枸杞对DNA损伤后修复作用的研究
作者：褚金花 杨华 刘荣华 梁佛佑 孔祥环
单位：褚金花 孔祥环 (首都医科大学环境卫生教研室 北京 100054)； 杨 华 刘荣华 梁佛佑 (首都医科大学遗传学教研室)
关键词：
卫生毒理学杂志990127 寻找天然抗致癌的物质对人类肿瘤的预防作用早已引起人们的重视。枸杞是我国传统中药。既是食品，又是药品，久服可坚筋骨，轻身不老，而耐寒暑。现代医学研究发现，枸杞具抗衰延寿，提高免疫功能，抑制癌细胞生长等作用。以小鼠骨髓细胞染色体畸变率为指标，进一步探讨枸杞对DNA损伤的修复作用。
材料与方法
1.枸杞液的制备及药品：选用宁夏枸杞，加入双蒸水经电动机粉碎，过滤，去除残渣，制成160mg/ml提取液，4℃冰箱保存备用。环磷酰胺(CP)，上海第十二制药厂产品。
, 百拇医药
2.实验动物：首都医科大学实验动物中心提供的昆明种雄性小鼠。
3.实验方法：雄性小鼠40只，体重25～30g，随机分组，阳性和阴性对照组，每组5只，实验组30只。实验组、阳性对照组均腹腔注射CP(30mg/kg,两次间隔24小时)，阳性对照组在第2次注射后6小时取材，阴性对照组给等量的蒸馏水，常规方法制备染色体标本。实验组在两次注射CP后再将小鼠分为两组，即枸杞实验组和枸杞对照组，每组15只，枸杞实验组每日用枸杞提取液(2g/kg)给小鼠灌胃，另15只小鼠灌等量的蒸馏水。枸杞实验组和枸杞对照组在灌胃3，7，14天后分别取材，制备染色体标本。每只动物观察100个细胞中期分裂相，染色体畸变类型主要以断裂、缺失和环状为主，统计细胞染色体畸变率。同时还观察1000个细胞的中期分裂相数，计算分裂指数。
结果与讨论
各物种细胞的自发染色体畸变率低而且比较稳定，但是经诱变剂处理后染色体畸变率可明显增高。本次实验阴性对照组小鼠染色体畸变率为2.8%，CP诱发的阳性对照组小鼠骨髓细胞染色体畸变率高达48.0%。但经CP诱发造成小鼠DNA损伤后，喂水3天组染色体畸变率与阳性对照组比较无显著差异，随着时间的推移，在喂水7天，14天染色体畸变率则逐渐降低。而经CP诱发后的小鼠喂服枸杞提取液3天，7天染色体畸变率和喂水组相比，染色体畸变率明显降低，并有显著性差异(P<0.01)。见表1。
, http://www.100md.com
表1 枸杞对CP诱发小鼠骨髓细胞染色体畸变的影响 组别
处理时间(天)
3
7
14
观察细胞数
畸变率(%)
观察细胞数
畸变率(%)
观察细胞数
畸变率(%)
枸杞实验组
, http://www.100md.com
500
31.6±1.8**
500
11.0±2**
500
7.4±2.8**
喂水对照组
500
48.0±6.6
500
28.6±2.2
500
, 百拇医药
9.2±2.0
**P<0.01
此外，尚观察到CP对小鼠骨髓细胞有丝分裂具有抑制作用。阴性对照组细胞分裂指数为93.6‰，阳性对照组为22.4‰，提示CP干扰DNA的复制，抑制细胞的增殖。但喂服枸杞液小鼠的细胞分裂相数目明显高于喂水组，并且有显著差异(P<0.01)。见表2。
表2 枸杞对CP抑制骨髓细胞分裂指数的影响 组别
处理时间(天)
3
7
14
观察细胞数
, http://www.100md.com 分裂细胞‰
观察细胞数
分裂细胞‰
观察细胞数
分裂细胞‰
枸杞实验组
5185
47.4**
4100
57.1**
5086
71.0
, 百拇医药
喂水对照组
5801
27.6
5094
41.2
5160
63.6
与对照组比较**P<0.01
从实验结果可以看出，小鼠经CP作用后，喂服枸杞3，7天后小鼠骨髓细胞染色体畸变率明显低于喂水组。近年来已有研究表明枸杞对DNA具有保护作用，具有抗致突变作用。
同时喂服枸杞后细胞分裂指数明显增加，具有拮抗CP的损伤，增强了细胞的分裂增殖能力。
本研究利用小鼠骨髓染色体畸变试验表明，枸杞具有拮抗环磷酰胺损伤作用，并能提高DNA的修复能力。
(修回日期 1998年9月), 百拇医药
单位：褚金花 孔祥环 (首都医科大学环境卫生教研室 北京 100054)； 杨 华 刘荣华 梁佛佑 (首都医科大学遗传学教研室)
关键词：
卫生毒理学杂志990127 寻找天然抗致癌的物质对人类肿瘤的预防作用早已引起人们的重视。枸杞是我国传统中药。既是食品，又是药品，久服可坚筋骨，轻身不老，而耐寒暑。现代医学研究发现，枸杞具抗衰延寿，提高免疫功能，抑制癌细胞生长等作用。以小鼠骨髓细胞染色体畸变率为指标，进一步探讨枸杞对DNA损伤的修复作用。
材料与方法
1.枸杞液的制备及药品：选用宁夏枸杞，加入双蒸水经电动机粉碎，过滤，去除残渣，制成160mg/ml提取液，4℃冰箱保存备用。环磷酰胺(CP)，上海第十二制药厂产品。
, 百拇医药
2.实验动物：首都医科大学实验动物中心提供的昆明种雄性小鼠。
3.实验方法：雄性小鼠40只，体重25～30g，随机分组，阳性和阴性对照组，每组5只，实验组30只。实验组、阳性对照组均腹腔注射CP(30mg/kg,两次间隔24小时)，阳性对照组在第2次注射后6小时取材，阴性对照组给等量的蒸馏水，常规方法制备染色体标本。实验组在两次注射CP后再将小鼠分为两组，即枸杞实验组和枸杞对照组，每组15只，枸杞实验组每日用枸杞提取液(2g/kg)给小鼠灌胃，另15只小鼠灌等量的蒸馏水。枸杞实验组和枸杞对照组在灌胃3，7，14天后分别取材，制备染色体标本。每只动物观察100个细胞中期分裂相，染色体畸变类型主要以断裂、缺失和环状为主，统计细胞染色体畸变率。同时还观察1000个细胞的中期分裂相数，计算分裂指数。
结果与讨论
各物种细胞的自发染色体畸变率低而且比较稳定，但是经诱变剂处理后染色体畸变率可明显增高。本次实验阴性对照组小鼠染色体畸变率为2.8%，CP诱发的阳性对照组小鼠骨髓细胞染色体畸变率高达48.0%。但经CP诱发造成小鼠DNA损伤后，喂水3天组染色体畸变率与阳性对照组比较无显著差异，随着时间的推移，在喂水7天，14天染色体畸变率则逐渐降低。而经CP诱发后的小鼠喂服枸杞提取液3天，7天染色体畸变率和喂水组相比，染色体畸变率明显降低，并有显著性差异(P<0.01)。见表1。
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表1 枸杞对CP诱发小鼠骨髓细胞染色体畸变的影响 组别
处理时间(天)
3
7
14
观察细胞数
畸变率(%)
观察细胞数
畸变率(%)
观察细胞数
畸变率(%)
枸杞实验组
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500
31.6±1.8**
500
11.0±2**
500
7.4±2.8**
喂水对照组
500
48.0±6.6
500
28.6±2.2
500
, 百拇医药
9.2±2.0
**P<0.01
此外，尚观察到CP对小鼠骨髓细胞有丝分裂具有抑制作用。阴性对照组细胞分裂指数为93.6‰，阳性对照组为22.4‰，提示CP干扰DNA的复制，抑制细胞的增殖。但喂服枸杞液小鼠的细胞分裂相数目明显高于喂水组，并且有显著差异(P<0.01)。见表2。
表2 枸杞对CP抑制骨髓细胞分裂指数的影响 组别
处理时间(天)
3
7
14
观察细胞数
, http://www.100md.com 分裂细胞‰
观察细胞数
分裂细胞‰
观察细胞数
分裂细胞‰
枸杞实验组
5185
47.4**
4100
57.1**
5086
71.0
, 百拇医药
喂水对照组
5801
27.6
5094
41.2
5160
63.6
与对照组比较**P<0.01
从实验结果可以看出，小鼠经CP作用后，喂服枸杞3，7天后小鼠骨髓细胞染色体畸变率明显低于喂水组。近年来已有研究表明枸杞对DNA具有保护作用，具有抗致突变作用。
同时喂服枸杞后细胞分裂指数明显增加，具有拮抗CP的损伤，增强了细胞的分裂增殖能力。
本研究利用小鼠骨髓染色体畸变试验表明，枸杞具有拮抗环磷酰胺损伤作用，并能提高DNA的修复能力。
(修回日期 1998年9月), 百拇医药