庚型肝炎与HGV研究的进展
作者：于建国 徐传镇 张光曙
单位：解放军88医院传染科 山东省泰安市 271000
关键词：肝炎，庚型/传播；肝炎，庚型/病理学；肝炎，庚型/治疗；庚型肝炎病毒
华人消化杂志981128 Subject headings hepatitis G/transmision; hepatitis G/pathology; hepatitis G/therapy; hepatitis G virus
中国图书资料分类号 R512.6
1 庚型肝炎病原学
1995-04-11，在美国The New Your Times上发表了关于GB肝炎的报道. 通过近年来对GB组病毒分子生物学研究发现，它与丙型肝炎病毒(HCV)不同，经鉴定属于似黄热病毒(flavivirus)，为单股正链RNA病毒. GB组肝炎病毒分为3种：GBV-A，GBV-B，GBV-C. GBV-A和GBV-C较近，而同GBV-B相差较远. GBV-C或HGV被认为是部分非甲～戊型肝炎的病原体，于1996年发表了全基因序列[1,2]. 而GBV-C由于与庚型肝炎病毒(HGV)的高同源性可能属于同一种病毒的不同分离株，属于肝炎相关病毒中一种，在遗传进化上与GBV-A/B/C三者密切相关. 经序列分析表明HGV与HCV同源性仅为25%，为正股单链RNA病毒，长约9300个核苷酸，只有一个开放阅读框架(ORF)编码约2900个氨基酸. HGV同HCV有共同相似的传播途径，主要通过血液输血(或血制品)传播，因此，HGV与HCV易形成混合感染. 在高危人群和肝病患者中检出率较高，甚至有小的暴发流行. 我们检测了24份输血后肝炎，16份职业献血员，32份慢性肝炎和26份肝硬变患者的血清用巢式PCR技术进行扩增，结果HGVRNA检出率分别占12.5%(3/24)，6.25%(1/6)，9.38%(3/32)和7.69%(2/26)，证实在我国输血后肝炎患者、献血员和慢性肝病患者中确实存在HGV感染，而且感染率相当高，应予以重视.
, 百拇医药
2 庚型肝炎病毒分子生物学与检测
HGV全基因为9000余碱基对(bp)，与HCV基因结构十分相似[3]. 5＇端结构基因依次编码核心蛋白，包膜蛋白Ⅰ和包膜蛋白2；3＇端的非结构基因依次非结构蛋白NS2，NS3，NS4a，NS4b,NS5a和NS5b区，其编码蛋白功能也与HCV相应蛋白一致. HGV基因具有高度的可变性，以编码区变异最大. 目前认为，HGVE2区的N端变异较多，但无明显高变区. HGVE2区蛋白具有很好的抗原性，可诱导机体产生中和抗体. Leary et al[3]报告HGV比较序列，同源性最高为83.7%，最低者为75.8%，而不同分离株核心序列长度变化大，可能同核心序列与HGVE1区无明显分界有关. 目前，已在全球各地测定了多株HGV全基因序列，如PNF2161(美国)、HGV-IW(日本)、R10291(美国)、GBV-C(东非)、GBV-C(西非)和HGVC964(中国)株，均证实HGV可产生不同的变异，除发生替代突变外还存在插入突变、缺失突变，此突变有可能改变5’端而产生不同大小病毒蛋白. 目前来自不同地区HGV部分基因组的核苷酸序列提示，HGV同HCV一样存在不同基因型；即GBV-C原型(GB型)、HGV(HG型)和新型(亚州型).
, 百拇医药
目前对HGV感染的检测方法主要两种：一种是ELISA法检测HGV抗体；另一种是用RT-PCR法检测HGVRNA. 两者检出率并不一定平行相关，因目前对HGV各抗原的研究刚刚开始，故用ELISA法检测HGV抗体诊断HGV感染缺乏说服力，唯有用PCR法诊断HGV感染较可靠. 随着对HGV感染分子生物学研究迅速发展，我国有必要采用和合成多肽引物来提高HGV感染的特异性和敏感性.
3 HGV与HBV和HCV合并感染
关于对庚型肝炎的流行病学研究表明，HGV可单独或者和HBV，HCV等共同感染机体，是由于三者之间具有共同的传播途径可能同时感染所决定. HGV感染主要经血或肠道外途径传播，受血者、静注毒品成隐者和接触血源的医务人员及长期血液透析者均为高危人群. 国外报告急性丙型肝炎中7.9%患者HGVRNA阳性，慢性丙型肝炎重叠HGV的感染率为11.5%～23.2%之间，慢性乙型肝炎重叠感染率为14%；我们曾对59例慢性丙型肝炎和17例非甲～戊型肝炎患者血清进行HGVRNA检测，阳性检出率分别为10.17%～29.41%，说明HGV感染在我国慢性丙型肝炎中有较高的重叠感染率，是我国非甲～戊型肝炎又一重要病原之一. 我国对11个省市的2870名供血员行抗一HGV检查表明，在抗一HGV阳性患者中，HGVRNA阳性率达50%～71.4%，平均为62%，证明HGV感染在我国献血员中感染流行较为严重. 因此，控制HGV同HBV和HCV合并感染，切断经血传播途径对减少乙、丙、庚型肝炎发病率均有重要的意义.
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4 庚型肝炎临床与病理
庚型肝炎临床表现较乙、丙型肝炎轻，多数急性感染呈亚临床表现，也有呈重型表现. 少数慢性患者ALT水平呈间歇性或持续性升高，停用抗病毒药物后出现反跳. 慢性化低于丙型肝炎，单纯HGV感染病例较少见，这可能由于同HCV有类似的传播途径所致[4]. 单纯HGV感染所致肝炎症状与HBV或HCV混合感染患者临床表现无明显区别，这可能同HGV的致病性低有关. 从HGV感染发展到肝硬变需较长时间，但一旦发生则可能进展很快；特别是HBV与HCV合并HGV多重感染的少数病例中已得到论证. 在血清和肝组织HBV和HCV阳性的患者中可检出HGVRNA阳性典型病例，提示肝癌的发生可能同HBV、HCV和HGV协同相关. 庚型肝炎的病理改变同丙型肝炎非常相似，主要表现为汇管区淋巴细胞浸润、肝实质性炎症、灶性坏死、嗜酸性改变和细胞皱缩；溶酶体保持完整，但有凋亡小体形成；慢性庚肝可见有碎屑样坏死及界板破坏. 说明HGV同HCV感染致病机制可能一样，并非直接对肝细胞损伤，而免疫介导损伤可能是主要原因. 国外已在狨猴和绢毛猴中建立了动物模型. 国内有HGVRNA阳性血清感染国产猕猴也获成功，并行肝活检见有急性肝炎的组织病理学改变. 我们对2例单独HGV感染的肝硬变患者行肝活检肝组织可见明显汇管区炎症，脂肪变，窦周及肝细胞间纤维化，并有假小叶和弓形纤维形成，提示HGV单独感染可能与HCV相同易发展为肝硬变.
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5 庚型肝炎的治疗
庚型肝炎治疗除一般的保肝与抗病毒药物治疗外，研究最多的是α-干扰素治疗. 因为它抗病毒作用强，HGV同HCV一样对干扰素较敏感，治后HGV标志消失，常伴有血清ALT复常及肝组织学改善. 但也有认为，病毒被暂时抑制，未能根除，停药后病毒复制仍会恢复到原来水平，有可能同干扰素的用量、治程和HGV基因型别等因素相关. 我们分别试用α-干扰素和人胎盘转移因子联合治疗4例单纯HGV感染慢性庚肝患者6mo，其中有3例治后ALT复常及肝组织学改善，血清HGVRNA阴转，另1例抗-HGVIgG抗体消失；提示HGV对α-干扰素及人胎盘转移因子联合治疗疗效较好，可以临床试用，但尚需规范化大样本双盲试验及长期临床观察才可得出结论，以便阐明和判断各种药物的临床疗效.
总之，HGV(GBV-C)的发现使我们找到一个导致肝炎和慢性肝病相关的新病因，但它不能解释全部非甲～戊型及慢性肝炎致病因子；而且目前的研究对HGV的致病性又提出质疑. 最近的研究有人认为HGV感染可能仅导致急性轻度肝炎，可能还存在尚未发现的其他导致肝炎的病毒因子；如日本刚命名与ALT异常有关的第七种肝炎病毒(TTV)[5]. 因此，我们对庚型肝炎与HGV的研究方兴未艾对已知和未知新型肝炎病毒的研究任重而道远.
, http://www.100md.com
6 参考文献
1 Simons JN, Leary TP. Dawson GJ, Pilot Matias, scott MA, Schlauder GG et al. Isolation of novel virus like sequence associated with human hepatitis. Nature Med, 1995;1(6):564-569
2 Linnen J, Wages J, Zhang ZY, Fry KE, Krawczynski KZ, Alter H et al. Molecular clonig and diseases association of hepatitis G Virus. A transfusion-transmissible agent, Science,1996;271(5248):505-508
3 Leary TP, Muerhoff AS, Simons JN, Pilot-Matias TJ, Erker JC, Chalmers ML et al. Sequence and genomic organization of GBV-C:A Novel Member of the Flaviviridae Associated With human non-A-E hepatitis. J Med Virol, 1996;48(1):60-67
4 李应光,武秀利,元俊明. 庚型肝炎病毒的流行病学研究. 国外医学流行病学传染病学分册，1996；23(5)：217-219
5 凌斌华,庄辉. 输血传播病毒(TTV)研究近况. 国外医学流行病学传染病学分册，1998；25(3)：97-98
通讯作者 于建国
收稿日期 1998-01-20 修回日期 1998-03-14, http://www.100md.com
单位：解放军88医院传染科 山东省泰安市 271000
关键词：肝炎，庚型/传播；肝炎，庚型/病理学；肝炎，庚型/治疗；庚型肝炎病毒
华人消化杂志981128 Subject headings hepatitis G/transmision; hepatitis G/pathology; hepatitis G/therapy; hepatitis G virus
中国图书资料分类号 R512.6
1 庚型肝炎病原学
1995-04-11，在美国The New Your Times上发表了关于GB肝炎的报道. 通过近年来对GB组病毒分子生物学研究发现，它与丙型肝炎病毒(HCV)不同，经鉴定属于似黄热病毒(flavivirus)，为单股正链RNA病毒. GB组肝炎病毒分为3种：GBV-A，GBV-B，GBV-C. GBV-A和GBV-C较近，而同GBV-B相差较远. GBV-C或HGV被认为是部分非甲～戊型肝炎的病原体，于1996年发表了全基因序列[1,2]. 而GBV-C由于与庚型肝炎病毒(HGV)的高同源性可能属于同一种病毒的不同分离株，属于肝炎相关病毒中一种，在遗传进化上与GBV-A/B/C三者密切相关. 经序列分析表明HGV与HCV同源性仅为25%，为正股单链RNA病毒，长约9300个核苷酸，只有一个开放阅读框架(ORF)编码约2900个氨基酸. HGV同HCV有共同相似的传播途径，主要通过血液输血(或血制品)传播，因此，HGV与HCV易形成混合感染. 在高危人群和肝病患者中检出率较高，甚至有小的暴发流行. 我们检测了24份输血后肝炎，16份职业献血员，32份慢性肝炎和26份肝硬变患者的血清用巢式PCR技术进行扩增，结果HGVRNA检出率分别占12.5%(3/24)，6.25%(1/6)，9.38%(3/32)和7.69%(2/26)，证实在我国输血后肝炎患者、献血员和慢性肝病患者中确实存在HGV感染，而且感染率相当高，应予以重视.
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2 庚型肝炎病毒分子生物学与检测
HGV全基因为9000余碱基对(bp)，与HCV基因结构十分相似[3]. 5＇端结构基因依次编码核心蛋白，包膜蛋白Ⅰ和包膜蛋白2；3＇端的非结构基因依次非结构蛋白NS2，NS3，NS4a，NS4b,NS5a和NS5b区，其编码蛋白功能也与HCV相应蛋白一致. HGV基因具有高度的可变性，以编码区变异最大. 目前认为，HGVE2区的N端变异较多，但无明显高变区. HGVE2区蛋白具有很好的抗原性，可诱导机体产生中和抗体. Leary et al[3]报告HGV比较序列，同源性最高为83.7%，最低者为75.8%，而不同分离株核心序列长度变化大，可能同核心序列与HGVE1区无明显分界有关. 目前，已在全球各地测定了多株HGV全基因序列，如PNF2161(美国)、HGV-IW(日本)、R10291(美国)、GBV-C(东非)、GBV-C(西非)和HGVC964(中国)株，均证实HGV可产生不同的变异，除发生替代突变外还存在插入突变、缺失突变，此突变有可能改变5’端而产生不同大小病毒蛋白. 目前来自不同地区HGV部分基因组的核苷酸序列提示，HGV同HCV一样存在不同基因型；即GBV-C原型(GB型)、HGV(HG型)和新型(亚州型).
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目前对HGV感染的检测方法主要两种：一种是ELISA法检测HGV抗体；另一种是用RT-PCR法检测HGVRNA. 两者检出率并不一定平行相关，因目前对HGV各抗原的研究刚刚开始，故用ELISA法检测HGV抗体诊断HGV感染缺乏说服力，唯有用PCR法诊断HGV感染较可靠. 随着对HGV感染分子生物学研究迅速发展，我国有必要采用和合成多肽引物来提高HGV感染的特异性和敏感性.
3 HGV与HBV和HCV合并感染
关于对庚型肝炎的流行病学研究表明，HGV可单独或者和HBV，HCV等共同感染机体，是由于三者之间具有共同的传播途径可能同时感染所决定. HGV感染主要经血或肠道外途径传播，受血者、静注毒品成隐者和接触血源的医务人员及长期血液透析者均为高危人群. 国外报告急性丙型肝炎中7.9%患者HGVRNA阳性，慢性丙型肝炎重叠HGV的感染率为11.5%～23.2%之间，慢性乙型肝炎重叠感染率为14%；我们曾对59例慢性丙型肝炎和17例非甲～戊型肝炎患者血清进行HGVRNA检测，阳性检出率分别为10.17%～29.41%，说明HGV感染在我国慢性丙型肝炎中有较高的重叠感染率，是我国非甲～戊型肝炎又一重要病原之一. 我国对11个省市的2870名供血员行抗一HGV检查表明，在抗一HGV阳性患者中，HGVRNA阳性率达50%～71.4%，平均为62%，证明HGV感染在我国献血员中感染流行较为严重. 因此，控制HGV同HBV和HCV合并感染，切断经血传播途径对减少乙、丙、庚型肝炎发病率均有重要的意义.
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4 庚型肝炎临床与病理
庚型肝炎临床表现较乙、丙型肝炎轻，多数急性感染呈亚临床表现，也有呈重型表现. 少数慢性患者ALT水平呈间歇性或持续性升高，停用抗病毒药物后出现反跳. 慢性化低于丙型肝炎，单纯HGV感染病例较少见，这可能由于同HCV有类似的传播途径所致[4]. 单纯HGV感染所致肝炎症状与HBV或HCV混合感染患者临床表现无明显区别，这可能同HGV的致病性低有关. 从HGV感染发展到肝硬变需较长时间，但一旦发生则可能进展很快；特别是HBV与HCV合并HGV多重感染的少数病例中已得到论证. 在血清和肝组织HBV和HCV阳性的患者中可检出HGVRNA阳性典型病例，提示肝癌的发生可能同HBV、HCV和HGV协同相关. 庚型肝炎的病理改变同丙型肝炎非常相似，主要表现为汇管区淋巴细胞浸润、肝实质性炎症、灶性坏死、嗜酸性改变和细胞皱缩；溶酶体保持完整，但有凋亡小体形成；慢性庚肝可见有碎屑样坏死及界板破坏. 说明HGV同HCV感染致病机制可能一样，并非直接对肝细胞损伤，而免疫介导损伤可能是主要原因. 国外已在狨猴和绢毛猴中建立了动物模型. 国内有HGVRNA阳性血清感染国产猕猴也获成功，并行肝活检见有急性肝炎的组织病理学改变. 我们对2例单独HGV感染的肝硬变患者行肝活检肝组织可见明显汇管区炎症，脂肪变，窦周及肝细胞间纤维化，并有假小叶和弓形纤维形成，提示HGV单独感染可能与HCV相同易发展为肝硬变.
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5 庚型肝炎的治疗
庚型肝炎治疗除一般的保肝与抗病毒药物治疗外，研究最多的是α-干扰素治疗. 因为它抗病毒作用强，HGV同HCV一样对干扰素较敏感，治后HGV标志消失，常伴有血清ALT复常及肝组织学改善. 但也有认为，病毒被暂时抑制，未能根除，停药后病毒复制仍会恢复到原来水平，有可能同干扰素的用量、治程和HGV基因型别等因素相关. 我们分别试用α-干扰素和人胎盘转移因子联合治疗4例单纯HGV感染慢性庚肝患者6mo，其中有3例治后ALT复常及肝组织学改善，血清HGVRNA阴转，另1例抗-HGVIgG抗体消失；提示HGV对α-干扰素及人胎盘转移因子联合治疗疗效较好，可以临床试用，但尚需规范化大样本双盲试验及长期临床观察才可得出结论，以便阐明和判断各种药物的临床疗效.
总之，HGV(GBV-C)的发现使我们找到一个导致肝炎和慢性肝病相关的新病因，但它不能解释全部非甲～戊型及慢性肝炎致病因子；而且目前的研究对HGV的致病性又提出质疑. 最近的研究有人认为HGV感染可能仅导致急性轻度肝炎，可能还存在尚未发现的其他导致肝炎的病毒因子；如日本刚命名与ALT异常有关的第七种肝炎病毒(TTV)[5]. 因此，我们对庚型肝炎与HGV的研究方兴未艾对已知和未知新型肝炎病毒的研究任重而道远.
, http://www.100md.com
6 参考文献
1 Simons JN, Leary TP. Dawson GJ, Pilot Matias, scott MA, Schlauder GG et al. Isolation of novel virus like sequence associated with human hepatitis. Nature Med, 1995;1(6):564-569
2 Linnen J, Wages J, Zhang ZY, Fry KE, Krawczynski KZ, Alter H et al. Molecular clonig and diseases association of hepatitis G Virus. A transfusion-transmissible agent, Science,1996;271(5248):505-508
3 Leary TP, Muerhoff AS, Simons JN, Pilot-Matias TJ, Erker JC, Chalmers ML et al. Sequence and genomic organization of GBV-C:A Novel Member of the Flaviviridae Associated With human non-A-E hepatitis. J Med Virol, 1996;48(1):60-67
4 李应光,武秀利,元俊明. 庚型肝炎病毒的流行病学研究. 国外医学流行病学传染病学分册，1996；23(5)：217-219
5 凌斌华,庄辉. 输血传播病毒(TTV)研究近况. 国外医学流行病学传染病学分册，1998；25(3)：97-98
通讯作者 于建国
收稿日期 1998-01-20 修回日期 1998-03-14, http://www.100md.com