抗菌药物对肠道大肠杆菌耐药性的影响
作者：张小林 汪复
单位：200040 上海医科大学华山医院
关键词：
中华传染病杂志980133
随着抗菌药物的广泛应用，细菌耐药性变得越来越严重。研究表明[1，2]，细菌耐药性的变化和抗菌药物应用有关。我们检测了4个月内未使用过抗菌药物和最近2周内使用过抗菌药物的成人肠道大肠杆菌对12种抗菌药物的敏感性，以期了解抗菌药物选择压力和细菌耐药性之间的关系。
材料和方法
一、检测对象
四个月内未使用过抗菌药物的健康成人51例，年龄26～70岁，平均52.8岁；两周内使用过抗菌药物的成人16例，年龄30～70岁，平均46.3岁，两组均为男性，来自上海医科大学基础部。在使用抗菌药物组中，2例服用诺氟沙星，8例头孢氨苄，4例复方新诺明，2例头孢拉定，均为口服常规剂量，疗程1～4天，使用抗菌药物组中，10例为上呼吸道感染，2例腹泻，4例无明显病症，检测时所有病例症状均已消失。
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二、标本采集
用消毒棉签采集受试者肛拭标本，置于卡里-布莱尔(Cary-Blair)培养基制成的培养管保存。标本采集时间为1995年11月。
三、药敏试验
采用K-B纸片法，结果按NCCLS1993年版标准判定。药敏试验用两种方法：1. 将肛拭标本直接涂布于麦康凯琼脂(Mac Conkty Agar)平板，作纸片药敏试验，在耐药范围内有5个以上的菌落生长即判定为携带有对该抗菌药物耐药的菌株。2. 将肛拭标本在麦康凯琼脂平板作细菌分离，随机选择出10株乳糖发酵菌落，进一步纯化，用MH琼脂平板作药敏试验，药敏质控菌为ATCC25922。
12种药敏纸片为：氨苄西林、哌拉西林、庆大霉素、阿米卡星、链霉素、氯霉素、四环素、甲氧苄氨嘧啶、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星(卫生部北京药品生物制品检验所)、磺胺甲基异FDA3唑(上海第十五制药厂)。
, 百拇医药
结 果
一、耐药菌株携带率
见表1。
未使用抗菌药物组和使用抗菌药物组，氨苄西林、哌拉西林、庆大霉素、链霉素、氯霉素、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星耐药株携带率在使用抗菌药物组均高于未使用组，其中氧氟沙星、庆大霉素两组间差异有显著性(均P<0.05)。
表1 12种抗菌药物的耐药株携带率(%) 抗菌药物
未使用抗菌药物(51)
使用抗菌药物(16)
氨苄西林
98(50)
, 百拇医药 100(16)
哌拉西林
64.3(33)
75(12)
庆大霉素
62(2)
87.5(14)*
阿米卡星
4(37)
0(0)
链霉素
72.6(37)
75(12)
, 百拇医药
氯霉素
72.6(51)
75(12)
四环素
100(51)
100(16)
磺胺甲基异(哑/心)唑
100(51)
100(16)
甲氧苄氨嘧啶
100(51)
100(16)
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诺氟沙星
37.2(19)
62.5(10)
氧氟沙星
33.3(17)
62.5(10)*
环丙沙星
53(27)
62.5(10)
*P<0.005;( )内为株数
二、随机选择菌株的耐药状况
见表2。
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使用抗菌药物组分离大肠杆菌对氨苄西林、哌拉西林、庆大霉素、链霉素、四环素、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、磺胺甲基异FDA3唑耐药率均显著高于未使用组(均P<0.005)，阿米卡星、氯霉素两组间差异无显著性(均P>0.05)。
三、多重耐药率和敏感率
使用抗菌药物组随机分离大肠杆菌耐3种以上抗菌药物的多重耐药率为61.3%(98/160)，显著高于未使用抗菌药物组26.4%(127/481，P<0.005)。使用抗菌药物组对12种抗菌药物均敏感的菌株占3.1%(5/160)，显著低于未使用组21.2%(102/481，P<0.005)。
表2 随机选择菌株对12种抗菌药物的耐药率(%) 抗菌药物
未使用抗菌药物(481)
使用抗菌药物(160)
, 百拇医药
氨苄西林
47(226)
70(112)
哌拉西林
6.7(32)
21.3(34)
庆大霉素
7.9(38)
25(40)
阿米卡星
0.2(1)
0(0)
, http://www.100md.com 链霉素
17.5(84)
36.3(58)
氯霉素
7.1(34)
7.5(12)
四环素
47.6(227)
89.4(143)
磺胺甲基异(哑/心)唑
29.3(141)
46.3(74)
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甲氧苄氨嘧啶
22.2(107)
50.6(81)
诺氟沙星
2.5(12)
25(40)
氧氟沙星
2.5(12)
25.6(41)
环丙沙星
2.3(11)
25.6(41)
, 百拇医药
*P<0.005;( )内为株数
讨 论
许多研究表明[1～3]抗菌药物的使用过程实际上也是对耐药菌株的选择过程。本研究结果显示：使用抗菌药物组肠道大肠杆菌的耐药程度明显高于未使用组，这个结果支持上述观点，表明抗菌药物的选择压力是细菌耐药性上升的重要原因。
本研究结果还表明，即使在未使用抗菌药物的人肠道中，多重耐药株比率也相当高，因此，抗菌药物的选择压力不但可选择出对本身或结构相似抗菌药物的耐药菌株，而且也可选择出对结构完全不同抗菌药物的耐药菌株。
有报道表明[1，4]使用抗菌药物在很短的时间内就可影响肠道大肠杆菌的耐药状态，甚至使用常规剂量的环丙沙星2天，携带耐药株的比例就会升高。我们检测的受试者，抗菌药物的疗程仅为1～4天，表明抗菌药物对耐药株的选择过程很快。
, 百拇医药
由于阿米卡星对绝大多数氨基糖甙钝化酶稳定，细菌不易产生耐药性。因此，肠道大肠杆菌对其耐药程度一直保持在很低的水平。氯霉素的耐药性也没有因为抗菌药物的使用而发生变化，这可能是由于氯霉素耐药发展缓慢，也有可能氯霉素的耐药基因不和其它耐药基因关联。
需要说明的是，虽然本研究使用抗菌药物组在使用抗菌药物的种类、剂量和疗程方面并不很一致，但是，研究结果仍强烈表明抗菌药物的使用和耐药性增加之间的关系，而且也恰恰证明了抗菌药物选择压力选择耐药株的非特异性。
参考文献
1 Dupeyron C, Mangeney N, Sedrati L, et al. Rapid emergence of quinolone resistance in cirrhotic patients treated with norfloxacin to prevent spontaneous bacterial peritonitis. Antimicrob Agents Chemother, 1994, 38:340-344.
, 百拇医药
2 Pena C, Albareda JM, Pallares R, et al. Relationship between quinolone use and emergence of ciprofloxacin-resistant Escherichia coli in bloodstream infections.Antimicrob Agents Chemoth-
er, 1995, 39:520-524.
3 Vollaard EJ， Clasener HAL. Colonization resistance. Antimicrob Agents Chemother, 1994, 38:409-414.
4 Pecquet S, Andremont A, Tancrede C. Effect of oral ofloxacin on fecal bacteria in human volunteers. Antimicrob Agents Chemother, 1987, 31:124-125., http://www.100md.com
单位：200040 上海医科大学华山医院
关键词：
中华传染病杂志980133
随着抗菌药物的广泛应用，细菌耐药性变得越来越严重。研究表明[1，2]，细菌耐药性的变化和抗菌药物应用有关。我们检测了4个月内未使用过抗菌药物和最近2周内使用过抗菌药物的成人肠道大肠杆菌对12种抗菌药物的敏感性，以期了解抗菌药物选择压力和细菌耐药性之间的关系。
材料和方法
一、检测对象
四个月内未使用过抗菌药物的健康成人51例，年龄26～70岁，平均52.8岁；两周内使用过抗菌药物的成人16例，年龄30～70岁，平均46.3岁，两组均为男性，来自上海医科大学基础部。在使用抗菌药物组中，2例服用诺氟沙星，8例头孢氨苄，4例复方新诺明，2例头孢拉定，均为口服常规剂量，疗程1～4天，使用抗菌药物组中，10例为上呼吸道感染，2例腹泻，4例无明显病症，检测时所有病例症状均已消失。
, http://www.100md.com
二、标本采集
用消毒棉签采集受试者肛拭标本，置于卡里-布莱尔(Cary-Blair)培养基制成的培养管保存。标本采集时间为1995年11月。
三、药敏试验
采用K-B纸片法，结果按NCCLS1993年版标准判定。药敏试验用两种方法：1. 将肛拭标本直接涂布于麦康凯琼脂(Mac Conkty Agar)平板，作纸片药敏试验，在耐药范围内有5个以上的菌落生长即判定为携带有对该抗菌药物耐药的菌株。2. 将肛拭标本在麦康凯琼脂平板作细菌分离，随机选择出10株乳糖发酵菌落，进一步纯化，用MH琼脂平板作药敏试验，药敏质控菌为ATCC25922。
12种药敏纸片为：氨苄西林、哌拉西林、庆大霉素、阿米卡星、链霉素、氯霉素、四环素、甲氧苄氨嘧啶、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星(卫生部北京药品生物制品检验所)、磺胺甲基异FDA3唑(上海第十五制药厂)。
, 百拇医药
结 果
一、耐药菌株携带率
见表1。
未使用抗菌药物组和使用抗菌药物组，氨苄西林、哌拉西林、庆大霉素、链霉素、氯霉素、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星耐药株携带率在使用抗菌药物组均高于未使用组，其中氧氟沙星、庆大霉素两组间差异有显著性(均P<0.05)。
表1 12种抗菌药物的耐药株携带率(%) 抗菌药物
未使用抗菌药物(51)
使用抗菌药物(16)
氨苄西林
98(50)
, 百拇医药 100(16)
哌拉西林
64.3(33)
75(12)
庆大霉素
62(2)
87.5(14)*
阿米卡星
4(37)
0(0)
链霉素
72.6(37)
75(12)
, 百拇医药
氯霉素
72.6(51)
75(12)
四环素
100(51)
100(16)
磺胺甲基异(哑/心)唑
100(51)
100(16)
甲氧苄氨嘧啶
100(51)
100(16)
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诺氟沙星
37.2(19)
62.5(10)
氧氟沙星
33.3(17)
62.5(10)*
环丙沙星
53(27)
62.5(10)
*P<0.005;( )内为株数
二、随机选择菌株的耐药状况
见表2。
, http://www.100md.com
使用抗菌药物组分离大肠杆菌对氨苄西林、哌拉西林、庆大霉素、链霉素、四环素、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、磺胺甲基异FDA3唑耐药率均显著高于未使用组(均P<0.005)，阿米卡星、氯霉素两组间差异无显著性(均P>0.05)。
三、多重耐药率和敏感率
使用抗菌药物组随机分离大肠杆菌耐3种以上抗菌药物的多重耐药率为61.3%(98/160)，显著高于未使用抗菌药物组26.4%(127/481，P<0.005)。使用抗菌药物组对12种抗菌药物均敏感的菌株占3.1%(5/160)，显著低于未使用组21.2%(102/481，P<0.005)。
表2 随机选择菌株对12种抗菌药物的耐药率(%) 抗菌药物
未使用抗菌药物(481)
使用抗菌药物(160)
, 百拇医药
氨苄西林
47(226)
70(112)
哌拉西林
6.7(32)
21.3(34)
庆大霉素
7.9(38)
25(40)
阿米卡星
0.2(1)
0(0)
, http://www.100md.com 链霉素
17.5(84)
36.3(58)
氯霉素
7.1(34)
7.5(12)
四环素
47.6(227)
89.4(143)
磺胺甲基异(哑/心)唑
29.3(141)
46.3(74)
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甲氧苄氨嘧啶
22.2(107)
50.6(81)
诺氟沙星
2.5(12)
25(40)
氧氟沙星
2.5(12)
25.6(41)
环丙沙星
2.3(11)
25.6(41)
, 百拇医药
*P<0.005;( )内为株数
讨 论
许多研究表明[1～3]抗菌药物的使用过程实际上也是对耐药菌株的选择过程。本研究结果显示：使用抗菌药物组肠道大肠杆菌的耐药程度明显高于未使用组，这个结果支持上述观点，表明抗菌药物的选择压力是细菌耐药性上升的重要原因。
本研究结果还表明，即使在未使用抗菌药物的人肠道中，多重耐药株比率也相当高，因此，抗菌药物的选择压力不但可选择出对本身或结构相似抗菌药物的耐药菌株，而且也可选择出对结构完全不同抗菌药物的耐药菌株。
有报道表明[1，4]使用抗菌药物在很短的时间内就可影响肠道大肠杆菌的耐药状态，甚至使用常规剂量的环丙沙星2天，携带耐药株的比例就会升高。我们检测的受试者，抗菌药物的疗程仅为1～4天，表明抗菌药物对耐药株的选择过程很快。
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由于阿米卡星对绝大多数氨基糖甙钝化酶稳定，细菌不易产生耐药性。因此，肠道大肠杆菌对其耐药程度一直保持在很低的水平。氯霉素的耐药性也没有因为抗菌药物的使用而发生变化，这可能是由于氯霉素耐药发展缓慢，也有可能氯霉素的耐药基因不和其它耐药基因关联。
需要说明的是，虽然本研究使用抗菌药物组在使用抗菌药物的种类、剂量和疗程方面并不很一致，但是，研究结果仍强烈表明抗菌药物的使用和耐药性增加之间的关系，而且也恰恰证明了抗菌药物选择压力选择耐药株的非特异性。
参考文献
1 Dupeyron C, Mangeney N, Sedrati L, et al. Rapid emergence of quinolone resistance in cirrhotic patients treated with norfloxacin to prevent spontaneous bacterial peritonitis. Antimicrob Agents Chemother, 1994, 38:340-344.
, 百拇医药
2 Pena C, Albareda JM, Pallares R, et al. Relationship between quinolone use and emergence of ciprofloxacin-resistant Escherichia coli in bloodstream infections.Antimicrob Agents Chemoth-
er, 1995, 39:520-524.
3 Vollaard EJ， Clasener HAL. Colonization resistance. Antimicrob Agents Chemother, 1994, 38:409-414.
4 Pecquet S, Andremont A, Tancrede C. Effect of oral ofloxacin on fecal bacteria in human volunteers. Antimicrob Agents Chemother, 1987, 31:124-125., http://www.100md.com