医学检验学
作者：杨振华
单位：100730 北京医院检验科
关键词：
中华医学杂志931223 近年检验工作者在推广新技术、新方法应用的同时，还注意到保证常规检验工作结果的准确性和可靠性，并作了不少质量保证工作，提出一些对质控工作的意见和建议。由卫生部北京老年医学研究所组织的京津沪三市胆固醇测定情况的调查[1，2]，受到检验界的注目。在1993年4月由中华医学会检验学会在上海召开的全国心血管疾病实验室诊断学术会议上曾对胆固醇标准化进行专题讨论。从这次调查结果看，胆固醇测定结果很不理想，结果能达到和靶值相差±3%的实验室只有30%，放宽标准到±5%，也仅有50%实验室能达的。与会者认为其原因与试剂品种混乱、标准品没有标化密切相关，其中由于标准品不一致造成的误差远高于方法学的误差。目前由李健斋领导的实验室已研究出胆固醇结晶[3]，纯度达99.8±0.1%，与美国国家科学技术研究所(NIST)的标准参考品纯度相。针对目前用于标化标准品的 ALBK 法操作复杂、技术要求高、难掌握等，提出一种用高效液相色谱(HPLC)分离测定血清胆固醇的方法[4]，其特点为选择6-氯豆甾醇为内标，选用较好的分离条件来消除血清中其他甾醇干扰，用该法测定美国SRM909标准品中胆固醇结果为 4.346mmol*g-1/L，与用 NIST 法测定值(4.359mmol*g-1/L)接近，此方法受到国内外临床化学界重视[5]。通过国内外其他实验室进一步评价，有望成为另一类实用的参考方法，用于统一和标化胆固醇标准液。在第二次调查时，在发放待测血清时还有一份由参考方法定值的统一标准品。结果误差在±3%和±5%内的实验室分别上升约为50%和70%。说明了统一标准品和统一测定方法是提高胆固醇测定水平的可行办法。中华医学检验学会已决定将于1994年召开血脂测定研讨会，希望能建立一个中国的测定胆固醇的推荐方法。
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近年来我国一些单位陆续引进新型号血细胞计数仪，在作红白细胞计数时可进行白细胞分类，根据类型不同，可作五分类、三分类或二分类，这种用仪器分类结果能否取代人工方法?其临床意义和价值如何?还需检验科和临床共同进行探讨和评价。孙芾等[6]报道 Coulter 公司的 VCS 分类仪和人工方法的对比结果，经统计学处理得出相关系数中性分叶粒细胞为0.956，淋巴细胞0.968，嗜酸细胞0.908，单核细胞0.618，嗜碱细胞0.227，相关性良好。该分类仪遇有不正常幼稚细胞时，即显著警告信号，再行人工分类，共测255例，出现异常细胞48例中，44例发出警告。仪器未发警告的4例只是在血片中找到少量中或晚粒细胞，多为慢性粒细胞性白血病治疗后患者。认为白细胞分类仪结果精确可靠，省时省力，可作为白细胞分析的筛选。但提出对血液病患者，还必须行显微镜检。乐家新等[7]用 Cell-Dyn610 分析仪进行二分类，仪器分出的淋巴和非淋巴细胞结果与手工方法符合率分别为90.2%和97.6%。这类方法有推广价值，希望临床医师从临床角度继续加以评价。
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尿红细胞形态对血尿的鉴别诊断有较大诊断价值，以往多用相差显微镜观察。很难定量并且受观察者主观因素的影响，一年来有多篇报道用血细胞分析仪检测尿中红细胞，通过 MPV 和 RDW 等指标来鉴别红细胞是否来自肾小球，丛玉隆等[8]提出如以MPV≤72fl为鉴别肾小球肾炎标准，敏感性为84.1%，特异性为84.6%。
盛恺等[9]提出以 MCV≤75fl为鉴别标准。
聚合酶链反应(PCR)在国内逐步推广，一些单位也出了不少试剂盒，为临床检验常规工作应用 PCR 提供了基础。一年来有多篇报道用 PCR 检测结核菌DNA的经验。潘毓宣等[10]用PCR检测了80份结核性脑膜炎和 63 份非结核性脑膜炎的脑脊液，敏感性为85%，特异性为98.4%。庄玉辉等[11]进行了涂片镜检、培养和 PCR 检测痰、脑脊液中结核菌的比较。75例痰标本，PCR阳性率比镜检高28%，比培养高32%；58例结核性脑膜炎脑脊液标本，镜检、培养和PCR阳性率分别为8.6%、1.7%和51.7%。提示在检测类似结核菌这样生长缓慢和难以培养的微生物方面，PCR具有快速、敏感和特异等明显优点。但操作技术要求高，如何防止交叉污染，避免假阳性，不同引物结果有无差异，标本处理和DNA提取方法不同对结果影响等问题有待进一步探讨。此外，还有PCR技术检测HBVDNA的报道，由于方法高度灵敏性，检测阳性率很高，其临床意义尚有待探讨。
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参考文献
1 李健斋，李培瑛，王 抒，等.北京、天津、上海三市206所医院胆固醇测定情况.中华医学检验杂志，1992,15:175.
2 李健斋.北京、天津、上海三市医院血清胆固醇与甘油三酯测定情况调查.中生临床生化技术通讯，1993,2:25.
3 王 抒.胆固醇纯度标准物质及标准血清研制成功.医药信息论坛，1993,6:17.
4 陈文祥，李培瑛，王 抒，等.高效液相色谱测定血清胆固醇的研究——一种新参考方法的建议.中华医学检验杂志，1993,16:146.
5 Chen WX,Li PY,Wang S, et al.Serum cholesterol determined by liquid chromatography with 6-chlorostigmasterol as internal standard. Clin Chem,1993,39:1620.
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6 孙芾，赵素荣，鲍震曾，等.全自动白细胞分类仪的评价.中华医学检验杂志，1992,15:366.
7 乐家新，丛玉隆.Cell-Dyn610型血液分析仪白细胞分类计数的实验室评价.中华医学检验杂志，1992,15:373.
8 丛玉隆，蔡力力，张桂珍.血液分析仪测定尿红细胞鉴别血尿来源临床价值探讨.中华医学检验杂志，1993,16:110.
9盛恺，凡秀华，刘剑雄，等.尿红细胞MCV及体积分布曲线鉴别血尿的价值.上海医学检验杂志，1993,8:88.
10 潘毓宣，田欣欣，胡 兰，等.利用聚合酶链反应体外扩增核酸法诊断结核性脑膜炎的研究.中华结核和呼吸杂志，1993,16:77.
11 庄玉辉，李国利，张小刚，等.脱氧核糖核酸聚合酶反应快速检测结核临床标本中结核菌的评价.中华结核和呼吸杂志，1993,16:26.
(收稿：1993-09-16), 百拇医药
单位：100730 北京医院检验科
关键词：
中华医学杂志931223 近年检验工作者在推广新技术、新方法应用的同时，还注意到保证常规检验工作结果的准确性和可靠性，并作了不少质量保证工作，提出一些对质控工作的意见和建议。由卫生部北京老年医学研究所组织的京津沪三市胆固醇测定情况的调查[1，2]，受到检验界的注目。在1993年4月由中华医学会检验学会在上海召开的全国心血管疾病实验室诊断学术会议上曾对胆固醇标准化进行专题讨论。从这次调查结果看，胆固醇测定结果很不理想，结果能达到和靶值相差±3%的实验室只有30%，放宽标准到±5%，也仅有50%实验室能达的。与会者认为其原因与试剂品种混乱、标准品没有标化密切相关，其中由于标准品不一致造成的误差远高于方法学的误差。目前由李健斋领导的实验室已研究出胆固醇结晶[3]，纯度达99.8±0.1%，与美国国家科学技术研究所(NIST)的标准参考品纯度相。针对目前用于标化标准品的 ALBK 法操作复杂、技术要求高、难掌握等，提出一种用高效液相色谱(HPLC)分离测定血清胆固醇的方法[4]，其特点为选择6-氯豆甾醇为内标，选用较好的分离条件来消除血清中其他甾醇干扰，用该法测定美国SRM909标准品中胆固醇结果为 4.346mmol*g-1/L，与用 NIST 法测定值(4.359mmol*g-1/L)接近，此方法受到国内外临床化学界重视[5]。通过国内外其他实验室进一步评价，有望成为另一类实用的参考方法，用于统一和标化胆固醇标准液。在第二次调查时，在发放待测血清时还有一份由参考方法定值的统一标准品。结果误差在±3%和±5%内的实验室分别上升约为50%和70%。说明了统一标准品和统一测定方法是提高胆固醇测定水平的可行办法。中华医学检验学会已决定将于1994年召开血脂测定研讨会，希望能建立一个中国的测定胆固醇的推荐方法。
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近年来我国一些单位陆续引进新型号血细胞计数仪，在作红白细胞计数时可进行白细胞分类，根据类型不同，可作五分类、三分类或二分类，这种用仪器分类结果能否取代人工方法?其临床意义和价值如何?还需检验科和临床共同进行探讨和评价。孙芾等[6]报道 Coulter 公司的 VCS 分类仪和人工方法的对比结果，经统计学处理得出相关系数中性分叶粒细胞为0.956，淋巴细胞0.968，嗜酸细胞0.908，单核细胞0.618，嗜碱细胞0.227，相关性良好。该分类仪遇有不正常幼稚细胞时，即显著警告信号，再行人工分类，共测255例，出现异常细胞48例中，44例发出警告。仪器未发警告的4例只是在血片中找到少量中或晚粒细胞，多为慢性粒细胞性白血病治疗后患者。认为白细胞分类仪结果精确可靠，省时省力，可作为白细胞分析的筛选。但提出对血液病患者，还必须行显微镜检。乐家新等[7]用 Cell-Dyn610 分析仪进行二分类，仪器分出的淋巴和非淋巴细胞结果与手工方法符合率分别为90.2%和97.6%。这类方法有推广价值，希望临床医师从临床角度继续加以评价。
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尿红细胞形态对血尿的鉴别诊断有较大诊断价值，以往多用相差显微镜观察。很难定量并且受观察者主观因素的影响，一年来有多篇报道用血细胞分析仪检测尿中红细胞，通过 MPV 和 RDW 等指标来鉴别红细胞是否来自肾小球，丛玉隆等[8]提出如以MPV≤72fl为鉴别肾小球肾炎标准，敏感性为84.1%，特异性为84.6%。
盛恺等[9]提出以 MCV≤75fl为鉴别标准。聚合酶链反应(PCR)在国内逐步推广，一些单位也出了不少试剂盒，为临床检验常规工作应用 PCR 提供了基础。一年来有多篇报道用 PCR 检测结核菌DNA的经验。潘毓宣等[10]用PCR检测了80份结核性脑膜炎和 63 份非结核性脑膜炎的脑脊液，敏感性为85%，特异性为98.4%。庄玉辉等[11]进行了涂片镜检、培养和 PCR 检测痰、脑脊液中结核菌的比较。75例痰标本，PCR阳性率比镜检高28%，比培养高32%；58例结核性脑膜炎脑脊液标本，镜检、培养和PCR阳性率分别为8.6%、1.7%和51.7%。提示在检测类似结核菌这样生长缓慢和难以培养的微生物方面，PCR具有快速、敏感和特异等明显优点。但操作技术要求高，如何防止交叉污染，避免假阳性，不同引物结果有无差异，标本处理和DNA提取方法不同对结果影响等问题有待进一步探讨。此外，还有PCR技术检测HBVDNA的报道，由于方法高度灵敏性，检测阳性率很高，其临床意义尚有待探讨。
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参考文献
1 李健斋，李培瑛，王 抒，等.北京、天津、上海三市206所医院胆固醇测定情况.中华医学检验杂志，1992,15:175.
2 李健斋.北京、天津、上海三市医院血清胆固醇与甘油三酯测定情况调查.中生临床生化技术通讯，1993,2:25.
3 王 抒.胆固醇纯度标准物质及标准血清研制成功.医药信息论坛，1993,6:17.
4 陈文祥，李培瑛，王 抒，等.高效液相色谱测定血清胆固醇的研究——一种新参考方法的建议.中华医学检验杂志，1993,16:146.
5 Chen WX,Li PY,Wang S, et al.Serum cholesterol determined by liquid chromatography with 6-chlorostigmasterol as internal standard. Clin Chem,1993,39:1620.
, http://www.100md.com
6 孙芾，赵素荣，鲍震曾，等.全自动白细胞分类仪的评价.中华医学检验杂志，1992,15:366.
7 乐家新，丛玉隆.Cell-Dyn610型血液分析仪白细胞分类计数的实验室评价.中华医学检验杂志，1992,15:373.
8 丛玉隆，蔡力力，张桂珍.血液分析仪测定尿红细胞鉴别血尿来源临床价值探讨.中华医学检验杂志，1993,16:110.
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盛恺，凡秀华，刘剑雄，等.尿红细胞MCV及体积分布曲线鉴别血尿的价值.上海医学检验杂志，1993,8:88.10 潘毓宣，田欣欣，胡 兰，等.利用聚合酶链反应体外扩增核酸法诊断结核性脑膜炎的研究.中华结核和呼吸杂志，1993,16:77.
11 庄玉辉，李国利，张小刚，等.脱氧核糖核酸聚合酶反应快速检测结核临床标本中结核菌的评价.中华结核和呼吸杂志，1993,16:26.
(收稿：1993-09-16), 百拇医药