肾癌细胞的凋亡与调控因子的表达
作者：许宁 石爱平 赵忠文 王乃义
单位：130021 长春,白求恩医科大学第一临床学院泌尿外科
关键词：
中华外科杂志/980722 我们利用微波免疫组化和流式细胞技术,对52例肾癌及14例癌旁正常组织的凋亡率及抗凋亡基因bcl-2、转化生长因子β1(TGF-β1)、c-myc的表达进行了定性、定量的测定，现报道如下。
1.材料和方法：1985～1995年手术切除的肾癌石蜡标本52例为实验组;癌旁正常肾组织14例为对照组。蛋白表达的定性测定及定位分布,采用免疫组化ABC法;定量测定及凋亡率[1],采用流式细胞技术制成单细胞悬液。其中1份标本加入荧光素标记的抗体;另1份标本用RNA酶消化,DNA染色,由计算机根据流式细胞仪所测数据和图形,测出荧光指数(FI)值(表示相对蛋白含量)(FI=肾癌细胞所测蛋白平均荧光强度-阴性对照组平均荧光强度/正常肾细胞所测蛋白平均荧光强度)和凋亡率。
2.结果： bcl-2、TGF-β1、c-myc在实验组和对照组表达的阳性率分别为73.08%和35.71%、53.84%和21.14%、76.92%和14.29%,组间比较差异有显著性意义(P<0.01)；FI值分别为1.42±0.22和0.83±0.13、1.30±0.31和0.60±0.17、1.39±0.19和0.46±0.12,组间比较差异有极显著性意义(P<0.01)。实验组和对照组的凋亡率分别为4.15%±1.93%和9.2%±1.61%，组间比较差异有显著性意义(P<0.01)；凋亡率与bcl-2表达呈负相关(r=-0.9155,P<0.01),随TGF-β1的表达有增加的趋势(但P>0.05),与c-myc表达无相关(P>0.05)。
3.讨论：肿瘤细胞逃避凋亡与肿瘤的发生、发展密切相关。一些癌基因、生长因子参与了细胞凋亡,bcl-2为目前已知的最重要的抑凋亡基因。本研究结果显示,bcl-2的表达与肾癌细胞的凋亡率呈强的负相关(r=-0.9155,P<0.001),表明bcl-2有很强的抑制肾癌细胞凋亡的作用。我们认为,bcl-2过量表达,对肾癌细胞凋亡率下降及其增殖和凋亡比例失调,最终导致肾癌发生起重要作用。TGF-β1为具有多种生物学功能的多肽生长因子。本实验结果显示,肾癌细胞凋亡率有随TGF-β1表达的增强而增加的趋势,提示TGF-β1可能有促进肾癌细胞凋亡的作用。c-myc为一种核原癌基因,其产物核磷酸蛋白调控细胞的增殖和分化,c-myc表达的失调是多种细胞凋亡的主要诱因。在本实验中,未发现c-myc表达与肾癌细胞凋亡率有相关性(P>0.05)。我们推测,在肾癌中bcl-2可能与c-myc蛋白相互作用,消除c-myc诱导的细胞凋亡。此外,可能有其他生长因子作为细胞存活信号,使c-myc表达的细胞完成增殖周期而不发生凋亡。
我们的研究提示,体内癌基因的激活和一些生长因子的分泌,它们的相互作用,使细胞增殖和凋亡的调节失衡,导致肾癌的发生和发展。在分析凋亡的调控机制时,应结合多因素共同研究,有利于揭示各因素间的相互调控机制,以及它们的综合作用对凋亡的影响。
参考文献
1Nicoletti I,Migliorati G,Pagliacci MC, et al. A rapid and simple method for measuring thymocyte apoptosis by propidium iodid staining and flow cytometry. J Immunol Method,1991,139:271-279., http://www.100md.com
单位：130021 长春,白求恩医科大学第一临床学院泌尿外科
关键词：
中华外科杂志/980722 我们利用微波免疫组化和流式细胞技术,对52例肾癌及14例癌旁正常组织的凋亡率及抗凋亡基因bcl-2、转化生长因子β1(TGF-β1)、c-myc的表达进行了定性、定量的测定，现报道如下。
1.材料和方法：1985～1995年手术切除的肾癌石蜡标本52例为实验组;癌旁正常肾组织14例为对照组。蛋白表达的定性测定及定位分布,采用免疫组化ABC法;定量测定及凋亡率[1],采用流式细胞技术制成单细胞悬液。其中1份标本加入荧光素标记的抗体;另1份标本用RNA酶消化,DNA染色,由计算机根据流式细胞仪所测数据和图形,测出荧光指数(FI)值(表示相对蛋白含量)(FI=肾癌细胞所测蛋白平均荧光强度-阴性对照组平均荧光强度/正常肾细胞所测蛋白平均荧光强度)和凋亡率。
2.结果： bcl-2、TGF-β1、c-myc在实验组和对照组表达的阳性率分别为73.08%和35.71%、53.84%和21.14%、76.92%和14.29%,组间比较差异有显著性意义(P<0.01)；FI值分别为1.42±0.22和0.83±0.13、1.30±0.31和0.60±0.17、1.39±0.19和0.46±0.12,组间比较差异有极显著性意义(P<0.01)。实验组和对照组的凋亡率分别为4.15%±1.93%和9.2%±1.61%，组间比较差异有显著性意义(P<0.01)；凋亡率与bcl-2表达呈负相关(r=-0.9155,P<0.01),随TGF-β1的表达有增加的趋势(但P>0.05),与c-myc表达无相关(P>0.05)。
3.讨论：肿瘤细胞逃避凋亡与肿瘤的发生、发展密切相关。一些癌基因、生长因子参与了细胞凋亡,bcl-2为目前已知的最重要的抑凋亡基因。本研究结果显示,bcl-2的表达与肾癌细胞的凋亡率呈强的负相关(r=-0.9155,P<0.001),表明bcl-2有很强的抑制肾癌细胞凋亡的作用。我们认为,bcl-2过量表达,对肾癌细胞凋亡率下降及其增殖和凋亡比例失调,最终导致肾癌发生起重要作用。TGF-β1为具有多种生物学功能的多肽生长因子。本实验结果显示,肾癌细胞凋亡率有随TGF-β1表达的增强而增加的趋势,提示TGF-β1可能有促进肾癌细胞凋亡的作用。c-myc为一种核原癌基因,其产物核磷酸蛋白调控细胞的增殖和分化,c-myc表达的失调是多种细胞凋亡的主要诱因。在本实验中,未发现c-myc表达与肾癌细胞凋亡率有相关性(P>0.05)。我们推测,在肾癌中bcl-2可能与c-myc蛋白相互作用,消除c-myc诱导的细胞凋亡。此外,可能有其他生长因子作为细胞存活信号,使c-myc表达的细胞完成增殖周期而不发生凋亡。
我们的研究提示,体内癌基因的激活和一些生长因子的分泌,它们的相互作用,使细胞增殖和凋亡的调节失衡,导致肾癌的发生和发展。在分析凋亡的调控机制时,应结合多因素共同研究,有利于揭示各因素间的相互调控机制,以及它们的综合作用对凋亡的影响。
参考文献
1Nicoletti I,Migliorati G,Pagliacci MC, et al. A rapid and simple method for measuring thymocyte apoptosis by propidium iodid staining and flow cytometry. J Immunol Method,1991,139:271-279., http://www.100md.com