联合检测血清PCⅢ、HA、LN对肝纤维化的诊断价值
作者：李兵顺 王继 刘金星 孙述强 魏梅新 刘晓梅 裴 王麟士
单位：050051 石家庄，河北医科大学第三医院(李兵顺、刘金星、孙述强、魏梅新、刘晓梅、裴琇、王麟士)；河北医科大学中医学院(王继)
关键词：Ⅲ型前胶元；透明质酸；层粘连蛋白；肝纤维化
中华传染病杂980210 【摘要】 目的 寻找肝纤维化敏感可靠的血清学指标。方法 对148例各种类型肝病联合检测血清Ⅲ型前胶元(PCⅢ)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)，并与34例肝组织学进行对照研究。结果 三项指标分别在急性肝炎、慢性肝炎中型、重型和肝硬化中依次升高，差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。三项指标升高与肝纤维组织增生呈同步性，显示出良好的正相关(P<0.01)。结论 三项指标的联合检测可极大增加临床诊断的准确性和可靠性。动态观察上述指标的变化既可掌握患者病情的演变，也为抗肝纤维化药物的筛选奠定基础。
, 百拇医药
The preliminary study on diagnostic value of co-detection of serum PCⅢ HA and LN in liver fibrosis patients Li Bingshun, Wang Ji, Liu Jinxing, et al. Department of infectious disease, The 3st Hospital, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050051
【Abstract】 Objective The study was designed to establish sensitive and reliable serum marker on liver fibrosis for early clinical diagnosis. Methods We carried out co-detection of serum PCⅢ, HA and LN in 148 cases with different hepatic diseases compared with liver-biopsy samples of 34 cases. Results The three markers increase in the AH,CH (moderate type, severe type), cirrhosis progressively while the difference between groups were significant (P<0.01 or P<0.05). Rise of three markers was consistent with the degree of hepatic fibrosis and there existed positive correlation between each other (P<0.01). Conclusion The co-detection of three markers can improve the accurency and reliability of clinical diagnosis. The dynamic changement of three markers may be used to predict the trends of diseases and select effective medicine treating hepatic fibrosis.
, 百拇医药
【Key words】 Serum type Ⅲ procollagen Hyaluronate acid Laminin Liver fibrosis
多种研究资料发现，肝纤维化是慢性活动性肝病向肝硬化发展的必经阶段，而且此阶段是个可逆的病理过程[1]。因此，寻找可靠和敏感的血清学指标和筛选有效的抗肝纤维化药物是目前基础和临床研究急待解决的问题。为此我们联合检测了148例各种类型的肝病血清Ⅲ型前胶元(serum type Ⅲ procollagen, PCⅢ)、透明质酸(hyaluronate acid, HA)、层粘连蛋白(Laminin,LN)，并与34例患者肝组织学结果进行对照研究，探讨其临床应用价值，现将初步结果报告如下。
材料和方法
一、病例来源
各种类型肝病148例为1994年10月～1996年2月在我科的住院和门诊患者，男94例，女54例，发病年龄17～72岁。
, http://www.100md.com
(一) 病毒类型 HAV感染14例，HBV感染76例，HCV感染22例，HBV、HCV及HBV、HCV、HDV重叠感染34例，2例各病毒标志均阴性。
(二) 肝炎临床分型 参照1995年(北京)第五届全国传染病与寄生虫病会议制定的诊断依据[2]，研究组中包括急性肝炎25例，慢性肝炎轻型25例，中型32例，重型31例，肝炎肝硬化32例，脂肪肝3例。各年龄组与对照组之间的年龄、性别、病程、暴露因素等均无差异(P>0.05)。
二、试剂与方法
(一) 肝炎病毒检测试剂 分别由山东潍坊三V公司、上海科华公司、北京医科大学肝病研究所提供。
(二) 肝纤维化指标 PCⅢ、HA、LN试剂盒分别由重庆肿瘤研究所、上海海军医学研究所提供，操作依据说明书由同位素科专人放免法测定。
, 百拇医药
(三) 肝组织病理标本 研究组中共计34例肝活检。方法采用经皮肝穿术，穿刺针为国产取12号针头快速负压抽吸专人操作。其中急性肝炎4例、慢性肝炎轻型10例、中型8例、重型8例，肝硬化4例。标本经连续切片常规HE染色和胶原纤维染色，病理诊断法参照第五届传染病与寄生虫病会议制定的“病毒性肝炎防治方案”中病理诊断依据[2]。
三、统计学处理
主要结果以方差分别、q检验，部分资料t检验进行统计学处理。
结果
一、血清三项指标在各型肝炎中的检测结果。
见表1。结果显示：三项指标在各型肝炎中的结果依据肝脏受损程度而依次升高，统计学显示：除慢性肝炎重型与肝硬化之间差异无显著性(P>0.05)外，其余各组间差异有显著性。
, 百拇医药
二、血清三项指标与肝组织学的对照结果
见表2。结果显示：血清三项指标随肝纤维增生程度同步升高，统计学表明：除Ⅲ与Ⅳ期之间差异无显著性(P>0.05)外，各组间差异有显著性。
表1 血清三项指标在各型肝炎的检测结果(
±s) 肝炎类型
例数
PCⅢ(μg/L)
HA(ng/ml)
LN(ng/ml)
急性肝炎
25
, http://www.100md.com
140.08±40.89*
90.64±61.35*
118.80±35.38
慢性肝炎
(q=4.25)
(q=4.82)
轻型(Ⅰ)
25
146.96±41.25*
84.52±51.84
116.08±20.22
, http://www.100md.com
(q=4.13)
中型(Ⅱ)
32
190.36±46.25**
327.29±211.36**
135.17±18.69**
(q=4.08)
(q=3.98)
(q=4.12)
重型(Ⅲ)
31
, http://www.100md.com
248.13±106.38***
521.83±147.29**
182.36±59.26**
(q=4.46)
(q=4.65)
(q=4.28)
肝硬化
32
235.64±68.75***
558.92±156.38**
, http://www.100md.com
208.37±98.45***
(q=4.38)
(q=4.75)
(q=4.65)
正常人
30
85.47±16.84
54.38±25.36
113.79±16.42
注：* 与正常组比较P<0.05；** 与轻型比较P<0.05；*** 与中型比较P<0.05表2 肝组织学与血清三项指标的对照结果(±s) 肝纤维化分期
, 百拇医药
例数
PCⅢ(μg/L)
HA(ng/ml)
LN(ng/ml)
0
4
81.48±16.26
57.20±20.47
102.28±14.75
Ⅰ
10
115.84±39.20*
, 百拇医药
81.35±22.15
116.37±17.21
(q=4.62)
Ⅱ
8
169.21±40.56*
325.49±187.73**
136.42±18.24**
(q=4.78)
(q=6.37)
(q=4.32)
, http://www.100md.com
Ⅲ
8
239.78±102.54***
549.36±134.82***
175.48±55.35***
(q=4.66)
(q=5.64)
(q=5.27)
Ⅳ
4
240.42±57.83***
, 百拇医药
560.48±152.36***
204.38±92.38***
(q=4.68)
(q=5.72)
(q=5.34)
注：* 与0期比较P<0.05；** 与Ⅰ期比较P<0.05；*** 与Ⅱ期比较P<0.05讨论
慢性肝病尤其是活动性病变由于致病因素的持续作用和机体免疫功能失调，以致肝细胞持续受损，纤维组织不断增生。进入到肝纤维化阶段其主要病理特点是胶原蛋白、蛋白多糖及粘连蛋白等多种细胞外基质(ECM)在肝内的过度沉积。但此阶段并非不可逆转。因而探讨其影响因素、寻找早期确诊的血清学指标，筛选有效药物引起广大学者的极大兴趣[3，4]。
, 百拇医药
1979年，Rohdog等[5]首先建立血清Ⅲ型胶原肽(PⅢP)放射免疫法应用于肝纤维化的临床诊断，并被国内外学者一致公认。近年来，对此方法也有学者提出异议。1985年后，国内学者先后报道PCⅢ、HA、LN用于肝纤维化的早期诊断[6～8]，但有的报道检测指标单一，有的报道缺少组织学对照，其临床价值仍在观察中。为此我们联合检测了三项指标(PCⅢ、HA、LN)，并结合部分肝组织学结果进行了对照研究。结果表明：三项指标在各型肝炎中依肝脏受损程度而发生变化，在急性肝炎，慢性肝炎中、重型和肝硬化之间依次升高。统计学证实除慢性肝炎重型与肝硬化之间外，各型间的差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。更重要的是：与肝组织学对照发现，三项指标的增高幅度与肝纤维增生程度是同步的，三项指标除Ⅲ期与Ⅳ期间外各期间差异有显著性。相关分析证实：三项指标与肝脏纤维增生呈现良好的正相关(γ值分别为0.956，0.971，0.936)。统计学证实：此差异有显著性(P<0.01)。
研究发现：如遇患者单一指标增高有时难以过早下结论，患者二项指标或三项指标同时升高，经组织学对照，诊断的可靠性较大。因此有条件者应联合检测上述指标，可望大大提高肝纤维化诊断的准确性和可靠性。
, http://www.100md.com
大量资料表明：基于慢性肝病患者的急性发作，急性隐匿性发病而致临床病程不清，多种病毒的混合或重叠感染等多因素的影响，临床诊断与病理诊断符合率通常可达70%～80%，不符合率可达20%以上[9]。本组有病理资料的34例患者中，7例初诊有误，由于其肝纤维化指标中二项或三项指标增高较明显，最后肝病理学证实2例急肝分别为慢性肝炎轻型和中型，慢性轻型3例分别为中型2例，重型1例；慢性中型2例分别为慢性重型和早期肝硬化。因此我们体会，联合检测上述指标可减少漏诊或误诊。
在本资料中我们发现：经B超和/或CT确诊的3例脂肪肝患者，血清纤维化三项指标均增高不明显，2例进行了肝活检，组织学证实其炎症活动度为Ⅰ度，肝纤维组织增生仅为Ⅰ期，似乎表明肝脏脂肪变并无明显纤维组织的增生。但由于临床资料较少，其确切关系还有待进一步观察。
本研究结果表明：上述三项指标的联合检测是判断慢性肝病患者有无纤维组织增生的敏感而可靠的指标。如能动态观察上述指标的变化，既可弥补临床诊断的不足和掌握患者病情演变的趋势，也为将来筛选抗肝纤维化的药物奠定基础。
, 百拇医药
参考文献
1 钱绍诚.肝纤维化(肝硬化)的可逆性.中华消化杂志，1995，15：251-252.
2 病毒性肝炎防治方案(试行).中华传染病杂志，1995，13：241-247.
3 杨大国，王林杰，肖野.慢性肝炎肝纤维化发生率及其相关因素的探讨.临床肝胆病杂志，1995，11：200-202.
4 王宝恩，王志富，殷蔚荑，等.实验性肝纤维化模型的研究.中华医学杂志，1989，69：503-505.
5 Rohde H,Vorgs L,Hahl E, et al. Radiommunossary for type Ⅲ procollagen peptide and its application to human liver disease, Enr J Clin Inuest, 1979,9:451-453.
6 叶红军，计秀生，冯雪梅，等.血清Ⅲ型前胶原对肝纤维化的诊断价值.临床肝胆病杂志，1993，9：90-92.
7 李伟道，刘兴明，林丁，等.125Ⅰ标记人Ⅲ型前胶原建立放免法诊断肝纤维化.临床肝胆病杂志，1993，9：143-145.
8 李桂芳，周民伟，刘万菊.血清透明质酸评价肝硬化肝癌预后的价值.临床肝胆病杂志，1994，10：90-91.
9 杨永平，张世兰，周艳贤，等.病毒性肝炎患者血清Ⅰ、Ⅲ型胶原与透明质酸及病理改变的关系.中华传染病杂志，1995，13：111-112., 百拇医药
单位：050051 石家庄，河北医科大学第三医院(李兵顺、刘金星、孙述强、魏梅新、刘晓梅、裴琇、王麟士)；河北医科大学中医学院(王继)
关键词：Ⅲ型前胶元；透明质酸；层粘连蛋白；肝纤维化
中华传染病杂980210 【摘要】 目的 寻找肝纤维化敏感可靠的血清学指标。方法 对148例各种类型肝病联合检测血清Ⅲ型前胶元(PCⅢ)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)，并与34例肝组织学进行对照研究。结果 三项指标分别在急性肝炎、慢性肝炎中型、重型和肝硬化中依次升高，差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。三项指标升高与肝纤维组织增生呈同步性，显示出良好的正相关(P<0.01)。结论 三项指标的联合检测可极大增加临床诊断的准确性和可靠性。动态观察上述指标的变化既可掌握患者病情的演变，也为抗肝纤维化药物的筛选奠定基础。
, 百拇医药
The preliminary study on diagnostic value of co-detection of serum PCⅢ HA and LN in liver fibrosis patients Li Bingshun, Wang Ji, Liu Jinxing, et al. Department of infectious disease, The 3st Hospital, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050051
【Abstract】 Objective The study was designed to establish sensitive and reliable serum marker on liver fibrosis for early clinical diagnosis. Methods We carried out co-detection of serum PCⅢ, HA and LN in 148 cases with different hepatic diseases compared with liver-biopsy samples of 34 cases. Results The three markers increase in the AH,CH (moderate type, severe type), cirrhosis progressively while the difference between groups were significant (P<0.01 or P<0.05). Rise of three markers was consistent with the degree of hepatic fibrosis and there existed positive correlation between each other (P<0.01). Conclusion The co-detection of three markers can improve the accurency and reliability of clinical diagnosis. The dynamic changement of three markers may be used to predict the trends of diseases and select effective medicine treating hepatic fibrosis.
, 百拇医药
【Key words】 Serum type Ⅲ procollagen Hyaluronate acid Laminin Liver fibrosis
多种研究资料发现，肝纤维化是慢性活动性肝病向肝硬化发展的必经阶段，而且此阶段是个可逆的病理过程[1]。因此，寻找可靠和敏感的血清学指标和筛选有效的抗肝纤维化药物是目前基础和临床研究急待解决的问题。为此我们联合检测了148例各种类型的肝病血清Ⅲ型前胶元(serum type Ⅲ procollagen, PCⅢ)、透明质酸(hyaluronate acid, HA)、层粘连蛋白(Laminin,LN)，并与34例患者肝组织学结果进行对照研究，探讨其临床应用价值，现将初步结果报告如下。
材料和方法
一、病例来源
各种类型肝病148例为1994年10月～1996年2月在我科的住院和门诊患者，男94例，女54例，发病年龄17～72岁。
, http://www.100md.com
(一) 病毒类型 HAV感染14例，HBV感染76例，HCV感染22例，HBV、HCV及HBV、HCV、HDV重叠感染34例，2例各病毒标志均阴性。
(二) 肝炎临床分型 参照1995年(北京)第五届全国传染病与寄生虫病会议制定的诊断依据[2]，研究组中包括急性肝炎25例，慢性肝炎轻型25例，中型32例，重型31例，肝炎肝硬化32例，脂肪肝3例。各年龄组与对照组之间的年龄、性别、病程、暴露因素等均无差异(P>0.05)。
二、试剂与方法
(一) 肝炎病毒检测试剂 分别由山东潍坊三V公司、上海科华公司、北京医科大学肝病研究所提供。
(二) 肝纤维化指标 PCⅢ、HA、LN试剂盒分别由重庆肿瘤研究所、上海海军医学研究所提供，操作依据说明书由同位素科专人放免法测定。
, 百拇医药
(三) 肝组织病理标本 研究组中共计34例肝活检。方法采用经皮肝穿术，穿刺针为国产取12号针头快速负压抽吸专人操作。其中急性肝炎4例、慢性肝炎轻型10例、中型8例、重型8例，肝硬化4例。标本经连续切片常规HE染色和胶原纤维染色，病理诊断法参照第五届传染病与寄生虫病会议制定的“病毒性肝炎防治方案”中病理诊断依据[2]。
三、统计学处理
主要结果以方差分别、q检验，部分资料t检验进行统计学处理。
结果
一、血清三项指标在各型肝炎中的检测结果。
见表1。结果显示：三项指标在各型肝炎中的结果依据肝脏受损程度而依次升高，统计学显示：除慢性肝炎重型与肝硬化之间差异无显著性(P>0.05)外，其余各组间差异有显著性。
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二、血清三项指标与肝组织学的对照结果
见表2。结果显示：血清三项指标随肝纤维增生程度同步升高，统计学表明：除Ⅲ与Ⅳ期之间差异无显著性(P>0.05)外，各组间差异有显著性。
表1 血清三项指标在各型肝炎的检测结果(
±s) 肝炎类型例数
PCⅢ(μg/L)
HA(ng/ml)
LN(ng/ml)
急性肝炎
25
, http://www.100md.com
140.08±40.89*
90.64±61.35*
118.80±35.38
慢性肝炎
(q=4.25)
(q=4.82)
轻型(Ⅰ)
25
146.96±41.25*
84.52±51.84
116.08±20.22
, http://www.100md.com
(q=4.13)
中型(Ⅱ)
32
190.36±46.25**
327.29±211.36**
135.17±18.69**
(q=4.08)
(q=3.98)
(q=4.12)
重型(Ⅲ)
31
, http://www.100md.com
248.13±106.38***
521.83±147.29**
182.36±59.26**
(q=4.46)
(q=4.65)
(q=4.28)
肝硬化
32
235.64±68.75***
558.92±156.38**
, http://www.100md.com
208.37±98.45***
(q=4.38)
(q=4.75)
(q=4.65)
正常人
30
85.47±16.84
54.38±25.36
113.79±16.42
注：* 与正常组比较P<0.05；** 与轻型比较P<0.05；*** 与中型比较P<0.05表2 肝组织学与血清三项指标的对照结果(
±s) 肝纤维化分期, 百拇医药
例数
PCⅢ(μg/L)
HA(ng/ml)
LN(ng/ml)
0
4
81.48±16.26
57.20±20.47
102.28±14.75
Ⅰ
10
115.84±39.20*
, 百拇医药
81.35±22.15
116.37±17.21
(q=4.62)
Ⅱ
8
169.21±40.56*
325.49±187.73**
136.42±18.24**
(q=4.78)
(q=6.37)
(q=4.32)
, http://www.100md.com
Ⅲ
8
239.78±102.54***
549.36±134.82***
175.48±55.35***
(q=4.66)
(q=5.64)
(q=5.27)
Ⅳ
4
240.42±57.83***
, 百拇医药
560.48±152.36***
204.38±92.38***
(q=4.68)
(q=5.72)
(q=5.34)
注：* 与0期比较P<0.05；** 与Ⅰ期比较P<0.05；*** 与Ⅱ期比较P<0.05讨论
慢性肝病尤其是活动性病变由于致病因素的持续作用和机体免疫功能失调，以致肝细胞持续受损，纤维组织不断增生。进入到肝纤维化阶段其主要病理特点是胶原蛋白、蛋白多糖及粘连蛋白等多种细胞外基质(ECM)在肝内的过度沉积。但此阶段并非不可逆转。因而探讨其影响因素、寻找早期确诊的血清学指标，筛选有效药物引起广大学者的极大兴趣[3，4]。
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1979年，Rohdog等[5]首先建立血清Ⅲ型胶原肽(PⅢP)放射免疫法应用于肝纤维化的临床诊断，并被国内外学者一致公认。近年来，对此方法也有学者提出异议。1985年后，国内学者先后报道PCⅢ、HA、LN用于肝纤维化的早期诊断[6～8]，但有的报道检测指标单一，有的报道缺少组织学对照，其临床价值仍在观察中。为此我们联合检测了三项指标(PCⅢ、HA、LN)，并结合部分肝组织学结果进行了对照研究。结果表明：三项指标在各型肝炎中依肝脏受损程度而发生变化，在急性肝炎，慢性肝炎中、重型和肝硬化之间依次升高。统计学证实除慢性肝炎重型与肝硬化之间外，各型间的差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。更重要的是：与肝组织学对照发现，三项指标的增高幅度与肝纤维增生程度是同步的，三项指标除Ⅲ期与Ⅳ期间外各期间差异有显著性。相关分析证实：三项指标与肝脏纤维增生呈现良好的正相关(γ值分别为0.956，0.971，0.936)。统计学证实：此差异有显著性(P<0.01)。
研究发现：如遇患者单一指标增高有时难以过早下结论，患者二项指标或三项指标同时升高，经组织学对照，诊断的可靠性较大。因此有条件者应联合检测上述指标，可望大大提高肝纤维化诊断的准确性和可靠性。
, http://www.100md.com
大量资料表明：基于慢性肝病患者的急性发作，急性隐匿性发病而致临床病程不清，多种病毒的混合或重叠感染等多因素的影响，临床诊断与病理诊断符合率通常可达70%～80%，不符合率可达20%以上[9]。本组有病理资料的34例患者中，7例初诊有误，由于其肝纤维化指标中二项或三项指标增高较明显，最后肝病理学证实2例急肝分别为慢性肝炎轻型和中型，慢性轻型3例分别为中型2例，重型1例；慢性中型2例分别为慢性重型和早期肝硬化。因此我们体会，联合检测上述指标可减少漏诊或误诊。
在本资料中我们发现：经B超和/或CT确诊的3例脂肪肝患者，血清纤维化三项指标均增高不明显，2例进行了肝活检，组织学证实其炎症活动度为Ⅰ度，肝纤维组织增生仅为Ⅰ期，似乎表明肝脏脂肪变并无明显纤维组织的增生。但由于临床资料较少，其确切关系还有待进一步观察。
本研究结果表明：上述三项指标的联合检测是判断慢性肝病患者有无纤维组织增生的敏感而可靠的指标。如能动态观察上述指标的变化，既可弥补临床诊断的不足和掌握患者病情演变的趋势，也为将来筛选抗肝纤维化的药物奠定基础。
, 百拇医药
参考文献
1 钱绍诚.肝纤维化(肝硬化)的可逆性.中华消化杂志，1995，15：251-252.
2 病毒性肝炎防治方案(试行).中华传染病杂志，1995，13：241-247.
3 杨大国，王林杰，肖野.慢性肝炎肝纤维化发生率及其相关因素的探讨.临床肝胆病杂志，1995，11：200-202.
4 王宝恩，王志富，殷蔚荑，等.实验性肝纤维化模型的研究.中华医学杂志，1989，69：503-505.
5 Rohde H,Vorgs L,Hahl E, et al. Radiommunossary for type Ⅲ procollagen peptide and its application to human liver disease, Enr J Clin Inuest, 1979,9:451-453.
6 叶红军，计秀生，冯雪梅，等.血清Ⅲ型前胶原对肝纤维化的诊断价值.临床肝胆病杂志，1993，9：90-92.
7 李伟道，刘兴明，林丁，等.125Ⅰ标记人Ⅲ型前胶原建立放免法诊断肝纤维化.临床肝胆病杂志，1993，9：143-145.
8 李桂芳，周民伟，刘万菊.血清透明质酸评价肝硬化肝癌预后的价值.临床肝胆病杂志，1994，10：90-91.
9 杨永平，张世兰，周艳贤，等.病毒性肝炎患者血清Ⅰ、Ⅲ型胶原与透明质酸及病理改变的关系.中华传染病杂志，1995，13：111-112., 百拇医药