扩张后皮肤组织自身修复过程动态观察的实验研究
作者：范志宏 崔磊 钱云良 李伟
单位：200011 上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科
关键词：皮肤扩张
980210 *本课题为国家自然科学基金资助
【摘要】 目的 了解扩张后皮肤慢性损害的动态修复过程。方法 选用7kg左右的狗
为实验动物。实验分为扩张后即时、1个月、3个月、6个月、1年及对照组共6组，采用超微
结构的观察及胶原定量分析等研究手段。结果 发现扩张刺激可致皮肤慢性损害，早期修复
, 百拇医药
表现为成纤维细胞功能活跃，胶原合成增加；随着时间的延长，成纤维细胞结构渐趋稳定，密体、密斑消失，胞浆减少，微粒纤细；大部分胶原纤维恢复正常的网状结构，但部分胶原
纤维排列紊乱，呈“漩涡状”排列，似“瘢痕样”改变。结论 扩张可致皮肤慢性损害，扩张后真皮组织修复并非组织再生。
Experimental study on the dynamic observation of skin repairing process after expansion Fan Zhihong, Cui Lei, Qian Yunliang, et,al. Plastic Surgery of No. 9 Affiliated Peoples Hospital, The Second Shanghai Medical University, 200011
, 百拇医药
【Abstract】 Objective To observe the dynamic repairing process of skin chronic injury due to expansion.Method Domestic dogs (7 kg) used in this study were divided into six groups: immediate, 1 month, 3 months, 6 months and 1 year after expansion as well as the control group. Dermal ultra structure observation and analysis of collagen were applied. Result The stimulation from expansion may lead to chronic skin injury, the microfilament in fibroblast was fragile, and the features of myofibroblast were absent. Most of the collagen fibers were returned to reticular arrangement along with time, only few remained irregular and sparse in arrangement. Conclusion The chronic injury of the subcutaneous tissue due to expansion could recover spontaneously, but the recovery was not tissue regeneration.
, 百拇医药
【Key Words】 Tissue expansion
皮肤软组织的扩张过程即皮肤组织遭受机械性张力的慢性损伤过程，主要表现为胶原纤维等细胞外基质成分的断裂与退变，同时刺激成纤维细胞的合成、分泌及收缩功能，导致胶原蛋白合成、分泌增加，慢性损伤的真皮组织自身修复[1]。随着真皮肤组织自身修复日趋完善，成纤维细胞的合成、分泌及收缩等细胞生物学行为趋向稳定。
本研究通过对扩张皮肤长达1年的超微结构的动态观察，旨在了解扩张后不同时期真皮组织中成纤维细胞的功能状态，探索成纤维细胞收缩特性的衰减规律，明确扩张后皮肤自身修复过程及扩张皮肤回缩的稳定时限。
材料与方法
一、材料
, 百拇医药
1.实验分组：实验Ⅰ组：扩张后即时；实验Ⅱ组：扩张后3个月；实验Ⅲ组：扩张后6个
月；实验Ⅳ组：扩张后1年；对照组：置入扩张器而未扩张。
2.主要仪器：H-600型透射电子显微镜：日本日立公司产品。
3.试剂：10%甲醛溶液；2%戊二醛溶液；1%锇酸溶液。
二、方法]
1.标本取材：按上述实验分组，分别切取皮肤标本。
2.常规电镜标本制作：1.5%戊二醛、0.1M PBS(pH 7.4)进行前固定，0.1M PBS 漂洗；1%饿酸进行后固定2小时；酒精逐级脱水、浸透；618-环氧树脂包埋；超薄切片及铀铝双
, 百拇医药 重染色。
结 果
真皮组织修复稳定性的观察：正常犬皮肤组织包括表皮、真皮和肉膜层，即时扩张后表皮增厚，有丝分裂增加明显，真皮层内成纤维细胞数目明显增多，胶原排列杂乱，有大量新生血管并可见少量炎性细胞浸润。电镜下可见成纤维细胞合成功能旺盛，表现为胞体大，粗面内质网及线粒体丰富，核膜及膜胞出现皱折(图1)。胶原排列杂乱，并发生大片溶解、吸收现象(图2)。但胶原纤维结构无明显改变，横纹清晰可见。
扩张后3个月，成纤维细胞数目减少，炎性浸润明显减轻，电镜下可见活跃的成纤维细胞
明显减少，胞膜皱折减轻，胶原排列方向重现规律性，但仍杂乱并有溶解现象(图3)。
, 百拇医药
图1 即时扩张后成纤维细胞体增大， 图2 即时扩张胶原纤维发生大片
溶解、断裂、排列杂乱(×6 000) 粗面内质网及线粒体丰富(×8 000)
扩张后6个月，皮肤组织结构已基本正常，成纤维细胞大多表现出纤维细胞的性质，细胞细长，胞浆减少，胞膜、核膜光滑，皱折消失，细胞内粗面内质网及线粒体明显减少。
图3 扩张后3个月，成纤维细胞趋于静止，图4 漩涡状排列的胶原纤维横纹较清晰(×20 000)
, 百拇医药
胞浆内可见大量空泡，密斑消失(×6 000)
扩张后1年，皮肤胶原排列大部恢复正常，仍有部分胶原纤维排列杂乱且呈漩涡状，似呈瘢痕改变。
讨 论 既往研究表明，扩张后真皮组织结构均发生相应改变，随着扩张的结束，改变的结构逐渐恢复正常，扩张后真皮组织可自身修复为正常组织[2]，扩张产生的“额外”皮肤是正常的皮肤组织，这一观点被广泛接受并作为组织扩张术的主要理论依据[3，4]。
我们通过对扩张后真皮组织超微结构的观察，发现成纤维细胞和胶原纤维在扩张后均发生相应的功能和排列的改变，并且随着时间的延长，这种改变日趋稳定，存在真皮的修复过程，这与以往的研究结果相吻合。而扩张后1年的真皮组织超微结构的观察显示，成纤维细胞的结构功能基本恢复正常，表现为细胞细长呈梭形，胞浆减少，核膜、胞膜光滑，皱折消失等；大部分胶原纤维排列恢复正常，小部分胶原纤维出现变性和退化现象，排列杂乱呈漩涡状，似瘢痕样改变(图4)。因此，扩张后1年的皮肤软组织尚未恢复正常，而这种瘢痕样的改变表明扩张后的皮肤并非“正常”皮肤组织，仍有回缩的可能，即扩张后1年皮肤软组织的回缩尚未稳定。
, http://www.100md.com
通过上述研究我们认为：皮肤软组织受扩张刺激后导致成纤维细胞的合成、分泌及收缩功能增强，产生“新”的皮肤组织，呈现皮肤软组织损伤后慢性修复的过程。但这种修复与创伤的瘢痕修复过程不同，也不是扩张皮肤组织的完全再生，而是介于组织再生修复与瘢痕修复之间的一种中间态的修复过程，即组织结构基本恢复正常，但仍存在有胶原纤维的部分排列紊乱现象。扩张后能获取的“额外”皮肤不是完全正常的皮肤组织，而是具有瘢痕样改变的皮肤组织，即扩张后1年的皮肤软组织具有瘢痕样挛缩的特性。
参考文献
1 Austad ED, Pasyk DA, Mcclatchey KD.Histomorphology evaluation if guinea pig skin and soft tissue after controlled tissue expansion .Plast Reconstr Sury, 1982,70:704.
, 百拇医药
2 Johnson PE, Kemahan DA, Bauer BS. Dermal and epidermal response to soft tissue expansion in pig. Plast Reconstr Sury, 1988,80:390.
3 Austad ED, Thomas SB, Pasyk K, et al.Histomorphologic evaluation of guinea pig skin and soft tissue after controlled tissue expansion. Plast Reconstr Surg, 1982,70:704.
4 Reter EJ, Kemahau DA, Bauer BS, et al.Dermal and epidermal response to soft tissue expansion in the pig.Plast Reconstr Surg,1988,81:390.
(收稿：1998-01-08), http://www.100md.com
单位：200011 上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科
关键词：皮肤扩张
980210 *本课题为国家自然科学基金资助
【摘要】 目的 了解扩张后皮肤慢性损害的动态修复过程。方法 选用7kg左右的狗
为实验动物。实验分为扩张后即时、1个月、3个月、6个月、1年及对照组共6组，采用超微
结构的观察及胶原定量分析等研究手段。结果 发现扩张刺激可致皮肤慢性损害，早期修复
, 百拇医药
表现为成纤维细胞功能活跃，胶原合成增加；随着时间的延长，成纤维细胞结构渐趋稳定，密体、密斑消失，胞浆减少，微粒纤细；大部分胶原纤维恢复正常的网状结构，但部分胶原
纤维排列紊乱，呈“漩涡状”排列，似“瘢痕样”改变。结论 扩张可致皮肤慢性损害，扩张后真皮组织修复并非组织再生。
Experimental study on the dynamic observation of skin repairing process after expansion Fan Zhihong, Cui Lei, Qian Yunliang, et,al. Plastic Surgery of No. 9 Affiliated Peoples Hospital, The Second Shanghai Medical University, 200011
, 百拇医药
【Abstract】 Objective To observe the dynamic repairing process of skin chronic injury due to expansion.Method Domestic dogs (7 kg) used in this study were divided into six groups: immediate, 1 month, 3 months, 6 months and 1 year after expansion as well as the control group. Dermal ultra structure observation and analysis of collagen were applied. Result The stimulation from expansion may lead to chronic skin injury, the microfilament in fibroblast was fragile, and the features of myofibroblast were absent. Most of the collagen fibers were returned to reticular arrangement along with time, only few remained irregular and sparse in arrangement. Conclusion The chronic injury of the subcutaneous tissue due to expansion could recover spontaneously, but the recovery was not tissue regeneration.
, 百拇医药
【Key Words】 Tissue expansion
皮肤软组织的扩张过程即皮肤组织遭受机械性张力的慢性损伤过程，主要表现为胶原纤维等细胞外基质成分的断裂与退变，同时刺激成纤维细胞的合成、分泌及收缩功能，导致胶原蛋白合成、分泌增加，慢性损伤的真皮组织自身修复[1]。随着真皮肤组织自身修复日趋完善，成纤维细胞的合成、分泌及收缩等细胞生物学行为趋向稳定。
本研究通过对扩张皮肤长达1年的超微结构的动态观察，旨在了解扩张后不同时期真皮组织中成纤维细胞的功能状态，探索成纤维细胞收缩特性的衰减规律，明确扩张后皮肤自身修复过程及扩张皮肤回缩的稳定时限。
材料与方法
一、材料
, 百拇医药
1.实验分组：实验Ⅰ组：扩张后即时；实验Ⅱ组：扩张后3个月；实验Ⅲ组：扩张后6个
月；实验Ⅳ组：扩张后1年；对照组：置入扩张器而未扩张。
2.主要仪器：H-600型透射电子显微镜：日本日立公司产品。
3.试剂：10%甲醛溶液；2%戊二醛溶液；1%锇酸溶液。
二、方法]
1.标本取材：按上述实验分组，分别切取皮肤标本。
2.常规电镜标本制作：1.5%戊二醛、0.1M PBS(pH 7.4)进行前固定，0.1M PBS 漂洗；1%饿酸进行后固定2小时；酒精逐级脱水、浸透；618-环氧树脂包埋；超薄切片及铀铝双
, 百拇医药 重染色。
结 果
真皮组织修复稳定性的观察：正常犬皮肤组织包括表皮、真皮和肉膜层，即时扩张后表皮增厚，有丝分裂增加明显，真皮层内成纤维细胞数目明显增多，胶原排列杂乱，有大量新生血管并可见少量炎性细胞浸润。电镜下可见成纤维细胞合成功能旺盛，表现为胞体大，粗面内质网及线粒体丰富，核膜及膜胞出现皱折(图1)。胶原排列杂乱，并发生大片溶解、吸收现象(图2)。但胶原纤维结构无明显改变，横纹清晰可见。
扩张后3个月，成纤维细胞数目减少，炎性浸润明显减轻，电镜下可见活跃的成纤维细胞
明显减少，胞膜皱折减轻，胶原排列方向重现规律性，但仍杂乱并有溶解现象(图3)。
, 百拇医药
图1 即时扩张后成纤维细胞体增大， 图2 即时扩张胶原纤维发生大片
溶解、断裂、排列杂乱(×6 000) 粗面内质网及线粒体丰富(×8 000)
扩张后6个月，皮肤组织结构已基本正常，成纤维细胞大多表现出纤维细胞的性质，细胞细长，胞浆减少，胞膜、核膜光滑，皱折消失，细胞内粗面内质网及线粒体明显减少。
图3 扩张后3个月，成纤维细胞趋于静止，图4 漩涡状排列的胶原纤维横纹较清晰(×20 000)
, 百拇医药
胞浆内可见大量空泡，密斑消失(×6 000)
扩张后1年，皮肤胶原排列大部恢复正常，仍有部分胶原纤维排列杂乱且呈漩涡状，似呈瘢痕改变。
讨 论 既往研究表明，扩张后真皮组织结构均发生相应改变，随着扩张的结束，改变的结构逐渐恢复正常，扩张后真皮组织可自身修复为正常组织[2]，扩张产生的“额外”皮肤是正常的皮肤组织，这一观点被广泛接受并作为组织扩张术的主要理论依据[3，4]。
我们通过对扩张后真皮组织超微结构的观察，发现成纤维细胞和胶原纤维在扩张后均发生相应的功能和排列的改变，并且随着时间的延长，这种改变日趋稳定，存在真皮的修复过程，这与以往的研究结果相吻合。而扩张后1年的真皮组织超微结构的观察显示，成纤维细胞的结构功能基本恢复正常，表现为细胞细长呈梭形，胞浆减少，核膜、胞膜光滑，皱折消失等；大部分胶原纤维排列恢复正常，小部分胶原纤维出现变性和退化现象，排列杂乱呈漩涡状，似瘢痕样改变(图4)。因此，扩张后1年的皮肤软组织尚未恢复正常，而这种瘢痕样的改变表明扩张后的皮肤并非“正常”皮肤组织，仍有回缩的可能，即扩张后1年皮肤软组织的回缩尚未稳定。
, http://www.100md.com
通过上述研究我们认为：皮肤软组织受扩张刺激后导致成纤维细胞的合成、分泌及收缩功能增强，产生“新”的皮肤组织，呈现皮肤软组织损伤后慢性修复的过程。但这种修复与创伤的瘢痕修复过程不同，也不是扩张皮肤组织的完全再生，而是介于组织再生修复与瘢痕修复之间的一种中间态的修复过程，即组织结构基本恢复正常，但仍存在有胶原纤维的部分排列紊乱现象。扩张后能获取的“额外”皮肤不是完全正常的皮肤组织，而是具有瘢痕样改变的皮肤组织，即扩张后1年的皮肤软组织具有瘢痕样挛缩的特性。
参考文献
1 Austad ED, Pasyk DA, Mcclatchey KD.Histomorphology evaluation if guinea pig skin and soft tissue after controlled tissue expansion .Plast Reconstr Sury, 1982,70:704.
, 百拇医药
2 Johnson PE, Kemahan DA, Bauer BS. Dermal and epidermal response to soft tissue expansion in pig. Plast Reconstr Sury, 1988,80:390.
3 Austad ED, Thomas SB, Pasyk K, et al.Histomorphologic evaluation of guinea pig skin and soft tissue after controlled tissue expansion. Plast Reconstr Surg, 1982,70:704.
4 Reter EJ, Kemahau DA, Bauer BS, et al.Dermal and epidermal response to soft tissue expansion in the pig.Plast Reconstr Surg,1988,81:390.
(收稿：1998-01-08), http://www.100md.com