小儿肾穿刺组织标本处理体会
作者：匡裕玖 刘铜林
单位：匡裕玖 刘铜林(同济医科大学附属同济医院儿科，武汉 430030)
关键词：肾脏；穿刺术；标本制备
小儿肾穿刺组织标本处理体会中国图书分类号 R329.2
文献标识码 A 文章编号 1001-7399(1999)01-0067-01
成功的肾穿刺是获得足够多的肾小球，以满足光镜、电镜及荧光镜三镜检查需要。多种原因可致小儿肾穿刺组织少于成人的。因组织块小而影响病理诊断。为提高小儿肾穿刺病理诊断的准确率，除肾穿刺操作顺利，制片染色良好外，标本处理亦很重要。
1 穿刺标本取出后，迅速判断是否为肾组织。暗红或灰白色，置于生理盐水内沉底者为肾组织。
2 分清皮质和髓质部，一般靠针尖端为髓质部，靠针柄端为皮质部，但若穿刺过深而穿透肾下极时，则不能由此判断。
3 我们使用TEMNO针穿刺。所取组织比Tru-cuf针穿刺所取标本稍细，因此不能纵剖分段。将所取肾组织从皮质部开始依序分为三段(电镜2 mm，荧光镜4 mm，余下为光镜标本)，当标本较短时，应尽可能再取一条，否则应优先满足光镜检查。
4 光镜标本以Duboscg-Brasil液固定4 h。电镜标本以2.5%戊二醛固定1 h后， 用0.1 mol*L-1PBS冲洗戊二醛，置4℃冰箱。荧光标本用生理盐水
湿润的纱布置4℃冰箱24 h或置于Michel保存液中10天以上。经以上处理的标本可互相转换使用。
5 在光镜下确认有肾小球后再送电镜和荧光镜观察。如光镜下无肾小球，可将上述荧光镜或电镜标本作石蜡包埋，常可获得较好染色。不可直接用冷冻切片作光镜染色，因切片厚，导致细胞重叠、结构不清楚而影响光镜诊断。2.5%戊二醛固定时间过长，常致组织收缩而使结构模糊。
6 光镜观察满意，而电镜下无肾小球时，可将剩余组织蜡块经二甲苯各级乙醇和PBS处理后再做电镜观察，可较好地观察肾小球基底膜改变及电子致密物沉积情况。
7 光镜观察满意而荧光镜下无肾小球时，可用石蜡切片作免疫酶标，可确定肾组织内沉积物。
通过以上处理，可最大限度提高三镜检查率及诊断率。减少重复肾活检，减轻患儿及家长的精神与经济负担，但若三镜标本均无肾小球时，为明确诊断，则需进行重复肾活检。
收稿日期：1999-01-15, 百拇医药
单位：匡裕玖 刘铜林(同济医科大学附属同济医院儿科，武汉 430030)
关键词：肾脏；穿刺术；标本制备
小儿肾穿刺组织标本处理体会中国图书分类号 R329.2
文献标识码 A 文章编号 1001-7399(1999)01-0067-01
成功的肾穿刺是获得足够多的肾小球，以满足光镜、电镜及荧光镜三镜检查需要。多种原因可致小儿肾穿刺组织少于成人的。因组织块小而影响病理诊断。为提高小儿肾穿刺病理诊断的准确率，除肾穿刺操作顺利，制片染色良好外，标本处理亦很重要。
1 穿刺标本取出后，迅速判断是否为肾组织。暗红或灰白色，置于生理盐水内沉底者为肾组织。
2 分清皮质和髓质部，一般靠针尖端为髓质部，靠针柄端为皮质部，但若穿刺过深而穿透肾下极时，则不能由此判断。
3 我们使用TEMNO针穿刺。所取组织比Tru-cuf针穿刺所取标本稍细，因此不能纵剖分段。将所取肾组织从皮质部开始依序分为三段(电镜2 mm，荧光镜4 mm，余下为光镜标本)，当标本较短时，应尽可能再取一条，否则应优先满足光镜检查。
4 光镜标本以Duboscg-Brasil液固定4 h。电镜标本以2.5%戊二醛固定1 h后， 用0.1 mol*L-1PBS冲洗戊二醛，置4℃冰箱。荧光标本用生理盐水
湿润的纱布置4℃冰箱24 h或置于Michel保存液中10天以上。经以上处理的标本可互相转换使用。
5 在光镜下确认有肾小球后再送电镜和荧光镜观察。如光镜下无肾小球，可将上述荧光镜或电镜标本作石蜡包埋，常可获得较好染色。不可直接用冷冻切片作光镜染色，因切片厚，导致细胞重叠、结构不清楚而影响光镜诊断。2.5%戊二醛固定时间过长，常致组织收缩而使结构模糊。
6 光镜观察满意，而电镜下无肾小球时，可将剩余组织蜡块经二甲苯各级乙醇和PBS处理后再做电镜观察，可较好地观察肾小球基底膜改变及电子致密物沉积情况。
7 光镜观察满意而荧光镜下无肾小球时，可用石蜡切片作免疫酶标，可确定肾组织内沉积物。
通过以上处理，可最大限度提高三镜检查率及诊断率。减少重复肾活检，减轻患儿及家长的精神与经济负担，但若三镜标本均无肾小球时，为明确诊断，则需进行重复肾活检。
收稿日期：1999-01-15, 百拇医药