急性髓系白血病患者原发性mdr１基因产物P－170与CD34表达及预后的关系
作者：安峻峰 张淑兰 安红梅 周有普 刘国勋 朱绮文 陈永振 杨 勤
单位：(安峻峰 张淑兰)广东医学院附属医院内科，湛江 524001；(安红梅 周有普)宁夏海原县中医院 756100
关键词：急性髓系白血病；P-170；免疫表型；单克隆抗体
广东医学院学报JOURNAL OF GUANGDONG MEDICAL COLLEGE1999年 第17卷 第1期 Vol 摘要 目的：观察急性髓系白血病(AML)患者原发性mdr1基因产物P-170与CD34抗原表达与预后的关系.方法：常规分离31例急性髓系白血病细胞，然后分别进行细胞免疫化学检查，观察了细胞膜分化抗原变化和mdr1基因产物P-170反应.结果：P-170总体表达率为41 .94%，以M5最高，M3最低；P-170阳性的白血病患者临床耐药发生率较P-170阴性者高(P<0.001)，CD34表达者耐药发生率也很高(较CD34阴性者，P<0.01).结论：P-170和CD34表达是急性髓系白血病患者对化疗抵抗的标志 .
, 百拇医药
Relationship between clinical prognosis and expression of P-170 and CD34
in patients with primary acute myeloblastic leukemia
An Junfeng Zhang Shulan An Hongmei，et al
Department of Medicine，Affiliated Hospital of Guangdong Medical College，Zhanjiang 524001
Abstract Objective：To examine relationship between clinical prognosis and expression of P-170 and CD34 in primary acute myeloblastic leukemia(AML)patients.Methods：Specimens from 31 AML patients wereexamined for the expression of AML cells membrane antigens and P-170 by using immunocytochemistyassay.Results：(1)The P-170 positive rate was 41.94% in AML，with the highest incidence in M5 and the lowest in M3；(2)the patients with the P-170 positive had higher resistant rate to chemotherapy as compared with the P-170 negative group (P<0.001).In addition，the CD34 positive patients also had higher resistant rate to chemotherapy(as compared with the CD34 negative group.(P<0.01) Conclusion：It suggested that the expression of P-170 and CD34 in AML is a indicator for resistant response to chemotherapy.
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Key words：acute myeloblastic leukemia：P-170；immunophenotype：monoclonal antibody.
目前研究发现多耐药基因(mdr1)表达水平与白血病细胞分化程度有关[1]，为此本文观察了31例 AML细胞原发性mdr1基因产物P-170表达与髓系分化抗原表达的关系，并探讨了其临床意义.
1 对象与方法
1.1 对象 本组31例均经FAB分型确诊的初诊AML患者，其中M12例，M28例，M37例，M46例，M58例，男18例，女13例；年龄16～63岁.
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1.2 主要试剂 P-170单克隆抗体(单抗)JSB-1、SP检测试剂盒即链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶连接法(Streptavidin peroxdase Conjugated method)检测试剂盒和DAB显色试剂盒购自福建迈新公司，多耐药细胞系K562/VCR和敏感细胞系HL60细胞涂片由中科院天津血研所杨纯正教授提供，免疫表型检测所用单抗CD11b、CD34由军事医学科学院基础所提供，CD13、CD14、CD15、CD33由中科院天津血研所免疫室提供，碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)检测试剂盒由卫生部武汉生物制品所提供.
1.3 P-170检测 取新鲜骨髓标本，肝素抗凝，常规分离单个核细胞涂片，空气干燥，用SP检测试剂盒检测.染色过程如下：先以丙酮固定10min，PBS冲洗 液(pH7.0)洗3次，依次滴加过氧化酶阻断液，非免疫动物血清，-抗(JSB-1)、生物素标记的二抗、链霉菌抗生物素蛋白——过氧化物酶溶液。每加一种试剂或抗体均置于湿盒内室温孵育10min(除一抗孵育30min外) .取出PBS洗涤后再加下一种试剂或抗体.最后加DAB，10min后清水冲洗，苏木素复染.每次操作均设多耐药细胞系K562/VCR和HL60分别为阳性和阴性对照.镜检至少500个细胞，计算阳性细胞百分率.P-170阳性细胞≥10%为mdr1表达(或称P-170基因表达)阳性[2].
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1.4 细胞免疫表型检测 用APAAP方法，取新鲜骨髓标本，肝素抗凝，常规分离单个核细胞涂片，空气干燥，丙酮固定10min，TBS(Tris缓冲液pH7.4)冲洗后，依次滴加一抗、二抗、三抗，底物显色液，置湿盒内孵育30min，每加一种试剂或抗体后均置湿盒孵育30min(除一抗孵育60min外)，然后取出，TBS冲洗后再加另一试剂或抗体，最后滴加底物显色液。阳性反应为红色定位在胞浆和胞膜，计数200个细胞，计算出阳性细胞百分率，以阳性细胞≥30%者为该抗原表达阳性，否则为阴性[3].
1.5 统计学处理 表2采用精确概率法，表3采用组内分组卡方检验[4].
2 结 果
2.1 P-170在AML的表达 31例患者中13例(41.94%)具有mdr1基因表达(见图1、2、3和表
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1).不同AML亚型的mdr1表达阳性率以M5最高(62.5%)，M3最低.M1也有很高比例P-170表
达，但因病例数较少，与总体比较未见显著差异(P>0.05).
图1 多耐药细胞系K562/VCR P-170阳性细胞×200 图2 HL60 P-170阴性细胞×200
图3 M5原代细胞P-170阳性细胞 ×200
表1 31例AML亚型与mdr1表达的关系 诊断
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例数
mdr+1
mdr-1
mdr+表达率/%
M1
2
2
0
100.00
M2
8
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3
5
37.50
M3
7
1
6
14.30
M4
6
2
4
33.33
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M5
8
5
3
62.50
总计
31
13
18
41.94
2.2 P-170表达与免疫表型P-170表达与免疫表型的关系见表2和图4、5.mdr+1组中CD34表达率显著高于mdr-1组(P<0 .05)，并且P-170表达和CD34表达呈正相关(r＝0.88).表2 P-170表达与CD34表型的关系 分组△
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CD34单抗表达阳性率/%
P-170+(n=13)
61.54(8/13)
P-170-(n=10)
10.00(1/10)
△随机选择P-170-组10例和P-170+13例进行CD34检测P<0.05
P-170表达数率/%
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图4 P-170表达与CD34表型相关关系图
图5 M5原代细胞CD34阳性细胞 ×200
2.3 P-170表达与临床耐药的关系 按照Camplin[5]的白血病耐药产生标准：急性白血病使用一线抗白血病药物，常规剂量全量全程诱导缓解方案，2个疗程未达完全缓解(CR)者定为耐药组，2个疗程内达CR者为CR组.31例患者首次诱导缓解方案为DA(D 代表柔红霉素，A 代表阿糖胞苷).作者追踪观察了31例患者P-170表达与否与临床疗效之间关系.
总体耐药发生率为32.3%(10/31)，18例mdr-1者中耐药发生率11.1%(2/18)，而13例mdr+1者耐药发生率为61.5%(8/13)，显著高于mdr-1者(P<0.05).
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2.4 CD34表型与临床耐药的关系 经统计学处理发现，CD34表达与耐药产生明显有关，CD34+者耐药发生率为44.4%(4/9)，而CD34-者14例中无1例发生耐药.
2.5 P-170和CD34协同表达与化疗反应的关系 P-170和CD34单独表达者耐药发生率分别为61.5%(8/13)和44.4%(4/9)，显著高于P-170(P<0.001)和CD34阴性组(P<0.01)；P-170和CD34协同表达者耐药产生率更高达100%(8/8)，但同P-170+或 CD34+单独表达者比较未显统计学差异(P>0.05).见表3.
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表3 免疫表型与预后的关系 组别
免疫标记表达
耐药发生率/%
1
P-170+/CD34+
100(8/8)
2
P-170+/CD34+
61.5(8/13)
3
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CD34+
44.4(4/9)
4
P-170-/CD34+
0.0(0/14)
χ2总＝22.63 P<0.001， χ2P-170+＝15.31 P<0.001，χ2CD34+＝7.06 P<0.01， χ2交互＝0.26 P>0.05
3 讨论
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多耐药(multidrug resistance，mdr)现象就是指肿瘤细胞mdr1基因过度表达，目前公认P-170是mdr1的基因产物.P-170作用原理就是利用ATP提供的能量，将被动扩散入细胞内的天然亲脂类抗肿瘤药物主动泵出胞外，使靶细胞内始终维持较低的药物堆积，细胞由此逃避抗癌剂的杀伤[6].作者利用单抗JSB-1检测了31例初诊AML患者细胞mdr1基因产物P-170的表达情况，以P-170阳性细胞≥10%为mdr+1，正常骨髓的P-170+细胞为3.5%±1.8%[2]，据此标准，本组41.94%的患者具有mdr1基因表达；按急性白血病使用一线抗白血病药物全程全量2个疗程以上未完全缓解者为耐药标准划分，mdr1基因表达者耐药产生率很高，显著高于mdr-1组.关于初治AML的mdr1基因表达阳性率国外报告范围为25%～71%[7，8]，本组在此范围内.Pieker等[7]人观察了63例初治AML患者，其中71%表达mdr1，mdr+1组与mdr-1组CR率显著不同(P＝0.008)，并且，mdr+1组易复发，无病生存期短，易早期死亡，说明mdr1基因表达是AML细胞本身固有特性，是原发性的.并提示AML患者原发性mdr1表达增加能导致耐药，预后差.关于白血病细胞mdr1基因来源，Haber[9]认为很可能是由于发病初斯出现突变所致.mdr1基因在AML各亚型的表达频率不同，Poeta等[10]发现mdr1基因在M0、M1和M5的表达率高，以M5表达率最高(88%)，M3则不表达.本组病例mdr1基因在AML不同亚型表达趋势与Poeta报告结果相近，即在M5高，M3最低.虽然M1组表达比例也很高，但由于观察例数少，不足以说明问题，有待进一步研究.
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关于AML细胞mdr1和CD34的阳性表达，Campos等[11]报道了AML细胞中mdr1基因高表达与CD34阳性显著相关，本组结果也显示 P-170表达与 CD34呈正相关，CD34表达也有独立预后意义即CD34单独表达者耐药发生率也很高.以上结果提示，表达P-170的髓系白血病细胞具有多能干细胞的特征.或来自分化不好的细胞群体，因此，临床上可把P-170+/CD34+细胞作为急性髓系白血病细胞化疗不敏感的指标，实行化疗方案个体化或及时使用逆转剂联合化疗，以提高化疗效果。
基金项目：广东医学院基金资助
4 参考文献
, 百拇医药
1 Miyachi H，Takemura Y，Yonekura S.et al. MDR1(multidrug resistance)gene expression in adult acute leukemia：Correlation with blast phenotype.Intern J Haematol，1993，57：31
2 杨纯正，奕风君，刘炳仁，等，白血病多药耐药检测，中华血液学杂志，1992，13：421
3 李惠芳，孙桂香，卢薇薇，等.白血病多药耐药基因表达与细胞表面分化抗原的关系.中华血液学杂志，1995，16：75
4 金丕焕，詹绍康主编.医学统计学方法.上海：上海医科大学出版社，1993.172～174.
5 Camplin，Gale RP.Acute myelogenous leukemia：Recent advances in therapy.Blood，1987，69：1551
, http://www.100md.com
6 Kartner N，Riordan JR，Ling V.Cell surface P-glycoprotein associated with multidrug resistance in mammalian cell lines.Science，1983，221：1285
7 Pieker R，Wallner J，Geisslerk，et al.MDR1 gene expression and treatment outcome in acute myeloid leukemia.J Natl Cancer Inst，1991，83：708
8 Sato HP，Preisler H，Day R，et al.MDR1 transcript levels as an indication of resistant disease in acute myelogenous leukemia.Br J Haematol，1990，75：340
, 百拇医药
9 Haber DA.Multidrug resistance(MDR1)in leukemia.Is it time to test？Blood，1992，79：295
10 Poeta GD，Stasi R，Venditti A，et al.Prognostic value of cell marker analysis in de novo acute myeloid leukemia.Leukemia，1994，8：338
11 Campos L，Guyotat D，Archimband B，et al，Clinical Significance of multidrug resistance P-glycoprotein expression on acute nonlymphoblastic leukemia cells at dignosis.Blood，1992，79：473
收稿日期：1998-03-30, 百拇医药
单位：(安峻峰 张淑兰)广东医学院附属医院内科，湛江 524001；(安红梅 周有普)宁夏海原县中医院 756100
关键词：急性髓系白血病；P-170；免疫表型；单克隆抗体
广东医学院学报JOURNAL OF GUANGDONG MEDICAL COLLEGE1999年 第17卷 第1期 Vol 摘要 目的：观察急性髓系白血病(AML)患者原发性mdr1基因产物P-170与CD34抗原表达与预后的关系.方法：常规分离31例急性髓系白血病细胞，然后分别进行细胞免疫化学检查，观察了细胞膜分化抗原变化和mdr1基因产物P-170反应.结果：P-170总体表达率为41 .94%，以M5最高，M3最低；P-170阳性的白血病患者临床耐药发生率较P-170阴性者高(P<0.001)，CD34表达者耐药发生率也很高(较CD34阴性者，P<0.01).结论：P-170和CD34表达是急性髓系白血病患者对化疗抵抗的标志 .
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Relationship between clinical prognosis and expression of P-170 and CD34
in patients with primary acute myeloblastic leukemia
An Junfeng Zhang Shulan An Hongmei，et al
Department of Medicine，Affiliated Hospital of Guangdong Medical College，Zhanjiang 524001
Abstract Objective：To examine relationship between clinical prognosis and expression of P-170 and CD34 in primary acute myeloblastic leukemia(AML)patients.Methods：Specimens from 31 AML patients wereexamined for the expression of AML cells membrane antigens and P-170 by using immunocytochemistyassay.Results：(1)The P-170 positive rate was 41.94% in AML，with the highest incidence in M5 and the lowest in M3；(2)the patients with the P-170 positive had higher resistant rate to chemotherapy as compared with the P-170 negative group (P<0.001).In addition，the CD34 positive patients also had higher resistant rate to chemotherapy(as compared with the CD34 negative group.(P<0.01) Conclusion：It suggested that the expression of P-170 and CD34 in AML is a indicator for resistant response to chemotherapy.
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Key words：acute myeloblastic leukemia：P-170；immunophenotype：monoclonal antibody.
目前研究发现多耐药基因(mdr1)表达水平与白血病细胞分化程度有关[1]，为此本文观察了31例 AML细胞原发性mdr1基因产物P-170表达与髓系分化抗原表达的关系，并探讨了其临床意义.
1 对象与方法
1.1 对象 本组31例均经FAB分型确诊的初诊AML患者，其中M12例，M28例，M37例，M46例，M58例，男18例，女13例；年龄16～63岁.
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1.2 主要试剂 P-170单克隆抗体(单抗)JSB-1、SP检测试剂盒即链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶连接法(Streptavidin peroxdase Conjugated method)检测试剂盒和DAB显色试剂盒购自福建迈新公司，多耐药细胞系K562/VCR和敏感细胞系HL60细胞涂片由中科院天津血研所杨纯正教授提供，免疫表型检测所用单抗CD11b、CD34由军事医学科学院基础所提供，CD13、CD14、CD15、CD33由中科院天津血研所免疫室提供，碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)检测试剂盒由卫生部武汉生物制品所提供.
1.3 P-170检测 取新鲜骨髓标本，肝素抗凝，常规分离单个核细胞涂片，空气干燥，用SP检测试剂盒检测.染色过程如下：先以丙酮固定10min，PBS冲洗 液(pH7.0)洗3次，依次滴加过氧化酶阻断液，非免疫动物血清，-抗(JSB-1)、生物素标记的二抗、链霉菌抗生物素蛋白——过氧化物酶溶液。每加一种试剂或抗体均置于湿盒内室温孵育10min(除一抗孵育30min外) .取出PBS洗涤后再加下一种试剂或抗体.最后加DAB，10min后清水冲洗，苏木素复染.每次操作均设多耐药细胞系K562/VCR和HL60分别为阳性和阴性对照.镜检至少500个细胞，计算阳性细胞百分率.P-170阳性细胞≥10%为mdr1表达(或称P-170基因表达)阳性[2].
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1.4 细胞免疫表型检测 用APAAP方法，取新鲜骨髓标本，肝素抗凝，常规分离单个核细胞涂片，空气干燥，丙酮固定10min，TBS(Tris缓冲液pH7.4)冲洗后，依次滴加一抗、二抗、三抗，底物显色液，置湿盒内孵育30min，每加一种试剂或抗体后均置湿盒孵育30min(除一抗孵育60min外)，然后取出，TBS冲洗后再加另一试剂或抗体，最后滴加底物显色液。阳性反应为红色定位在胞浆和胞膜，计数200个细胞，计算出阳性细胞百分率，以阳性细胞≥30%者为该抗原表达阳性，否则为阴性[3].
1.5 统计学处理 表2采用精确概率法，表3采用组内分组卡方检验[4].
2 结 果
2.1 P-170在AML的表达 31例患者中13例(41.94%)具有mdr1基因表达(见图1、2、3和表
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1).不同AML亚型的mdr1表达阳性率以M5最高(62.5%)，M3最低.M1也有很高比例P-170表
达，但因病例数较少，与总体比较未见显著差异(P>0.05).
图1 多耐药细胞系K562/VCR P-170阳性细胞×200 图2 HL60 P-170阴性细胞×200
图3 M5原代细胞P-170阳性细胞 ×200
表1 31例AML亚型与mdr1表达的关系 诊断
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例数
mdr+1
mdr-1
mdr+表达率/%
M1
2
2
0
100.00
M2
8
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3
5
37.50
M3
7
1
6
14.30
M4
6
2
4
33.33
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M5
8
5
3
62.50
总计
31
13
18
41.94
2.2 P-170表达与免疫表型P-170表达与免疫表型的关系见表2和图4、5.mdr+1组中CD34表达率显著高于mdr-1组(P<0 .05)，并且P-170表达和CD34表达呈正相关(r＝0.88).表2 P-170表达与CD34表型的关系 分组△
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CD34单抗表达阳性率/%
P-170+(n=13)
61.54(8/13)
P-170-(n=10)
10.00(1/10)
△随机选择P-170-组10例和P-170+13例进行CD34检测P<0.05
P-170表达数率/%
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图4 P-170表达与CD34表型相关关系图
图5 M5原代细胞CD34阳性细胞 ×200
2.3 P-170表达与临床耐药的关系 按照Camplin[5]的白血病耐药产生标准：急性白血病使用一线抗白血病药物，常规剂量全量全程诱导缓解方案，2个疗程未达完全缓解(CR)者定为耐药组，2个疗程内达CR者为CR组.31例患者首次诱导缓解方案为DA(D 代表柔红霉素，A 代表阿糖胞苷).作者追踪观察了31例患者P-170表达与否与临床疗效之间关系.
总体耐药发生率为32.3%(10/31)，18例mdr-1者中耐药发生率11.1%(2/18)，而13例mdr+1者耐药发生率为61.5%(8/13)，显著高于mdr-1者(P<0.05).
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2.4 CD34表型与临床耐药的关系 经统计学处理发现，CD34表达与耐药产生明显有关，CD34+者耐药发生率为44.4%(4/9)，而CD34-者14例中无1例发生耐药.
2.5 P-170和CD34协同表达与化疗反应的关系 P-170和CD34单独表达者耐药发生率分别为61.5%(8/13)和44.4%(4/9)，显著高于P-170(P<0.001)和CD34阴性组(P<0.01)；P-170和CD34协同表达者耐药产生率更高达100%(8/8)，但同P-170+或 CD34+单独表达者比较未显统计学差异(P>0.05).见表3.
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表3 免疫表型与预后的关系 组别
免疫标记表达
耐药发生率/%
1
P-170+/CD34+
100(8/8)
2
P-170+/CD34+
61.5(8/13)
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CD34+
44.4(4/9)
4
P-170-/CD34+
0.0(0/14)
χ2总＝22.63 P<0.001， χ2P-170+＝15.31 P<0.001，χ2CD34+＝7.06 P<0.01， χ2交互＝0.26 P>0.05
3 讨论
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多耐药(multidrug resistance，mdr)现象就是指肿瘤细胞mdr1基因过度表达，目前公认P-170是mdr1的基因产物.P-170作用原理就是利用ATP提供的能量，将被动扩散入细胞内的天然亲脂类抗肿瘤药物主动泵出胞外，使靶细胞内始终维持较低的药物堆积，细胞由此逃避抗癌剂的杀伤[6].作者利用单抗JSB-1检测了31例初诊AML患者细胞mdr1基因产物P-170的表达情况，以P-170阳性细胞≥10%为mdr+1，正常骨髓的P-170+细胞为3.5%±1.8%[2]，据此标准，本组41.94%的患者具有mdr1基因表达；按急性白血病使用一线抗白血病药物全程全量2个疗程以上未完全缓解者为耐药标准划分，mdr1基因表达者耐药产生率很高，显著高于mdr-1组.关于初治AML的mdr1基因表达阳性率国外报告范围为25%～71%[7，8]，本组在此范围内.Pieker等[7]人观察了63例初治AML患者，其中71%表达mdr1，mdr+1组与mdr-1组CR率显著不同(P＝0.008)，并且，mdr+1组易复发，无病生存期短，易早期死亡，说明mdr1基因表达是AML细胞本身固有特性，是原发性的.并提示AML患者原发性mdr1表达增加能导致耐药，预后差.关于白血病细胞mdr1基因来源，Haber[9]认为很可能是由于发病初斯出现突变所致.mdr1基因在AML各亚型的表达频率不同，Poeta等[10]发现mdr1基因在M0、M1和M5的表达率高，以M5表达率最高(88%)，M3则不表达.本组病例mdr1基因在AML不同亚型表达趋势与Poeta报告结果相近，即在M5高，M3最低.虽然M1组表达比例也很高，但由于观察例数少，不足以说明问题，有待进一步研究.
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关于AML细胞mdr1和CD34的阳性表达，Campos等[11]报道了AML细胞中mdr1基因高表达与CD34阳性显著相关，本组结果也显示 P-170表达与 CD34呈正相关，CD34表达也有独立预后意义即CD34单独表达者耐药发生率也很高.以上结果提示，表达P-170的髓系白血病细胞具有多能干细胞的特征.或来自分化不好的细胞群体，因此，临床上可把P-170+/CD34+细胞作为急性髓系白血病细胞化疗不敏感的指标，实行化疗方案个体化或及时使用逆转剂联合化疗，以提高化疗效果。
基金项目：广东医学院基金资助
4 参考文献
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1 Miyachi H，Takemura Y，Yonekura S.et al. MDR1(multidrug resistance)gene expression in adult acute leukemia：Correlation with blast phenotype.Intern J Haematol，1993，57：31
2 杨纯正，奕风君，刘炳仁，等，白血病多药耐药检测，中华血液学杂志，1992，13：421
3 李惠芳，孙桂香，卢薇薇，等.白血病多药耐药基因表达与细胞表面分化抗原的关系.中华血液学杂志，1995，16：75
4 金丕焕，詹绍康主编.医学统计学方法.上海：上海医科大学出版社，1993.172～174.
5 Camplin，Gale RP.Acute myelogenous leukemia：Recent advances in therapy.Blood，1987，69：1551
, http://www.100md.com
6 Kartner N，Riordan JR，Ling V.Cell surface P-glycoprotein associated with multidrug resistance in mammalian cell lines.Science，1983，221：1285
7 Pieker R，Wallner J，Geisslerk，et al.MDR1 gene expression and treatment outcome in acute myeloid leukemia.J Natl Cancer Inst，1991，83：708
8 Sato HP，Preisler H，Day R，et al.MDR1 transcript levels as an indication of resistant disease in acute myelogenous leukemia.Br J Haematol，1990，75：340
, 百拇医药
9 Haber DA.Multidrug resistance(MDR1)in leukemia.Is it time to test？Blood，1992，79：295
10 Poeta GD，Stasi R，Venditti A，et al.Prognostic value of cell marker analysis in de novo acute myeloid leukemia.Leukemia，1994，8：338
11 Campos L，Guyotat D，Archimband B，et al，Clinical Significance of multidrug resistance P-glycoprotein expression on acute nonlymphoblastic leukemia cells at dignosis.Blood，1992，79：473
收稿日期：1998-03-30, 百拇医药