抗凋亡蛋白Bcl-2在反应性与瘤性淋巴滤泡的分布及诊断价值
作者：陈协群 黄高昇 王文亮
单位：710032 西安，第四军医大学西京医院血液科(陈协群)，病理学教研室(黄高昇、王文亮)
关键词：
中华医学杂志960423
我们采用免疫组织化学技术，比较研究了Bcl-2蛋白在滤泡性淋巴瘤(FL)与反应性淋巴滤泡中的定位与分布，期望能为FL的准确诊断提供新途径。
一、材料和方法
1.主要试剂：鼠抗人Bcl-2单克隆抗体Bcl-2-100由英国牛津Mason博士惠赠。鼠过氧化物酶抗过氧化物酶复合物(PAP)、桥抗兔抗鼠IgG以及白细胞共同抗原、CD45特异性抗体均为Dako公司产品。
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2.组织标本：7例FL，按Kiel标准[1]诊断与10例反应性淋巴滤泡增生过长淋巴结活检标本均来自第四军攻大学西京医院病理科。各标本均经常石蜡包埋、HE染色，并经病理检查证实。
3.免疫组织化学染色：参阅参考文献[2]。正常小鼠血清与CD45特异性抗体分别替代第一抗体，用作阴性与阳性对照。
二、结果
1.反应性增生淋巴结中Bcl-2蛋白表达与分布：Bcl-2蛋白阳性细胞密集于套区、散布于滤泡间区，而发生中心细胞均呈阴性反应(图1)。阳性反应物主要定位于胞浆，呈棕黄色细颗粒状。正常鼠血清或CD45特异性抗体替代对照分别呈阴性或弥漫性阳性反应。
2.FL组织中Bcl-2蛋白表达与分布：7例FL中，Bcl-2蛋白表达细胞主要密集于瘤性滤泡中央；尚可见较多Bcl-2阳性肿瘤细胞散在于瘤性滤泡间区(图2)。有1例组织标本，其瘤性滤泡的Bcl-2蛋白染色在一部分区域为强阳性，在另一部分区域则为弱阳性~阴性。HE切片显示，Bcl-2蛋白染色弱阳性或阴性区的肿瘤细胞形态保存欠佳，推测与固定不良有关。
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图1 反应性淋巴滤泡中Bcl-2蛋白强阳性细胞密集于套区，生发中心细胞阴性。多重 PAP×400
图2 瘤性淋巴滤泡中Bcl-2蛋白强阳性细胞密集于中央，散于周围。多重 PAP×200
三、讨论
据文献报道，75%FL携带t(14：18)(q32：q21)染色体易位，结果导致位于染色体18q21的细胞凋亡拮抗基因bcl-2激活、高表达[3]。Bcl-2蛋白异常增高可能与FL的发生、演变及其临床治疗反应有密切关系[4]。
业已证实，反就万籁 淋巴滤泡的发生中心即使在HE切片上亦可见天较多的细胞碎片，表明细胞凋亡十分明显，而其周围的套区则富含长寿命淋巴细胞。因而生理状态下Bcl-2蛋白理应优势分布于套区，而不会存在于生发中心，除非滤泡周围存在瘤性病变如何杰金病等[2]。相反，FL中所谓的滤泡样结构实际上是由瘤细胞相对密集万而成，并非真正的生理性生发中心与套区结构，所以Bcl-2蛋白阳性细胞主要定位于瘤性滤泡中央，而其周围则相对稀疏，结果Bcl-2蛋白染色强度由瘤性滤泡中央至周围而逐渐减弱。由此可见，Bcl-2蛋白在两类不同性质滤泡中所呈现的迥然不同的局部解剖学分布方式，有助于鉴别FL与反应性淋巴滤泡增生。
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另外，尽管Bcl-2蛋白在石蜡包埋与冰冻处理的组织、细胞中均可保存，而且两种方法保存的抗原量并无明显差别[5]，但及时、良好的固定措施对防止Bcl-2蛋白降解仍然十分重要。在本研究中，1例组织标本因固定不均匀而出现了部分区域瘤性滤泡Bcl-2蛋白假阴性反应。
本课题为国家自然科学基金资助项目
参考文献
1 Stansfeld AG, Diebold J, NOel H, et al. Update kiel classiffication for lymphomas. Lancet, 1988, 1: 292.
2 陈协群,王文亮,黄高昇,等.何杰金氏病中抗细胞凋亡基因bcl-2翻译产物的定位.中华医学杂志,1994,74:618.
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3 Chen-levy Z, Nourse J, Cleary ML. The bcl-2 candidate protooncogene produdt is a 24-kilodalton integral-
mem-brane protein highly expressed in lymphoid cell lines and lymphomas carrying the t (14:18) translocation. Mol Cell Biol, 1989, 9: 701.
4 Pezzella F, Jones M, Ralfkiaer E, et al. Evaluation of bcl-2 protein expression and 14; 18 translocation as prognostic markers in follicular lymphoma. Br J Cancer, 1992, 65: 87.
5 Pezzella f, Tse AGD, Cordell JL, et al. Expression of the bcl-2 oncogene protein is not specific for the 14; 18 chromosomal translocation. Am J Pathol, 1990, 137: 225.
(收稿：1995-10-28 修回：1995-12-27)
(本文编辑：李群), 百拇医药
单位：710032 西安，第四军医大学西京医院血液科(陈协群)，病理学教研室(黄高昇、王文亮)
关键词：
中华医学杂志960423
我们采用免疫组织化学技术，比较研究了Bcl-2蛋白在滤泡性淋巴瘤(FL)与反应性淋巴滤泡中的定位与分布，期望能为FL的准确诊断提供新途径。
一、材料和方法
1.主要试剂：鼠抗人Bcl-2单克隆抗体Bcl-2-100由英国牛津Mason博士惠赠。鼠过氧化物酶抗过氧化物酶复合物(PAP)、桥抗兔抗鼠IgG以及白细胞共同抗原、CD45特异性抗体均为Dako公司产品。
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2.组织标本：7例FL，按Kiel标准[1]诊断与10例反应性淋巴滤泡增生过长淋巴结活检标本均来自第四军攻大学西京医院病理科。各标本均经常石蜡包埋、HE染色，并经病理检查证实。
3.免疫组织化学染色：参阅参考文献[2]。正常小鼠血清与CD45特异性抗体分别替代第一抗体，用作阴性与阳性对照。
二、结果
1.反应性增生淋巴结中Bcl-2蛋白表达与分布：Bcl-2蛋白阳性细胞密集于套区、散布于滤泡间区，而发生中心细胞均呈阴性反应(图1)。阳性反应物主要定位于胞浆，呈棕黄色细颗粒状。正常鼠血清或CD45特异性抗体替代对照分别呈阴性或弥漫性阳性反应。
2.FL组织中Bcl-2蛋白表达与分布：7例FL中，Bcl-2蛋白表达细胞主要密集于瘤性滤泡中央；尚可见较多Bcl-2阳性肿瘤细胞散在于瘤性滤泡间区(图2)。有1例组织标本，其瘤性滤泡的Bcl-2蛋白染色在一部分区域为强阳性，在另一部分区域则为弱阳性~阴性。HE切片显示，Bcl-2蛋白染色弱阳性或阴性区的肿瘤细胞形态保存欠佳，推测与固定不良有关。
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图1 反应性淋巴滤泡中Bcl-2蛋白强阳性细胞密集于套区，生发中心细胞阴性。多重 PAP×400
图2 瘤性淋巴滤泡中Bcl-2蛋白强阳性细胞密集于中央，散于周围。多重 PAP×200
三、讨论
据文献报道，75%FL携带t(14：18)(q32：q21)染色体易位，结果导致位于染色体18q21的细胞凋亡拮抗基因bcl-2激活、高表达[3]。Bcl-2蛋白异常增高可能与FL的发生、演变及其临床治疗反应有密切关系[4]。
业已证实，反就万籁 淋巴滤泡的发生中心即使在HE切片上亦可见天较多的细胞碎片，表明细胞凋亡十分明显，而其周围的套区则富含长寿命淋巴细胞。因而生理状态下Bcl-2蛋白理应优势分布于套区，而不会存在于生发中心，除非滤泡周围存在瘤性病变如何杰金病等[2]。相反，FL中所谓的滤泡样结构实际上是由瘤细胞相对密集万而成，并非真正的生理性生发中心与套区结构，所以Bcl-2蛋白阳性细胞主要定位于瘤性滤泡中央，而其周围则相对稀疏，结果Bcl-2蛋白染色强度由瘤性滤泡中央至周围而逐渐减弱。由此可见，Bcl-2蛋白在两类不同性质滤泡中所呈现的迥然不同的局部解剖学分布方式，有助于鉴别FL与反应性淋巴滤泡增生。
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另外，尽管Bcl-2蛋白在石蜡包埋与冰冻处理的组织、细胞中均可保存，而且两种方法保存的抗原量并无明显差别[5]，但及时、良好的固定措施对防止Bcl-2蛋白降解仍然十分重要。在本研究中，1例组织标本因固定不均匀而出现了部分区域瘤性滤泡Bcl-2蛋白假阴性反应。
本课题为国家自然科学基金资助项目
参考文献
1 Stansfeld AG, Diebold J, NOel H, et al. Update kiel classiffication for lymphomas. Lancet, 1988, 1: 292.
2 陈协群,王文亮,黄高昇,等.何杰金氏病中抗细胞凋亡基因bcl-2翻译产物的定位.中华医学杂志,1994,74:618.
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3 Chen-levy Z, Nourse J, Cleary ML. The bcl-2 candidate protooncogene produdt is a 24-kilodalton integral-
mem-brane protein highly expressed in lymphoid cell lines and lymphomas carrying the t (14:18) translocation. Mol Cell Biol, 1989, 9: 701.
4 Pezzella F, Jones M, Ralfkiaer E, et al. Evaluation of bcl-2 protein expression and 14; 18 translocation as prognostic markers in follicular lymphoma. Br J Cancer, 1992, 65: 87.
5 Pezzella f, Tse AGD, Cordell JL, et al. Expression of the bcl-2 oncogene protein is not specific for the 14; 18 chromosomal translocation. Am J Pathol, 1990, 137: 225.
(收稿：1995-10-28 修回：1995-12-27)
(本文编辑：李群), 百拇医药