吗啡对小鼠免疫功能的影响
作者：雷志明 魏雪涛 张坚 宁殿峰 刘开军 薛彬
单位：北京医科大学卫生毒理学教研室(100083)
关键词：
卫生毒理学杂志990112 近年来的大量研究表明，阿片类药物吗啡和海洛因等对机体的免疫功能有明显的损害[1，2]，因此机体很容易受到细菌和病毒等的感染。为了研究如何改善阿片类药物依赖者的免疫功能，我们观察了皮下注射不同剂量的吗啡对小鼠免疫功能的影响，试图建立吗啡依赖小鼠的动物模型。
材料与方法
1.动物：昆明种小鼠，雌性，6～8周龄，22～25g。LACA雌性小鼠，6～8周龄，18～22g。北京医科大学实验动物科学部提供(合格证号01-3049)。
, 百拇医药 2.试剂：琼脂糖(Sigma);SRBC(北医大实验动物科学部)；Hanks液、SA液和补体(自制)：盐酸吗啡(北医大药物依赖研究所提供)。
3.观察指标：抗体形成细胞试验(IgM-PFC/脾)、迟发型变态反应(DTH)、采用单只动物多项免疫功能检测法测定[3]，统计方法用t检验。
4.实验设计：实验分为6天和14天两种不同给药天数的设计，即两个不同的剂量设计。各实验均设对照组。
(1) 6天实验：小鼠皮下注射吗啡10，20，30，40，50，60mg/kg各1天，每个剂量2次/日(8：00am,16:00pm)，共6天。
(2) 14天实验：小鼠皮下注射吗啡10，20，30，40mg/kg各1天，60，80，100，120，140mg/kg各2天，2次/日(8：00am,16:00pm)，共14天。
, 百拇医药
结 果
1.皮下注射吗啡对小鼠体重和免疫器官重量的影响：
(1) 昆明种小鼠皮下注射吗啡6天，小鼠的脾脏未见明显变化，实验组小鼠胸腺与对照组比明显抑制，抑制率为33%。昆明种小鼠皮下注射吗啡14天，小鼠的体重、脾脏和胸腺明显抑制，与对照组比均有显著性差异(表1)。
表1 皮下注射吗啡6天和14天对小鼠体重、脾脏和胸腺重量的影响(
±s) 组别
n
体重增长
(g)
脾脏
, 百拇医药
胸腺
绝对重(mg)
相对重
绝对重(mg)
相对重
6天
吗啡
5
1.9±1.3
130±20
4.9±0.8
83±31
3.2±1.1*
, 百拇医药
对照
7
1.0±1.0
140±30
5.6±1.2
110±30
4.6±0.7
14天
吗啡
7
1.8±1.9*
120±20*
, 百拇医药
4.5±0.4
40±7**
1.7±0.3**
对照
5
6.0±0.9
160±30
5.3±1.0
110±20
3.7±0.8
与对照组相比*P<0.05 **P<0.01 相对重=脏器重(mg)/体重(g)
, 百拇医药
(2) LACA小鼠皮下注射吗啡14天，小鼠的脾脏重和胸腺重与对照组比均有明显抑制，其相对重抑制率分别为20%和55%(表2)。
表2 吗啡对LACA小鼠的脾脏和胸腺重量的影响(±s) 组别
n
脾脏
胸腺
绝对重(mg)
相对重
绝对重(mg)
相对重
吗啡
, 百拇医药
10
93±18**
4.5±0.77*
38±19**
2.0±0.69**
对照
10
160±38
5.6±1.3
122±31
4.5±0.8
, 百拇医药
与对照组比*P<0.05 **P<0.01
2.皮下注射吗啡对小鼠DTH和IgM-PFC/脾的影响：
(1) 昆明种小鼠皮下注射吗啡6天，小鼠的DTH与对照组比明显抑制，抑制率为40%。实验组小鼠IgM-PFC/脾与对照组比未见明显变化。小鼠皮下注射吗啡14天后，小鼠的DTH与对照组比较抑制程度较注射6天组更明显，其抑制率为50%；小鼠IgM-PFC/脾与对照组比较仍未见明显变化(表3)。
表3 皮下注射吗啡6天和14天对小鼠DTH和IgM-PFC/脾的影响 组别
n
DTH(mm)
(±s)
, 百拇医药
IgM-PFC/脾
(
s)
6天
对照
7
0.65±0.20
154,8221.29
吗啡
5
, http://www.100md.com
0.39±0.09**
112,2011.46
14天
对照
5
0.70±0.20
128,2641.42
吗啡
7
0.35±0.08**
, 百拇医药
159,4951.30
与对照组比**P<0.01
(2) LACA 小鼠皮下注射吗啡14天，小鼠DTH和IgM-PFC/脾与对照组比均明显抑制，抑制率分别为37%和75%，结果表明，吗啡对LACA小鼠的细胞免疫和体液免疫均有明显的抑制作用(表4)。
表4 吗啡对LACA小鼠DTH、IgM-PFC/脾的影响 组别
n
DTH(mm)
(±s)
, 百拇医药
IgM-PFC/脾
(s)
吗啡
10
0.39±0.16*
31,0611.86**
对照
10
0.62±0.25
, 百拇医药
122,6491.56
与对照组比*P<0.05 **P<0.01
讨论
本研究的结果表明，昆明种小鼠皮下注射吗啡6天和14天后，细胞免疫功能受到明显的抑制，而体液免疫功能未见明显变化。LACA小鼠皮下注射吗啡14天后，小鼠的免疫器官、细胞免疫和体液免疫均受到不同程度的抑制。许多研究证明，吗啡对小鼠的细胞免疫、体液免疫、免疫因子及巨噬细胞等均有抑制作用[4～6]，本研究选用的两个鼠种的细胞免疫检测结果基本相同，但是体液免疫出现了不同的结果；根据给药剂量(或时间)与抑制程度的关系，说明吗啡对小鼠中枢免疫器官的抑制作用比外周免疫器官敏感，对细胞免疫功能的抑制比体液免疫更敏感；并提示：吗啡对小鼠免疫功能的影响可能存在着种属差异。
, http://www.100md.com
参考文献
1.卞如廉，严岚.药物滥用对免疫功能的损伤.中国药物依赖性通报，1993，2(4)：227～229.
2.刘湛等.静脉注射海洛因成瘾者免疫功能状态的研究.中国药物依赖性通报，1993，2(3)：194～197.
3.雷志明，等.单只动物多项免疫功能检测研究.北京医科大学学报，1991，23(5)：399～401.
4.Bryant HU,Roudebush RE.Suppressive effects of morphine pellet implants on in vivo parameters of immune function.J Pharmacol Exp Ther，1990,255:410～414.
5.陆正武，等.吗啡的免疫抑制作用及机制研究.中国药物依赖性通报，1993；2(3)：164～167.
6.陆正武，林志彬.吗啡依赖小鼠免疫功能的变化.中国药物依赖性通报，1994，3(1)：4.
(修回日期 1998年5月), 百拇医药
单位：北京医科大学卫生毒理学教研室(100083)
关键词：
卫生毒理学杂志990112 近年来的大量研究表明，阿片类药物吗啡和海洛因等对机体的免疫功能有明显的损害[1，2]，因此机体很容易受到细菌和病毒等的感染。为了研究如何改善阿片类药物依赖者的免疫功能，我们观察了皮下注射不同剂量的吗啡对小鼠免疫功能的影响，试图建立吗啡依赖小鼠的动物模型。
材料与方法
1.动物：昆明种小鼠，雌性，6～8周龄，22～25g。LACA雌性小鼠，6～8周龄，18～22g。北京医科大学实验动物科学部提供(合格证号01-3049)。
, 百拇医药 2.试剂：琼脂糖(Sigma);SRBC(北医大实验动物科学部)；Hanks液、SA液和补体(自制)：盐酸吗啡(北医大药物依赖研究所提供)。
3.观察指标：抗体形成细胞试验(IgM-PFC/脾)、迟发型变态反应(DTH)、采用单只动物多项免疫功能检测法测定[3]，统计方法用t检验。
4.实验设计：实验分为6天和14天两种不同给药天数的设计，即两个不同的剂量设计。各实验均设对照组。
(1) 6天实验：小鼠皮下注射吗啡10，20，30，40，50，60mg/kg各1天，每个剂量2次/日(8：00am,16:00pm)，共6天。
(2) 14天实验：小鼠皮下注射吗啡10，20，30，40mg/kg各1天，60，80，100，120，140mg/kg各2天，2次/日(8：00am,16:00pm)，共14天。
, 百拇医药
结 果
1.皮下注射吗啡对小鼠体重和免疫器官重量的影响：
(1) 昆明种小鼠皮下注射吗啡6天，小鼠的脾脏未见明显变化，实验组小鼠胸腺与对照组比明显抑制，抑制率为33%。昆明种小鼠皮下注射吗啡14天，小鼠的体重、脾脏和胸腺明显抑制，与对照组比均有显著性差异(表1)。
表1 皮下注射吗啡6天和14天对小鼠体重、脾脏和胸腺重量的影响(
±s) 组别n
体重增长
(g)
脾脏
, 百拇医药
胸腺
绝对重(mg)
相对重
绝对重(mg)
相对重
6天
吗啡
5
1.9±1.3
130±20
4.9±0.8
83±31
3.2±1.1*
, 百拇医药
对照
7
1.0±1.0
140±30
5.6±1.2
110±30
4.6±0.7
14天
吗啡
7
1.8±1.9*
120±20*
, 百拇医药
4.5±0.4
40±7**
1.7±0.3**
对照
5
6.0±0.9
160±30
5.3±1.0
110±20
3.7±0.8
与对照组相比*P<0.05 **P<0.01 相对重=脏器重(mg)/体重(g)
, 百拇医药
(2) LACA小鼠皮下注射吗啡14天，小鼠的脾脏重和胸腺重与对照组比均有明显抑制，其相对重抑制率分别为20%和55%(表2)。
表2 吗啡对LACA小鼠的脾脏和胸腺重量的影响(
±s) 组别n
脾脏
胸腺
绝对重(mg)
相对重
绝对重(mg)
相对重
吗啡
, 百拇医药
10
93±18**
4.5±0.77*
38±19**
2.0±0.69**
对照
10
160±38
5.6±1.3
122±31
4.5±0.8
, 百拇医药
与对照组比*P<0.05 **P<0.01
2.皮下注射吗啡对小鼠DTH和IgM-PFC/脾的影响：
(1) 昆明种小鼠皮下注射吗啡6天，小鼠的DTH与对照组比明显抑制，抑制率为40%。实验组小鼠IgM-PFC/脾与对照组比未见明显变化。小鼠皮下注射吗啡14天后，小鼠的DTH与对照组比较抑制程度较注射6天组更明显，其抑制率为50%；小鼠IgM-PFC/脾与对照组比较仍未见明显变化(表3)。
表3 皮下注射吗啡6天和14天对小鼠DTH和IgM-PFC/脾的影响 组别
n
DTH(mm)
(
±s), 百拇医药
IgM-PFC/脾
(
s)6天
对照
7
0.65±0.20
154,822
1.29吗啡
5
, http://www.100md.com
0.39±0.09**
112,201
1.4614天
对照
5
0.70±0.20
128,264
1.42吗啡
7
0.35±0.08**
, 百拇医药
159,495
1.30与对照组比**P<0.01
(2) LACA 小鼠皮下注射吗啡14天，小鼠DTH和IgM-PFC/脾与对照组比均明显抑制，抑制率分别为37%和75%，结果表明，吗啡对LACA小鼠的细胞免疫和体液免疫均有明显的抑制作用(表4)。
表4 吗啡对LACA小鼠DTH、IgM-PFC/脾的影响 组别
n
DTH(mm)
(
±s), 百拇医药
IgM-PFC/脾
(
s)吗啡
10
0.39±0.16*
31,061
1.86**对照
10
0.62±0.25
, 百拇医药
122,649
1.56与对照组比*P<0.05 **P<0.01
讨论
本研究的结果表明，昆明种小鼠皮下注射吗啡6天和14天后，细胞免疫功能受到明显的抑制，而体液免疫功能未见明显变化。LACA小鼠皮下注射吗啡14天后，小鼠的免疫器官、细胞免疫和体液免疫均受到不同程度的抑制。许多研究证明，吗啡对小鼠的细胞免疫、体液免疫、免疫因子及巨噬细胞等均有抑制作用[4～6]，本研究选用的两个鼠种的细胞免疫检测结果基本相同，但是体液免疫出现了不同的结果；根据给药剂量(或时间)与抑制程度的关系，说明吗啡对小鼠中枢免疫器官的抑制作用比外周免疫器官敏感，对细胞免疫功能的抑制比体液免疫更敏感；并提示：吗啡对小鼠免疫功能的影响可能存在着种属差异。
, http://www.100md.com
参考文献
1.卞如廉，严岚.药物滥用对免疫功能的损伤.中国药物依赖性通报，1993，2(4)：227～229.
2.刘湛等.静脉注射海洛因成瘾者免疫功能状态的研究.中国药物依赖性通报，1993，2(3)：194～197.
3.雷志明，等.单只动物多项免疫功能检测研究.北京医科大学学报，1991，23(5)：399～401.
4.Bryant HU,Roudebush RE.Suppressive effects of morphine pellet implants on in vivo parameters of immune function.J Pharmacol Exp Ther，1990,255:410～414.
5.陆正武，等.吗啡的免疫抑制作用及机制研究.中国药物依赖性通报，1993；2(3)：164～167.
6.陆正武，林志彬.吗啡依赖小鼠免疫功能的变化.中国药物依赖性通报，1994，3(1)：4.
(修回日期 1998年5月), 百拇医药