肝脏肿瘤中基质溶解素的表达
作者：方石岗 钱其军 杨继震 曲增强 吴孟超
单位：510282 广州珠江医院普通外科(方石岗、杨继震)；上海东方肝胆外科医院(钱其军、曲增强、吴孟超)
关键词：
中华外科杂志980923 基质溶解素(stromelysin)是金属蛋白酶具有代表性的主要成员之一，在多种肿瘤中已经证明恶性肿瘤细胞通过金属蛋白酶降解细胞外基质以突破组织屏障而发生转移，为探讨其在肝脏肿瘤转移中所起的作用，我们应用原位分子杂交技术分别检测了原发性肝癌、继发性肝癌和肝癌肝外转移淋巴结组织中基质溶解素mRNA的表达。
1.资料和方法：手术切除肝脏肿瘤和瘤旁肝组织标本17例。男14例，女3例。年龄33～69岁，平均47.6岁。伴肝硬变者13例，不伴肝硬变者4例。未出现肝外转移的原发性肝细胞癌12例，取癌组织和癌旁肝组织进行检测。肝细胞癌肝外转移至肝门或大网膜淋巴结2例，取淋巴结组织进行检测。继发性肝癌3例(分别为结肠癌、直肠癌和胰腺癌肝转移)，均为原发肿瘤切除之后出现的转移灶。取新鲜组织常规制备冰冻切片。
基质溶解素cDNA探针长度1.6 Kb，EcoRⅠ酶切回收。应用地高辛随机引物法标记探针，杂交方法和步骤依据地高辛试剂盒操作流程进行。探针浓度约为390 ng/ml，42℃杂交过夜。终止反应后梯度乙醇脱水。镜下观察细胞出现蓝色反应颗粒为阳性。
2.结果：12例肝细胞癌组织中，7例基质溶解素mRNA表达阳性。2例肝癌肝外转移淋巴结组织和3例继发性肝癌均为阳性，正常肝组织和癌旁肝组织均阴性。病理分级Ⅰ～Ⅱ级肝细胞癌3例，均阴性；Ⅲ～Ⅳ级肝细胞癌9例，阳性7例。镜下观察阳性细胞呈散在的片状或灶状分布，显色和分布不均匀。阳性细胞多位于癌巢边缘部分或管道近旁。2例肝癌肝外转移淋巴结组织中癌细胞深度显色，聚集成片状。3例继发性肝癌也表达出较高水平的基质溶解素mRNA，阳性细胞区域显色深且较多，表达水平均高于未出现肝外转移的肝癌组织。
3.讨论：本实验结果发现，相当部分癌组织中并不表达基质溶解素，而表达基质溶解素的癌细胞则呈散在的片灶状分布，且多位于癌巢边缘或管道近旁，提示具有转移潜能的瘤细胞多位于肿瘤结节的表面和周边，因而肿瘤细胞也易于向周边侵袭并转移。有文献报道金属蛋白酶和组织金属蛋白酶抑制物参与了肿瘤内血管的新生以及组织的改建和破坏，也显示了血管旁基质溶解素阳性细胞的增多。本组中病理分级Ⅲ～Ⅳ级肝癌组织的mRNA表达水平要高于Ⅰ～Ⅱ级的肝癌组织，表明随着疾病的进展获得转移潜能肿瘤细胞的增多。
肝癌具有早期经门静脉系统发生肿瘤扩散的特点，患者往往尚未出现肝外转移即出现全身衰竭。肝癌肝外淋巴结转移说明其组织类型具有高转移性，其基质溶解素的高表达，提示基质溶解素参与了肝癌转移的过程。本组3例继发性肝癌均表达了较高水平的基质溶解素，也表明了金属蛋白酶在肿瘤转移中的重要性。, 百拇医药
单位：510282 广州珠江医院普通外科(方石岗、杨继震)；上海东方肝胆外科医院(钱其军、曲增强、吴孟超)
关键词：
中华外科杂志980923 基质溶解素(stromelysin)是金属蛋白酶具有代表性的主要成员之一，在多种肿瘤中已经证明恶性肿瘤细胞通过金属蛋白酶降解细胞外基质以突破组织屏障而发生转移，为探讨其在肝脏肿瘤转移中所起的作用，我们应用原位分子杂交技术分别检测了原发性肝癌、继发性肝癌和肝癌肝外转移淋巴结组织中基质溶解素mRNA的表达。
1.资料和方法：手术切除肝脏肿瘤和瘤旁肝组织标本17例。男14例，女3例。年龄33～69岁，平均47.6岁。伴肝硬变者13例，不伴肝硬变者4例。未出现肝外转移的原发性肝细胞癌12例，取癌组织和癌旁肝组织进行检测。肝细胞癌肝外转移至肝门或大网膜淋巴结2例，取淋巴结组织进行检测。继发性肝癌3例(分别为结肠癌、直肠癌和胰腺癌肝转移)，均为原发肿瘤切除之后出现的转移灶。取新鲜组织常规制备冰冻切片。
基质溶解素cDNA探针长度1.6 Kb，EcoRⅠ酶切回收。应用地高辛随机引物法标记探针，杂交方法和步骤依据地高辛试剂盒操作流程进行。探针浓度约为390 ng/ml，42℃杂交过夜。终止反应后梯度乙醇脱水。镜下观察细胞出现蓝色反应颗粒为阳性。
2.结果：12例肝细胞癌组织中，7例基质溶解素mRNA表达阳性。2例肝癌肝外转移淋巴结组织和3例继发性肝癌均为阳性，正常肝组织和癌旁肝组织均阴性。病理分级Ⅰ～Ⅱ级肝细胞癌3例，均阴性；Ⅲ～Ⅳ级肝细胞癌9例，阳性7例。镜下观察阳性细胞呈散在的片状或灶状分布，显色和分布不均匀。阳性细胞多位于癌巢边缘部分或管道近旁。2例肝癌肝外转移淋巴结组织中癌细胞深度显色，聚集成片状。3例继发性肝癌也表达出较高水平的基质溶解素mRNA，阳性细胞区域显色深且较多，表达水平均高于未出现肝外转移的肝癌组织。
3.讨论：本实验结果发现，相当部分癌组织中并不表达基质溶解素，而表达基质溶解素的癌细胞则呈散在的片灶状分布，且多位于癌巢边缘或管道近旁，提示具有转移潜能的瘤细胞多位于肿瘤结节的表面和周边，因而肿瘤细胞也易于向周边侵袭并转移。有文献报道金属蛋白酶和组织金属蛋白酶抑制物参与了肿瘤内血管的新生以及组织的改建和破坏，也显示了血管旁基质溶解素阳性细胞的增多。本组中病理分级Ⅲ～Ⅳ级肝癌组织的mRNA表达水平要高于Ⅰ～Ⅱ级的肝癌组织，表明随着疾病的进展获得转移潜能肿瘤细胞的增多。
肝癌具有早期经门静脉系统发生肿瘤扩散的特点，患者往往尚未出现肝外转移即出现全身衰竭。肝癌肝外淋巴结转移说明其组织类型具有高转移性，其基质溶解素的高表达，提示基质溶解素参与了肝癌转移的过程。本组3例继发性肝癌均表达了较高水平的基质溶解素，也表明了金属蛋白酶在肿瘤转移中的重要性。, 百拇医药