人工麝香对退变颈椎间盘中免疫球蛋白的含量影响
作者：彭宝淦 施杞 贾连顺
单位：彭宝淦 贾连顺(第二军医大学附属长征医院骨科 200003 上海)；施杞(上海中医药大学)
关键词：人工麝香；退变；颈椎间盘；免疫球蛋白
中国中医骨伤科990103 摘要 方法：实验选用15只新西兰兔，分为3组，每组5只，分别为颈椎间盘退变组、颈椎间盘退变加人工麝香饲养组和正常对照组。通过切除动物颈棘上及棘间韧带和分离颈椎旁两侧肌肉，造成颈椎力学上的失衡而诱导了兔的颈椎间盘退行性变化。在术后8月时，杀死动物，取动物颈椎间盘组织，用单向环状免疫扩散技术测定其中IgG及IgM含量。结果：退变颈椎间盘中IgG含量明显升高；人工麝香具有显著降低退变颈椎间盘中IgG的作用，IgM与颈椎间盘退变无关。
Synthetic Moschus' Role to Imminoglobulin Content in
, 百拇医药
Degenerated Cervic al discs
Peng Baogan,Shi Qi,Jia Lianshun
Changzheng Hospital,Second Military Medical University,Shanghai,200003
ABSTRACT Methods:In this study,15 white Newzealand rabbit s were used and seperated into three groups:degenerated cervical disc group,dege nerated cervical disc group with Synthetic Moschus,and control group,and each gr oup has five rabbits.The experimental model of degenerated cervical disc in the rabbit was established by resection of cervical supraspinous and interspinous li gaments and detachment of posterior paravertebral muscles from the cervical vert abrae.Rabbits were killed eight months after operation.The cervical disc tissues in all three groups were assayed to detect IgG and IgM content by simple agar d iffusion method.Results:The results were showed that the IgG content in degenera ted cervical discs were obviously higher than those of control discs;synthetic M oschus could obviously decrease IgG content in degenerated cervical disc;IgM wer e not related to disc degeneration.
, 百拇医药
KEY WORDS Synthetic mouschus Degeneration Cervical disc Immunoglobulin
麝香系鹿科动物林麝Moschus berezovskii F1erov、马麝M.sifanicus przewalski或原麝M.nosc hiferus L.成熟雄体香囊中的干燥分泌物。麝香在中药中的应用十分广泛，目前市场上以麝香为主料配成的中成药据统计已达200多种。由于麝香需求量日增，我国从50年代未就先后在四川、安徽、陕西等地建立了养麝香场，但这还远远不能满足需要。[1]为解决供需予盾，最近，国家中药制药工程技术研究中心成功地合成了含麝香酮等成分的合成麝香-人工麝香。“人工麝香”这项生物技术产品的后期工作-药理研究及临床应用则是极为重要的一项工作。
最近，大量的研究提示炎症反应在椎间盘突出后的神经根病发病过程中起重要使用。机体对退变或突出椎间盘组织产生的自身免疫反应可能是产生炎症进而引起根性疼痛和/或颈腰痛的原因之一。本研究的目的是想证明退变椎间盘中免疫球蛋白含量是否升高，然后用人工麝香饲养这些动物，观察人工麝香有否降低退变椎间盘中免疫球蛋白含量的作用。
, 百拇医药
材料与方法
1 动物及分组 实验选用15只6～10月龄新西兰兔，体重2.5～3.0kg，雌雄不拘。将动物分为3组，分别为颈椎间盘退变组、颈椎间盘退变加人工麝香饲养组及正常对照组，每组5只动物。
2 颈椎间盘退变的造模方法 将实验动物颈后部剪毛及清洁后，按100mg/kg体重行氯氨酮肌注麻醉，麻醉满意后，俯卧位固定于手术台上，消毒铺巾，手术切口从环枕关节至第二胸椎棘突处，长约7～8cm。切开皮肤后，钝性分离，直至充分暴露棘突，将脊柱两侧附着于棘突、椎板及小关节的肌肉全部分离开，然后依次切除C1-7的棘上及棘间韧带。术后放置笼中，让其自动活动。正常对照组不作任何处理。颈椎间盘退变加人工麝香饲养组动物在处死前喂以人工麝香2周，剂量按每天每公斤体重20毫克给药。术后8月时，先行动物颈椎X线正侧位摄片，然后将动物处死，小心取出动物整个颈椎，C4-5和C5-6椎间盘作病理学检查，其余椎间盘收集在一起测定IgG及IgM含量。由于手术动物颈后部软组织结构被破坏，导致动物颈部力学失衡，颈椎间盘退变非常严重，X线正、侧位片及病理学上已呈颈椎病征象。
, 百拇医药
3 IgG及IgM测定方法 用单向环状免疫扩散技术。
结果
三组动物椎间盘中IgG、IgM含量测定结果见表1，三组动物颈椎间盘中IgG、IgM含量之间显著性检验(t检验)结果见表2，由表1及表2所见，三组动物椎间盘中IgM含量无变化，统计学上无差异，说明椎间盘退变过程与IgM无关，颈椎间盘退变之后，椎间盘中IgG含量显著升高，统计学上有显著性差异；经人工麝香饲养的退变颈椎间盘动物其颈椎间盘中IgG含量明显下降，说明人工麝香具有显著降低退变颈椎间盘中IgG含量的作用。
表1 三组动物颈椎盘中IgG及IgM含 (
±s) 组 别
n
IgG(IU/gm)
, http://www.100md.com
IgM(IU/gm)
颈椎间盘退变组(a)
5
16.47±0.88
13.36±0.53
人工麝香饲养组(b)
5
13.02±0.69
12.24±1.44
正常对照组(c)
5
12.68±1.17
, http://www.100md.com
13.13±2.25
表2 三组动物颈椎间盘中IgG、IgM含量之间显著性检验(t检验)P值 组比
IgG
IgM
a∶b
P<0.01
P>0.05
a∶c
P<0.01
P>0.05
b∶c
P>0.05
, 百拇医药
P>0.05
讨论
Pennington等[2]用ELISA方法首先证明，正常狗的髓核中存在IgG，但未见IgM的存在，作者分析，IgG作为正常椎间盘中的成分而存在，一旦髓核突出或漏逸到纤维环外，则IgG可能激活补体级联反应而引起炎症反应。Spllliopoulou等[3]用比浊法对突出的人椎间盘进行了免疫球蛋白定量分析，结果表明IgM呈现有意义的升高。Habtemariam等[4]用免疫组化方法对腰椎间盘中的IgG、IgM进行了定位，结果表明，在突出的椎间盘中，56%显示IgM沉积，35%显示IgG沉积，正常对照组未见免疫球蛋白沉积。到目前为止，还没有实验研究退变的但未突出的椎间盘中免疫球蛋白含量。我们首次测定了退变颈椎间盘中IgG、IgM含量。我们的研究结果表明，退变颈椎间盘中IgG含量明显升高，但IgM含量与正常对照组相比则无变化，说明椎间盘退变与IgM无关。退变椎间盘中升高的IgG可能是与椎间盘组织自身抗原反应的自身抗体。不少的组织学研究表明，退变椎间盘中有新血管的侵入，随着退变程度加重，血管侵入增多。[5]侵入退变椎间盘组织的血管正好识别椎间盘抗原物质，引起退变椎间盘自身免疫反应。
, http://www.100md.com
麝香水溶性蛋白对体液免疫和细胞免疫有增强作用。实验观察到麝香对腹腔注射绵羊红细胞免疫小鼠产生抗体IgM无抑制使用，似有增强使用，但其抗炎使用是通过增强肾上腺功能而起使用，切除动物肾上腺则抗炎使用消失。[6]我们的研究表明人工麝香具有显著降低退变颈椎间盘中IgG的使用，其作用原理可能通过免疫调节作用和增强肾上腺功能，抑制血管通透性和抑制白细胞游出作用有关。人工麝香对免疫功能的详细作用还有待进一步深入研究。
参考文献
[1]郑希林.麝香药理及代用品的研究近况.山东中医杂志，1991，10(2)：42
[2]Pennington JB,Mccarron RF,laros GS.Identification IgG of in the canine in tervertebral disc.Spine,1988,13:909
, 百拇医药
[3]Spilliopoulou I,Korovessis P,Konstantinoi D,et al.IgG and IgM concentra tion in the prolapsed human intervertebral disc and sciatica etiology.Spine,1994 ,19:1320
[4]Habtemariam A,Gronblad M,Virri J,et al.Immunocytochemical localization of immunoglobulins in disc herniations.Spine,1996,21:1864
[5]Virri J,Gronblad M,Savikko J, et al.Prevalence,morphology,and topograph y of blood vessels in herniated disc tissue.Spine,21:1856
[6]黄正良.麝香的药理作用及临床应用研究.中成药研究，1987，(5)：23
(收稿：1998-3-16), http://www.100md.com
单位：彭宝淦 贾连顺(第二军医大学附属长征医院骨科 200003 上海)；施杞(上海中医药大学)
关键词：人工麝香；退变；颈椎间盘；免疫球蛋白
中国中医骨伤科990103 摘要 方法：实验选用15只新西兰兔，分为3组，每组5只，分别为颈椎间盘退变组、颈椎间盘退变加人工麝香饲养组和正常对照组。通过切除动物颈棘上及棘间韧带和分离颈椎旁两侧肌肉，造成颈椎力学上的失衡而诱导了兔的颈椎间盘退行性变化。在术后8月时，杀死动物，取动物颈椎间盘组织，用单向环状免疫扩散技术测定其中IgG及IgM含量。结果：退变颈椎间盘中IgG含量明显升高；人工麝香具有显著降低退变颈椎间盘中IgG的作用，IgM与颈椎间盘退变无关。
Synthetic Moschus' Role to Imminoglobulin Content in
, 百拇医药
Degenerated Cervic al discs
Peng Baogan,Shi Qi,Jia Lianshun
Changzheng Hospital,Second Military Medical University,Shanghai,200003
ABSTRACT Methods:In this study,15 white Newzealand rabbit s were used and seperated into three groups:degenerated cervical disc group,dege nerated cervical disc group with Synthetic Moschus,and control group,and each gr oup has five rabbits.The experimental model of degenerated cervical disc in the rabbit was established by resection of cervical supraspinous and interspinous li gaments and detachment of posterior paravertebral muscles from the cervical vert abrae.Rabbits were killed eight months after operation.The cervical disc tissues in all three groups were assayed to detect IgG and IgM content by simple agar d iffusion method.Results:The results were showed that the IgG content in degenera ted cervical discs were obviously higher than those of control discs;synthetic M oschus could obviously decrease IgG content in degenerated cervical disc;IgM wer e not related to disc degeneration.
, 百拇医药
KEY WORDS Synthetic mouschus Degeneration Cervical disc Immunoglobulin
麝香系鹿科动物林麝Moschus berezovskii F1erov、马麝M.sifanicus przewalski或原麝M.nosc hiferus L.成熟雄体香囊中的干燥分泌物。麝香在中药中的应用十分广泛，目前市场上以麝香为主料配成的中成药据统计已达200多种。由于麝香需求量日增，我国从50年代未就先后在四川、安徽、陕西等地建立了养麝香场，但这还远远不能满足需要。[1]为解决供需予盾，最近，国家中药制药工程技术研究中心成功地合成了含麝香酮等成分的合成麝香-人工麝香。“人工麝香”这项生物技术产品的后期工作-药理研究及临床应用则是极为重要的一项工作。
最近，大量的研究提示炎症反应在椎间盘突出后的神经根病发病过程中起重要使用。机体对退变或突出椎间盘组织产生的自身免疫反应可能是产生炎症进而引起根性疼痛和/或颈腰痛的原因之一。本研究的目的是想证明退变椎间盘中免疫球蛋白含量是否升高，然后用人工麝香饲养这些动物，观察人工麝香有否降低退变椎间盘中免疫球蛋白含量的作用。
, 百拇医药
材料与方法
1 动物及分组 实验选用15只6～10月龄新西兰兔，体重2.5～3.0kg，雌雄不拘。将动物分为3组，分别为颈椎间盘退变组、颈椎间盘退变加人工麝香饲养组及正常对照组，每组5只动物。
2 颈椎间盘退变的造模方法 将实验动物颈后部剪毛及清洁后，按100mg/kg体重行氯氨酮肌注麻醉，麻醉满意后，俯卧位固定于手术台上，消毒铺巾，手术切口从环枕关节至第二胸椎棘突处，长约7～8cm。切开皮肤后，钝性分离，直至充分暴露棘突，将脊柱两侧附着于棘突、椎板及小关节的肌肉全部分离开，然后依次切除C1-7的棘上及棘间韧带。术后放置笼中，让其自动活动。正常对照组不作任何处理。颈椎间盘退变加人工麝香饲养组动物在处死前喂以人工麝香2周，剂量按每天每公斤体重20毫克给药。术后8月时，先行动物颈椎X线正侧位摄片，然后将动物处死，小心取出动物整个颈椎，C4-5和C5-6椎间盘作病理学检查，其余椎间盘收集在一起测定IgG及IgM含量。由于手术动物颈后部软组织结构被破坏，导致动物颈部力学失衡，颈椎间盘退变非常严重，X线正、侧位片及病理学上已呈颈椎病征象。
, 百拇医药
3 IgG及IgM测定方法 用单向环状免疫扩散技术。
结果
三组动物椎间盘中IgG、IgM含量测定结果见表1，三组动物颈椎间盘中IgG、IgM含量之间显著性检验(t检验)结果见表2，由表1及表2所见，三组动物椎间盘中IgM含量无变化，统计学上无差异，说明椎间盘退变过程与IgM无关，颈椎间盘退变之后，椎间盘中IgG含量显著升高，统计学上有显著性差异；经人工麝香饲养的退变颈椎间盘动物其颈椎间盘中IgG含量明显下降，说明人工麝香具有显著降低退变颈椎间盘中IgG含量的作用。
表1 三组动物颈椎盘中IgG及IgM含 (
±s) 组 别n
IgG(IU/gm)
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IgM(IU/gm)
颈椎间盘退变组(a)
5
16.47±0.88
13.36±0.53
人工麝香饲养组(b)
5
13.02±0.69
12.24±1.44
正常对照组(c)
5
12.68±1.17
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13.13±2.25
表2 三组动物颈椎间盘中IgG、IgM含量之间显著性检验(t检验)P值 组比
IgG
IgM
a∶b
P<0.01
P>0.05
a∶c
P<0.01
P>0.05
b∶c
P>0.05
, 百拇医药
P>0.05
讨论
Pennington等[2]用ELISA方法首先证明，正常狗的髓核中存在IgG，但未见IgM的存在，作者分析，IgG作为正常椎间盘中的成分而存在，一旦髓核突出或漏逸到纤维环外，则IgG可能激活补体级联反应而引起炎症反应。Spllliopoulou等[3]用比浊法对突出的人椎间盘进行了免疫球蛋白定量分析，结果表明IgM呈现有意义的升高。Habtemariam等[4]用免疫组化方法对腰椎间盘中的IgG、IgM进行了定位，结果表明，在突出的椎间盘中，56%显示IgM沉积，35%显示IgG沉积，正常对照组未见免疫球蛋白沉积。到目前为止，还没有实验研究退变的但未突出的椎间盘中免疫球蛋白含量。我们首次测定了退变颈椎间盘中IgG、IgM含量。我们的研究结果表明，退变颈椎间盘中IgG含量明显升高，但IgM含量与正常对照组相比则无变化，说明椎间盘退变与IgM无关。退变椎间盘中升高的IgG可能是与椎间盘组织自身抗原反应的自身抗体。不少的组织学研究表明，退变椎间盘中有新血管的侵入，随着退变程度加重，血管侵入增多。[5]侵入退变椎间盘组织的血管正好识别椎间盘抗原物质，引起退变椎间盘自身免疫反应。
, http://www.100md.com
麝香水溶性蛋白对体液免疫和细胞免疫有增强作用。实验观察到麝香对腹腔注射绵羊红细胞免疫小鼠产生抗体IgM无抑制使用，似有增强使用，但其抗炎使用是通过增强肾上腺功能而起使用，切除动物肾上腺则抗炎使用消失。[6]我们的研究表明人工麝香具有显著降低退变颈椎间盘中IgG的使用，其作用原理可能通过免疫调节作用和增强肾上腺功能，抑制血管通透性和抑制白细胞游出作用有关。人工麝香对免疫功能的详细作用还有待进一步深入研究。
参考文献
[1]郑希林.麝香药理及代用品的研究近况.山东中医杂志，1991，10(2)：42
[2]Pennington JB,Mccarron RF,laros GS.Identification IgG of in the canine in tervertebral disc.Spine,1988,13:909
, 百拇医药
[3]Spilliopoulou I,Korovessis P,Konstantinoi D,et al.IgG and IgM concentra tion in the prolapsed human intervertebral disc and sciatica etiology.Spine,1994 ,19:1320
[4]Habtemariam A,Gronblad M,Virri J,et al.Immunocytochemical localization of immunoglobulins in disc herniations.Spine,1996,21:1864
[5]Virri J,Gronblad M,Savikko J, et al.Prevalence,morphology,and topograph y of blood vessels in herniated disc tissue.Spine,21:1856
[6]黄正良.麝香的药理作用及临床应用研究.中成药研究，1987，(5)：23
(收稿：1998-3-16), http://www.100md.com