老年患者嗅球的组织形态学变化
作者：王娜亚 李挺 范为 喻妮 张小伯 王忠植
单位：100029 北京,中日友好医院耳鼻喉科(王娜亚、范为、喻妮、张小伯、王忠植)，病理科(李挺)
关键词：
中华医学杂志981116
随着社会老龄化的进展，对中枢神经系统老化的研究亦不断深入。为此，我们用常规组织病理学和免疫组织化学的方法，观察了老年患者嗅球的变化，以期为嗅球及老年性嗅觉障碍的研究提供形态学的依据，报道如下。
一、对象和方法
1.对象：来自我院和日本国立国际医疗中心的14例尸体解剖患者(无前颅窝病变)，其中肺癌4例，头颈部恶性肿瘤3例，肝癌2例，血液病2例，乳腺癌、卵巢癌和慢性肾功能衰竭各1例。14例中男9例，女5例，年龄20～44岁5例，60～87岁9例。
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2.嗅球标本制备：于前颅窝筛板处采取完整单侧嗅球组织，10%甲醛固定。将嗅球冠状连续切为3块(每份厚约3 mm)，石蜡包埋，切片厚3 μm。行常规HE染色。
3.免疫组织化学染色：石蜡切片4 μm，用S-100(1∶1 000，多克隆抗体，丹麦DAKO公司)和神经元特异烯醇化酶(NSE)(1∶100，单克隆抗体，丹麦DAKO公司)抗体，行标准ABC法及DAB法显色。
4.观察指标：HE切片，将综合嗅球不同组织段切片(即嗅球冠状连续切块包埋切片)所见作为分析依据；S-100和NSE染色分别对胶质细胞和神经元免疫标记作为辅助观察。(1)测定嗅球内4种神经元的数量：以各切面僧帽细胞数的平均值作定量分析；比较各例的刷状细胞层和内颗粒细胞层的厚度，以及这两种细胞和小球周细胞的核密度，作半定量分析。(2)观察突触小球的数量和形态：以各切面突触小球数的平均值为标准，同时观察突触小球的形态改变，其大小以直径为标准(大：直径约100 μm，中：直径约60 μm，小：直径约30 μm)。(3)其他退行性改变：淀粉样小体大量出现为+++，中度为++。
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图1 正常嗅球结构.从外到内分别为嗅神经
纤维层、突触小球层、外颗粒层、僧帽细胞
层、内颗粒层及嗅束神经纤维层 HE×64
二、结果
1.嗅球的结构：HE染色有13例较清楚地显示了嗅球的6层结构(图1)：嗅球的最外层可见嗅神经纤维层；其次一层可见到呈球状纤维的突触小球层，突触小球球体大而圆，直径约100 μm，有时呈2～4个分叶状结构集聚而成；第3层为外颗粒层，由排列不整，细胞体积由小逐渐增大的锥体状神经元(刷状细胞)构成；第4层为僧帽细胞层，僧帽细胞是嗅球中最大的细胞，锥体状，泡状核，直径约15～20 μm，且细胞排列疏松；第5层为内颗粒层，可见排列呈3～5层的细胞核密集带；第6层为嗅束神经纤维层。在嗅神经纤维层、突触小球层及嗅束神经纤维层中，S-100蛋白呈阳性反应的胶质细胞广泛分布，数目较多。嗅球的僧帽细胞、刷状细胞、颗粒细胞及小球周细胞等4种神经元对S-100蛋白均呈阴性反应。NSE染色在较大的刷状细胞和僧帽细胞中呈阳性。
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2.老年患者嗅球改变的组织学特点：以青壮年组作对照，该组突触小球的数量为17～20个(群)，僧帽细胞20～23个。老年患者的突触小球层和僧帽细胞层有明显改变者8例。突触小球减少为10～12个(群)者2例(分别为65岁及72岁)，其形态变为中等大，僧帽细胞亦呈中度减少(9～14个)；突触小球减少至4～8个(群)者2例(分别为60岁及85岁)，其形态变为更小，僧帽细胞呈中度减少(9～14个)；突触小球结构不清者4例(分别为63岁、83岁、85岁及87岁)，其中僧帽细胞中度减少3例(9～13个)，重度减少1例(5个)；伴有突触小球内纤维状结构消失者2例，表现为呈云雾状均值的强嗜伊红块结；在老年患者嗅球的6层结构中，嗅神经纤维层、外颗粒层、内颗粒层及嗅束神经纤维层的形态无明显变化，而嗅球6层结构不清伴细胞总数明显减少1例(72岁)，其僧帽细胞重度减少(5个)。此外，因突触小球层不同程度萎缩造成外颗粒层外移6例(图2，3)；伴有小球周细胞体减少9例；出现明显淀粉样小体5例，其中3例为+++，2例为++；出现软脑膜钙化斑2例。
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图2 青年患者嗅球.突触小球呈分叶状结构(↓)，外颗粒
层深层可见与刷状细胞移行过渡的僧帽细胞(▲) HE×400
图3 老龄患者嗅球.突触小球的球形结构消失，突触小球层萎缩
导致外颗粒层外移，僧帽细胞(↑)，内颗粒细胞层(▲) HE×400
三、讨论
1.人嗅球的形态学特点：嗅球为嗅觉的低级中枢，呈扁卵圆形、长约9 mm，位于前颅窝筛板之上，大脑额叶前下方[1]。有关人嗅球的研究报道甚少，动物嗅球的结构已十分明确，其横断面分为近似同心圆的6层[2]。人嗅球结构被认为与动物相似，本组13例患者可看到嗅球6层结构。其明显的特点为：(1)突触小球球体大而圆，直径约100 μm，有时由2～4个分叶状结构集聚而成。(2)突触小球层、外颗粒层、僧帽细胞层、内颗粒层及嗅束神经纤维层相互之间有移行过渡，不象动物嗅球的6层结构那样分，尤其是僧帽细胞，为嗅球中最主要的神经元，其细胞排列疏松不整，与第3层深部个体较大的刷状细胞移形过渡更为显著。
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2.老年患者嗅球改变的组织学特点：对照青年组嗅球组织学结构，老年组嗅球改变有：僧帽细胞、突触小球及小球周细胞均明显减少；突触小球形态变小甚至结构不清，并导致部分突触小球层出现不同程度萎缩；部分有淀粉样小体和软脑膜钙化斑。中枢神经系统衰老的特点之一是神经细胞减少[3]。僧帽细胞是嗅球内最主要的神经细胞，为嗅觉系的一级神经元，其树突接受嗅细胞轴突传来的刺激，其轴突汇成嗅索并将刺激传到大脑嗅觉中枢[2]。本组部分老年患者僧帽细胞明显减少，提示在临床可能出现老年性嗅觉减退。突触小球是由嗅丝末端与僧帽细胞和刷状细胞的树突构成的球体。我们观察到老年患者的突触小球明显减少，其形态变小甚至结构不清，均意味着组成小球各种神经纤维减少。突触小球是嗅细胞与僧帽细胞之间联系中介[2]，上述改变可以导致嗅觉传导障碍。小球周细胞担当突触小球间的联络，是具有多巴胺能的细胞群，以此推测，如果这3种细胞明显减少将造成嗅觉中枢性传导障碍。
参考文献
1 川北幸男，山上荣.机能的神经解剖学.东京：医齿药出版株式会社，1975.244-252.
2 入来正躬，外山敬介.生理学Ⅰ.东京：株式会社，1986，353-362.
3 江口吾朗，大泽仲昭，他.发生と老化Ⅱ.新医科学大系4B.东京：中山书店，1986.112-122.
(收稿：1998-02-19 修回：1998-07-16), http://www.100md.com
单位：100029 北京,中日友好医院耳鼻喉科(王娜亚、范为、喻妮、张小伯、王忠植)，病理科(李挺)
关键词：
中华医学杂志981116
随着社会老龄化的进展，对中枢神经系统老化的研究亦不断深入。为此，我们用常规组织病理学和免疫组织化学的方法，观察了老年患者嗅球的变化，以期为嗅球及老年性嗅觉障碍的研究提供形态学的依据，报道如下。
一、对象和方法
1.对象：来自我院和日本国立国际医疗中心的14例尸体解剖患者(无前颅窝病变)，其中肺癌4例，头颈部恶性肿瘤3例，肝癌2例，血液病2例，乳腺癌、卵巢癌和慢性肾功能衰竭各1例。14例中男9例，女5例，年龄20～44岁5例，60～87岁9例。
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2.嗅球标本制备：于前颅窝筛板处采取完整单侧嗅球组织，10%甲醛固定。将嗅球冠状连续切为3块(每份厚约3 mm)，石蜡包埋，切片厚3 μm。行常规HE染色。
3.免疫组织化学染色：石蜡切片4 μm，用S-100(1∶1 000，多克隆抗体，丹麦DAKO公司)和神经元特异烯醇化酶(NSE)(1∶100，单克隆抗体，丹麦DAKO公司)抗体，行标准ABC法及DAB法显色。
4.观察指标：HE切片，将综合嗅球不同组织段切片(即嗅球冠状连续切块包埋切片)所见作为分析依据；S-100和NSE染色分别对胶质细胞和神经元免疫标记作为辅助观察。(1)测定嗅球内4种神经元的数量：以各切面僧帽细胞数的平均值作定量分析；比较各例的刷状细胞层和内颗粒细胞层的厚度，以及这两种细胞和小球周细胞的核密度，作半定量分析。(2)观察突触小球的数量和形态：以各切面突触小球数的平均值为标准，同时观察突触小球的形态改变，其大小以直径为标准(大：直径约100 μm，中：直径约60 μm，小：直径约30 μm)。(3)其他退行性改变：淀粉样小体大量出现为+++，中度为++。
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图1 正常嗅球结构.从外到内分别为嗅神经
纤维层、突触小球层、外颗粒层、僧帽细胞
层、内颗粒层及嗅束神经纤维层 HE×64
二、结果
1.嗅球的结构：HE染色有13例较清楚地显示了嗅球的6层结构(图1)：嗅球的最外层可见嗅神经纤维层；其次一层可见到呈球状纤维的突触小球层，突触小球球体大而圆，直径约100 μm，有时呈2～4个分叶状结构集聚而成；第3层为外颗粒层，由排列不整，细胞体积由小逐渐增大的锥体状神经元(刷状细胞)构成；第4层为僧帽细胞层，僧帽细胞是嗅球中最大的细胞，锥体状，泡状核，直径约15～20 μm，且细胞排列疏松；第5层为内颗粒层，可见排列呈3～5层的细胞核密集带；第6层为嗅束神经纤维层。在嗅神经纤维层、突触小球层及嗅束神经纤维层中，S-100蛋白呈阳性反应的胶质细胞广泛分布，数目较多。嗅球的僧帽细胞、刷状细胞、颗粒细胞及小球周细胞等4种神经元对S-100蛋白均呈阴性反应。NSE染色在较大的刷状细胞和僧帽细胞中呈阳性。
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2.老年患者嗅球改变的组织学特点：以青壮年组作对照，该组突触小球的数量为17～20个(群)，僧帽细胞20～23个。老年患者的突触小球层和僧帽细胞层有明显改变者8例。突触小球减少为10～12个(群)者2例(分别为65岁及72岁)，其形态变为中等大，僧帽细胞亦呈中度减少(9～14个)；突触小球减少至4～8个(群)者2例(分别为60岁及85岁)，其形态变为更小，僧帽细胞呈中度减少(9～14个)；突触小球结构不清者4例(分别为63岁、83岁、85岁及87岁)，其中僧帽细胞中度减少3例(9～13个)，重度减少1例(5个)；伴有突触小球内纤维状结构消失者2例，表现为呈云雾状均值的强嗜伊红块结；在老年患者嗅球的6层结构中，嗅神经纤维层、外颗粒层、内颗粒层及嗅束神经纤维层的形态无明显变化，而嗅球6层结构不清伴细胞总数明显减少1例(72岁)，其僧帽细胞重度减少(5个)。此外，因突触小球层不同程度萎缩造成外颗粒层外移6例(图2，3)；伴有小球周细胞体减少9例；出现明显淀粉样小体5例，其中3例为+++，2例为++；出现软脑膜钙化斑2例。
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图2 青年患者嗅球.突触小球呈分叶状结构(↓)，外颗粒
层深层可见与刷状细胞移行过渡的僧帽细胞(▲) HE×400
图3 老龄患者嗅球.突触小球的球形结构消失，突触小球层萎缩
导致外颗粒层外移，僧帽细胞(↑)，内颗粒细胞层(▲) HE×400
三、讨论
1.人嗅球的形态学特点：嗅球为嗅觉的低级中枢，呈扁卵圆形、长约9 mm，位于前颅窝筛板之上，大脑额叶前下方[1]。有关人嗅球的研究报道甚少，动物嗅球的结构已十分明确，其横断面分为近似同心圆的6层[2]。人嗅球结构被认为与动物相似，本组13例患者可看到嗅球6层结构。其明显的特点为：(1)突触小球球体大而圆，直径约100 μm，有时由2～4个分叶状结构集聚而成。(2)突触小球层、外颗粒层、僧帽细胞层、内颗粒层及嗅束神经纤维层相互之间有移行过渡，不象动物嗅球的6层结构那样分，尤其是僧帽细胞，为嗅球中最主要的神经元，其细胞排列疏松不整，与第3层深部个体较大的刷状细胞移形过渡更为显著。
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2.老年患者嗅球改变的组织学特点：对照青年组嗅球组织学结构，老年组嗅球改变有：僧帽细胞、突触小球及小球周细胞均明显减少；突触小球形态变小甚至结构不清，并导致部分突触小球层出现不同程度萎缩；部分有淀粉样小体和软脑膜钙化斑。中枢神经系统衰老的特点之一是神经细胞减少[3]。僧帽细胞是嗅球内最主要的神经细胞，为嗅觉系的一级神经元，其树突接受嗅细胞轴突传来的刺激，其轴突汇成嗅索并将刺激传到大脑嗅觉中枢[2]。本组部分老年患者僧帽细胞明显减少，提示在临床可能出现老年性嗅觉减退。突触小球是由嗅丝末端与僧帽细胞和刷状细胞的树突构成的球体。我们观察到老年患者的突触小球明显减少，其形态变小甚至结构不清，均意味着组成小球各种神经纤维减少。突触小球是嗅细胞与僧帽细胞之间联系中介[2]，上述改变可以导致嗅觉传导障碍。小球周细胞担当突触小球间的联络，是具有多巴胺能的细胞群，以此推测，如果这3种细胞明显减少将造成嗅觉中枢性传导障碍。
参考文献
1 川北幸男，山上荣.机能的神经解剖学.东京：医齿药出版株式会社，1975.244-252.
2 入来正躬，外山敬介.生理学Ⅰ.东京：株式会社，1986，353-362.
3 江口吾朗，大泽仲昭，他.发生と老化Ⅱ.新医科学大系4B.东京：中山书店，1986.112-122.
(收稿：1998-02-19 修回：1998-07-16), http://www.100md.com