一种新的人类疱疹病毒：Kaposi’s肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)
作者：王世珍 刘淑红 耿运琪
单位：南开大学生命科学学院，天津 300071
关键词：Kaposi’s肉瘤(KS)；Kaposi’s肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)；8型人类疱疹病毒(HHV-8)；获得性免疫缺陷综合征(AIDS)
中国病毒学990101 A New Human Herpesvirus：Kaposi's Sarcoma-Associated Herpesvirus (KSHV)
Wang Shizhen Liu Shuhong Geng Yunqi
(College of Life Science, Nankai University, Tianjin 300071)
, 百拇医药 Key words Kaposi's sarcoma (KS), Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (KSHV), Human herpesvirus 8 (HHV-8), Acquired immunodeficiency syndrome (AIDS)
1994年Y.Chang等人从AIDS患者的Kaposi's肉瘤(KS)组织中分离到了两种独有的序列[1]，并由KS建立了基因组文库，对其中外源序列进行克隆和序列分析[2]，初步确认一种新的人类疱疹病毒——KS相关疱疹病毒。
1 KSHV的发现
Kaposi's肉瘤是AIDS患者中最为常见的肿瘤。在AIDS患者和其他免疫抑制人群中，KS的发病率分别为美国正常人群发病率的20?000和600倍；AIDS患者中同性恋或两性恋者发病率为血友病人的20倍[3]。这些流行病学特点暗示：AIDS相关的KS可能是由一种感染性病原体引起的，而且该病原体是性传播的。被怀疑的对象包括巨细胞病毒(CMV)、乙型肝炎病毒(HBV)、6型人类疱疹病毒(HHV-6)、人类免疫缺陷病毒(HIV)和penetrans支原体，但是PCR检测发现，它们都不同于推测的病原体。
, 百拇医药
使KS研究柳暗花明的是一种名为“代表性差异分析”(representational difference analysis, RDA)的方法，即先PCR扩增短限制性片段，作为同一个体病变组织和正常组织的基因组“代表”；将病变组织的DNA“代表”与引物序列连接，再和过量未经连接的正常组织DNA“代表”杂交；这样，在随后的PCR循环中仅病变组织独有的DNA片段两条链都含有引物序列，能够被扩增。通过这种方法从KS组织中分离到了两段序列：KS330Bam和KS631Bam，分别与γ疱疹病毒herpesvirus saimiri (HVS)、Epstein-Barr virus (EBV)的衣壳蛋白和被膜(tegument)蛋白基因同源，标志着一种新的人类疱疹病毒。由于最初发现于KS组织，许多研究者称之为KS相关疱疹病毒(KSHV)；作为第8种鉴定的人类疱疹病毒，它也被称为8型人类疱疹病毒(HHV-8)。
2 KSHV的流行病学特点
PCR检测发现：95%～100%AIDS相关KS患者的KS组织中存在KSHV序列，而健康人组织中KSHV序列的阳性率<1%[4，5]。KS患者未病变组织的KSHV序列阳性率约为20%，说明KSHV可传播至表型正常的组织，并在这些组织中潜伏。在经典欧洲-地中海KS、非洲地方性KS和接受移植者的KS中普遍发现了KSHV序列，可见KSHV不仅仅是AIDS患者的一种机会感染的感染源，而且很可能是所有形式KS的共同病原体。此外，AIDS相关的body cavity-based淋巴瘤(BCBL)和Multifocal Castleman's disease (MCD)患者的病变组织中也存在KSHV DNA。
, 百拇医药
52%KS患者的外周血单核细胞(PBMC)中可检出KSHV序列，健康者没有发现；未患KS的AIDS患者如果PBMC中含有KSHV序列，未来几年内出现KS的可能性极大[6]。在AIDS相关KS患者的睾丸中未检出KSHV序列，但他们的前列腺和精液中都能检出KSHV[7]，说明前列腺可能是被感染宿主中KSHV潜伏或持续性感染的位点。KS患者的痰和咽喉标本中很少检测到KSHV，粪便也全部为阴性，但在KS患者的唾液中发现了以毒粒形式存在的KSHV序列[8]，目前还不清楚这种感染性的唾液是否一种传播途径。
对KSHV的血清流行病学研究至今仍缺乏令人满意的方法。当前用于抗体检测的KSHV抗原全部来自BCBL建立的被KSHV潜伏感染的细胞系。用这种细胞系对不同来源的血清进行免疫荧光分析发现：全部非洲地方性KS患者，和96%的AIDS相关KS美国患者的血清中含KSHV抗体，90%美国同性恋男性AIDS患者血清为阳性，而仅23%静脉用药AIDS患者和21%女性AIDS患者有KSHV抗体，与普通成年人群并无差异[9]。血友病患者和其他接受血制品人群的血清阳性率也与普通人相似。这些结果显示：KSHV首要的传播方式为性传播。2%～8%的儿童为血清学阳性，暗示还存在非性传播途径[10]。免疫荧光显示25%美国正常成人都有抗BCBL细胞系的抗体，而PCR检测发现，正常人组织中极少出现KSHV DNA，这可能是该细胞系同时被另一种更为普遍的病毒感染造成的；或者是一些人曾被KSHV侵入，并产生了抗体，但由于他们良好的免疫系统或其他某些原因，造成病毒未能在机体中大量繁殖。
, 百拇医药
KSHV病毒包括100多种蛋白成分，抗体很容易与某些未知的抗原发生交叉反应。因而，很多研究组都在寻找一种能产生灵敏、可靠结果的病毒抗原用于血清检测[11～14]，已有的抗原包括被KSHV与EBV共同感染的BC-1细胞表达的KSHV裂解周期抗原(lytic-cycle antigen)p40、小病毒衣壳抗原(small viral capsid antigen, sVCA)、核抗原p226和p234，但它们的灵敏度还不够理想。对病毒其他抗原的研究还在进行之中。
3 KSHV的分类地位
KSHV基因组被克隆和序列分析后，比较它与疱疹病毒科其他成员的关系发现：KSHV是一种γ-2疱疹病毒(猴病毒属，Rhadinovirus)，在该属成员herpesvirus saimiri (HVS)、2型马疱疹病毒(EHV2)和4型牛疱疹病毒(BHV4)中，KSHV与HVS关系最近[2]。KSHV是猴病毒属中第一个感染人类的成员。γ-1疱疹病毒(淋巴隐伏病毒属，Lymphocryptovirus)EBV是与KSHV最接近的人类病毒。
, 百拇医药
4 KSHV的病理学
KS主要见于皮肤，组成上不均一，纺锤状(spindle)内皮细胞占主要部分。KSHV以淋巴系统为初级复制场所，并与淋巴增殖失调密切相关，符合γ疱疹病毒嗜淋巴性的特点。AIDS相关KS比经典KS和地方性KS更具危害性，可影响系统器官。免疫抑制有利于病毒的复制，从而触发KS多灶病状。培养的KS细胞可分泌多种细胞因子，如碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、IL-6和血小板衍生生长因子(PDGF)，而且发现bFGF、IL-1β、IL-6和制癌蛋白(oncostatin)M等生长因子和细胞因子对KS中纺锤细胞的增殖有重要作用。因此，人们推测细胞因子的局部失调很可能是KS形成的主要原因。
5 KSHV的基因组结构
KSHV基因组为165?kb的双链线性DNA[15]，与其它γ疱疹病毒基因组大小近似。在潜伏感染的BCBL-1细胞中，KSHV以附加体(episome)的单体环状形式存在，当病毒从潜伏状态诱导进入裂解周期时，线性基因组形式大量积累。在被EBV共感染的非许可性或半许可性B细胞中KSHV基因组大小约270kb，可能是基因组的串联多聚化或倍增重排造成的。
, 百拇医药
KSHV基因组中间为140.5kb的低GC DNA(L DNA)，GC含量53.5%，含至少81个开放阅读框架(ORF)；两边为801个核苷酸的高GC DNA(H DNA)串联重复，GC含量达84.5%[16]。GC含量的不均一性导致密度梯度离心时基因组断裂，这是猴病毒属的一个共同特点。KSHV L DNA中的ORF与HVSLDNA基因共线性，并有66个ORF与HVS同源，因而用HVS基因组相应位置上的基因来初步命名KSHV的基因。猴病毒属有很多与细胞基因同源性很高的ORF，可能是病毒在进化中从宿主细胞捕获的，常包括编码干扰免疫系统的蛋白(补体控制蛋白同源物、CD59)、参与核苷酸代谢的酶(胸苷合成酶、二氢叶酸还原酶)和细胞生长调节因子(细胞周期蛋白、IL-17、IL-8受体等)的基因。此外，KSHV还有几个其他猴病毒属没有的细胞同源基因：vIL-6[17，18]、三个CC趋化因子、干扰素应答因子和N-CAM家族穿膜蛋白ox-2。这些基因产物都类似于细胞周期调控蛋白和信号蛋白，在病毒对宿主细胞的作用中有重要意义。KSHV和HVS都有D型细胞周期蛋白(cyclin D)基因[19～22]和bcl-2的同源物，它们在阻止细胞凋亡或细胞周期停滞中起作用。
, 百拇医药
KSHV还编码许多病毒结构蛋白和酶类，与HVS和EBV相比，有一些是保守的。其中DNA聚合酶参与病毒DNA复制，二氢叶酸还原酶与胸苷合成酶参与核苷酸合成。此外，还包括基因表达调节物、5个保守的疱疹病毒衣壳蛋白、5个糖蛋白和编码在同一ORF中的蛋白酶(Pr)和装配蛋白(AP)[22]。
EBV的核抗原(EBNAs)和潜伏膜蛋白(LMPs)对病毒潜伏状态的维持及病毒引起的宿主细胞转化十分重要，它们能诱导hIL-6、cyclin D、IL-8受体、细胞Bcl-2和补体控制蛋白CR-2等细胞基因的表达。KSHV虽然不编码与EBNA和LMP类似的蛋白，但它凭借病毒基因组本身携带的细胞同源基因，可以达到与EBV这两种蛋白相同的目的：克服宿主细胞对病毒感染产生的细胞周期停滞、细胞凋亡和细胞免疫激活这些应答现象。病毒用某种手段调节细胞生长是为了自己的繁殖，但当病毒没有进行裂解复制时，这些促进生长基因的表达便导致了细胞增殖的失调，从而产生肿瘤。
, 百拇医药 6 KSHV的基因表达
在KS中，KSHV的基因表达有很大局限性。杂交实验只发现了两种病毒RNA：大小分别为1.1kb和0.7kb的T1.1和T0.7。这两个序列都含有poly(A)信号，未经转录后拼接或RNA编辑，而且在不同的KSHV分离物中完全保守。T1.1的序列分析暗示它并非mRNA[23]，原位杂交发现，它主要定位于细胞核，伴随主要衣壳蛋白(MCP)RNA出现于少数肿瘤细胞中，这些细胞可能正在产生子代病毒，因而T1.1是一种裂解周期基因产物。T0.7有信使功能，位于胞质，其产物表现强烈的疏水性，推测是一种小的膜蛋白，称为Kaposin。在肿瘤发生发展的各个阶段，绝大多数的肿瘤细胞都含有这种病毒转录物，它可能与细胞的转化有关[24，25]。当然，由于所用基因组文库不完整及杂交实验灵敏度的影响，很可能还有其他基因的表达。
正常生长的BCBL细胞系中基因表达情况与KS十分相似。佛波酯TPA能够诱导细胞系中病毒的裂解复制，表现为促进病毒DNA合成、更多的基因组区域转录和子代毒粒的产生及释放。可见，在无TPA诱导时，病毒基因的限制表达是潜伏感染的标志，也说明KS中大多数被感染的细胞为潜伏感染，仅在很少一部分细胞中有病毒的裂解复制。如果潜伏感染刺激靶细胞的无限增殖，而且这种刺激并不是永久性的，那么，就需要一些产毒性感染的细胞释放子代病毒，以对新的细胞进行潜伏感染，肿瘤才得以生长。这种保持一定的潜伏和裂解感染比例的调控机制，还有待人们去发现。
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7 KSHV与HIV的相互作用
KS的发病与AIDS明显相关，暗示KSHV与HIV之间存在相互作用。临床上AIDS相关性KS比非AIDS相关性KS严重；HIV tat基因的转染能够促进体外培养的KS纺锤细胞生长；HIV的感染还可能使被KSHV感染的淋巴细胞释放细胞因子和生长因子，同时破坏免疫监视系统。这些结果说明HIV的感染至少通过免疫抑制和tat激活两方面加速KS肿瘤的形成。但是KS病灶中几乎检测不到HIV，推测tat的水平很低。此外，有研究表明KSHV在体外激活HIV的基因表达，但还不知道是否由某种KSHV编码的细胞因子介导。KSHV和HIV在体内的相互作用尚需进一步研究。
8 KSHV的动物模型
猴腹膜后腔纤维瘤病(retroperitoneal fibromatosis，RF)是一种血管纤维增殖肿瘤，与人类的KS在形态学和组织学特点上十分相似。象KS在AIDS病人中流行一样，RF与一种D型反转录病毒——2型猴反转录病毒(SRV-2)感染引起的猴获得性免疫缺陷综合征(SAIDS)高度相关。从Macaca属中两种猴子Macaca nemestrina和Macaca mulatta的RF组织经PCR得到了不同于任何已知疱疹病毒的两种DNA序列。这两种新的疱疹病毒被暂时称为腹膜后腔纤维瘤病疱疹病毒(RFHV)，分别表示为RFHVMn和RFHVMm[26]。序列比较发现：在所有疱疹病毒中，KSHV与这两种RF病毒序列同源性最高，关系最近。这两种新的疱疹病毒与KSHV一样属于γ疱疹病毒亚科，并与KSHV一起构成了γ亚科中的一群，这一群中的成员与人类KS和其他灵长类的KS样肿瘤相关。根据上述结果人们猜测：KSHV是由非人灵长类传播至人类的，由于在地理位置相距很远的人群中均能发现KSHV，该传播事件一定发生在很久以前。
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RF与KS的相似性及RFHV与KSHV的亲缘关系都说明Macaca猴子的RF可以作为研究人类KS的动物模型。利用该模型，人们可增加对KSHV各方面特点的了解，并筛选治疗KS样肿瘤的药物。
9 小结
虽然科学工作者对这个新发现的病毒从不同的角度进行了研究，但由于缺乏适合KSHV生长的细胞培养系统，对该病毒毒粒结构、生活周期、与宿主细胞相互作用等方面的生物学特性至今还没有深入的了解。该病毒基因组的结构和功能、基因表达调控、与其他病毒的相互关系以及它的病理学特征和在临床上的意义，有待进一步研究。目前应该肯定的是：KSHV与Kaposi's肉瘤相关，并且常与HIV伴生感染，对人类的健康有重要影响。对该病毒的分子生物学、临床医学、流行病学、病理学诸方面迅速开展研究，将有助于KSHV相关疾病的治疗，为人类健康作出贡献。
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收稿日期1997-09-22修回日期：1997-11-03, http://www.100md.com
单位：南开大学生命科学学院，天津 300071
关键词：Kaposi’s肉瘤(KS)；Kaposi’s肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)；8型人类疱疹病毒(HHV-8)；获得性免疫缺陷综合征(AIDS)
中国病毒学990101 A New Human Herpesvirus：Kaposi's Sarcoma-Associated Herpesvirus (KSHV)
Wang Shizhen Liu Shuhong Geng Yunqi
(College of Life Science, Nankai University, Tianjin 300071)
, 百拇医药 Key words Kaposi's sarcoma (KS), Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (KSHV), Human herpesvirus 8 (HHV-8), Acquired immunodeficiency syndrome (AIDS)
1994年Y.Chang等人从AIDS患者的Kaposi's肉瘤(KS)组织中分离到了两种独有的序列[1]，并由KS建立了基因组文库，对其中外源序列进行克隆和序列分析[2]，初步确认一种新的人类疱疹病毒——KS相关疱疹病毒。
1 KSHV的发现
Kaposi's肉瘤是AIDS患者中最为常见的肿瘤。在AIDS患者和其他免疫抑制人群中，KS的发病率分别为美国正常人群发病率的20?000和600倍；AIDS患者中同性恋或两性恋者发病率为血友病人的20倍[3]。这些流行病学特点暗示：AIDS相关的KS可能是由一种感染性病原体引起的，而且该病原体是性传播的。被怀疑的对象包括巨细胞病毒(CMV)、乙型肝炎病毒(HBV)、6型人类疱疹病毒(HHV-6)、人类免疫缺陷病毒(HIV)和penetrans支原体，但是PCR检测发现，它们都不同于推测的病原体。
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使KS研究柳暗花明的是一种名为“代表性差异分析”(representational difference analysis, RDA)的方法，即先PCR扩增短限制性片段，作为同一个体病变组织和正常组织的基因组“代表”；将病变组织的DNA“代表”与引物序列连接，再和过量未经连接的正常组织DNA“代表”杂交；这样，在随后的PCR循环中仅病变组织独有的DNA片段两条链都含有引物序列，能够被扩增。通过这种方法从KS组织中分离到了两段序列：KS330Bam和KS631Bam，分别与γ疱疹病毒herpesvirus saimiri (HVS)、Epstein-Barr virus (EBV)的衣壳蛋白和被膜(tegument)蛋白基因同源，标志着一种新的人类疱疹病毒。由于最初发现于KS组织，许多研究者称之为KS相关疱疹病毒(KSHV)；作为第8种鉴定的人类疱疹病毒，它也被称为8型人类疱疹病毒(HHV-8)。
2 KSHV的流行病学特点
PCR检测发现：95%～100%AIDS相关KS患者的KS组织中存在KSHV序列，而健康人组织中KSHV序列的阳性率<1%[4，5]。KS患者未病变组织的KSHV序列阳性率约为20%，说明KSHV可传播至表型正常的组织，并在这些组织中潜伏。在经典欧洲-地中海KS、非洲地方性KS和接受移植者的KS中普遍发现了KSHV序列，可见KSHV不仅仅是AIDS患者的一种机会感染的感染源，而且很可能是所有形式KS的共同病原体。此外，AIDS相关的body cavity-based淋巴瘤(BCBL)和Multifocal Castleman's disease (MCD)患者的病变组织中也存在KSHV DNA。
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52%KS患者的外周血单核细胞(PBMC)中可检出KSHV序列，健康者没有发现；未患KS的AIDS患者如果PBMC中含有KSHV序列，未来几年内出现KS的可能性极大[6]。在AIDS相关KS患者的睾丸中未检出KSHV序列，但他们的前列腺和精液中都能检出KSHV[7]，说明前列腺可能是被感染宿主中KSHV潜伏或持续性感染的位点。KS患者的痰和咽喉标本中很少检测到KSHV，粪便也全部为阴性，但在KS患者的唾液中发现了以毒粒形式存在的KSHV序列[8]，目前还不清楚这种感染性的唾液是否一种传播途径。
对KSHV的血清流行病学研究至今仍缺乏令人满意的方法。当前用于抗体检测的KSHV抗原全部来自BCBL建立的被KSHV潜伏感染的细胞系。用这种细胞系对不同来源的血清进行免疫荧光分析发现：全部非洲地方性KS患者，和96%的AIDS相关KS美国患者的血清中含KSHV抗体，90%美国同性恋男性AIDS患者血清为阳性，而仅23%静脉用药AIDS患者和21%女性AIDS患者有KSHV抗体，与普通成年人群并无差异[9]。血友病患者和其他接受血制品人群的血清阳性率也与普通人相似。这些结果显示：KSHV首要的传播方式为性传播。2%～8%的儿童为血清学阳性，暗示还存在非性传播途径[10]。免疫荧光显示25%美国正常成人都有抗BCBL细胞系的抗体，而PCR检测发现，正常人组织中极少出现KSHV DNA，这可能是该细胞系同时被另一种更为普遍的病毒感染造成的；或者是一些人曾被KSHV侵入，并产生了抗体，但由于他们良好的免疫系统或其他某些原因，造成病毒未能在机体中大量繁殖。
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KSHV病毒包括100多种蛋白成分，抗体很容易与某些未知的抗原发生交叉反应。因而，很多研究组都在寻找一种能产生灵敏、可靠结果的病毒抗原用于血清检测[11～14]，已有的抗原包括被KSHV与EBV共同感染的BC-1细胞表达的KSHV裂解周期抗原(lytic-cycle antigen)p40、小病毒衣壳抗原(small viral capsid antigen, sVCA)、核抗原p226和p234，但它们的灵敏度还不够理想。对病毒其他抗原的研究还在进行之中。
3 KSHV的分类地位
KSHV基因组被克隆和序列分析后，比较它与疱疹病毒科其他成员的关系发现：KSHV是一种γ-2疱疹病毒(猴病毒属，Rhadinovirus)，在该属成员herpesvirus saimiri (HVS)、2型马疱疹病毒(EHV2)和4型牛疱疹病毒(BHV4)中，KSHV与HVS关系最近[2]。KSHV是猴病毒属中第一个感染人类的成员。γ-1疱疹病毒(淋巴隐伏病毒属，Lymphocryptovirus)EBV是与KSHV最接近的人类病毒。
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4 KSHV的病理学
KS主要见于皮肤，组成上不均一，纺锤状(spindle)内皮细胞占主要部分。KSHV以淋巴系统为初级复制场所，并与淋巴增殖失调密切相关，符合γ疱疹病毒嗜淋巴性的特点。AIDS相关KS比经典KS和地方性KS更具危害性，可影响系统器官。免疫抑制有利于病毒的复制，从而触发KS多灶病状。培养的KS细胞可分泌多种细胞因子，如碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、IL-6和血小板衍生生长因子(PDGF)，而且发现bFGF、IL-1β、IL-6和制癌蛋白(oncostatin)M等生长因子和细胞因子对KS中纺锤细胞的增殖有重要作用。因此，人们推测细胞因子的局部失调很可能是KS形成的主要原因。
5 KSHV的基因组结构
KSHV基因组为165?kb的双链线性DNA[15]，与其它γ疱疹病毒基因组大小近似。在潜伏感染的BCBL-1细胞中，KSHV以附加体(episome)的单体环状形式存在，当病毒从潜伏状态诱导进入裂解周期时，线性基因组形式大量积累。在被EBV共感染的非许可性或半许可性B细胞中KSHV基因组大小约270kb，可能是基因组的串联多聚化或倍增重排造成的。
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KSHV基因组中间为140.5kb的低GC DNA(L DNA)，GC含量53.5%，含至少81个开放阅读框架(ORF)；两边为801个核苷酸的高GC DNA(H DNA)串联重复，GC含量达84.5%[16]。GC含量的不均一性导致密度梯度离心时基因组断裂，这是猴病毒属的一个共同特点。KSHV L DNA中的ORF与HVSLDNA基因共线性，并有66个ORF与HVS同源，因而用HVS基因组相应位置上的基因来初步命名KSHV的基因。猴病毒属有很多与细胞基因同源性很高的ORF，可能是病毒在进化中从宿主细胞捕获的，常包括编码干扰免疫系统的蛋白(补体控制蛋白同源物、CD59)、参与核苷酸代谢的酶(胸苷合成酶、二氢叶酸还原酶)和细胞生长调节因子(细胞周期蛋白、IL-17、IL-8受体等)的基因。此外，KSHV还有几个其他猴病毒属没有的细胞同源基因：vIL-6[17，18]、三个CC趋化因子、干扰素应答因子和N-CAM家族穿膜蛋白ox-2。这些基因产物都类似于细胞周期调控蛋白和信号蛋白，在病毒对宿主细胞的作用中有重要意义。KSHV和HVS都有D型细胞周期蛋白(cyclin D)基因[19～22]和bcl-2的同源物，它们在阻止细胞凋亡或细胞周期停滞中起作用。
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KSHV还编码许多病毒结构蛋白和酶类，与HVS和EBV相比，有一些是保守的。其中DNA聚合酶参与病毒DNA复制，二氢叶酸还原酶与胸苷合成酶参与核苷酸合成。此外，还包括基因表达调节物、5个保守的疱疹病毒衣壳蛋白、5个糖蛋白和编码在同一ORF中的蛋白酶(Pr)和装配蛋白(AP)[22]。
EBV的核抗原(EBNAs)和潜伏膜蛋白(LMPs)对病毒潜伏状态的维持及病毒引起的宿主细胞转化十分重要，它们能诱导hIL-6、cyclin D、IL-8受体、细胞Bcl-2和补体控制蛋白CR-2等细胞基因的表达。KSHV虽然不编码与EBNA和LMP类似的蛋白，但它凭借病毒基因组本身携带的细胞同源基因，可以达到与EBV这两种蛋白相同的目的：克服宿主细胞对病毒感染产生的细胞周期停滞、细胞凋亡和细胞免疫激活这些应答现象。病毒用某种手段调节细胞生长是为了自己的繁殖，但当病毒没有进行裂解复制时，这些促进生长基因的表达便导致了细胞增殖的失调，从而产生肿瘤。
, 百拇医药 6 KSHV的基因表达
在KS中，KSHV的基因表达有很大局限性。杂交实验只发现了两种病毒RNA：大小分别为1.1kb和0.7kb的T1.1和T0.7。这两个序列都含有poly(A)信号，未经转录后拼接或RNA编辑，而且在不同的KSHV分离物中完全保守。T1.1的序列分析暗示它并非mRNA[23]，原位杂交发现，它主要定位于细胞核，伴随主要衣壳蛋白(MCP)RNA出现于少数肿瘤细胞中，这些细胞可能正在产生子代病毒，因而T1.1是一种裂解周期基因产物。T0.7有信使功能，位于胞质，其产物表现强烈的疏水性，推测是一种小的膜蛋白，称为Kaposin。在肿瘤发生发展的各个阶段，绝大多数的肿瘤细胞都含有这种病毒转录物，它可能与细胞的转化有关[24，25]。当然，由于所用基因组文库不完整及杂交实验灵敏度的影响，很可能还有其他基因的表达。
正常生长的BCBL细胞系中基因表达情况与KS十分相似。佛波酯TPA能够诱导细胞系中病毒的裂解复制，表现为促进病毒DNA合成、更多的基因组区域转录和子代毒粒的产生及释放。可见，在无TPA诱导时，病毒基因的限制表达是潜伏感染的标志，也说明KS中大多数被感染的细胞为潜伏感染，仅在很少一部分细胞中有病毒的裂解复制。如果潜伏感染刺激靶细胞的无限增殖，而且这种刺激并不是永久性的，那么，就需要一些产毒性感染的细胞释放子代病毒，以对新的细胞进行潜伏感染，肿瘤才得以生长。这种保持一定的潜伏和裂解感染比例的调控机制，还有待人们去发现。
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7 KSHV与HIV的相互作用
KS的发病与AIDS明显相关，暗示KSHV与HIV之间存在相互作用。临床上AIDS相关性KS比非AIDS相关性KS严重；HIV tat基因的转染能够促进体外培养的KS纺锤细胞生长；HIV的感染还可能使被KSHV感染的淋巴细胞释放细胞因子和生长因子，同时破坏免疫监视系统。这些结果说明HIV的感染至少通过免疫抑制和tat激活两方面加速KS肿瘤的形成。但是KS病灶中几乎检测不到HIV，推测tat的水平很低。此外，有研究表明KSHV在体外激活HIV的基因表达，但还不知道是否由某种KSHV编码的细胞因子介导。KSHV和HIV在体内的相互作用尚需进一步研究。
8 KSHV的动物模型
猴腹膜后腔纤维瘤病(retroperitoneal fibromatosis，RF)是一种血管纤维增殖肿瘤，与人类的KS在形态学和组织学特点上十分相似。象KS在AIDS病人中流行一样，RF与一种D型反转录病毒——2型猴反转录病毒(SRV-2)感染引起的猴获得性免疫缺陷综合征(SAIDS)高度相关。从Macaca属中两种猴子Macaca nemestrina和Macaca mulatta的RF组织经PCR得到了不同于任何已知疱疹病毒的两种DNA序列。这两种新的疱疹病毒被暂时称为腹膜后腔纤维瘤病疱疹病毒(RFHV)，分别表示为RFHVMn和RFHVMm[26]。序列比较发现：在所有疱疹病毒中，KSHV与这两种RF病毒序列同源性最高，关系最近。这两种新的疱疹病毒与KSHV一样属于γ疱疹病毒亚科，并与KSHV一起构成了γ亚科中的一群，这一群中的成员与人类KS和其他灵长类的KS样肿瘤相关。根据上述结果人们猜测：KSHV是由非人灵长类传播至人类的，由于在地理位置相距很远的人群中均能发现KSHV，该传播事件一定发生在很久以前。
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RF与KS的相似性及RFHV与KSHV的亲缘关系都说明Macaca猴子的RF可以作为研究人类KS的动物模型。利用该模型，人们可增加对KSHV各方面特点的了解，并筛选治疗KS样肿瘤的药物。
9 小结
虽然科学工作者对这个新发现的病毒从不同的角度进行了研究，但由于缺乏适合KSHV生长的细胞培养系统，对该病毒毒粒结构、生活周期、与宿主细胞相互作用等方面的生物学特性至今还没有深入的了解。该病毒基因组的结构和功能、基因表达调控、与其他病毒的相互关系以及它的病理学特征和在临床上的意义，有待进一步研究。目前应该肯定的是：KSHV与Kaposi's肉瘤相关，并且常与HIV伴生感染，对人类的健康有重要影响。对该病毒的分子生物学、临床医学、流行病学、病理学诸方面迅速开展研究，将有助于KSHV相关疾病的治疗，为人类健康作出贡献。
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收稿日期1997-09-22修回日期：1997-11-03, http://www.100md.com