甲状腺滤泡肿瘤Ki-67抗原的表达及其与增殖细胞核抗原表达的关系
作者：杨亦萍 韦敏怡 立山尚
单位：广西医科大学附属口腔医院病理科 南宁 530021
关键词：Ki-67抗原；甲状腺滤泡肿瘤；免疫组织化学；增殖细胞核抗原
广西医科大学学报990102
摘要 目的：探讨Ki-67抗原标记指数与良恶性甲状腺滤泡肿瘤间的关系。方法：用免疫组织化学法检测44例常规福尔马林固定，石蜡包埋的甲状腺滤泡肿瘤中的Ki-67抗原的表达。结果：Ki-7抗原阳性细胞标记指数在微浸润型癌(MIFC)、广泛浸润型癌(WIFC)和滤泡腺瘤(FA)中分别是(4.3±3.42)%，(3.5±1.53)%和(0.6±0.39)%，腺瘤与微浸润型癌和广泛浸润型癌之间均有显著性差异(P<0.05)，并且和增殖细胞核抗原(PCNA)在甲状腺滤泡肿瘤中的表达呈明显正相关(r=0.79，P<0.01)。结论：Ki-67抗原的表达有助于良恶性甲状腺滤泡肿瘤的鉴别诊断。
, http://www.100md.com
中国图书资料分类法分类号 R730.43
EXPRESSION OF Ki-67 ANTIGEN IN FOLLICULAR TUMOURS OF
THE THYROID AND ITS CORRELATION WITH PCNA EXPRESSION
Yang Yiping,Wei Minyi,Hisashi Tateyama(Dept.of Pathol,Stomatological Hospital,Guangxi Medical University，Nanning 530021)
Abstract Objective:To explore the relationship between the labelling index of Ki-67 antigen and follicular carcinomas and follicular adenomas of the thyroid.Methods:Expression of Ki-67 antigen in 44 thyroid follicular tumours specimens routinely fixed in formalin and embeded in paraffin were studied by immunohistochemical method.Results:The labelling index of Ki-67 antigen-positive cells in Minimally invasive follicular carcinomas (MIFC) ,widely invasive follicular carcinomas (WIFC) and follicular adenomas (FA) was (4.3±3.42)%,(3.5±1.53)% and (0.6±0.39)% respectively.There was a statistically significant difference between FA and MIFC of WIFC (P<0.05).Expression of Ki-67 antigen was significantly related to the expression of PCNA (r=0.79,P<0.01).Conclusions:The examination of Ki-67 is valuable in differential diagnosis of thyroid follicular tumours.
, 百拇医药
Key words Ki-67 antigen;follicular tumours of the tryroid;immunohistochemical method；PCNA
甲状腺滤泡癌，特别是微浸润型癌与甲状腺滤泡腺瘤的鉴别诊断，一直是病理诊断中的难点。近年来已有研究表明Ki-67抗原在良恶性肿瘤中有明显不同的表达[1，2]。但Ki-67抗原在甲状腺肿瘤中的表达情况，国外偶见报道[3]，国内未见报道。为此，我们使用可用于福尔马林固定，石蜡包埋组织的抗Ki-67抗原单克隆抗体MIB1，对甲状腺滤泡肿瘤进行了检测，并和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达进行了比较。以探讨Ki-67抗原在甲状腺滤泡肿瘤中的表达及其意义。
1 材料和方法
1.1材料：甲状腺滤泡肿瘤手术切除标本共44例，按世界卫生组织1988年分类标准分为甲状腺滤泡癌(Follicular carcinoma,FC)22例，其中微浸润癌(Minimally invasive follicular carcinoma,MIFA)14例，广泛浸润癌(Widely invasive follicular carcinoma,WIFC)8例，甲状腺滤泡腺瘤(Follicular adenoma FA)22例，所有HE切片均经复查，MIFC均有明确的包膜或血管浸润，正常甲状腺组织10例作对照。
, 百拇医药
1.2 方法：所有标本均经质量分数为10%福尔马林固定，石蜡包埋，制备4 μm厚连续切片，常规脱蜡至水后，用10 mmol/L pH6.0枸椽酸盐缓冲液进行微波修复，再按SAB法常规免疫组织化学染色，DAB显色，苏木素复染。一抗为抗Ki-67单克隆抗体MIB1(由法国Immunoteth公司生产，名古屋市立大学荣本忠昭教授惠赠)和抗PCNA单克隆抗体PC10(DAKO公司生产)，SAB法试剂盒由东京株式会社ニチレイ提供，PBC代替一抗作阴性对照。
1.3 Ki-67抗原和PCNA阳性细胞判断和计数：Ki-67抗原和PCNA阳性细胞均显示颗粒状和弥漫性两种类型核着色，着色强度不同，分布亦不均匀，但凡是能辨认有棕褐或棕黄色核着色的细胞都视为阳性细胞，计数由两名病理医生独立完成，采用CMIAS007真彩色医学图像分析系统，计数每张切片高倍镜下1 000个肿瘤细胞内Ki-67抗原和PCNA阳性细胞数，以标记指数(Labelling index)表达。
1.4 统计学处理：t检验分析组间差异，Spearman相关检验分析Ki-67和PCNA间的相关性。
, 百拇医药
2 结 果
2.1甲状腺滤泡肿瘤中Ki-67标记指数：本组甲状腺滤泡癌Ki-67标记指数明显高于滤泡腺瘤，良恶性之间存在显著性差异(P<0.05)，而且微浸润型或广泛浸润型癌与腺瘤之间也都存在明显差异(P<0.05)，但MIFC和WIFC之间没有差异(P>0.05)。腺瘤各组之间亦无差异(P>0.05)(表1，图1、图2)。
表1 甲状腺滤泡肿瘤中Ki-67和PCNA的标记指数 组织学类型
n
Ki-67标记指数
(
±s)%
PCNA标记指数
, 百拇医药
(±s)%
甲状腺滤泡癌
22
4.00±2.86
22.21±7.32
微浸润型
14
4.27±3.42
22.90±8.55
广泛浸润型
8
, 百拇医药
3.51±1.53
21.00±4.75
甲状腺滤泡腺瘤
22
0.61±0.39
5.24±1.58
胎儿、胚胎型
13
0.62±0.46
5.13±1.75
单纯、胶样型
9
, 百拇医药
0.59±0.29
5.40±1.38
*组相比 P<0.05
图1 Ki-67抗原在甲状腺滤泡癌中的表达 SAB×100
图2 PCNA在甲状腺滤泡癌中的表达 SAB×100
2.2 甲状腺滤泡腺瘤中PCNA标记指数：甲状腺滤泡癌PCNA标记指数高于甲状腺滤泡腺瘤，两者间有明显差异性(P<0.05)(表1)。而且PCNA的标记指数均值(14.2%)高于Ki-67标记指数均值(2.8%)。
, 百拇医药 2.3 甲状腺滤泡性肿瘤中Ki-67和PCNA标记指数的相关性：本组甲状腺良恶性滤泡性肿瘤中Ki-67与PCNA标记指数之间的相关系数r=0.79，P<0.01，表明两指数间存在显著线性正相关关系。
2.4 正常甲状腺组织几乎不表达Ki-67和PCNA(标记指数<0.01%)。
3 讨 论
甲状腺滤泡癌微浸润型和甲状腺滤泡腺瘤的鉴别诊断一直是临床病理诊断的难点。理论上认为，发现明确的包膜或血管浸润即可作为诊断恶性的依据。但在实际工作中，因受送检标本不全，取材数量有限，包膜浸润标准不一致等诸多因素制约，有时很难确定浸润部位。近年有人用PCNA对甲状腺滤泡肿瘤进行检测，证明良恶性间可显示出不同的标记指数[4，5]，本文使用的是和PCNA一样能反映细胞增殖活性的Ki-67抗原。Ki-67抗原是一种由相对分子质量为345×103u和395×103u的两条多肽链组成的核蛋白。凡进入增殖周期的细胞都具有此DNA复制时所需的蛋白质，Ki-67指数代表的细胞群体包括G1、S、G2和M期，且由于Ki-67抗原半衰期短，细胞脱离增殖周期后迅速被降解，其检测结果的可靠性明显优于半衰期较长的PCNA[6，7]。本研究结果中Ki-67抗原在甲状腺滤泡癌中的表达比在滤泡腺瘤中的表达强烈得多，癌与瘤之间，尤其是微浸润型癌和腺瘤之间有明显的差异(P<0.05)。说明Ki-67抗原能够准确反映细胞的增殖状态。为临床因种种客观因素制约找不到明确的包膜和血管浸润的病例，提供了一种有效的鉴别诊断工具，本文的结果和Wallin等人的冰冻切片的结果[3]比较，表达指标同样偏低，但指数重叠现象很少，而且腺瘤无阴性表达现象。这可能与抗体和方法不同，以及标本固定时间长短有关。至于良恶性的界定值，文献报道PCNA为10%[4]。而Ki-67在本文的检测中：良性为0.1%～1.7%，微浸润癌为：1.1%～6.4%，广泛浸润癌为1.2%～6.4%。22例癌组中的4例(1.2%，1.2%，1.1%，1.1%)和22例瘤组中的2例(1.7%，1.2%)，其标记指数有重叠现象，但腺瘤组无一例高于2%。根据这一检测结果，我们认为将2%作为一个参考值是可行的，对于临床高于2%标记指数的病例，反复多次取材寻找恶性证据或定期随访是必要的。我们在Ki-67检测过程中曾有1例原诊断为“腺瘤”的病例，其标记指数达到3.4%，经对其全部石蜡块反复连续切片，最终发现了明确的包膜浸润。说明Ki-67抗原对甲状腺滤泡肿瘤良恶性判断是有价值的，当然更可靠合理的界定值还有待进一步探讨和验证。
, http://www.100md.com
Ki-67抗原的表达在微浸润型癌和广泛浸润型癌之间没有差异(P>0.05)。证明微浸润型癌属于恶性范畴，此前曾称此型为“浸润型腺瘤”，这一命名不反映它的恶性本质，容易产生误解，以不用为好。Ki-67抗原在甲状腺腺瘤常见的各类型中的表达无差异性(P>0.05)，而且在常规切片中腺瘤的不同区域常有不同亚型图像混合存在，说明腺瘤各亚型的细胞增殖状态相似，腺瘤进一步分亚型的意义不大。
本文将Ki-67标记指数与PCNA的标记指数进行了比较，尽管两者的平均值有差别，但两者统计学分析具有相关性，这和文献结果是一致的[8]。说明Ki-67和PCNA一样可作为鉴别良恶性的标记物，而且因其半衰期短，检测结果更可靠。如果两者同时使用，可相互比较、验证，则所提供的信息更准确。
以往使用的Ki-67抗体只能用于冰冻切片，既无法进行回顾性研究，成本亦高。此次我们使用的抗Ki-67单克隆抗体MIB1，可用于常规固定，包埋切片，和其它一些反映细胞增殖状态的方法如3 T-HdR,流式细胞术相比，更简单、经济、可靠，因此可用于个例分析。
, 百拇医药
本文的研究结果提示：Ki-67抗原在甲状腺良恶性滤泡肿瘤中的表达有显著性差异。因此可作为评价甲状腺滤泡肿瘤增殖度的指标，并有助于甲状腺滤泡肿瘤的鉴别诊断。
*广西区教委科研资助课题
作者简介：韦敏怡 广西医科大学第一附属医院病理科
立山尚 日本名古屋市立大学医学部第二病理讲座
参考文献
1 Walker RA,Camplejohn RS.Comparison of monoclonal antibody Ki-67 reactivity with grade and DNA flow cytometry of breast carcinomas.B J Cacer,1988,57:281
, 百拇医药
2 Murakami M,Ohtami I,Hojo H,et al.Immunohistochemi-
cal evaluation with Ki-67:an application to salivary gland tumours.J Laryngol Otol,1992,106:35
3 Wallin G,Backdahl M,Christensson B,et al.Nuclear protein content and Ki-67 immunoreactivity in nonneoplastic and neoplastic thyroid cells.Anal Quant Cytol Histol,1992,14(4):296
4 Tateyama H,Yiping Y,Einoto T,et al.Proliferative cell nuclear antigen expression in follicular tumours of the thyroid with special reference to oxyphilic cell lesiong.Virchows Archiv,1994,424:533
, http://www.100md.com
5 Shimizu T,Usuda N,Yamanda T,et al.Proliferative activity of human thyroid tumors evaluated by proliferating cell nuclear antigen cyclin immunohistochemical studies.Cancer,71:2 807
6 Gerdes J,Li L,Schlueter C,et al.Immunobiochemical and inolecular biologic characterization of the cell proliferation
-associated nuclear antigen that is defined by monoclonal antibody Ki-67.Am J Pathol,1991,138:867
, 百拇医药 7 Sasaki K,Murakami T,Kawasaki M,et al.The cell cycle associated change of the Ki-67 reactive nuclear antigen expression.J Cell Physiol,1987,133:579
8 Schwantz BR,Pinkus G,Bacus S,et al.Cell proliferation in Non-Hodgkins lymphomas digital image analysis of Ki-67 antibody staining.Am J Pathol,1989,134(2):327
收稿日期：1998-04-20, 百拇医药
单位：广西医科大学附属口腔医院病理科 南宁 530021
关键词：Ki-67抗原；甲状腺滤泡肿瘤；免疫组织化学；增殖细胞核抗原
广西医科大学学报990102
摘要 目的：探讨Ki-67抗原标记指数与良恶性甲状腺滤泡肿瘤间的关系。方法：用免疫组织化学法检测44例常规福尔马林固定，石蜡包埋的甲状腺滤泡肿瘤中的Ki-67抗原的表达。结果：Ki-7抗原阳性细胞标记指数在微浸润型癌(MIFC)、广泛浸润型癌(WIFC)和滤泡腺瘤(FA)中分别是(4.3±3.42)%，(3.5±1.53)%和(0.6±0.39)%，腺瘤与微浸润型癌和广泛浸润型癌之间均有显著性差异(P<0.05)，并且和增殖细胞核抗原(PCNA)在甲状腺滤泡肿瘤中的表达呈明显正相关(r=0.79，P<0.01)。结论：Ki-67抗原的表达有助于良恶性甲状腺滤泡肿瘤的鉴别诊断。
, http://www.100md.com
中国图书资料分类法分类号 R730.43
EXPRESSION OF Ki-67 ANTIGEN IN FOLLICULAR TUMOURS OF
THE THYROID AND ITS CORRELATION WITH PCNA EXPRESSION
Yang Yiping,Wei Minyi,Hisashi Tateyama(Dept.of Pathol,Stomatological Hospital,Guangxi Medical University，Nanning 530021)
Abstract Objective:To explore the relationship between the labelling index of Ki-67 antigen and follicular carcinomas and follicular adenomas of the thyroid.Methods:Expression of Ki-67 antigen in 44 thyroid follicular tumours specimens routinely fixed in formalin and embeded in paraffin were studied by immunohistochemical method.Results:The labelling index of Ki-67 antigen-positive cells in Minimally invasive follicular carcinomas (MIFC) ,widely invasive follicular carcinomas (WIFC) and follicular adenomas (FA) was (4.3±3.42)%,(3.5±1.53)% and (0.6±0.39)% respectively.There was a statistically significant difference between FA and MIFC of WIFC (P<0.05).Expression of Ki-67 antigen was significantly related to the expression of PCNA (r=0.79,P<0.01).Conclusions:The examination of Ki-67 is valuable in differential diagnosis of thyroid follicular tumours.
, 百拇医药
Key words Ki-67 antigen;follicular tumours of the tryroid;immunohistochemical method；PCNA
甲状腺滤泡癌，特别是微浸润型癌与甲状腺滤泡腺瘤的鉴别诊断，一直是病理诊断中的难点。近年来已有研究表明Ki-67抗原在良恶性肿瘤中有明显不同的表达[1，2]。但Ki-67抗原在甲状腺肿瘤中的表达情况，国外偶见报道[3]，国内未见报道。为此，我们使用可用于福尔马林固定，石蜡包埋组织的抗Ki-67抗原单克隆抗体MIB1，对甲状腺滤泡肿瘤进行了检测，并和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达进行了比较。以探讨Ki-67抗原在甲状腺滤泡肿瘤中的表达及其意义。
1 材料和方法
1.1材料：甲状腺滤泡肿瘤手术切除标本共44例，按世界卫生组织1988年分类标准分为甲状腺滤泡癌(Follicular carcinoma,FC)22例，其中微浸润癌(Minimally invasive follicular carcinoma,MIFA)14例，广泛浸润癌(Widely invasive follicular carcinoma,WIFC)8例，甲状腺滤泡腺瘤(Follicular adenoma FA)22例，所有HE切片均经复查，MIFC均有明确的包膜或血管浸润，正常甲状腺组织10例作对照。
, 百拇医药
1.2 方法：所有标本均经质量分数为10%福尔马林固定，石蜡包埋，制备4 μm厚连续切片，常规脱蜡至水后，用10 mmol/L pH6.0枸椽酸盐缓冲液进行微波修复，再按SAB法常规免疫组织化学染色，DAB显色，苏木素复染。一抗为抗Ki-67单克隆抗体MIB1(由法国Immunoteth公司生产，名古屋市立大学荣本忠昭教授惠赠)和抗PCNA单克隆抗体PC10(DAKO公司生产)，SAB法试剂盒由东京株式会社ニチレイ提供，PBC代替一抗作阴性对照。
1.3 Ki-67抗原和PCNA阳性细胞判断和计数：Ki-67抗原和PCNA阳性细胞均显示颗粒状和弥漫性两种类型核着色，着色强度不同，分布亦不均匀，但凡是能辨认有棕褐或棕黄色核着色的细胞都视为阳性细胞，计数由两名病理医生独立完成，采用CMIAS007真彩色医学图像分析系统，计数每张切片高倍镜下1 000个肿瘤细胞内Ki-67抗原和PCNA阳性细胞数，以标记指数(Labelling index)表达。
1.4 统计学处理：t检验分析组间差异，Spearman相关检验分析Ki-67和PCNA间的相关性。
, 百拇医药
2 结 果
2.1甲状腺滤泡肿瘤中Ki-67标记指数：本组甲状腺滤泡癌Ki-67标记指数明显高于滤泡腺瘤，良恶性之间存在显著性差异(P<0.05)，而且微浸润型或广泛浸润型癌与腺瘤之间也都存在明显差异(P<0.05)，但MIFC和WIFC之间没有差异(P>0.05)。腺瘤各组之间亦无差异(P>0.05)(表1，图1、图2)。
表1 甲状腺滤泡肿瘤中Ki-67和PCNA的标记指数 组织学类型
n
Ki-67标记指数
(
±s)%PCNA标记指数
, 百拇医药
(
±s)%甲状腺滤泡癌
22
4.00±2.86
22.21±7.32
微浸润型
14
4.27±3.42
22.90±8.55
广泛浸润型
8
, 百拇医药
3.51±1.53
21.00±4.75
甲状腺滤泡腺瘤
22
0.61±0.39
5.24±1.58
胎儿、胚胎型
13
0.62±0.46
5.13±1.75
单纯、胶样型
9
, 百拇医药
0.59±0.29
5.40±1.38
*组相比 P<0.05
图1 Ki-67抗原在甲状腺滤泡癌中的表达 SAB×100
图2 PCNA在甲状腺滤泡癌中的表达 SAB×100
2.2 甲状腺滤泡腺瘤中PCNA标记指数：甲状腺滤泡癌PCNA标记指数高于甲状腺滤泡腺瘤，两者间有明显差异性(P<0.05)(表1)。而且PCNA的标记指数均值(14.2%)高于Ki-67标记指数均值(2.8%)。
, 百拇医药 2.3 甲状腺滤泡性肿瘤中Ki-67和PCNA标记指数的相关性：本组甲状腺良恶性滤泡性肿瘤中Ki-67与PCNA标记指数之间的相关系数r=0.79，P<0.01，表明两指数间存在显著线性正相关关系。
2.4 正常甲状腺组织几乎不表达Ki-67和PCNA(标记指数<0.01%)。
3 讨 论
甲状腺滤泡癌微浸润型和甲状腺滤泡腺瘤的鉴别诊断一直是临床病理诊断的难点。理论上认为，发现明确的包膜或血管浸润即可作为诊断恶性的依据。但在实际工作中，因受送检标本不全，取材数量有限，包膜浸润标准不一致等诸多因素制约，有时很难确定浸润部位。近年有人用PCNA对甲状腺滤泡肿瘤进行检测，证明良恶性间可显示出不同的标记指数[4，5]，本文使用的是和PCNA一样能反映细胞增殖活性的Ki-67抗原。Ki-67抗原是一种由相对分子质量为345×103u和395×103u的两条多肽链组成的核蛋白。凡进入增殖周期的细胞都具有此DNA复制时所需的蛋白质，Ki-67指数代表的细胞群体包括G1、S、G2和M期，且由于Ki-67抗原半衰期短，细胞脱离增殖周期后迅速被降解，其检测结果的可靠性明显优于半衰期较长的PCNA[6，7]。本研究结果中Ki-67抗原在甲状腺滤泡癌中的表达比在滤泡腺瘤中的表达强烈得多，癌与瘤之间，尤其是微浸润型癌和腺瘤之间有明显的差异(P<0.05)。说明Ki-67抗原能够准确反映细胞的增殖状态。为临床因种种客观因素制约找不到明确的包膜和血管浸润的病例，提供了一种有效的鉴别诊断工具，本文的结果和Wallin等人的冰冻切片的结果[3]比较，表达指标同样偏低，但指数重叠现象很少，而且腺瘤无阴性表达现象。这可能与抗体和方法不同，以及标本固定时间长短有关。至于良恶性的界定值，文献报道PCNA为10%[4]。而Ki-67在本文的检测中：良性为0.1%～1.7%，微浸润癌为：1.1%～6.4%，广泛浸润癌为1.2%～6.4%。22例癌组中的4例(1.2%，1.2%，1.1%，1.1%)和22例瘤组中的2例(1.7%，1.2%)，其标记指数有重叠现象，但腺瘤组无一例高于2%。根据这一检测结果，我们认为将2%作为一个参考值是可行的，对于临床高于2%标记指数的病例，反复多次取材寻找恶性证据或定期随访是必要的。我们在Ki-67检测过程中曾有1例原诊断为“腺瘤”的病例，其标记指数达到3.4%，经对其全部石蜡块反复连续切片，最终发现了明确的包膜浸润。说明Ki-67抗原对甲状腺滤泡肿瘤良恶性判断是有价值的，当然更可靠合理的界定值还有待进一步探讨和验证。
, http://www.100md.com
Ki-67抗原的表达在微浸润型癌和广泛浸润型癌之间没有差异(P>0.05)。证明微浸润型癌属于恶性范畴，此前曾称此型为“浸润型腺瘤”，这一命名不反映它的恶性本质，容易产生误解，以不用为好。Ki-67抗原在甲状腺腺瘤常见的各类型中的表达无差异性(P>0.05)，而且在常规切片中腺瘤的不同区域常有不同亚型图像混合存在，说明腺瘤各亚型的细胞增殖状态相似，腺瘤进一步分亚型的意义不大。
本文将Ki-67标记指数与PCNA的标记指数进行了比较，尽管两者的平均值有差别，但两者统计学分析具有相关性，这和文献结果是一致的[8]。说明Ki-67和PCNA一样可作为鉴别良恶性的标记物，而且因其半衰期短，检测结果更可靠。如果两者同时使用，可相互比较、验证，则所提供的信息更准确。
以往使用的Ki-67抗体只能用于冰冻切片，既无法进行回顾性研究，成本亦高。此次我们使用的抗Ki-67单克隆抗体MIB1，可用于常规固定，包埋切片，和其它一些反映细胞增殖状态的方法如3 T-HdR,流式细胞术相比，更简单、经济、可靠，因此可用于个例分析。
, 百拇医药
本文的研究结果提示：Ki-67抗原在甲状腺良恶性滤泡肿瘤中的表达有显著性差异。因此可作为评价甲状腺滤泡肿瘤增殖度的指标，并有助于甲状腺滤泡肿瘤的鉴别诊断。
*广西区教委科研资助课题
作者简介：韦敏怡 广西医科大学第一附属医院病理科
立山尚 日本名古屋市立大学医学部第二病理讲座
参考文献
1 Walker RA,Camplejohn RS.Comparison of monoclonal antibody Ki-67 reactivity with grade and DNA flow cytometry of breast carcinomas.B J Cacer,1988,57:281
, 百拇医药
2 Murakami M,Ohtami I,Hojo H,et al.Immunohistochemi-
cal evaluation with Ki-67:an application to salivary gland tumours.J Laryngol Otol,1992,106:35
3 Wallin G,Backdahl M,Christensson B,et al.Nuclear protein content and Ki-67 immunoreactivity in nonneoplastic and neoplastic thyroid cells.Anal Quant Cytol Histol,1992,14(4):296
4 Tateyama H,Yiping Y,Einoto T,et al.Proliferative cell nuclear antigen expression in follicular tumours of the thyroid with special reference to oxyphilic cell lesiong.Virchows Archiv,1994,424:533
, http://www.100md.com
5 Shimizu T,Usuda N,Yamanda T,et al.Proliferative activity of human thyroid tumors evaluated by proliferating cell nuclear antigen cyclin immunohistochemical studies.Cancer,71:2 807
6 Gerdes J,Li L,Schlueter C,et al.Immunobiochemical and inolecular biologic characterization of the cell proliferation
-associated nuclear antigen that is defined by monoclonal antibody Ki-67.Am J Pathol,1991,138:867
, 百拇医药 7 Sasaki K,Murakami T,Kawasaki M,et al.The cell cycle associated change of the Ki-67 reactive nuclear antigen expression.J Cell Physiol,1987,133:579
8 Schwantz BR,Pinkus G,Bacus S,et al.Cell proliferation in Non-Hodgkins lymphomas digital image analysis of Ki-67 antibody staining.Am J Pathol,1989,134(2):327
收稿日期：1998-04-20, 百拇医药