电离辐射对大鼠小肠及血浆DAO活性的影响
作者：董红林 蔡军伟 司兆学
单位：解放军广州医学高等专科学校病理学教研室 广东省广州市 510315
关键词：辐射，电离；小肠/辐射效应；二胺氧化酶类/代谢
华人消化杂志980834Subject headings radiation, ionizing; intestins, small/radiation effects; amine oxidase/metabolism
中国图书资料分类号 R 811.5
近年来，对二胺氧化酶(DAO)的研究已引起越来越多的学者注意. 目前已知，DAO在大多数哺乳动物和人的小肠粘膜中含量最高，而在其他组织(除孕鼠胎盘外)的酶活性均低于小肠粘膜的5%以下，它是组胺等胺类物质在肠粘膜代谢的一个最重要的酶[1]. 这就使DAO活性能较为准确地反映肠粘膜的完整性和损伤及增生程度. 我们通过研究电离辐射后大鼠小肠和外周血浆DAO活性的变化以评价血浆DAO活性变化能否反映肠道辐射损伤的程度，希望能为临床肿瘤放疗患者肠道损伤程度的判断提供一种非创伤性手段.
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1 材料和方法
实验用♀ Wistar大鼠，体重150 g～200 g. 每组动物数4～8只. 60Coγ线全身一次照射1.5，3.0，4.5，6.0，7.5，9.0，12 Gy，剂量率为2.18×10-2～2.58×10-2Gy/ S. 将动物麻醉后，四肢固定于动物板上，剪断股静脉取血3 ml，置于肝素抗凝管中. 打开腹腔，在离幽门15 cm处取一段回肠7 cm～10 cm，剔除肠系膜，用冰磷酸缓冲液(pH 7.4)洗净，吸干，称0.1 g肠组织，用磷酸缓冲液稀释10倍后磨成匀浆，血和肠匀浆标本离心(3000 r/ min×10min)后，取上清液测定DAO活性，方法用改良的Okuyama et al[2]的方法.
2 结果
2.1 照射后小肠和血浆DAO活性(图1) 6 Gy照射后d 1，小肠和血浆DAO活性开始下降，d 3达最低(P<0.05)，d 5开始升高，d 7小肠DAO活性已达正常，血浆DAO活性稍低，但与正常相比无显著差异，到d 15～d 25，小肠和血浆DAO活性均明显高于正常(P<0.01). 结果显示，小肠和血浆DAO活性的变化是基本平行一致的.
, 百拇医药
2.2 照射后d 3，小肠和血浆DAO活性(图2) 随着照射剂量的加大，小肠和血浆DAO活性逐渐降低，二者变化基本平行一致. 6 Gy以上剂量照射后，小肠和血浆DAO活性变化不明显.
3 讨论
小肠粘膜是电离辐射的敏感组织，辐射损伤主要造成肠粘膜上皮及绒毛的脱落和隐窝细胞的破坏. 此时，主要存在于肠粘膜上皮细胞内的DAO活性会随着辐射损伤的程度及粘膜上皮的恢复而发生变化，而小肠DAO活性变化与肠粘膜损伤的病理形态学变化是平行一致的. 本结果显示，辐射损伤后，大鼠血浆DAO活性变化与小肠粘膜DAO活性变化基本一致，亦即与肠粘膜辐射损伤的病理形态学变化一致.
长期以来，研究肠道疾病的损伤程度的指标，主要是通过创伤性手段如活检取材，这对患者来讲是难以接受的，所以越来越多的学者将注意力集中到了肠道损伤时血浆DAO活性变化的研究上. 他们的研究结果显示，血浆DAO活性的变化能反映新生大鼠肠粘膜的增生成熟程度及成年大鼠肠道损伤时肠粘膜的损伤程度[3]；能判断临床小肠克隆病患者病变活动程度、疗效、预后及复发[4]；能判断慢性肾功能衰竭患者肠道损伤的程度[5]；通过检测肝素化后血浆DAO活性的变化来评价大鼠小肠移植物的功能等[6]. 本结果说明，用少量外周血测定其DAO活性的变化，能较好地反映小肠辐射损伤的程度，为临床判断放疗患者肠道的损伤程度，提供了一种非创伤性的手段.
, 百拇医药
通讯作者 董红林
收稿日期 1998-05-03
4 参考文献
1 Jarisch R, Wantke F. Wine and headache. Int Arch Allergy Immunol, 1996;110(1):7-12
2 Okuyama T, Kobayashi Y. Determination of diamine oxidase activity by liquid scintillation counting. Arch Biophys, 1961;95(3):242-244
3 Luk GD, Bayless TM, Baylin SB. Diamine oxidase (histaminase). A circulating marker for rat intestinal mucosal maturatuion and integrity. J Clin Invest, 1980;66(1):66-70
, 百拇医药
4 D＇ Agostino L, Pignata S, Daniele B, Visconti M Ferraro C, D＇Adamo G et al. Postheparin plasma diamine oxidase values in the follow up of patients with small bowel Grohn＇s disease. Gut, 1991;32(8):932-935
5 Stein J,. Scheuermann EH, Yazdi R, Lembcke B, Caspary WF. Reduced postheparin plasma diamine oxidase activity in patients with chronic renal failure. Z Gastroenterol, 1994;32(4):236-239
6 Wolvekamp MC, de-Bruin RW, Marquet RL, Heineman F. Assessment of small bowel graft function in rats by monitoring postheparin diamine oxidase activity. Transplant Proc, 1994;26(3):1514-1516, http://www.100md.com
单位：解放军广州医学高等专科学校病理学教研室 广东省广州市 510315
关键词：辐射，电离；小肠/辐射效应；二胺氧化酶类/代谢
华人消化杂志980834Subject headings radiation, ionizing; intestins, small/radiation effects; amine oxidase/metabolism
中国图书资料分类号 R 811.5
近年来，对二胺氧化酶(DAO)的研究已引起越来越多的学者注意. 目前已知，DAO在大多数哺乳动物和人的小肠粘膜中含量最高，而在其他组织(除孕鼠胎盘外)的酶活性均低于小肠粘膜的5%以下，它是组胺等胺类物质在肠粘膜代谢的一个最重要的酶[1]. 这就使DAO活性能较为准确地反映肠粘膜的完整性和损伤及增生程度. 我们通过研究电离辐射后大鼠小肠和外周血浆DAO活性的变化以评价血浆DAO活性变化能否反映肠道辐射损伤的程度，希望能为临床肿瘤放疗患者肠道损伤程度的判断提供一种非创伤性手段.
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1 材料和方法
实验用♀ Wistar大鼠，体重150 g～200 g. 每组动物数4～8只. 60Coγ线全身一次照射1.5，3.0，4.5，6.0，7.5，9.0，12 Gy，剂量率为2.18×10-2～2.58×10-2Gy/ S. 将动物麻醉后，四肢固定于动物板上，剪断股静脉取血3 ml，置于肝素抗凝管中. 打开腹腔，在离幽门15 cm处取一段回肠7 cm～10 cm，剔除肠系膜，用冰磷酸缓冲液(pH 7.4)洗净，吸干，称0.1 g肠组织，用磷酸缓冲液稀释10倍后磨成匀浆，血和肠匀浆标本离心(3000 r/ min×10min)后，取上清液测定DAO活性，方法用改良的Okuyama et al[2]的方法.
2 结果
2.1 照射后小肠和血浆DAO活性(图1) 6 Gy照射后d 1，小肠和血浆DAO活性开始下降，d 3达最低(P<0.05)，d 5开始升高，d 7小肠DAO活性已达正常，血浆DAO活性稍低，但与正常相比无显著差异，到d 15～d 25，小肠和血浆DAO活性均明显高于正常(P<0.01). 结果显示，小肠和血浆DAO活性的变化是基本平行一致的.
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2.2 照射后d 3，小肠和血浆DAO活性(图2) 随着照射剂量的加大，小肠和血浆DAO活性逐渐降低，二者变化基本平行一致. 6 Gy以上剂量照射后，小肠和血浆DAO活性变化不明显.
3 讨论
小肠粘膜是电离辐射的敏感组织，辐射损伤主要造成肠粘膜上皮及绒毛的脱落和隐窝细胞的破坏. 此时，主要存在于肠粘膜上皮细胞内的DAO活性会随着辐射损伤的程度及粘膜上皮的恢复而发生变化，而小肠DAO活性变化与肠粘膜损伤的病理形态学变化是平行一致的. 本结果显示，辐射损伤后，大鼠血浆DAO活性变化与小肠粘膜DAO活性变化基本一致，亦即与肠粘膜辐射损伤的病理形态学变化一致.
长期以来，研究肠道疾病的损伤程度的指标，主要是通过创伤性手段如活检取材，这对患者来讲是难以接受的，所以越来越多的学者将注意力集中到了肠道损伤时血浆DAO活性变化的研究上. 他们的研究结果显示，血浆DAO活性的变化能反映新生大鼠肠粘膜的增生成熟程度及成年大鼠肠道损伤时肠粘膜的损伤程度[3]；能判断临床小肠克隆病患者病变活动程度、疗效、预后及复发[4]；能判断慢性肾功能衰竭患者肠道损伤的程度[5]；通过检测肝素化后血浆DAO活性的变化来评价大鼠小肠移植物的功能等[6]. 本结果说明，用少量外周血测定其DAO活性的变化，能较好地反映小肠辐射损伤的程度，为临床判断放疗患者肠道的损伤程度，提供了一种非创伤性的手段.
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通讯作者 董红林
收稿日期 1998-05-03
4 参考文献
1 Jarisch R, Wantke F. Wine and headache. Int Arch Allergy Immunol, 1996;110(1):7-12
2 Okuyama T, Kobayashi Y. Determination of diamine oxidase activity by liquid scintillation counting. Arch Biophys, 1961;95(3):242-244
3 Luk GD, Bayless TM, Baylin SB. Diamine oxidase (histaminase). A circulating marker for rat intestinal mucosal maturatuion and integrity. J Clin Invest, 1980;66(1):66-70
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4 D＇ Agostino L, Pignata S, Daniele B, Visconti M Ferraro C, D＇Adamo G et al. Postheparin plasma diamine oxidase values in the follow up of patients with small bowel Grohn＇s disease. Gut, 1991;32(8):932-935
5 Stein J,. Scheuermann EH, Yazdi R, Lembcke B, Caspary WF. Reduced postheparin plasma diamine oxidase activity in patients with chronic renal failure. Z Gastroenterol, 1994;32(4):236-239
6 Wolvekamp MC, de-Bruin RW, Marquet RL, Heineman F. Assessment of small bowel graft function in rats by monitoring postheparin diamine oxidase activity. Transplant Proc, 1994;26(3):1514-1516, http://www.100md.com