丹参对急性坏死性胰腺炎大鼠脂质炎症介质的影响
作者：裘正军 花天放 夏 强 陈雨强 刘小弟 李宝华 钟福全
单位：200080 上海市第一人民医院
关键词：
上海医学990116 胰腺微循环损伤引起的胰腺缺血可能在急性坏死性胰腺炎(ANP)发病机制中起着重要作用，而脂质炎症介质血栓素A2具有明显的缩血管和促进血小板聚集的作用，参与ANP胰腺微循环损伤，本研究应用活血化瘀的中药丹参治疗急性坏死性胰腺炎大鼠，研究其对脂质炎症介质的作用。
材料与方法
一、动物及分组
雄性SD大鼠76只，体重为250±30g，随机分成四组：(1) 丹参治疗组(n=24)：ANP模型制成30分钟后，每日给予丹参(上海第一制药厂)2g/kg体重+5%葡萄糖溶液15ml稀释，按3ml/h电脑输液泵静脉输注，然后用乳酸林格液3ml/h电脑输液泵静脉维持；(2) 静脉维持乳酸林格液组(ANP对照组,n=24)：ANP模型制成30分钟后，给予乳酸林格氏液3ml/h电脑输液泵静脉维持；(3) 皮下注射乳酸林格液组，(n=10)：ANP模型制成30分钟后，每日皮下注射乳酸林格液10ml，观察72小时死亡率；(4) 假手术组(n=18)。
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二、动物模型
SD大鼠用1%戊巴比妥钠腹腔麻醉，上腹正中切口，按Schmidt方法[1]，于十二指肠对系膜缘穿刺插入导管致胆胰管，肝门部胆管用小血管夹夹闭，用微量注射泵推注5%的牛磺胆酸钠(Sigma,美国)溶液0.5ml/10分钟，拔除导管，缝合十二指肠穿刺口。颈内静脉插管建立静脉输液系统。假手术大鼠剖腹探查后缝合腹壁切口，结扎一侧颈内静脉。
三、观察指标
丹参组、对照组和假手术组分别于模型制成后6、24和72小时心脏穿刺采血，用放免法测定TXB2和6-keto-PGF1α(苏州医学院血栓和止血研究所)，检测血淀粉酶，记录腹水量，胰腺和胰周大体变化，取整胰用10%福尔马林固定，常规石蜡切片和HE染色，观察胰腺组织学改变。
四、统计学处理
, 百拇医药
数据以
±s表达，用Student-t检验作统计分析，显著性水平定为P≤0.05。
结果
本研究采用的ANP大鼠模型72小时自然死亡率为40%，丹参组和对照组72小时内均无死亡。
一、脂质炎症介质的变化(见表1)
二、血淀粉酶，腹水量，胰腺和胰周大体变化
各组的血淀粉酶结果见表2；在ANP模型制成后6小时时两组大鼠有大量腹水(丹参组8.3±2.7g，对照组9.5±2.3g)，但无统计学差异，24小时腹水明显减少，而以丹参组为明显(丹参组0.93±0.09g，对照组1.36±0.29g，P<0.01)，到72小时时两组均无腹水；胰腺和胰周变化丹参组和对照组相似，在ANP模型制成后6小时时胰腺明显肿胀，胰包膜下大量积液，大网膜、肠系膜及腹膜后有点状散在脂肪坏死，24小时时胰腺肿胀，可见斑片状胰腺坏死，脂肪坏死融合成片状，72小时更明显。
, 百拇医药
表1 血TXB2和6-keto-PGF1α变化 组 别
TXB2(pg/ml)
6-keto-PGF1α(pg/ml)
6小时
24小时
72小时
6小时
24小时
72小时
丹参组(n=8)
385.3±107.8*△
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134.9±51.3*
89.9±36.8
185.1±47.6△
93.0±27.7
40.0±19.7
对照组(n=8)
557.6±150.2△
212.8±60.7△
97.5±42.8
183.6±50.5△
, 百拇医药
90.36±23.4
40.5±23.0
假手术组(n=6)
186.3±45.3
90.4±38.7
87.6±41.5
95.7±25.4
68.9±22.2
50.5±34.5
*与对照组比较P<0.02,△与假手术组比较P<0.001 表2 血淀粉酶的变化 组别
血淀粉酶(U/L)
, 百拇医药
6小时
24小时
72小时
丹参组(n=8)
2809.0±306.7△
2146.8±223.0*△
1162.0±162.8*△
对照组
(n=8)
2972.7±275.4△
2589.5±275.8△
, http://www.100md.com
1556.4±239.1△
假手术组
(n=6)
794.6±161.7
865.5±156.3
812.2±152.5
*与对照组比较P<0.01,△与假手术组比较P<0.001
三、胰腺病理变化
在ANP模型制成后6小时时丹参组和对照组胰腺均有明显水肿、炎症细胞浸润、间质出血和腺泡坏死，随时间的延长胰腺腺泡坏死有加重趋势，以对照组为明显。讨论
, http://www.100md.com 胰腺微循环障碍发生在ANP早期，导致胰腺缺血，认为是胰腺坏死的始动因素和病变加重的原因[2]。而脂质炎症介质的代谢紊乱并存于本病的发生和发展，血栓素A2具有收缩血管和促进血小板聚集的作用，在胆源性胰腺炎动物模型中血栓素A2的稳定代谢产物TXB2明显升高，可能是引起胰腺微循环障碍的重要炎症介质之一[3]。本实验发现在ANP模型制成后6小时时TXB2在大鼠血中明显升高，说明ANP早期存在脂质炎症介质的代谢紊乱。
本实验在ANP诱发后30分钟给予丹参和大剂量补液治疗，此时胰腺损伤刚开始，胰腺微循环灌注不足开始恶化[4]，给予针对改善胰腺微循环的治疗理论上说是有效的；中药丹参具有扩张收缩的微血管，加速血流量，抗血小板聚集和抑制血栓素A2的产生[5]，本实验发现丹参组在ANP模型制成后6小时大鼠血TXB2水平明显低于对照组，24小时降到正常，并且血淀粉酶下降和腹水吸收较对照组快，胰腺腺泡坏死也较轻，说明丹参是通过调节ANP大鼠脂质炎症介质的代谢，减少血栓素A2的产生和扩张胰腺微血管，改善胰腺的血供，减轻了胰腺损伤，从而起到治疗作用。
, 百拇医药
本实验还发现早期大剂量补液可减少ANP大鼠早期死亡率。这一结果也支持临床上急性重症胰腺炎早期扩容的有效性[4]，大剂量补液可使血液稀释，降低血液的粘滞度，保证重要器管的灌注，减少胰外并发症，而提高ANP的早期生存率。本模型的建立有助于对ANP药物治疗效果的合理评价和远期并发症预防的研究。
参考文献
[1] Schmidt J, Rattner DW, Lewnndrowski K, et al. A better model of acute pancreatitis for evaluating therapy. Ann Surg, 1992,215:44.
[2] Kerner T, Vollmar B, Menger MD, et al. Determinants of Pancreatic Microcirculation in Acute Pancreatitis in Rats.J Surg Res, 1996,62:165.
, http://www.100md.com
[3] Van Ooijew B, Kort WJ, Tinga CJ, et al. Significance of Thromboxane A2 and Prostaglandin I2 in Acute Necrotizing Pancreatitis in Rats. Dig Dis Sci, 1990,35:1078.
[4] Klar E, Foitzik T, Buhr H, et al. Isovolemic hemodilution with dextran 60 as treatment of pancreatic ischemia in acute pancreatitis-clinical practicability of an experimebntal cocept. Ann Surg, 1993,217:369.
[5] 杨春欣.丹参素的药理研究进展.中国药理学报，1997，13：298.
(收稿：1998-07-08 修回：1998-09-20), 百拇医药
单位：200080 上海市第一人民医院
关键词：
上海医学990116 胰腺微循环损伤引起的胰腺缺血可能在急性坏死性胰腺炎(ANP)发病机制中起着重要作用，而脂质炎症介质血栓素A2具有明显的缩血管和促进血小板聚集的作用，参与ANP胰腺微循环损伤，本研究应用活血化瘀的中药丹参治疗急性坏死性胰腺炎大鼠，研究其对脂质炎症介质的作用。
材料与方法
一、动物及分组
雄性SD大鼠76只，体重为250±30g，随机分成四组：(1) 丹参治疗组(n=24)：ANP模型制成30分钟后，每日给予丹参(上海第一制药厂)2g/kg体重+5%葡萄糖溶液15ml稀释，按3ml/h电脑输液泵静脉输注，然后用乳酸林格液3ml/h电脑输液泵静脉维持；(2) 静脉维持乳酸林格液组(ANP对照组,n=24)：ANP模型制成30分钟后，给予乳酸林格氏液3ml/h电脑输液泵静脉维持；(3) 皮下注射乳酸林格液组，(n=10)：ANP模型制成30分钟后，每日皮下注射乳酸林格液10ml，观察72小时死亡率；(4) 假手术组(n=18)。
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二、动物模型
SD大鼠用1%戊巴比妥钠腹腔麻醉，上腹正中切口，按Schmidt方法[1]，于十二指肠对系膜缘穿刺插入导管致胆胰管，肝门部胆管用小血管夹夹闭，用微量注射泵推注5%的牛磺胆酸钠(Sigma,美国)溶液0.5ml/10分钟，拔除导管，缝合十二指肠穿刺口。颈内静脉插管建立静脉输液系统。假手术大鼠剖腹探查后缝合腹壁切口，结扎一侧颈内静脉。
三、观察指标
丹参组、对照组和假手术组分别于模型制成后6、24和72小时心脏穿刺采血，用放免法测定TXB2和6-keto-PGF1α(苏州医学院血栓和止血研究所)，检测血淀粉酶，记录腹水量，胰腺和胰周大体变化，取整胰用10%福尔马林固定，常规石蜡切片和HE染色，观察胰腺组织学改变。
四、统计学处理
, 百拇医药
数据以
±s表达，用Student-t检验作统计分析，显著性水平定为P≤0.05。结果
本研究采用的ANP大鼠模型72小时自然死亡率为40%，丹参组和对照组72小时内均无死亡。
一、脂质炎症介质的变化(见表1)
二、血淀粉酶，腹水量，胰腺和胰周大体变化
各组的血淀粉酶结果见表2；在ANP模型制成后6小时时两组大鼠有大量腹水(丹参组8.3±2.7g，对照组9.5±2.3g)，但无统计学差异，24小时腹水明显减少，而以丹参组为明显(丹参组0.93±0.09g，对照组1.36±0.29g，P<0.01)，到72小时时两组均无腹水；胰腺和胰周变化丹参组和对照组相似，在ANP模型制成后6小时时胰腺明显肿胀，胰包膜下大量积液，大网膜、肠系膜及腹膜后有点状散在脂肪坏死，24小时时胰腺肿胀，可见斑片状胰腺坏死，脂肪坏死融合成片状，72小时更明显。
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表1 血TXB2和6-keto-PGF1α变化 组 别
TXB2(pg/ml)
6-keto-PGF1α(pg/ml)
6小时
24小时
72小时
6小时
24小时
72小时
丹参组(n=8)
385.3±107.8*△
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134.9±51.3*
89.9±36.8
185.1±47.6△
93.0±27.7
40.0±19.7
对照组(n=8)
557.6±150.2△
212.8±60.7△
97.5±42.8
183.6±50.5△
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90.36±23.4
40.5±23.0
假手术组(n=6)
186.3±45.3
90.4±38.7
87.6±41.5
95.7±25.4
68.9±22.2
50.5±34.5
*与对照组比较P<0.02,△与假手术组比较P<0.001 表2 血淀粉酶的变化 组别
血淀粉酶(U/L)
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6小时
24小时
72小时
丹参组(n=8)
2809.0±306.7△
2146.8±223.0*△
1162.0±162.8*△
对照组
(n=8)
2972.7±275.4△
2589.5±275.8△
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1556.4±239.1△
假手术组
(n=6)
794.6±161.7
865.5±156.3
812.2±152.5
*与对照组比较P<0.01,△与假手术组比较P<0.001
三、胰腺病理变化
在ANP模型制成后6小时时丹参组和对照组胰腺均有明显水肿、炎症细胞浸润、间质出血和腺泡坏死，随时间的延长胰腺腺泡坏死有加重趋势，以对照组为明显。讨论
, http://www.100md.com 胰腺微循环障碍发生在ANP早期，导致胰腺缺血，认为是胰腺坏死的始动因素和病变加重的原因[2]。而脂质炎症介质的代谢紊乱并存于本病的发生和发展，血栓素A2具有收缩血管和促进血小板聚集的作用，在胆源性胰腺炎动物模型中血栓素A2的稳定代谢产物TXB2明显升高，可能是引起胰腺微循环障碍的重要炎症介质之一[3]。本实验发现在ANP模型制成后6小时时TXB2在大鼠血中明显升高，说明ANP早期存在脂质炎症介质的代谢紊乱。
本实验在ANP诱发后30分钟给予丹参和大剂量补液治疗，此时胰腺损伤刚开始，胰腺微循环灌注不足开始恶化[4]，给予针对改善胰腺微循环的治疗理论上说是有效的；中药丹参具有扩张收缩的微血管，加速血流量，抗血小板聚集和抑制血栓素A2的产生[5]，本实验发现丹参组在ANP模型制成后6小时大鼠血TXB2水平明显低于对照组，24小时降到正常，并且血淀粉酶下降和腹水吸收较对照组快，胰腺腺泡坏死也较轻，说明丹参是通过调节ANP大鼠脂质炎症介质的代谢，减少血栓素A2的产生和扩张胰腺微血管，改善胰腺的血供，减轻了胰腺损伤，从而起到治疗作用。
, 百拇医药
本实验还发现早期大剂量补液可减少ANP大鼠早期死亡率。这一结果也支持临床上急性重症胰腺炎早期扩容的有效性[4]，大剂量补液可使血液稀释，降低血液的粘滞度，保证重要器管的灌注，减少胰外并发症，而提高ANP的早期生存率。本模型的建立有助于对ANP药物治疗效果的合理评价和远期并发症预防的研究。
参考文献
[1] Schmidt J, Rattner DW, Lewnndrowski K, et al. A better model of acute pancreatitis for evaluating therapy. Ann Surg, 1992,215:44.
[2] Kerner T, Vollmar B, Menger MD, et al. Determinants of Pancreatic Microcirculation in Acute Pancreatitis in Rats.J Surg Res, 1996,62:165.
, http://www.100md.com
[3] Van Ooijew B, Kort WJ, Tinga CJ, et al. Significance of Thromboxane A2 and Prostaglandin I2 in Acute Necrotizing Pancreatitis in Rats. Dig Dis Sci, 1990,35:1078.
[4] Klar E, Foitzik T, Buhr H, et al. Isovolemic hemodilution with dextran 60 as treatment of pancreatic ischemia in acute pancreatitis-clinical practicability of an experimebntal cocept. Ann Surg, 1993,217:369.
[5] 杨春欣.丹参素的药理研究进展.中国药理学报，1997，13：298.
(收稿：1998-07-08 修回：1998-09-20), 百拇医药