组织相容性抗原与血液病患者反复输注血小板效果的相关性
作者：陈澍英 肖露露 邹小立 佘妙容 林伟 叶欣 林惠群 马琳雅 陈江声
单位：510080 广州，广东省人民医院(陈澍英、邹小立、林伟、佘妙容、林惠群)，广州市血液中心(肖露露、叶欣、马琳雅)，汕头大学医学院第二附属医院(陈江声)
关键词：血小板输注；抗淋巴细胞血清；HLA抗原
中华医学杂志981107 【摘要】 目的 探讨血液病患者反复血小板输注的治疗效果与人类组织相容性抗原(HLA)之间的相关性。方法 采用微量淋巴细胞毒试验(LCT)和免疫磁珠HLA-Ⅰ类分型，观察了126例反复接受血 小板输注的住院患者，血小板增加修正值(CCI)与LCT的关系。结果 血小板输注有效48例，LCT阳性率4%，无效78例LCT阳性率50%。血小板输注无效与LCT阳性率、LCT强度之间相关联(P<0.01)。患者HLA-A2基因频率为0.91，与健康人群0.54相比显著增高。结论 LCT阳性是造成患者血小板输注无效的主要免疫因素。应将CCI和LCT测算列入反复输注血小板治疗患者的常规检测项目，以期预测CCI和改善血小板输注效果。
, 百拇医药
Ineffective platelet transfusion in patients with hematology malignance Chen Shuying* , Xiao Lulu, Zou Xiaoli, et al. * Department of Hematology, Guangdong provincial people′s Hospital, Guangzhou 510080.
【Abstract】 Objective To explore the relationship between the effects of platelet transfusion and histocompatibility antigen (HLA). Methods The relationship between the corrected count increment (CCI) of platelet with lymphocytotoxicity test (LCT) and human histocompatibity antigen system-Ⅰ subtype (HLA-Ⅰ) in 126 hospitalized patients who accepted platelet transfusion. Results Ineffective platelet transfusion was strongly related to LCT positive and LCT intensity (P<0.01). The HLA A2 gene frequency was 0.91.The frequency was much higher than that of health human being (0.54). Conclusion Positive LCT was mainly immune factor for ineffective platelet transfusion. CCI and LCT should be the routine test for platelet patients. It may improve the effects of platelet transfusion.
, 百拇医药
【Key words】 Platelet transfusion Antilymphocyte serum HLA antigen
(Natl Med J China, 1998, 78：824-826)
血液病患者在接受化疗、放疗、骨髓移植中经常出现血小板减少，必需接受血小板输注，反复输注血小板后，患者往往对输注血小板无效，这是近10年来对血小板应用特别关注的问题。我们对1996年～1997年 间住院的126例反复输注血小板的血液病患者进行了血小板输注效果，血小板增加修正值(CCI值)与HLA相关性的研究。
对象与方法
一、对象
1.126例血液病患者男81例，女45例，年龄14～79岁(均已排除非免疫因素所致的血小板减
, 百拇医药
少[1，2])，其中急性白血病63例，再生障碍性贫血28例，非何杰金淋巴瘤7例，慢性粒细胞性白血病9例，骨髓增生异常综合征7例，多发性骨髓瘤5例，恶性组织细胞病2例，骨髓纤维化5例。
二、方法
1.单采血小板悬液的制备：血小板悬液由广州血液中心提供，应用Baxter CS-3000 Puls血细胞分离机，对每名献血者行血小板单采，每袋容量200 ml，内含血小板2.5×1011，每例患者每次输注1袋。输注血小板3～18次不等。
2.淋巴细胞毒试验(LCT)和HLA-Ⅰ类分型：采用文献[3]方法，所有病例每次输血小板前、输后1小时和输后24小时分别测外周血血小板和LCT。
3.血小板输注效果测算：参照文献[4]方法。使用血小板增加修正值(CCI)，CCI=输后血小板增加值×体表面积(M2)/输注血小板总数×1011，若输注后1小时CCI>10×109/L和24小时CCI>7.5×109/L为有效，(1小时，24小时均达到标准才有效)，小于上述数值则为无效。
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4.统计学处理：应用医学统计学回归分析软件进行数据处理。
结果
一、CCI有效率与输血次数
平均每例患者测算CCI值10次，CCI有效48例(38.1%)，每例患者平均输注血小板为4.5次(3～8次)；输全血和红细胞平均次数22次(2～48次)。无效78例(61.9%)，每例患者平均输注血小板为5.2次(3～18次)，输全血和红细胞平均次数23次(2～52次)，出现CCI无效的平均次数为3.5次(附表)；两组CCI值间差异有显著意义(P<0.01)，两组输血小板，全血，红细胞平均输注次数间差异无显著意义(P均>0.05)。63例白血病的CCI无效率71.4%(45例)；28例再生障碍性贫血中CCI无效率46.4%(13例)，两者间P>0.05。男性患者CCI无效率为59.2%(48/81)，女性患者CCI无效率为66.7%(30/45)，两者间差异无显著意义(P>0.05)。
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附表 血液病患者血小板输注后CCI、LCT及预后 分组
例数
输血
小板
次数
CCI(×109/L)
LCT
阳性率
(%)
LCT
平均强度
(%)
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1年内
死亡
率(%)
1h
24h
CCI有效
48
4.5
32.13
22.83
2( 4.2)
8.8
10.4
, 百拇医药
CCI无效
78
5.2
2.83
2.67
39(50.0)
41.8
41.0
二、LCT阳性率及反应强度
CCI有效组LCT阳性率为4.2%(2例)，平均强度8.8%(4.3～14)，(平均每例测算LCT12次)。CCI无效组LCT阳性率为50%(39例)，平均强度41.8%(3～93)，(平均每例测算LCT13次)。两组患者的LCT阳性率和平均强度之间均差异有显著意义(P<0.01)。81例男患者中LCT阳性24例(29.6%)，45例女患者中LCT阳性17例(37.8%)，性别差异无显著意义(P>0.05)。在41例LCT阳性中CCI无效39例(95.1%)，而85例LCT阴性中CCI无效39例(45.9%)，两者差异有显著意义(P<0.01)。
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三、预后
CCI有效组在1年内死亡5例(10.4%)，其中因大出血死亡3例(6.3%)，因败血症死亡2例(4.2%)。CCI无效组在1年内死亡32例(41.0%)，其中因大出血死亡28例(35.9%)，因败血症死亡4例(5.1%)。两组患者在1年内死亡率和出血死亡率之间差异均呈显著意义(P均<0.01)。
LCT阳性组41例，1年内死亡33例，占80.5%，其中大出血30例(73.2%)，败血症3例(7.3%)；LCT阴性组85例，1年内死亡4例(4.7%)，其中大出血1例(1.2%)，败血症3例(3.5%)。2组患者1年内死亡率和死于出血的比例之间差异均有显著性意义(P<0.01)。
四、HLA-A2抗原频率
对35例患者作了HLA-Ⅰ类分型，可识别包括HLA-A，B座位81个抗原。在CCI无效组中检测了22例，20例有HLA-A2抗原其频率为0.91，其中LCT阳性者为16例(72.7%)，CCI有效组中检测了13例，1例有HLA-A2抗原，频率为0.077，其中LCT阳性者为3例。两组LCT阳性率呈显著差异(P<0.01)。中国汉族健康人群的HLA-A2抗原频率为0.54[5]。CCI无效组的HLA-A2抗原频率高于CCI有效组和中国汉族健康人群(P<0.01)。讨论
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血液病患者在疾病及治疗过程中不可避免地会出现血小板减少，需要反复输注血小板，然而反复输注血小板易产生同种免疫反应，导致再接受血小板输注后CCI无效，妨碍有效的血小板输注治疗。本组126例反复输注血小板的各类型血液病患者，CCI无效的发生率为61.9%，其中白血病患者CCI无效率71.4%，高于再生障碍性贫血(46.4%)，与国外文献报道白血病患者CCI无效率低(24%)而再生障碍性贫血的CCI无效率高(80%)不一致[6]。
在血小板输注无效引起的难治性血小板减少症中92%是因HLA抗体所致，其次为血小板特异性抗体者占8%[2]。本组CCI无效组LCT阳性率和强度均高于CCI有效组。CCI有效时，LCT强度指数低；CCI无效时，LCT强度指数高；提示抗体强度指数越高，发生输注无效的可能性越大，输入的血小板表面带有的HLA抗原与患者体内相应的HLA抗体结合，破坏输入的血小板。因此，不能收到良好的输注效果。提示CCI与LCT阳性有密切关联，LCT阳性是造成CCI无效的主要原因。
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男女患者CCI无效率分别为59.2%、66.7%，LCT阳性率分别为29.6%、37.8%(P>0.05)，推测由于女性患者既往妊娠中接受过婴儿带有的父源HLA抗原致敏经历，导致女性患者的CCI无效率和LCT阳性率均比男性高。
35例患者HLA-Ⅰ类分型中，我们观察到，HLA-A2抗原频率与健康国人0.54相比，在CCI有效组中显著减少(0.077)，并伴有低的LCT阳性率；在CCI无效组中显著升高(0.91)，并伴随较高的LCT阳性率。带有A2抗原的患者易产生同种免疫反应，不带A2抗原的患者表现不易感同种免疫，说明供受者间血小板上表达HLA-Ⅰ类抗原的差异介导受体的免疫识别和应答作用。
研究证实，在反复输注血小板的血液病患者中，CCI无效、LCT阳性、HLA-A2与出血性死亡有一定关联。血小板输注有效能使患者的出血性死亡率降低25%[7]，因此，为了减少血小板输注中同种免疫抗体的产生，我们认为，将CCI测算、LCT检测列入血小板输注的常规检测项目具有重要的临床意义；进行 “适合性血小板输注”[8]，即建立HLA分型供者计算机检索库，为患者提供血小板配合的单一供者的单采血小板的输注疗法，对解决困扰血小板输注效果的难题创造有利前景。
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本课题为广东省科委重点攻关项目(1997-114-19)
参考文献
1 Bishop JF, Mcgrath K, Wolf MM, et al. Clinical factors influencing the efficacy of pooled platelet transfusion. Blood, 1988, 71：383-387.
2 Mofarland JG, Auderson AJ, Slichtern SI. Factors influencing the transfusion response to HLA-selected apheresis donor plateletes in patients refractory to random plateletes in patients refractory to random platelet concentrates. Br J Haematol, 1989, 73：380-386.
, 百拇医药
3 Pamphlion DH, Farrell DH, Donaldson C, et al. Development of lymphocytoxin and platelet reactive antibodies: A prospective study in patients with acute leukemia. Vox Sang, 1989, 57：177-181.
4 Hogge DE, Dutcher JP, Aisner J, et al. Lymphocytotoxic antibody is a predictor of response to random donor platelet transfusion. Am J Hematol, 1983, 14：363-369.
5 Bodmer J G, Marsh S G E, Albert ED, et al. Nomenclature for the HLA system. Human Immunol, 1995，43：149-155.
, 百拇医药
6 Naomi C. The immunology diagnosis and management of the alloimmunized platelet recipient. hematalogy-education program. Boston: American Society of Hematol, 1990.65-71.
7 Slichter SJ. Platelet transfusion therapy. Hematol Oncol North Am Clin, 1990, 4：291-311.
8 陈澍英，肖露露，黄梓伦.血小板输注与HLA同种免疫相关的研究概况.实用医学杂志，1997，9：618-619.
(收稿：1998-03-15 修回：1998-06-15), http://www.100md.com
单位：510080 广州，广东省人民医院(陈澍英、邹小立、林伟、佘妙容、林惠群)，广州市血液中心(肖露露、叶欣、马琳雅)，汕头大学医学院第二附属医院(陈江声)
关键词：血小板输注；抗淋巴细胞血清；HLA抗原
中华医学杂志981107 【摘要】 目的 探讨血液病患者反复血小板输注的治疗效果与人类组织相容性抗原(HLA)之间的相关性。方法 采用微量淋巴细胞毒试验(LCT)和免疫磁珠HLA-Ⅰ类分型，观察了126例反复接受血 小板输注的住院患者，血小板增加修正值(CCI)与LCT的关系。结果 血小板输注有效48例，LCT阳性率4%，无效78例LCT阳性率50%。血小板输注无效与LCT阳性率、LCT强度之间相关联(P<0.01)。患者HLA-A2基因频率为0.91，与健康人群0.54相比显著增高。结论 LCT阳性是造成患者血小板输注无效的主要免疫因素。应将CCI和LCT测算列入反复输注血小板治疗患者的常规检测项目，以期预测CCI和改善血小板输注效果。
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Ineffective platelet transfusion in patients with hematology malignance Chen Shuying* , Xiao Lulu, Zou Xiaoli, et al. * Department of Hematology, Guangdong provincial people′s Hospital, Guangzhou 510080.
【Abstract】 Objective To explore the relationship between the effects of platelet transfusion and histocompatibility antigen (HLA). Methods The relationship between the corrected count increment (CCI) of platelet with lymphocytotoxicity test (LCT) and human histocompatibity antigen system-Ⅰ subtype (HLA-Ⅰ) in 126 hospitalized patients who accepted platelet transfusion. Results Ineffective platelet transfusion was strongly related to LCT positive and LCT intensity (P<0.01). The HLA A2 gene frequency was 0.91.The frequency was much higher than that of health human being (0.54). Conclusion Positive LCT was mainly immune factor for ineffective platelet transfusion. CCI and LCT should be the routine test for platelet patients. It may improve the effects of platelet transfusion.
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【Key words】 Platelet transfusion Antilymphocyte serum HLA antigen
(Natl Med J China, 1998, 78：824-826)
血液病患者在接受化疗、放疗、骨髓移植中经常出现血小板减少，必需接受血小板输注，反复输注血小板后，患者往往对输注血小板无效，这是近10年来对血小板应用特别关注的问题。我们对1996年～1997年 间住院的126例反复输注血小板的血液病患者进行了血小板输注效果，血小板增加修正值(CCI值)与HLA相关性的研究。
对象与方法
一、对象
1.126例血液病患者男81例，女45例，年龄14～79岁(均已排除非免疫因素所致的血小板减
, 百拇医药
少[1，2])，其中急性白血病63例，再生障碍性贫血28例，非何杰金淋巴瘤7例，慢性粒细胞性白血病9例，骨髓增生异常综合征7例，多发性骨髓瘤5例，恶性组织细胞病2例，骨髓纤维化5例。
二、方法
1.单采血小板悬液的制备：血小板悬液由广州血液中心提供，应用Baxter CS-3000 Puls血细胞分离机，对每名献血者行血小板单采，每袋容量200 ml，内含血小板2.5×1011，每例患者每次输注1袋。输注血小板3～18次不等。
2.淋巴细胞毒试验(LCT)和HLA-Ⅰ类分型：采用文献[3]方法，所有病例每次输血小板前、输后1小时和输后24小时分别测外周血血小板和LCT。
3.血小板输注效果测算：参照文献[4]方法。使用血小板增加修正值(CCI)，CCI=输后血小板增加值×体表面积(M2)/输注血小板总数×1011，若输注后1小时CCI>10×109/L和24小时CCI>7.5×109/L为有效，(1小时，24小时均达到标准才有效)，小于上述数值则为无效。
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4.统计学处理：应用医学统计学回归分析软件进行数据处理。
结果
一、CCI有效率与输血次数
平均每例患者测算CCI值10次，CCI有效48例(38.1%)，每例患者平均输注血小板为4.5次(3～8次)；输全血和红细胞平均次数22次(2～48次)。无效78例(61.9%)，每例患者平均输注血小板为5.2次(3～18次)，输全血和红细胞平均次数23次(2～52次)，出现CCI无效的平均次数为3.5次(附表)；两组CCI值间差异有显著意义(P<0.01)，两组输血小板，全血，红细胞平均输注次数间差异无显著意义(P均>0.05)。63例白血病的CCI无效率71.4%(45例)；28例再生障碍性贫血中CCI无效率46.4%(13例)，两者间P>0.05。男性患者CCI无效率为59.2%(48/81)，女性患者CCI无效率为66.7%(30/45)，两者间差异无显著意义(P>0.05)。
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附表 血液病患者血小板输注后CCI、LCT及预后 分组
例数
输血
小板
次数
CCI(×109/L)
LCT
阳性率
(%)
LCT
平均强度
(%)
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1年内
死亡
率(%)
1h
24h
CCI有效
48
4.5
32.13
22.83
2( 4.2)
8.8
10.4
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CCI无效
78
5.2
2.83
2.67
39(50.0)
41.8
41.0
二、LCT阳性率及反应强度
CCI有效组LCT阳性率为4.2%(2例)，平均强度8.8%(4.3～14)，(平均每例测算LCT12次)。CCI无效组LCT阳性率为50%(39例)，平均强度41.8%(3～93)，(平均每例测算LCT13次)。两组患者的LCT阳性率和平均强度之间均差异有显著意义(P<0.01)。81例男患者中LCT阳性24例(29.6%)，45例女患者中LCT阳性17例(37.8%)，性别差异无显著意义(P>0.05)。在41例LCT阳性中CCI无效39例(95.1%)，而85例LCT阴性中CCI无效39例(45.9%)，两者差异有显著意义(P<0.01)。
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三、预后
CCI有效组在1年内死亡5例(10.4%)，其中因大出血死亡3例(6.3%)，因败血症死亡2例(4.2%)。CCI无效组在1年内死亡32例(41.0%)，其中因大出血死亡28例(35.9%)，因败血症死亡4例(5.1%)。两组患者在1年内死亡率和出血死亡率之间差异均呈显著意义(P均<0.01)。
LCT阳性组41例，1年内死亡33例，占80.5%，其中大出血30例(73.2%)，败血症3例(7.3%)；LCT阴性组85例，1年内死亡4例(4.7%)，其中大出血1例(1.2%)，败血症3例(3.5%)。2组患者1年内死亡率和死于出血的比例之间差异均有显著性意义(P<0.01)。
四、HLA-A2抗原频率
对35例患者作了HLA-Ⅰ类分型，可识别包括HLA-A，B座位81个抗原。在CCI无效组中检测了22例，20例有HLA-A2抗原其频率为0.91，其中LCT阳性者为16例(72.7%)，CCI有效组中检测了13例，1例有HLA-A2抗原，频率为0.077，其中LCT阳性者为3例。两组LCT阳性率呈显著差异(P<0.01)。中国汉族健康人群的HLA-A2抗原频率为0.54[5]。CCI无效组的HLA-A2抗原频率高于CCI有效组和中国汉族健康人群(P<0.01)。讨论
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血液病患者在疾病及治疗过程中不可避免地会出现血小板减少，需要反复输注血小板，然而反复输注血小板易产生同种免疫反应，导致再接受血小板输注后CCI无效，妨碍有效的血小板输注治疗。本组126例反复输注血小板的各类型血液病患者，CCI无效的发生率为61.9%，其中白血病患者CCI无效率71.4%，高于再生障碍性贫血(46.4%)，与国外文献报道白血病患者CCI无效率低(24%)而再生障碍性贫血的CCI无效率高(80%)不一致[6]。
在血小板输注无效引起的难治性血小板减少症中92%是因HLA抗体所致，其次为血小板特异性抗体者占8%[2]。本组CCI无效组LCT阳性率和强度均高于CCI有效组。CCI有效时，LCT强度指数低；CCI无效时，LCT强度指数高；提示抗体强度指数越高，发生输注无效的可能性越大，输入的血小板表面带有的HLA抗原与患者体内相应的HLA抗体结合，破坏输入的血小板。因此，不能收到良好的输注效果。提示CCI与LCT阳性有密切关联，LCT阳性是造成CCI无效的主要原因。
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男女患者CCI无效率分别为59.2%、66.7%，LCT阳性率分别为29.6%、37.8%(P>0.05)，推测由于女性患者既往妊娠中接受过婴儿带有的父源HLA抗原致敏经历，导致女性患者的CCI无效率和LCT阳性率均比男性高。
35例患者HLA-Ⅰ类分型中，我们观察到，HLA-A2抗原频率与健康国人0.54相比，在CCI有效组中显著减少(0.077)，并伴有低的LCT阳性率；在CCI无效组中显著升高(0.91)，并伴随较高的LCT阳性率。带有A2抗原的患者易产生同种免疫反应，不带A2抗原的患者表现不易感同种免疫，说明供受者间血小板上表达HLA-Ⅰ类抗原的差异介导受体的免疫识别和应答作用。
研究证实，在反复输注血小板的血液病患者中，CCI无效、LCT阳性、HLA-A2与出血性死亡有一定关联。血小板输注有效能使患者的出血性死亡率降低25%[7]，因此，为了减少血小板输注中同种免疫抗体的产生，我们认为，将CCI测算、LCT检测列入血小板输注的常规检测项目具有重要的临床意义；进行 “适合性血小板输注”[8]，即建立HLA分型供者计算机检索库，为患者提供血小板配合的单一供者的单采血小板的输注疗法，对解决困扰血小板输注效果的难题创造有利前景。
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本课题为广东省科委重点攻关项目(1997-114-19)
参考文献
1 Bishop JF, Mcgrath K, Wolf MM, et al. Clinical factors influencing the efficacy of pooled platelet transfusion. Blood, 1988, 71：383-387.
2 Mofarland JG, Auderson AJ, Slichtern SI. Factors influencing the transfusion response to HLA-selected apheresis donor plateletes in patients refractory to random plateletes in patients refractory to random platelet concentrates. Br J Haematol, 1989, 73：380-386.
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3 Pamphlion DH, Farrell DH, Donaldson C, et al. Development of lymphocytoxin and platelet reactive antibodies: A prospective study in patients with acute leukemia. Vox Sang, 1989, 57：177-181.
4 Hogge DE, Dutcher JP, Aisner J, et al. Lymphocytotoxic antibody is a predictor of response to random donor platelet transfusion. Am J Hematol, 1983, 14：363-369.
5 Bodmer J G, Marsh S G E, Albert ED, et al. Nomenclature for the HLA system. Human Immunol, 1995，43：149-155.
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6 Naomi C. The immunology diagnosis and management of the alloimmunized platelet recipient. hematalogy-education program. Boston: American Society of Hematol, 1990.65-71.
7 Slichter SJ. Platelet transfusion therapy. Hematol Oncol North Am Clin, 1990, 4：291-311.
8 陈澍英，肖露露，黄梓伦.血小板输注与HLA同种免疫相关的研究概况.实用医学杂志，1997，9：618-619.
(收稿：1998-03-15 修回：1998-06-15), http://www.100md.com