高健美片剂质量标准的研究
作者：王 捷
单位：王 捷 广西医科大学制药厂
关键词：高健美片剂；人参；黄芪；薄层层析；甲状腺粉特有化合碘含量；紫外分光光度法；照品法
广西医学99123
摘要 应用薄层色谱法检测高健美片剂中人参和黄芪，应用紫外分光光度法中对照品法测定成药中甲状腺特有的化合碘含量，方法简便，专属性强，结果可靠。
高健美片剂是广西医科大学第一附属医院内分泌科和广西医科大学制药厂共同研究生产的科研制剂，文号：南药(96)01278。由人参、黄芪、冬虫夏草、甲状腺粉等多种组分制成，具有调节内分泌机能，促进生长激素分泌，促进细胞和机体代谢过程及生长发育过程，明显促进长骨生长发育，从而达到人体增高目的。此外本品还促进智力发育，调节免疫功能。二年来，临床应用疗效观察表明：对儿童及青少年短身材者明显身体增高，对青春期发育迟缓、性功能低下、体质虚弱等亦有较好疗效。为进一步控制该制剂质量，通过研究，选择处方中之人参和黄芪，作为质量控制的定性指标，并选择紫外分光光度法中对照品法测定片剂中甲状腺粉特有化合碘(Ⅰ)的含量。
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1 仪器和试药
紫外可见分光光度计(上海光学仪器厂制造，型号为753BI微机型)。双波长紫外光灯。(365nm和253.7nm)。
碘化钾对照品，黄芪甲甙对照品，人参皂甙Rb1、Rg1、Re对照品(均购于中国药品生物制品检定所)。高健美片成品，批号971205、980624、960615。试剂：均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 人参的薄层定性鉴别
2.1.1 供试品溶液的制备：称取本品12.0g，加氯仿50ml，置水浴上加热回流1小时，弃去氯仿液，药渣挥干溶剂，加水2～4ml，拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇30ml，超声处理30分钟，吸取上清液，加氨试液3倍量，摇匀。10℃以下放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
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2.1.2 人参对照药材溶液的制备：取人参药材粉1.0g，按2.1.1项同法制得。
2.1.3 对照品人参皂甙Rb1、Re、Rg1溶液制备：取人参皂甙Rb1、Re、Rg1，加甲醇分别制成每1ml各含2mg的溶液。
2.1.4 人参阴性对照液的制备：除去人参，模拟制剂处方比例及工艺，按2.1.1项同法制得。
2.1.5 薄层层析：分别吸取供试品溶液、人参对照药材溶液、人参皂甙Rb1、Re、Rg1对照品溶液，各5μl，点于同一硅胶G-CMCNa薄层板上，以氯仿一醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃烘数分钟，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色斑点或荧光斑点；在与人参皂甙Rb1、Re、Rg1对照品色谱相应的位置上，日光下显相同的三个紫红色斑点，紫外光灯(365nm)下，显相同的一个黄色和两个橙色荧光斑点。人参阴性对照液无干扰。
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2.2 黄芪的薄层定性鉴别
2.2.1 供试品溶液的制备：取本品粉末1.0g，加甲醇10ml浸泡15分钟，时时振摇，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇0.5ml溶解，作为供试品溶液。
2.2.2 黄芪甲甙对照品的制备：取黄芪甲甙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液。
2.2.3 黄芪阴性对照溶液的制备：模拟处方比例及工艺，除去黄芪，按2.2.1项同法制得。
2.2.4 薄层层析：分别吸取上述三种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G-CMC Na薄层板，以氯仿 ——甲醇——水(12∶6∶2)下层溶液为展开剂展开，取出晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，置105℃烘约5分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置，日光下显相同的棕褐色斑点，紫外光(365nm)下显相同的橙黄色荧光斑点。黄芪阴性对照无干扰。
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2.3 甲状腺粉化合碘(Ⅰ)的含量测定
2.3.1 对照品溶液的制备：精密称取碘化钾对照品0.1308g，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置另一200ml量瓶中，加水稀释到刻度，摇匀，再精密量取5ml，置100ml量瓶，加磷酸盐缓冲液(pH2.0)稀释到刻度，摇匀即得。(每1ml中含碘0.50μg)。
2.3.2 供试品溶液的制备：取本品20片，除去糖衣后，精密称定，研细，精密称取适量(相当于甲状腺粉15mg以上)，照氧瓶燃烧法(九五版中国药典附录VⅡC)进行有机破坏，用60mm×60mm的无灰滤纸包裹，选用1000ml燃烧瓶，精密加入0.4%氢氧化钠溶液50ml为吸收液，待生成的烟雾完全吸收后，摇匀，精密量取上清液10ml，加1mol/L硫酸溶液7～8滴至pH值约为2，用磷酸盐缓冲液(pH2.0)定量稀释成每1ml中含碘0.3～0.9μg的溶液。
, 百拇医药 2.3.3 空白对照液的制备：按处方比例及工艺，除去甲状腺粉，依2.3.2项制得。
2.3.4 参比溶液的制备：除去供试品，依2.3.2项和2.3.5项同法操作制得。
2.3.5 测定波长的选择：精密量取对照品溶液、供试品溶液、空白对照液各10ml，分别置25ml烧杯中，在对照溶液中加稀硫酸1滴后，各滴加溴试液至溶液呈稳定的淡黄色，加热至沸时取下，放冷至室温，加水3ml、1%碘化钾溶液1.0ml与淀粉溶液(可溶性淀粉0.3g与水杨酸0.1g；加水5ml，溶于60ml沸水，放冷)1.0ml，各加水使成15.0ml，置冰浴中15分钟后，迅速调至室温，5分钟后，照分光光度法(九五版中国药典附录IVA)，在585±5nm内。结果供试品和对照品均在药典规定的585nm有最大吸收。空白对照液无干扰吸收，表明成药中辅料在585nm处无吸收。
2.3.6 回收率测定：精密称取甲状腺粉(以硫代硫酸钠滴定法测定其特有化合碘Ⅰ)，模拟高健美片剂处方，准确配成4份不同含量的样品，依上述2.3.2项要求制成供试品溶液后，按上述碘化钾对照品溶液法，分别在585nm波长处测定吸收值，参照公式：Cx=(Ax/Ar)Cr,Cx为供试品溶液浓度，Cr为对照品溶液浓度，Ax为供试品溶液吸收度，Ar为对照品溶液吸收度；计算4份样品的含量值。平均回收率为99.84%，RSD为1.13%。
2.3.7 样品测定：取高健美片剂成品3批，批号分别为960615，971205，980624，每批3份，按回收率项下方法测定化合碘Ⅰ，计算出成品所含甲状腺粉特有化合碘量，三批样品分别为4%(mg/g)、3.6%(mg/g)、3.86%(mg/g)。
3 讨论
综上所述，通过以上测定方法，该制剂处方中人参、黄芪、甲状腺粉化合碘，都可在成品中检出定性定量，专属性强，灵敏度高，重现性好，产品质量可控。对进一步完善产品质量标准，严格控制和提高产品质量水平；对医院临床应用研究观察高效和顺利的进行，确保临床疗效达到预定目标，都将起到积极的促进作用。, http://www.100md.com
单位：王 捷 广西医科大学制药厂
关键词：高健美片剂；人参；黄芪；薄层层析；甲状腺粉特有化合碘含量；紫外分光光度法；照品法
广西医学99123
摘要 应用薄层色谱法检测高健美片剂中人参和黄芪，应用紫外分光光度法中对照品法测定成药中甲状腺特有的化合碘含量，方法简便，专属性强，结果可靠。
高健美片剂是广西医科大学第一附属医院内分泌科和广西医科大学制药厂共同研究生产的科研制剂，文号：南药(96)01278。由人参、黄芪、冬虫夏草、甲状腺粉等多种组分制成，具有调节内分泌机能，促进生长激素分泌，促进细胞和机体代谢过程及生长发育过程，明显促进长骨生长发育，从而达到人体增高目的。此外本品还促进智力发育，调节免疫功能。二年来，临床应用疗效观察表明：对儿童及青少年短身材者明显身体增高，对青春期发育迟缓、性功能低下、体质虚弱等亦有较好疗效。为进一步控制该制剂质量，通过研究，选择处方中之人参和黄芪，作为质量控制的定性指标，并选择紫外分光光度法中对照品法测定片剂中甲状腺粉特有化合碘(Ⅰ)的含量。
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紫外可见分光光度计(上海光学仪器厂制造，型号为753BI微机型)。双波长紫外光灯。(365nm和253.7nm)。
碘化钾对照品，黄芪甲甙对照品，人参皂甙Rb1、Rg1、Re对照品(均购于中国药品生物制品检定所)。高健美片成品，批号971205、980624、960615。试剂：均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 人参的薄层定性鉴别
2.1.1 供试品溶液的制备：称取本品12.0g，加氯仿50ml，置水浴上加热回流1小时，弃去氯仿液，药渣挥干溶剂，加水2～4ml，拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇30ml，超声处理30分钟，吸取上清液，加氨试液3倍量，摇匀。10℃以下放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
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2.1.2 人参对照药材溶液的制备：取人参药材粉1.0g，按2.1.1项同法制得。
2.1.3 对照品人参皂甙Rb1、Re、Rg1溶液制备：取人参皂甙Rb1、Re、Rg1，加甲醇分别制成每1ml各含2mg的溶液。
2.1.4 人参阴性对照液的制备：除去人参，模拟制剂处方比例及工艺，按2.1.1项同法制得。
2.1.5 薄层层析：分别吸取供试品溶液、人参对照药材溶液、人参皂甙Rb1、Re、Rg1对照品溶液，各5μl，点于同一硅胶G-CMCNa薄层板上，以氯仿一醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃烘数分钟，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色斑点或荧光斑点；在与人参皂甙Rb1、Re、Rg1对照品色谱相应的位置上，日光下显相同的三个紫红色斑点，紫外光灯(365nm)下，显相同的一个黄色和两个橙色荧光斑点。人参阴性对照液无干扰。
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2.2 黄芪的薄层定性鉴别
2.2.1 供试品溶液的制备：取本品粉末1.0g，加甲醇10ml浸泡15分钟，时时振摇，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇0.5ml溶解，作为供试品溶液。
2.2.2 黄芪甲甙对照品的制备：取黄芪甲甙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液。
2.2.3 黄芪阴性对照溶液的制备：模拟处方比例及工艺，除去黄芪，按2.2.1项同法制得。
2.2.4 薄层层析：分别吸取上述三种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G-CMC Na薄层板，以氯仿 ——甲醇——水(12∶6∶2)下层溶液为展开剂展开，取出晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，置105℃烘约5分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置，日光下显相同的棕褐色斑点，紫外光(365nm)下显相同的橙黄色荧光斑点。黄芪阴性对照无干扰。
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2.3 甲状腺粉化合碘(Ⅰ)的含量测定
2.3.1 对照品溶液的制备：精密称取碘化钾对照品0.1308g，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置另一200ml量瓶中，加水稀释到刻度，摇匀，再精密量取5ml，置100ml量瓶，加磷酸盐缓冲液(pH2.0)稀释到刻度，摇匀即得。(每1ml中含碘0.50μg)。
2.3.2 供试品溶液的制备：取本品20片，除去糖衣后，精密称定，研细，精密称取适量(相当于甲状腺粉15mg以上)，照氧瓶燃烧法(九五版中国药典附录VⅡC)进行有机破坏，用60mm×60mm的无灰滤纸包裹，选用1000ml燃烧瓶，精密加入0.4%氢氧化钠溶液50ml为吸收液，待生成的烟雾完全吸收后，摇匀，精密量取上清液10ml，加1mol/L硫酸溶液7～8滴至pH值约为2，用磷酸盐缓冲液(pH2.0)定量稀释成每1ml中含碘0.3～0.9μg的溶液。
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2.3.4 参比溶液的制备：除去供试品，依2.3.2项和2.3.5项同法操作制得。
2.3.5 测定波长的选择：精密量取对照品溶液、供试品溶液、空白对照液各10ml，分别置25ml烧杯中，在对照溶液中加稀硫酸1滴后，各滴加溴试液至溶液呈稳定的淡黄色，加热至沸时取下，放冷至室温，加水3ml、1%碘化钾溶液1.0ml与淀粉溶液(可溶性淀粉0.3g与水杨酸0.1g；加水5ml，溶于60ml沸水，放冷)1.0ml，各加水使成15.0ml，置冰浴中15分钟后，迅速调至室温，5分钟后，照分光光度法(九五版中国药典附录IVA)，在585±5nm内。结果供试品和对照品均在药典规定的585nm有最大吸收。空白对照液无干扰吸收，表明成药中辅料在585nm处无吸收。
2.3.6 回收率测定：精密称取甲状腺粉(以硫代硫酸钠滴定法测定其特有化合碘Ⅰ)，模拟高健美片剂处方，准确配成4份不同含量的样品，依上述2.3.2项要求制成供试品溶液后，按上述碘化钾对照品溶液法，分别在585nm波长处测定吸收值，参照公式：Cx=(Ax/Ar)Cr,Cx为供试品溶液浓度，Cr为对照品溶液浓度，Ax为供试品溶液吸收度，Ar为对照品溶液吸收度；计算4份样品的含量值。平均回收率为99.84%，RSD为1.13%。
2.3.7 样品测定：取高健美片剂成品3批，批号分别为960615，971205，980624，每批3份，按回收率项下方法测定化合碘Ⅰ，计算出成品所含甲状腺粉特有化合碘量，三批样品分别为4%(mg/g)、3.6%(mg/g)、3.86%(mg/g)。
3 讨论
综上所述，通过以上测定方法，该制剂处方中人参、黄芪、甲状腺粉化合碘，都可在成品中检出定性定量，专属性强，灵敏度高，重现性好，产品质量可控。对进一步完善产品质量标准，严格控制和提高产品质量水平；对医院临床应用研究观察高效和顺利的进行，确保临床疗效达到预定目标，都将起到积极的促进作用。, http://www.100md.com