骨髓的成骨作用及复合移植综述
作者：李彦林* 曾才铭*
单位：* 昆明医学院第一附属医院骨科(云南昆明，650032)
关键词：
中国修复重建外科杂志980114 早在1869年，Goujon就观察到自体红骨髓异位移植后具有成骨作用。自体骨髓移植后成骨作用显著，不产生排斥反应，来源充足，取材方便，术后并发症少且轻微，具有广阔的应用前景。现就骨髓成骨的细胞起源、骨髓体内外培养、单纯骨髓移植、骨髓复合移植及其成骨机理作一综述。
1 骨髓成骨的细胞起源
1.1 确定性骨祖细胞和诱导性骨祖细胞的概念
骨祖细胞最终分化为成骨细胞。正常的骨祖细胞可分为两类：①确定性骨祖细胞(the determined osteogenic precursor cell, DOPC)，具有干细胞的特性，不需外源性诱导物的作用就能自动分化成骨，它仅存在于骨髓基质和骨表面。②诱导性骨祖细胞(the inducible osteogenic precursor cell, IOPC)，分布于许多器官的结缔组织网架及循环血液中，只有经诱导物作用才可分化成骨。Friedenstein推测诱导性骨祖细胞是起源尚不清楚，可随血流移动的游走细胞。Takagi和Urist认为，诱导性骨祖细胞存在于骨髓内。
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1.2 骨髓基质干细胞的成骨潜能
骨髓是一个具有多种细胞成分的复杂器官，有造血及成骨功能，可分为造血和基质两大系统。骨髓的成骨能力来源于骨髓基质系统的基质干细胞(stromal stem cell)，它能自动分化为成骨细胞，即使在体外脱离诱导物的培养条件下也能成骨[1，2]，故属于DOPC。但它同时又是一种具有多种分化潜能的干细胞，能分化出不同亚系的祖细胞，可向成骨细胞、成纤维细胞、网状细胞等多个方向分化。在有诱导物骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)存在时可促进其向骨形成方向分化，故Reddi也把它视为IOPC，认为在BMP诱导下，骨髓基质干细胞分化为前成骨细胞，完成IOPC到DOPC的分化，并维持其成骨表现型[3]。
2 骨髓体内外培养与成骨
虽然一百多年前人们就发现骨髓异位移植后具
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有成骨作用，但无法证明骨组织来源于骨髓还是周围组织。为此，1980年Ashton等将骨髓悬液加入扩散盒，再植入动物体内。由于盒壁的孔隙仅0.45 μm，周围组织细胞无法长入，证明扩散盒内所获得的骨组织为骨髓所形成。在扩散盒内，造血细胞陆续死亡，只有为数不多的基质细胞进行了成骨活动，其成骨过程类似于膜内成骨。
随着细胞生物学的发展和各种检测手段的改进，人们对体外培养骨髓细胞的成骨作用也进行了研究。Maniatopoulos等[1]首次报道了成鼠骨髓基质细胞在体外培养条件下能形成钙化的骨样组织，并经X线衍射分析确定形成的钙化物具有羟基磷灰石(hydroxyapatite, HA)结构，证明骨髓体外培养也具有成骨能力。另外，Lennon等[2]用无血清培养基培养骨髓间充质干细胞也获成功，其分化形成骨与软骨的方式与用有血清的培养基相同。
此外，为对骨髓基质细胞的成骨分化作进一步研究，人们已从体外培养的骨髓基质细胞中分离出能在体外表现成骨特性，且植入体内扩散室也可形成骨组织的细胞株[4]。
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3 单纯骨髓移植的成骨作用
骨髓来源广，取材方便，具有流动性，故可经皮下注射移植。Paley等[5]将双侧兔桡骨中段切断或作成1.0 cm骨缺损，5天后，由股骨大转子处抽取骨髓，试验侧截骨处注射1 ml，骨缺损处注射2 ml，对照侧注射等量生理盐水。骨缺损组试验侧成骨现象可见于整个骨缺损区，对照侧由两端向中央生长，骨髓移植后2周～3周内成骨能力最大。4周时，试验侧4/5骨缺损愈合，仅一例有0.2 mm间隙，而对照侧尚有0.36 mm～5.24 mm间隙。截骨组试验侧骨痂量明显多于对照侧，4周时达骨性愈合，对照侧为纤维连接。
Connolly等[6]将经皮骨髓注射的方法应用于临床，对20例胫骨骨折不愈合的患者进行治疗，患者自受伤到注射骨髓时的时间为7个月～36个月，平均14个月，年龄为18岁～32岁，平均30岁。操作在门诊进行，在X线机引导下，将由髂后上棘处抽取的骨髓注入骨折处，用石膏或髓内针固定，18例骨折愈合，愈合率为90%。骨髓注射具有操作安全，简便，费用低，创伤小，避免了骨移植手术供区、受区并发症等优点。但是，骨髓有一定的流动性，单独植入后易扩散[7]，降低了其成骨效能。故单纯骨髓移植的效果不恒定，使其应用受到一定限制。因此，很多学者致力于寻找骨髓适宜的载体，以利于更好地成骨。
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4 骨髓复合移植的成骨作用
4.1 自体骨髓与同种异体骨复合移植
1964年Burwell将鼠新鲜的和经各种理化处理后的髂骨(包括冷冻、冻干、脱蛋白、脱钙等)与受体鼠骨髓复合植入其肌肉内，发现与骨髓复合的骨块均有新骨形成，而未与骨髓复合的骨块则无新骨形成。1977年Nade等在动物试验研究中发现，以稀盐酸脱钙的同种异体骨，浸透宿主自体红骨髓移植后2周有新骨形成，且较未脱钙髂骨或用EDTA脱钙者多，可能由于稀盐酸脱钙的同种异体骨为骨髓成骨提供较好的环境，或未脱钙髂骨、EDTA脱钙骨提供较差环境的结果。夏贤良[8]用脱钙同种骨加自体红骨髓复合移植修复38例骨肿瘤和肿瘤样患者术后的骨缺损，32例愈合，4例失败，2例失访。他认为脱钙同种骨—自体红骨髓复合骨为一良好的骨移植材料，它能有效地修复骨缺损。
4.2 自体骨髓与异体骨复合移植
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1973年Salama等将经多种方法处理的异种骨，包括羊和小牛的冷冻骨、冻干骨、Kiel骨和Oswestry骨，加自体骨髓和不加自体骨髓，分别植入鼠背部肌肉组织中。在223只未加自体骨髓的鼠中，1只有新骨形成；223只加自体骨髓的鼠中，216只有新骨形成。在所有植入物中，全部脱蛋白的Oswestry骨复合自体骨髓的复合移植成骨最好。Salama等认为，复合移植中新骨形成来源于自体骨髓，并认为异体骨中有机物质所致的免疫排斥反应可影响骨髓的成骨作用，而较弱或无免疫排斥的异种骨可使很多骨髓细胞分化为成骨细胞，并形成较多的新骨。1978年Salama等首先将复合自体红骨髓的Kiel骨用于临床，治疗假关节、关节融合、良性肿瘤及创伤性骨缺损等多种疾病。26例患者经随访6个月以上，除1例感染外，其余均获良好效果。他们认为，异种骨配合自体红骨髓进行复合移植具有创伤小，手术时间短，操作简便，安全可行，避免了供区可能出现的并发症；异种骨来源广，费用低等优点。随着生物学和材料学的发展，钙磷陶瓷人工骨将取代Kiel骨与骨髓复合移植[9]。
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4.3 自体骨髓与钙磷陶瓷复合移植
Nade等[10]将钙磷陶瓷和骨髓复合植入成年兔腹斜肌内，术后第14天开始有新骨形成，14天～182天的标本中均有新骨形成。实验表明，骨髓与生物性相容的陶瓷复合移植仍具有成骨功能，陶瓷孔径大于100 μm，特别是孔相互连通的陶瓷，有利于新骨在孔内生长。他们认为，合适的钙磷陶瓷可作为支架，携带自体骨髓修复骨缺损。Grundel等[11]用颗粒状、块状双相钙磷陶瓷与自体骨髓复合，单纯自体红骨髓移植修复20只成年狗尺骨长2.5 cm的骨缺损，24周后发现颗粒状钙磷陶瓷与骨髓复合移植中，6只狗中5只获得稳固连接，仅1只纤维连接。而块状钙磷陶瓷与骨髓复合移植中，6只狗中3只获得稳固连接，3只纤维连接。单纯自体骨髓移植的5只狗都有骨桥连接。另3只无移植物的空白对照则无连接。且颗粒状钙磷陶瓷与自体骨髓复合移植的完全性骨桥连接较单纯自体骨髓移植早得多。他们认为，钙磷陶瓷与自体骨髓的复合移植可改善移植物的作用，加速骨缺损修复。
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为提高复合移植的成骨能力，Goshima等[12]将自体骨髓体外培养两周后所得的上皮样基质细胞与多孔钙磷陶瓷复合，植入鼠背部和腹部皮下，与未经培养的自体新鲜骨髓与钙磷陶瓷复合移植相比，有较强的成骨潜能，其成骨早而多。他们认为，由于从患者分离出的新鲜骨髓有限，故可将骨髓细胞培养到适当数量后可用于修复大块骨缺损和骨不连。这种方法尤其适用于骨髓中骨祖细胞较少的老年患者。
5 骨髓移植的成骨机理
将骨髓组织移植于自体肌肉、皮下、骨膜下及骨缺损中，发现自体骨髓在植入部位均有骨组织形成。但自体骨髓移植后的成骨机制仍不完全清楚[13]。一般认为，骨髓移植后的坏死部分释放出成骨诱导物质，刺激受区非特异性间充质细胞分化为成骨细胞，继而形成新骨；骨髓移植后幸存下来的基质细胞受坏死骨髓细胞释放的因子或活骨髓细胞分泌的成骨因子刺激，以及受区邻近骨的影响，分化为成骨细胞[13]。而且骨髓细胞的数量对其成骨作用有直接影响，Salama[13]报道，移植的骨髓量越大，诱导生成的新骨量越多。许多实验结果表明，新鲜活骨髓有明显的成骨作用，而灭活的骨髓无明显的成骨作用[14，15]。
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总之，近年来关于骨髓成骨的研究有很大进展，确认了骨髓基质干细胞的成骨潜能。自体骨髓来源丰富，取材方便，安全简便，创伤小，供区无明显并发症，移植后无免疫反应。无论单纯骨髓移植，还是复合移植都显示了修复骨缺损及骨不连的优越性，但有些研究结论尚有不一致之处，骨髓成骨机理目前仍不十分清楚，临床应用尚属初步，需进一步研究。
6 参考文献
1 Maniatopoulos C, Sodek J, Melcher AH. Bone formation in vitro by stromal cells obtained from bone marrow of young adult rats. Cell Tissue Res, 1988;254(3):317
2 Lennon DP, Haynesworth SE, Young RG et al. A chemically defined medium supports in vitro proliferation and matains the osteochondral potential of rat marrow-derived mesenchymal stem cells. Exp Cell Res, 1995;219(3):211
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3 Reddi AH. Bone morphogenetic proteins, bone marrow stromal cells, and mesenchymal stem cells. Clin Orthop, 1995;313(4):115
4 Diduch DR, Coe MR, Joyner CC et al. Two cell lines from bone marrow that differ in terms of collagen synthesis, osteogenic characteristics, and matrix mineralization. J Bone Joint Surg(Am), 1993;75(1):92
5 Paley D, Young MC, Wiley AM et al. Percutaneous bone marrow grafting of fractures and bony defects: An experimental study in rabbits. Clin Orthop, 1986;208(7):300
, 百拇医药
6 Connolly JF, Guse R, Tiedeman J et al. Autologous marrow injection as a substitute for operative grafting of tibial nonunions. Clin Orthop, 1991;266(5):259
7 Connolly JF. Injectable bone marrow preparations to stimulate osteogenic repair. Clin Orthop, 1995;313(4):8
8 夏贤良.脱钙同种骨加自体红骨髓复合植骨.中华骨科杂志，1982；2(4)：242
9 Graham CE. Further experience with the bone grafting of fractures using xenografts mixed with autologous red marrow. J Bone Joint Surg(Br), 1982;64(1):123
, http://www.100md.com
10 Nade S, Armstrong L, McCartney E et al. Osteogenesis after bone and bone marrow transplantation: The ability of ceramic materials to sustain osteogenesis from transplanted bone marrow cells: preliminary studies. Clin Orthop, 1983;181(12):255
11 Grundel RE, Chapman MW, Yee T et al. Autogeneic bone marrow and porous biphasic calcium phosphate ceramic for segmental bone defects in the canine ulna. Clin Orthop, 1991;266(5):244
, 百拇医药 12 Goshima J, Goldberg VM, Caplan AI. The osteogenic potential of culture-expanded rat marrow mesenchymal cells assayed in vivo in calcium phosphate ceramic blocks. Clin Orthop, 1991;262(1):298
13 Salama R. Xenogeneic bone grafting in humans. Clin Orthop, 1983;174(4):113
14 Ohgushi H, Goldberg VM, Caplan AI. Heterotopic osteogenesis in porous ceramics induced by marrow cells. J Orthop Res, 1989;7(4):568
15 Goshima J, Goldberg VM, Caplan AI. The origin of bone formed in composite grafts of porous calcium phosphate ceramic loaded with marrow cells. Clin Orthop, 1991;269(8):274
(收稿：1997-08-18), 百拇医药
单位：* 昆明医学院第一附属医院骨科(云南昆明，650032)
关键词：
中国修复重建外科杂志980114 早在1869年，Goujon就观察到自体红骨髓异位移植后具有成骨作用。自体骨髓移植后成骨作用显著，不产生排斥反应，来源充足，取材方便，术后并发症少且轻微，具有广阔的应用前景。现就骨髓成骨的细胞起源、骨髓体内外培养、单纯骨髓移植、骨髓复合移植及其成骨机理作一综述。
1 骨髓成骨的细胞起源
1.1 确定性骨祖细胞和诱导性骨祖细胞的概念
骨祖细胞最终分化为成骨细胞。正常的骨祖细胞可分为两类：①确定性骨祖细胞(the determined osteogenic precursor cell, DOPC)，具有干细胞的特性，不需外源性诱导物的作用就能自动分化成骨，它仅存在于骨髓基质和骨表面。②诱导性骨祖细胞(the inducible osteogenic precursor cell, IOPC)，分布于许多器官的结缔组织网架及循环血液中，只有经诱导物作用才可分化成骨。Friedenstein推测诱导性骨祖细胞是起源尚不清楚，可随血流移动的游走细胞。Takagi和Urist认为，诱导性骨祖细胞存在于骨髓内。
, 百拇医药
1.2 骨髓基质干细胞的成骨潜能
骨髓是一个具有多种细胞成分的复杂器官，有造血及成骨功能，可分为造血和基质两大系统。骨髓的成骨能力来源于骨髓基质系统的基质干细胞(stromal stem cell)，它能自动分化为成骨细胞，即使在体外脱离诱导物的培养条件下也能成骨[1，2]，故属于DOPC。但它同时又是一种具有多种分化潜能的干细胞，能分化出不同亚系的祖细胞，可向成骨细胞、成纤维细胞、网状细胞等多个方向分化。在有诱导物骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)存在时可促进其向骨形成方向分化，故Reddi也把它视为IOPC，认为在BMP诱导下，骨髓基质干细胞分化为前成骨细胞，完成IOPC到DOPC的分化，并维持其成骨表现型[3]。
2 骨髓体内外培养与成骨
虽然一百多年前人们就发现骨髓异位移植后具
, 百拇医药
有成骨作用，但无法证明骨组织来源于骨髓还是周围组织。为此，1980年Ashton等将骨髓悬液加入扩散盒，再植入动物体内。由于盒壁的孔隙仅0.45 μm，周围组织细胞无法长入，证明扩散盒内所获得的骨组织为骨髓所形成。在扩散盒内，造血细胞陆续死亡，只有为数不多的基质细胞进行了成骨活动，其成骨过程类似于膜内成骨。
随着细胞生物学的发展和各种检测手段的改进，人们对体外培养骨髓细胞的成骨作用也进行了研究。Maniatopoulos等[1]首次报道了成鼠骨髓基质细胞在体外培养条件下能形成钙化的骨样组织，并经X线衍射分析确定形成的钙化物具有羟基磷灰石(hydroxyapatite, HA)结构，证明骨髓体外培养也具有成骨能力。另外，Lennon等[2]用无血清培养基培养骨髓间充质干细胞也获成功，其分化形成骨与软骨的方式与用有血清的培养基相同。
此外，为对骨髓基质细胞的成骨分化作进一步研究，人们已从体外培养的骨髓基质细胞中分离出能在体外表现成骨特性，且植入体内扩散室也可形成骨组织的细胞株[4]。
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3 单纯骨髓移植的成骨作用
骨髓来源广，取材方便，具有流动性，故可经皮下注射移植。Paley等[5]将双侧兔桡骨中段切断或作成1.0 cm骨缺损，5天后，由股骨大转子处抽取骨髓，试验侧截骨处注射1 ml，骨缺损处注射2 ml，对照侧注射等量生理盐水。骨缺损组试验侧成骨现象可见于整个骨缺损区，对照侧由两端向中央生长，骨髓移植后2周～3周内成骨能力最大。4周时，试验侧4/5骨缺损愈合，仅一例有0.2 mm间隙，而对照侧尚有0.36 mm～5.24 mm间隙。截骨组试验侧骨痂量明显多于对照侧，4周时达骨性愈合，对照侧为纤维连接。
Connolly等[6]将经皮骨髓注射的方法应用于临床，对20例胫骨骨折不愈合的患者进行治疗，患者自受伤到注射骨髓时的时间为7个月～36个月，平均14个月，年龄为18岁～32岁，平均30岁。操作在门诊进行，在X线机引导下，将由髂后上棘处抽取的骨髓注入骨折处，用石膏或髓内针固定，18例骨折愈合，愈合率为90%。骨髓注射具有操作安全，简便，费用低，创伤小，避免了骨移植手术供区、受区并发症等优点。但是，骨髓有一定的流动性，单独植入后易扩散[7]，降低了其成骨效能。故单纯骨髓移植的效果不恒定，使其应用受到一定限制。因此，很多学者致力于寻找骨髓适宜的载体，以利于更好地成骨。
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4 骨髓复合移植的成骨作用
4.1 自体骨髓与同种异体骨复合移植
1964年Burwell将鼠新鲜的和经各种理化处理后的髂骨(包括冷冻、冻干、脱蛋白、脱钙等)与受体鼠骨髓复合植入其肌肉内，发现与骨髓复合的骨块均有新骨形成，而未与骨髓复合的骨块则无新骨形成。1977年Nade等在动物试验研究中发现，以稀盐酸脱钙的同种异体骨，浸透宿主自体红骨髓移植后2周有新骨形成，且较未脱钙髂骨或用EDTA脱钙者多，可能由于稀盐酸脱钙的同种异体骨为骨髓成骨提供较好的环境，或未脱钙髂骨、EDTA脱钙骨提供较差环境的结果。夏贤良[8]用脱钙同种骨加自体红骨髓复合移植修复38例骨肿瘤和肿瘤样患者术后的骨缺损，32例愈合，4例失败，2例失访。他认为脱钙同种骨—自体红骨髓复合骨为一良好的骨移植材料，它能有效地修复骨缺损。
4.2 自体骨髓与异体骨复合移植
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1973年Salama等将经多种方法处理的异种骨，包括羊和小牛的冷冻骨、冻干骨、Kiel骨和Oswestry骨，加自体骨髓和不加自体骨髓，分别植入鼠背部肌肉组织中。在223只未加自体骨髓的鼠中，1只有新骨形成；223只加自体骨髓的鼠中，216只有新骨形成。在所有植入物中，全部脱蛋白的Oswestry骨复合自体骨髓的复合移植成骨最好。Salama等认为，复合移植中新骨形成来源于自体骨髓，并认为异体骨中有机物质所致的免疫排斥反应可影响骨髓的成骨作用，而较弱或无免疫排斥的异种骨可使很多骨髓细胞分化为成骨细胞，并形成较多的新骨。1978年Salama等首先将复合自体红骨髓的Kiel骨用于临床，治疗假关节、关节融合、良性肿瘤及创伤性骨缺损等多种疾病。26例患者经随访6个月以上，除1例感染外，其余均获良好效果。他们认为，异种骨配合自体红骨髓进行复合移植具有创伤小，手术时间短，操作简便，安全可行，避免了供区可能出现的并发症；异种骨来源广，费用低等优点。随着生物学和材料学的发展，钙磷陶瓷人工骨将取代Kiel骨与骨髓复合移植[9]。
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4.3 自体骨髓与钙磷陶瓷复合移植
Nade等[10]将钙磷陶瓷和骨髓复合植入成年兔腹斜肌内，术后第14天开始有新骨形成，14天～182天的标本中均有新骨形成。实验表明，骨髓与生物性相容的陶瓷复合移植仍具有成骨功能，陶瓷孔径大于100 μm，特别是孔相互连通的陶瓷，有利于新骨在孔内生长。他们认为，合适的钙磷陶瓷可作为支架，携带自体骨髓修复骨缺损。Grundel等[11]用颗粒状、块状双相钙磷陶瓷与自体骨髓复合，单纯自体红骨髓移植修复20只成年狗尺骨长2.5 cm的骨缺损，24周后发现颗粒状钙磷陶瓷与骨髓复合移植中，6只狗中5只获得稳固连接，仅1只纤维连接。而块状钙磷陶瓷与骨髓复合移植中，6只狗中3只获得稳固连接，3只纤维连接。单纯自体骨髓移植的5只狗都有骨桥连接。另3只无移植物的空白对照则无连接。且颗粒状钙磷陶瓷与自体骨髓复合移植的完全性骨桥连接较单纯自体骨髓移植早得多。他们认为，钙磷陶瓷与自体骨髓的复合移植可改善移植物的作用，加速骨缺损修复。
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为提高复合移植的成骨能力，Goshima等[12]将自体骨髓体外培养两周后所得的上皮样基质细胞与多孔钙磷陶瓷复合，植入鼠背部和腹部皮下，与未经培养的自体新鲜骨髓与钙磷陶瓷复合移植相比，有较强的成骨潜能，其成骨早而多。他们认为，由于从患者分离出的新鲜骨髓有限，故可将骨髓细胞培养到适当数量后可用于修复大块骨缺损和骨不连。这种方法尤其适用于骨髓中骨祖细胞较少的老年患者。
5 骨髓移植的成骨机理
将骨髓组织移植于自体肌肉、皮下、骨膜下及骨缺损中，发现自体骨髓在植入部位均有骨组织形成。但自体骨髓移植后的成骨机制仍不完全清楚[13]。一般认为，骨髓移植后的坏死部分释放出成骨诱导物质，刺激受区非特异性间充质细胞分化为成骨细胞，继而形成新骨；骨髓移植后幸存下来的基质细胞受坏死骨髓细胞释放的因子或活骨髓细胞分泌的成骨因子刺激，以及受区邻近骨的影响，分化为成骨细胞[13]。而且骨髓细胞的数量对其成骨作用有直接影响，Salama[13]报道，移植的骨髓量越大，诱导生成的新骨量越多。许多实验结果表明，新鲜活骨髓有明显的成骨作用，而灭活的骨髓无明显的成骨作用[14，15]。
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总之，近年来关于骨髓成骨的研究有很大进展，确认了骨髓基质干细胞的成骨潜能。自体骨髓来源丰富，取材方便，安全简便，创伤小，供区无明显并发症，移植后无免疫反应。无论单纯骨髓移植，还是复合移植都显示了修复骨缺损及骨不连的优越性，但有些研究结论尚有不一致之处，骨髓成骨机理目前仍不十分清楚，临床应用尚属初步，需进一步研究。
6 参考文献
1 Maniatopoulos C, Sodek J, Melcher AH. Bone formation in vitro by stromal cells obtained from bone marrow of young adult rats. Cell Tissue Res, 1988;254(3):317
2 Lennon DP, Haynesworth SE, Young RG et al. A chemically defined medium supports in vitro proliferation and matains the osteochondral potential of rat marrow-derived mesenchymal stem cells. Exp Cell Res, 1995;219(3):211
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3 Reddi AH. Bone morphogenetic proteins, bone marrow stromal cells, and mesenchymal stem cells. Clin Orthop, 1995;313(4):115
4 Diduch DR, Coe MR, Joyner CC et al. Two cell lines from bone marrow that differ in terms of collagen synthesis, osteogenic characteristics, and matrix mineralization. J Bone Joint Surg(Am), 1993;75(1):92
5 Paley D, Young MC, Wiley AM et al. Percutaneous bone marrow grafting of fractures and bony defects: An experimental study in rabbits. Clin Orthop, 1986;208(7):300
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6 Connolly JF, Guse R, Tiedeman J et al. Autologous marrow injection as a substitute for operative grafting of tibial nonunions. Clin Orthop, 1991;266(5):259
7 Connolly JF. Injectable bone marrow preparations to stimulate osteogenic repair. Clin Orthop, 1995;313(4):8
8 夏贤良.脱钙同种骨加自体红骨髓复合植骨.中华骨科杂志，1982；2(4)：242
9 Graham CE. Further experience with the bone grafting of fractures using xenografts mixed with autologous red marrow. J Bone Joint Surg(Br), 1982;64(1):123
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10 Nade S, Armstrong L, McCartney E et al. Osteogenesis after bone and bone marrow transplantation: The ability of ceramic materials to sustain osteogenesis from transplanted bone marrow cells: preliminary studies. Clin Orthop, 1983;181(12):255
11 Grundel RE, Chapman MW, Yee T et al. Autogeneic bone marrow and porous biphasic calcium phosphate ceramic for segmental bone defects in the canine ulna. Clin Orthop, 1991;266(5):244
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13 Salama R. Xenogeneic bone grafting in humans. Clin Orthop, 1983;174(4):113
14 Ohgushi H, Goldberg VM, Caplan AI. Heterotopic osteogenesis in porous ceramics induced by marrow cells. J Orthop Res, 1989;7(4):568
15 Goshima J, Goldberg VM, Caplan AI. The origin of bone formed in composite grafts of porous calcium phosphate ceramic loaded with marrow cells. Clin Orthop, 1991;269(8):274
(收稿：1997-08-18), 百拇医药