，收集结合峰。整个标记过程均在无菌条件下进行。标记率40%～60%，放化纯度在90%以上，标记前后抗体免疫活性无明显变化。
使用99mTc-高分子右旋糖酐(DX，江苏原子能研究所提供，平均分子量120000)作为本底扣除剂。
三、显像方法
患者于静脉注入标记物后第48小时开始用SPECT(荷兰Philips公司)扫描摄像，分4次(48、72、96、120小时)采集，于96小时采集前，静脉注入99mTc-DX37MBq,25分钟后双道采集131I和99mTc。采集完毕后用计算机处理，将贮存的131抗体图像扣除血本底及膀胱99mTc图像，即得131I-γ-Sm抗体与前列腺癌特异性结合的定位图像。并在核素浓集的相应部位取10×10像素小规格的“感兴趣区(ROI)”，作为靶组织计数，以同样方式在两侧髂血管及腹中部取ROI，其均数作为非靶组织计数，计算肿瘤组织与非瘤组织摄取核素的放射比(T/NT，图1)。
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图1 前列腺癌RII求T/NT值ROI画取位置(A为前腺癌核素浓集区,BCD框为正常组织位置,E为本底区)
结 果
一、显像结果
69例前列腺癌患者经本法检出66例，阳性率为95.7%，同时用B超、CT对照检查，其阳性结果仅分别为70.8%和73.1%，经手术及病理证实均为前列腺癌。其中13例同时检出有骨及盆腔淋巴结转移灶，阳性率100%。而同时CT仅检出8例，阳性率为61.5%(图2～4)。
图2 前列腺癌RII图(P示癌核素浓集区)
图3 前列腺癌盆腔内转移癌RII图;M示盆腔内转移病灶核素聚集区;B为膀胱部位
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图4 前列腺癌淋巴结转移灶RII图;二个C箭头示
淋巴结转移灶的核素浓素浓集区
37例前列腺增生症患者，除2例呈弱阳性外，余均为阴性。其中10例临床诊断为前列腺癌，用本方法检查为阴性，后经手术及病理证实为前腺增生(其中包括3例膀胱癌伴有前列腺增生)，与本法诊断结果相符(图5)。
图5 前列腺增生症RII图(P示前列腺部位未见核素聚集)
11例前列腺癌患者，其血清前列腺酸性磷酸酶阴性(<0.5mg/L)、B超及CT均诊断为前列腺增生，用本法诊断阳性，后经手术及病理证实均为局限性前列腺癌(A1期)。本方法检出的最小肿瘤直径为0.cm。
, 百拇医药 5例患者因术中粘连严重仅切除部分前列腺癌组织，术后RII仍为阳性。1例手术全部切除前列腺，但术后RII仍阳性，后经病理标本发现切缘处仍残留有前列腺癌细胞。另1例行根治手术的患者，术后及1年后复查RII均为阴性，经2年随访患者仍健在，证实了手术的治疗效果(图6)。
图6 前列腺癌根治术后RII图(P示已切除的前列腺癌部位未见有核聚集;
分腔区内也未见明显的核素聚集灶
二、最佳显像时间
前列腺癌的T/NT比值随时间推移逐渐升高，96小时为最佳显像时间，T/NT值前列腺癌为3.08±0.72(X±S)，最高达6.89，转移灶为2.77±0.68，前列腺增生症为1.02±0.24，差异有非常显著意义(P<0.001，图7，8)。
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图7 前列腺癌RII扣本底前后图(左图为扣本底前,见核素聚集区不集中,膀胱影像与前列腺癌灶融合在一起;右图为扣本底后,见核素更加聚集,膀胱位置明确)
图8 前列腺增生症RII扣本前后图(左图为扣本底前,见膀胱位置有核素区,前列腺部位有散在核素;右图扣本底膀胱位置明显,前列腺部位无核素聚集)
三、交叉显像：
13例原发性肝癌患者用131I—AFP抗体、5例胃癌患者用131I—MG7抗体及3例骨肉瘤患者用131I—BMP抗体做RII的同时，对前列腺部位扫描均未见核素聚集。20例前列腺增生症患者在行前列腺RII同时，行其他脏器扫描，均无明确的核素积集，证明本法的特异性较高。
四、血清学变化：
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127例患者在注射131I—抗体后，均未发现任何不良反应，其血像、肝、肾功能在RII前后未观察到显著性变化。
讨 论
据统计，隐匿性前列腺癌为有临床症状病例的2～5倍，此类患者初诊时，已有转移癌灶的病例为20%～30%，其中骨骼转移占全部病例的60%～70%，占前列腺癌致死病例的97.6%，因此早期诊断非常重要。目前，前列腺癌的临床诊断方法很多，如直肠指诊、前列腺特异性抗原、经直肠超声、前列腺针刺活检、CT及核磁共振等，有些也较先进，但均有一定的局限性〔3〕。我们应用放射免疫显像技术，既能定位又能定性，使前列腺癌阳性检出率达95.7%。其中69例受检患者中检出A1期前列腺癌11例，而其他检查方法均未发现异常。另外本法检出转移病灶早于X线检查1～8个月，可见本法早期诊断的价值较大。
成功的显像取决于肿瘤大小、部位及抗体特异性等因素〔4〕，而前列腺是个小器官，位置较深，加之游离的131I从尿液排泄，造成膀胱显影，严重干扰了前列腺的显像效果，因而显像难度较大。我们使患者取截石体位，以探头45度角采集，可减 少膀胱与前列腺影像的重叠。并选用99mTc-DXF双核素无踪，同时扣除血池本底及膀胱影像，使显像工作一次完成。而且图像清晰，前列腺癌T/NT值明显提高，达6.89，对照组前列腺增生症T/NT值则有所下降。检出的最小肿瘤直径为0.5cm。
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精浆蛋白(γ-Sm)是前列腺癌分泌的特异性抗原〔5〕，本抗体经免疫组织化学染色定位，证实与前列腺癌组织有高度特异亲和性和良好的选择性，是一较为理想的标记抗体。尤其是能特异地检出前列腺癌转移病灶，并且可以确定此转移灶来自于前列腺癌，这点优于其他影像学诊断方法。本组有3例骨转移患者，就诊时转移灶来源不明确，经本方法证实为前列腺癌转移。另外，本方法用于前列腺癌手术后检查有无残留肿瘤组织，对治疗效果观察及预后判定有较大价值。
参考文献
1 Berche CB,Mach JP,Jean-Denis,et al.Tomoscintigraphy for detecting gastrointestinal and medullary thyroid cancers:first clinical results using rediolabelled monclonal antibodies against carcinvembrynic antigen.Br Med J,1982,285∶1447。
, 百拇医药
2 朱晓鸣，王世直，周 前，等。分泌AFP肿瘤免疫显像的临床应用。中华核医学杂志，1985，5(2)∶65。
3 Schmidt SD.Clinical Diagnosis of Prostatic Cancer.Can-cer(sup),1992,70∶221.
4 谢天豪。肿瘤的放射免疫显像与治。国外医学肿瘤学分册，1988，3∶143。
5 江藤耕作。血清γ-Sm测定床意羲。床病理，1986，特(68)∶55
(收稿：1993-06-07 修回：1993-08-10), 百拇医药
单位：710038西安，第四军医大学唐都医院中心实验室(郝晓柯、梁国栋、张盈华、张盈华、白玉杰)；西安医科大学附属二院核医学科(孙步洲、舒博学)；南京市鼓楼医院泌尿外科(周志耀)；南京铁道医学院附属医院核医学科(刘璐)
关键词：前列腺肿瘤；放射性核素成像
中华医学杂志931106 摘要 应用131I—抗人精浆蛋白(γ—Sm)抗体放射免疫显像对69例前列腺癌、37例前列腺增生症患者进行了诊断。采用SPECT及双核素示踪和计算机减影技术，结果最佳显像时间为96小时，肿瘤组织与非瘤组织摄取核素的放射比值(T/NT)为6.89，前列腺癌检出阳性率为95.7%，最小检出肿瘤直径0.5cm，其中13例盆腔淋巴结及骨转移灶同时被检出，而37例前列腺增生症仅2例呈弱阳性。本组病例同时用B超及CT对照检查的阳性率仅分别为70.8%和73.1%。证明此法不仅可以定性诊断，并能显示原发肿瘤灶及转移灶，作为前列腺癌的影像诊断，它还优于B超、CT等方法。
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近年来，应用放射性核素标记肿瘤特异性抗体进行放射免疫显像(RII)，为肿瘤的诊断开辟了新的途径〔1，2〕。我室自1989年以来，应用131I—抗人精浆蛋白抗体RII对前列腺癌及其转移癌的患者进行了早期定位诊断的研究。
资料及方法
一、临床病例
69例前列腺癌患者均经手术及病理证实，其中1例于1年前已做前列腺癌根治性切除，1例行前列腺全切，5例由于粘连严重仅切除部分前列腺。另外13例有骨及盆腔淋巴结转移。37例前列腺增生症、3例膀胱癌及21例其他肿瘤(13例肝癌、5例胃癌及3例骨肉瘤)患者为门诊及住院患者。患者于注射标记物前3天口服复方碘溶液，每次5滴，每天3次，连服7天，以封闭保护甲状腺。
二、抗体制备和标记
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抗人精浆蛋白(γ-Sm)抗体由本室制备，经IgG纯化，0.22μm滤膜无菌过滤处理。抗体标记采用氯胺-T法，取γ-Sm抗体800～1200μg，131I148百万克(MBq)，氯胺-T100μg，反应2分钟，偏重亚硫酸钠终止反应，过葡聚糖G50凝胶层析柱(瑞典Pharmacia公司)，以pH7.4,0.2MOL/L磷酸盐缓冲液洗脱，收集结合峰。整个标记过程均在无菌条件下进行。标记率40%～60%，放化纯度在90%以上，标记前后抗体免疫活性无明显变化。
使用99mTc-高分子右旋糖酐(DX，江苏原子能研究所提供，平均分子量120000)作为本底扣除剂。
三、显像方法
患者于静脉注入标记物后第48小时开始用SPECT(荷兰Philips公司)扫描摄像，分4次(48、72、96、120小时)采集，于96小时采集前，静脉注入99mTc-DX37MBq,25分钟后双道采集131I和99mTc。采集完毕后用计算机处理，将贮存的131抗体图像扣除血本底及膀胱99mTc图像，即得131I-γ-Sm抗体与前列腺癌特异性结合的定位图像。并在核素浓集的相应部位取10×10像素小规格的“感兴趣区(ROI)”，作为靶组织计数，以同样方式在两侧髂血管及腹中部取ROI，其均数作为非靶组织计数，计算肿瘤组织与非瘤组织摄取核素的放射比(T/NT，图1)。
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图1 前列腺癌RII求T/NT值ROI画取位置(A为前腺癌核素浓集区,BCD框为正常组织位置,E为本底区)
结 果
一、显像结果
69例前列腺癌患者经本法检出66例，阳性率为95.7%，同时用B超、CT对照检查，其阳性结果仅分别为70.8%和73.1%，经手术及病理证实均为前列腺癌。其中13例同时检出有骨及盆腔淋巴结转移灶，阳性率100%。而同时CT仅检出8例，阳性率为61.5%(图2～4)。
图2 前列腺癌RII图(P示癌核素浓集区)
图3 前列腺癌盆腔内转移癌RII图;M示盆腔内转移病灶核素聚集区;B为膀胱部位
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图4 前列腺癌淋巴结转移灶RII图;二个C箭头示
淋巴结转移灶的核素浓素浓集区
37例前列腺增生症患者，除2例呈弱阳性外，余均为阴性。其中10例临床诊断为前列腺癌，用本方法检查为阴性，后经手术及病理证实为前腺增生(其中包括3例膀胱癌伴有前列腺增生)，与本法诊断结果相符(图5)。
图5 前列腺增生症RII图(P示前列腺部位未见核素聚集)
11例前列腺癌患者，其血清前列腺酸性磷酸酶阴性(<0.5mg/L)、B超及CT均诊断为前列腺增生，用本法诊断阳性，后经手术及病理证实均为局限性前列腺癌(A1期)。本方法检出的最小肿瘤直径为0.cm。
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图6 前列腺癌根治术后RII图(P示已切除的前列腺癌部位未见有核聚集;
分腔区内也未见明显的核素聚集灶
二、最佳显像时间
前列腺癌的T/NT比值随时间推移逐渐升高，96小时为最佳显像时间，T/NT值前列腺癌为3.08±0.72(X±S)，最高达6.89，转移灶为2.77±0.68，前列腺增生症为1.02±0.24，差异有非常显著意义(P<0.001，图7，8)。
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图7 前列腺癌RII扣本底前后图(左图为扣本底前,见核素聚集区不集中,膀胱影像与前列腺癌灶融合在一起;右图为扣本底后,见核素更加聚集,膀胱位置明确)
图8 前列腺增生症RII扣本前后图(左图为扣本底前,见膀胱位置有核素区,前列腺部位有散在核素;右图扣本底膀胱位置明显,前列腺部位无核素聚集)
三、交叉显像：
13例原发性肝癌患者用131I—AFP抗体、5例胃癌患者用131I—MG7抗体及3例骨肉瘤患者用131I—BMP抗体做RII的同时，对前列腺部位扫描均未见核素聚集。20例前列腺增生症患者在行前列腺RII同时，行其他脏器扫描，均无明确的核素积集，证明本法的特异性较高。
四、血清学变化：
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127例患者在注射131I—抗体后，均未发现任何不良反应，其血像、肝、肾功能在RII前后未观察到显著性变化。
讨 论
据统计，隐匿性前列腺癌为有临床症状病例的2～5倍，此类患者初诊时，已有转移癌灶的病例为20%～30%，其中骨骼转移占全部病例的60%～70%，占前列腺癌致死病例的97.6%，因此早期诊断非常重要。目前，前列腺癌的临床诊断方法很多，如直肠指诊、前列腺特异性抗原、经直肠超声、前列腺针刺活检、CT及核磁共振等，有些也较先进，但均有一定的局限性〔3〕。我们应用放射免疫显像技术，既能定位又能定性，使前列腺癌阳性检出率达95.7%。其中69例受检患者中检出A1期前列腺癌11例，而其他检查方法均未发现异常。另外本法检出转移病灶早于X线检查1～8个月，可见本法早期诊断的价值较大。
成功的显像取决于肿瘤大小、部位及抗体特异性等因素〔4〕，而前列腺是个小器官，位置较深，加之游离的131I从尿液排泄，造成膀胱显影，严重干扰了前列腺的显像效果，因而显像难度较大。我们使患者取截石体位，以探头45度角采集，可减 少膀胱与前列腺影像的重叠。并选用99mTc-DXF双核素无踪，同时扣除血池本底及膀胱影像，使显像工作一次完成。而且图像清晰，前列腺癌T/NT值明显提高，达6.89，对照组前列腺增生症T/NT值则有所下降。检出的最小肿瘤直径为0.5cm。
, 百拇医药
精浆蛋白(γ-Sm)是前列腺癌分泌的特异性抗原〔5〕，本抗体经免疫组织化学染色定位，证实与前列腺癌组织有高度特异亲和性和良好的选择性，是一较为理想的标记抗体。尤其是能特异地检出前列腺癌转移病灶，并且可以确定此转移灶来自于前列腺癌，这点优于其他影像学诊断方法。本组有3例骨转移患者，就诊时转移灶来源不明确，经本方法证实为前列腺癌转移。另外，本方法用于前列腺癌手术后检查有无残留肿瘤组织，对治疗效果观察及预后判定有较大价值。
参考文献
1 Berche CB,Mach JP,Jean-Denis,et al.Tomoscintigraphy for detecting gastrointestinal and medullary thyroid cancers:first clinical results using rediolabelled monclonal antibodies against carcinvembrynic antigen.Br Med J,1982,285∶1447。
, 百拇医药
2 朱晓鸣，王世直，周 前，等。分泌AFP肿瘤免疫显像的临床应用。中华核医学杂志，1985，5(2)∶65。
3 Schmidt SD.Clinical Diagnosis of Prostatic Cancer.Can-cer(sup),1992,70∶221.
4 谢天豪。肿瘤的放射免疫显像与治。国外医学肿瘤学分册，1988，3∶143。
5 江藤耕作。血清γ-Sm测定床意羲。床病理，1986，特(68)∶55
(收稿：1993-06-07 修回：1993-08-10), 百拇医药