卡介苗联合白细胞介素-2膀胱灌注预防膀胱癌复发机理的研究
作者：温儒民 周广臣 谢叔良 连保罗 孙晓青 陈家存
单位：221002 徐州医学院附属医院泌尿外科
关键词：膀胱肿瘤；癌；灌注，局部；卡介苗；白细胞介素；2
中华外科杂志/980418 【摘要】 目的 探讨卡介苗(BCG)联合白细胞介素-2(IL-2)膀胱灌注预防膀胱癌复发的机理。方法 对35例膀胱移行细胞癌术后患者分别行BCG和BCG加IL-2膀胱灌注，随访14～22个月，复发率分别为31.2 5%和21.05%。 结果 应用IL-2加BCG膀胱灌注6周后，外周血天然杀伤细胞激活因子(NKCF)活性明显增强，在NKCF活性与IL-2活性间有显著正相关变化。 结论 IL-2加BCG膀胱灌注预防膀胱癌复发作用明显优于单纯用BCG，IL-2和BCG 两者间有免疫促进和协同作用。
Mechanism of preventing the recurrence of bladder carcinoma by intravesical instillation of BCG plus IL-2 Wen Rumin,Zhou Guangchen,Xie Shuliang,et al. Department of Urology,Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College, Xuzhou 221002.
, http://www.100md.com
【Abstract】 Objective To study the mechanism of preventing the recurrence of bladder carcinoma by intravesical instillation of BCG plus IL-2. Method Intravesical instillation of BCG or BCG plus IL-2 were carried out in the bladder transitional cell carcinoma patients undergoing surgical operation(16,19 cases respectively). Result They were followed up for 14～22 months.The recurrence rates were 31.25% and 21.05% respectively. At 6 weeks after the instillation of IL-2 plus BCG,the peripheral blood NKCF activity was increased significantly and there was a significant positive correlation between the activities of NKCF and IL-2. Conclusion The intravesical instillation of IL-2 plus BCG is clearly superior to only BCG in preventing recurrence of bladder carcinoma.There may be immuno-enhancement and immuno-synergism.
, 百拇医药
【Key words】 Bladder neoplasms Carcinoma Perfusion，regional BCG Vaccine Interleukin-2
卡介苗(BCG)联合白细胞介素-2(IL-2)膀胱灌注预防膀胱癌复发，国内外已有报道[1，2]，但对其作用机理尚缺乏足够的认识。对此，我们进行了研究，现报告如下。
资料与方法
一、临床资料
经病理确诊的膀胱移行细胞癌初发患者35例，均为单发， 病理分级Ⅰ～Ⅱ期，已行膀胱部分切除或经尿道膀胱肿瘤电切术。年龄42～69岁，平均54.3岁。按均衡原则分成两组，BCG灌注组16例，BCG加IL-2灌注组19例。正常对照组来自血库献血员20例，年龄35～52岁，平均 45.2岁。
, 百拇医药
二、灌注方法
灌注开始时间为患者切口基本愈合后，排尿正常，一般为术后1周左右。BCG灌注组以BCG 120 mg加生理盐水30 ml膀胱灌注，BCG加IL-2灌注组以IL-210000 U,BCG 120 mg加生理盐水30 ml膀胱灌注，每周1次，连续6周。维持疗程一般为每个月1次，1年后每3个月1次。术后每3个月行膀胱镜和(或)B超检查一次，随访时间14～22个月。
三、实验方法
1.外周血单核细胞分离：无菌抽取外周静脉血5 ml，肝素抗凝，经淋巴细胞分离液密度梯度离心(2000 r/min)20分钟。吸取界面单核细胞层，Hank液洗2遍，完全培养液将细胞浓度调至1×106/ml。
2.IL-2产生能力测定：MTT法测定[3]。
, 百拇医药
3.NKCF活性检测：MTT法测定[4]。
结果
1.疗效观察:BCG膀胱灌注组16例患者中有5例复发，复发率为31.25%；BCG加IL-2灌注组19例患者中有4例复发，复发率为21.05%。BCG灌注后，35例患者全部发生不同程度的尿频等膀胱刺激征。22.8%(8/35)的患者有肉眼血尿；62.8%(22/35)出现低热；11.4%(4/35)发生高热。上述症状多于灌注1～2天后发生，随灌注时间延长，症状加重。疗程结束后，全部症状消失。
2.IL-2及NKCF活性测定结果:对照组20例患者血IL-2为0.42±0.06A值，NKCF活性为33.57%±8.39%。肿瘤组35例，灌注前的IL-2为0.21±0.04A值，NKCF为19.84%±5.62%。16例BCG灌注组灌注前的IL-2为0.19±0.04A值，NKCF为17.78%±5.46%，灌注6周后的IL-2为0.31±0.05A值，NKCF为27.79%±6.64%，与灌注前相比差异显著(P<0.05)。19例BCG加IL-2灌注组灌注前的IL-2为0.23±0.05A值，NKCF为21.16%±5.84%，灌注6周后的IL-2为0.40±0.06A值，NKCF为32.30%±9.84%，与BCG灌注相比差异显著(P<0.05)。比较BCG或BCG加IL-2膀胱灌注6周后IL-2活性与NKCF活性关系时发现，二者间有显著正相关关系，r值分别为0.843与0.875，P<0.01。
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讨论
BCG是一种刺激网状内皮系统，增强免疫细胞功能的有效生物制剂。局部灌注，口服BCG预防肿瘤复发已取得令人满意的效果。近年来的研究表明，BCG联合IL-2膀胱灌注预防膀胱肿瘤复发明显优于单用BCG[1，2]。我们的研究结果也证实了这一点，本组复发率为21.05%，与文献报道基本相似。
膀胱癌患者的免疫功能低下，外周血IL-2及NK活性降低。提高患者的免疫功能，降低复发率就显得非常重要。NK 细胞在机体免疫监视与杀伤肿瘤效应中起重要作用。BCG是NK细胞的强烈诱导剂与活性调节剂，在免疫调节网络中，BCG通过直接诱导、激活T、T4、NK、MΦ产生IL-2与IFN。后者可进一步刺激NK细胞增殖与分化，使前体NK细胞转化成具有强烈细胞毒效应的成熟NK细胞[5]。本组实验显示， BCG灌注后，外周血NKCF活性增强，NKCF活性与IL-2活性间有明显正相关变化。因此机体形成一个BCG、IL-2、NK 的免疫调节网络。根据膀胱癌患者血和尿中IL-2活性低下，我们选用IL-2联合BCG膀胱灌注后，外周血NKCF活性更强，在NKCF活性与IL-2活性间也有显著正相关变化。说明IL-2与BCG间有免疫协同或促进作用，对BCG、IL-2、NK免疫网络有更强的调节作用，进一步放大免疫细胞的抗肿瘤效应。由此，我们认为BCG加IL-2膀胱灌注预防肿瘤复发的机理可能是：在用BCG灌注治疗引起膀胱粘膜炎性反应及免疫作用的基础上，IL-2对其产生了免疫促进和协同作用，同时提高机体的主动免疫和被动免疫功能。
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参考文献
1Abrahan TK,Robert SD,Louis RC,et al.BCG and IL-2 for treatment of superficial bladder cancer. J Urol, 1991,146:766-767.
2郑军洪,湛道明.BCG加IL-2膀胱灌注免疫功能动态观察. 中华泌尿外科杂志,1996,6:356-357.
3田志刚,杨贵贞.用CTLL-2细胞测定IL-2的实验观察.中华医学检验杂志,1991,14:340-341.
4刘子栋,谢淑良.膀胱腔内灌注干扰素对膀胱肿瘤病人NKCF活性的影响.中华泌尿外科杂志,1991,12:273-274.
5韩瑞发,马腾骧,王文成,等.BCG 灌注对外周血免疫细胞的调节及其功能的影响.中华泌尿外科杂志,1994,15:100-101., 百拇医药
单位：221002 徐州医学院附属医院泌尿外科
关键词：膀胱肿瘤；癌；灌注，局部；卡介苗；白细胞介素；2
中华外科杂志/980418 【摘要】 目的 探讨卡介苗(BCG)联合白细胞介素-2(IL-2)膀胱灌注预防膀胱癌复发的机理。方法 对35例膀胱移行细胞癌术后患者分别行BCG和BCG加IL-2膀胱灌注，随访14～22个月，复发率分别为31.2 5%和21.05%。 结果 应用IL-2加BCG膀胱灌注6周后，外周血天然杀伤细胞激活因子(NKCF)活性明显增强，在NKCF活性与IL-2活性间有显著正相关变化。 结论 IL-2加BCG膀胱灌注预防膀胱癌复发作用明显优于单纯用BCG，IL-2和BCG 两者间有免疫促进和协同作用。
Mechanism of preventing the recurrence of bladder carcinoma by intravesical instillation of BCG plus IL-2 Wen Rumin,Zhou Guangchen,Xie Shuliang,et al. Department of Urology,Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College, Xuzhou 221002.
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【Abstract】 Objective To study the mechanism of preventing the recurrence of bladder carcinoma by intravesical instillation of BCG plus IL-2. Method Intravesical instillation of BCG or BCG plus IL-2 were carried out in the bladder transitional cell carcinoma patients undergoing surgical operation(16,19 cases respectively). Result They were followed up for 14～22 months.The recurrence rates were 31.25% and 21.05% respectively. At 6 weeks after the instillation of IL-2 plus BCG,the peripheral blood NKCF activity was increased significantly and there was a significant positive correlation between the activities of NKCF and IL-2. Conclusion The intravesical instillation of IL-2 plus BCG is clearly superior to only BCG in preventing recurrence of bladder carcinoma.There may be immuno-enhancement and immuno-synergism.
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【Key words】 Bladder neoplasms Carcinoma Perfusion，regional BCG Vaccine Interleukin-2
卡介苗(BCG)联合白细胞介素-2(IL-2)膀胱灌注预防膀胱癌复发，国内外已有报道[1，2]，但对其作用机理尚缺乏足够的认识。对此，我们进行了研究，现报告如下。
资料与方法
一、临床资料
经病理确诊的膀胱移行细胞癌初发患者35例，均为单发， 病理分级Ⅰ～Ⅱ期，已行膀胱部分切除或经尿道膀胱肿瘤电切术。年龄42～69岁，平均54.3岁。按均衡原则分成两组，BCG灌注组16例，BCG加IL-2灌注组19例。正常对照组来自血库献血员20例，年龄35～52岁，平均 45.2岁。
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二、灌注方法
灌注开始时间为患者切口基本愈合后，排尿正常，一般为术后1周左右。BCG灌注组以BCG 120 mg加生理盐水30 ml膀胱灌注，BCG加IL-2灌注组以IL-210000 U,BCG 120 mg加生理盐水30 ml膀胱灌注，每周1次，连续6周。维持疗程一般为每个月1次，1年后每3个月1次。术后每3个月行膀胱镜和(或)B超检查一次，随访时间14～22个月。
三、实验方法
1.外周血单核细胞分离：无菌抽取外周静脉血5 ml，肝素抗凝，经淋巴细胞分离液密度梯度离心(2000 r/min)20分钟。吸取界面单核细胞层，Hank液洗2遍，完全培养液将细胞浓度调至1×106/ml。
2.IL-2产生能力测定：MTT法测定[3]。
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3.NKCF活性检测：MTT法测定[4]。
结果
1.疗效观察:BCG膀胱灌注组16例患者中有5例复发，复发率为31.25%；BCG加IL-2灌注组19例患者中有4例复发，复发率为21.05%。BCG灌注后，35例患者全部发生不同程度的尿频等膀胱刺激征。22.8%(8/35)的患者有肉眼血尿；62.8%(22/35)出现低热；11.4%(4/35)发生高热。上述症状多于灌注1～2天后发生，随灌注时间延长，症状加重。疗程结束后，全部症状消失。
2.IL-2及NKCF活性测定结果:对照组20例患者血IL-2为0.42±0.06A值，NKCF活性为33.57%±8.39%。肿瘤组35例，灌注前的IL-2为0.21±0.04A值，NKCF为19.84%±5.62%。16例BCG灌注组灌注前的IL-2为0.19±0.04A值，NKCF为17.78%±5.46%，灌注6周后的IL-2为0.31±0.05A值，NKCF为27.79%±6.64%，与灌注前相比差异显著(P<0.05)。19例BCG加IL-2灌注组灌注前的IL-2为0.23±0.05A值，NKCF为21.16%±5.84%，灌注6周后的IL-2为0.40±0.06A值，NKCF为32.30%±9.84%，与BCG灌注相比差异显著(P<0.05)。比较BCG或BCG加IL-2膀胱灌注6周后IL-2活性与NKCF活性关系时发现，二者间有显著正相关关系，r值分别为0.843与0.875，P<0.01。
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讨论
BCG是一种刺激网状内皮系统，增强免疫细胞功能的有效生物制剂。局部灌注，口服BCG预防肿瘤复发已取得令人满意的效果。近年来的研究表明，BCG联合IL-2膀胱灌注预防膀胱肿瘤复发明显优于单用BCG[1，2]。我们的研究结果也证实了这一点，本组复发率为21.05%，与文献报道基本相似。
膀胱癌患者的免疫功能低下，外周血IL-2及NK活性降低。提高患者的免疫功能，降低复发率就显得非常重要。NK 细胞在机体免疫监视与杀伤肿瘤效应中起重要作用。BCG是NK细胞的强烈诱导剂与活性调节剂，在免疫调节网络中，BCG通过直接诱导、激活T、T4、NK、MΦ产生IL-2与IFN。后者可进一步刺激NK细胞增殖与分化，使前体NK细胞转化成具有强烈细胞毒效应的成熟NK细胞[5]。本组实验显示， BCG灌注后，外周血NKCF活性增强，NKCF活性与IL-2活性间有明显正相关变化。因此机体形成一个BCG、IL-2、NK 的免疫调节网络。根据膀胱癌患者血和尿中IL-2活性低下，我们选用IL-2联合BCG膀胱灌注后，外周血NKCF活性更强，在NKCF活性与IL-2活性间也有显著正相关变化。说明IL-2与BCG间有免疫协同或促进作用，对BCG、IL-2、NK免疫网络有更强的调节作用，进一步放大免疫细胞的抗肿瘤效应。由此，我们认为BCG加IL-2膀胱灌注预防肿瘤复发的机理可能是：在用BCG灌注治疗引起膀胱粘膜炎性反应及免疫作用的基础上，IL-2对其产生了免疫促进和协同作用，同时提高机体的主动免疫和被动免疫功能。
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参考文献
1Abrahan TK,Robert SD,Louis RC,et al.BCG and IL-2 for treatment of superficial bladder cancer. J Urol, 1991,146:766-767.
2郑军洪,湛道明.BCG加IL-2膀胱灌注免疫功能动态观察. 中华泌尿外科杂志,1996,6:356-357.
3田志刚,杨贵贞.用CTLL-2细胞测定IL-2的实验观察.中华医学检验杂志,1991,14:340-341.
4刘子栋,谢淑良.膀胱腔内灌注干扰素对膀胱肿瘤病人NKCF活性的影响.中华泌尿外科杂志,1991,12:273-274.
5韩瑞发,马腾骧,王文成,等.BCG 灌注对外周血免疫细胞的调节及其功能的影响.中华泌尿外科杂志,1994,15:100-101., 百拇医药