SAA患者PBMNCs对正常CFU-GM的抑制与免疫抑制治疗疗效的关系
作者：朱宁希 虞荣喜 罗秀素 周郁鸿 沈一平 金锦梅 高瑞兰
单位：浙江省中医院
关键词：贫血，再生障碍性；外周血单个核细胞；粒-巨噬细胞集落形成单位；免疫抑制治疗
临床血液学杂志990112 摘要 目的：探讨严重型再生障碍性贫血(SAA)患者外周血 单个核细胞(PBMNCs)对正常造血的抑制及其与免疫抑制剂治疗疗效的关系。方法：采用造血 祖细胞半固体琼脂培养法，在正常人粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)培养体系中加入 SAA患者的PBMNCs。结果：35例SAA中，62.9%患者的PBMNCs对正常人CFU-GM生长具有明 显抑制作用，该组患者的环孢霉素A(CsA)治疗有效率达77.3%，明显高于PBMNCs对正常C FU-GM不产生抑制作用患者的CsA治疗有效率(30.8%)。结论：PBMNCs对正常人CFU-GM 生长具有抑制作用的SAA患者免疫抑制治疗疗效较好，SAA患者PBMNCs对正常CFU-GM的抑制 试验可作为预测SAA免疫抑制治疗疗效的简便方法。
, 百拇医药
目前，免疫抑制治疗已成为严重型再生障碍性贫血(SAA)的 主要治疗手段。新型免疫抑制剂环孢霉素A(CsA)安全有效，已被广泛用于SAA的治疗。我们 研究了35例SAA患者外周血单个核细胞(PBMNCs)对正常人粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-G M)的抑制作用，并探讨其与CsA治疗疗效间的关系。
1 材料和方法
1.1 病例选择 35例初诊SAA均系我院住院患者，诊断符 合全国统一标准〔1〕。其中SAA-Ⅰ型24例，SAA-Ⅱ型11例；男23例，女12例；年 龄8～56岁，中位年龄27岁。接受免疫抑制剂治疗前，测定患者PBMNCs对正常人CFU-GM生长 的影响(抑制试验)。
1.2 正常人骨髓CFU-GM的培养及病人PBMNCs对其抑制 采用半固体琼脂培养法〔2〕，在正常人CFU-GM培养体系中加入SAA患者的PBMNCs共 同培养，正常骨髓取自患者的无病亲属。以往的实验表明，正常人PBMNCs对正常CFU-GM的 生长抑制率<30%，因此将PBMNCs对正常的CFU-GM的生长抑制率≥30%，作为抑制试验的阳 性标准〔2〕。
, http://www.100md.com
1.3 治疗方案 35例患者均接受雄激素和CsA的治疗。部 分病例同时服用强的松(治疗初期)。CsA用法为5～8 mg/(kg.d)，分两次服用，连续用>3 个月。治疗期间定期检测血象、骨髓象、肝肾功能和CsA的血浓度，调整CsA的血浓度为 200～400 ng/ml。
1.4 SAA的疗效评定标准 参照全国通用标准〔1〕 。
2 结果
2.1 PBMNCs对正常CFU-GM的抑制作用 35例SAA中，22例 患者的PBMNCs对正常人CFU-GM的生长抑制率≥30%，抑制试验阳性率62.9%。
2.2 总疗效 随访观察6个月～4年，35例中21例有效，总 有效率60.0%，其中14例(40.0%)达到基本缓解或明显进步。
, 百拇医药
2.3 PBMNCs对正常CFU-GM的抑制与CsA疗效的关系 抑制 试验阳性组22例，17例治疗有效，总有效率77.3%；抑制试验阴性组13例，4例有效，总 有效率30.8%；两组比较P<0.001。
3 讨论
SAA的发病机制复杂，与干细胞受损、微环境损伤及免疫异常有关。目前认为， 免疫紊乱与SAA的发病密切相关〔3〕，其中激活的T淋巴细胞分泌的负性造血因子如 白介素2(IL-2)、干扰素(IFN-)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)等对造血干细胞增殖和分 化的抑制在SAA的发病中起着重要作用〔4〕。免疫抑制剂CsA能有效地抑制激活的T细 胞分泌IL-2等细胞因子，并阻断T细胞IL-2受体的表达和毒性T细胞的激活〔5〕， 因此可用于SAA的治疗并具有一定的疗效。近来，有研究表明〔6〕，存在上述免疫功 能紊乱的SAA患者免疫抑制剂治疗疗效较好。本组研究证实，62.9%的SAA患者PBMNCs对正常CFU-GM的生长具有抑 制作用，提示在约2/3 SAA的发病过程中确实存在异常免疫介导。PBMNCs的主要成分是T细胞 ，推测SAA患者PBMNCs对正常CFU-GM的生长的抑制，可能主要是通过T细胞分泌IL-2等负性 造血因子而起作用。疗效分析结果进一步表明，抑制试验阳性的SAA患者CsA治疗疗效高(有 效率77.3%)，而抑制试验阴性的SAA患者CsA疗效低(有效率30.8%)。因此，对前一 类患者，免疫抑制剂CsA等可作为首选药物；对后一类患者，CsA等药物疗效有限，应考虑给 予其它治疗手段，如造血刺激因子治疗或骨髓移植，以进一步提高疗效。我们认为，SAA患 者PBMNCs对正常CFU-GM的抑制试验不仅有助于了解免疫功能紊乱在SAA发病过程中的作用， 而且是预测SAA患者免疫抑制治疗疗效的简便有效方法。
, 百拇医药
邮政编码：杭州市，310006
参考文献
[1] 张之南主编.血液病诊断及疗效标准.天津：天津科学技术出 版社，1991.31-32，34-35
[2] 高瑞兰，虞荣喜，马逢顺，等.骨髓体外培养BFU-E、CFU-E和CFU-GM 对63例再生障碍性贫血的临床研究.中华内科杂志，1991，30：268
[3] Young NS,Barret AJ.The treatment of severe acquired aplastic an emia.Blood,1995,85:3367
[4] Marsh JCW,Gordon-smith E.Treatment of aplastic anemia with ant ilymphocyte globulin and cyclosporin.Int J Hematol,1995,62:133
[5] Leonard EM,Raefsky E,Griffith D,et al.Cycyclosporin therapy of aplastic anemia,congenital and acquired red cell aplasia.Br J Haematol,1989,77:2 78
[6] 邵宗鸿，阵克奇，陈桂彬，等.严重型再生障碍性贫血患者血清IL-2、S IL-2R水平与免疫抑制治疗关系的研究.中华血液学杂志，1997，18：180
(1998-07-06 收稿), http://www.100md.com
单位：浙江省中医院
关键词：贫血，再生障碍性；外周血单个核细胞；粒-巨噬细胞集落形成单位；免疫抑制治疗
临床血液学杂志990112 摘要 目的：探讨严重型再生障碍性贫血(SAA)患者外周血 单个核细胞(PBMNCs)对正常造血的抑制及其与免疫抑制剂治疗疗效的关系。方法：采用造血 祖细胞半固体琼脂培养法，在正常人粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)培养体系中加入 SAA患者的PBMNCs。结果：35例SAA中，62.9%患者的PBMNCs对正常人CFU-GM生长具有明 显抑制作用，该组患者的环孢霉素A(CsA)治疗有效率达77.3%，明显高于PBMNCs对正常C FU-GM不产生抑制作用患者的CsA治疗有效率(30.8%)。结论：PBMNCs对正常人CFU-GM 生长具有抑制作用的SAA患者免疫抑制治疗疗效较好，SAA患者PBMNCs对正常CFU-GM的抑制 试验可作为预测SAA免疫抑制治疗疗效的简便方法。
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目前，免疫抑制治疗已成为严重型再生障碍性贫血(SAA)的 主要治疗手段。新型免疫抑制剂环孢霉素A(CsA)安全有效，已被广泛用于SAA的治疗。我们 研究了35例SAA患者外周血单个核细胞(PBMNCs)对正常人粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-G M)的抑制作用，并探讨其与CsA治疗疗效间的关系。
1 材料和方法
1.1 病例选择 35例初诊SAA均系我院住院患者，诊断符 合全国统一标准〔1〕。其中SAA-Ⅰ型24例，SAA-Ⅱ型11例；男23例，女12例；年 龄8～56岁，中位年龄27岁。接受免疫抑制剂治疗前，测定患者PBMNCs对正常人CFU-GM生长 的影响(抑制试验)。
1.2 正常人骨髓CFU-GM的培养及病人PBMNCs对其抑制 采用半固体琼脂培养法〔2〕，在正常人CFU-GM培养体系中加入SAA患者的PBMNCs共 同培养，正常骨髓取自患者的无病亲属。以往的实验表明，正常人PBMNCs对正常CFU-GM的 生长抑制率<30%，因此将PBMNCs对正常的CFU-GM的生长抑制率≥30%，作为抑制试验的阳 性标准〔2〕。
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1.3 治疗方案 35例患者均接受雄激素和CsA的治疗。部 分病例同时服用强的松(治疗初期)。CsA用法为5～8 mg/(kg.d)，分两次服用，连续用>3 个月。治疗期间定期检测血象、骨髓象、肝肾功能和CsA的血浓度，调整CsA的血浓度为 200～400 ng/ml。
1.4 SAA的疗效评定标准 参照全国通用标准〔1〕 。
2 结果
2.1 PBMNCs对正常CFU-GM的抑制作用 35例SAA中，22例 患者的PBMNCs对正常人CFU-GM的生长抑制率≥30%，抑制试验阳性率62.9%。
2.2 总疗效 随访观察6个月～4年，35例中21例有效，总 有效率60.0%，其中14例(40.0%)达到基本缓解或明显进步。
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2.3 PBMNCs对正常CFU-GM的抑制与CsA疗效的关系 抑制 试验阳性组22例，17例治疗有效，总有效率77.3%；抑制试验阴性组13例，4例有效，总 有效率30.8%；两组比较P<0.001。
3 讨论
SAA的发病机制复杂，与干细胞受损、微环境损伤及免疫异常有关。目前认为， 免疫紊乱与SAA的发病密切相关〔3〕，其中激活的T淋巴细胞分泌的负性造血因子如 白介素2(IL-2)、干扰素(IFN-)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)等对造血干细胞增殖和分 化的抑制在SAA的发病中起着重要作用〔4〕。免疫抑制剂CsA能有效地抑制激活的T细 胞分泌IL-2等细胞因子，并阻断T细胞IL-2受体的表达和毒性T细胞的激活〔5〕， 因此可用于SAA的治疗并具有一定的疗效。近来，有研究表明〔6〕，存在上述免疫功 能紊乱的SAA患者免疫抑制剂治疗疗效较好。本组研究证实，62.9%的SAA患者PBMNCs对正常CFU-GM的生长具有抑 制作用，提示在约2/3 SAA的发病过程中确实存在异常免疫介导。PBMNCs的主要成分是T细胞 ，推测SAA患者PBMNCs对正常CFU-GM的生长的抑制，可能主要是通过T细胞分泌IL-2等负性 造血因子而起作用。疗效分析结果进一步表明，抑制试验阳性的SAA患者CsA治疗疗效高(有 效率77.3%)，而抑制试验阴性的SAA患者CsA疗效低(有效率30.8%)。因此，对前一 类患者，免疫抑制剂CsA等可作为首选药物；对后一类患者，CsA等药物疗效有限，应考虑给 予其它治疗手段，如造血刺激因子治疗或骨髓移植，以进一步提高疗效。我们认为，SAA患 者PBMNCs对正常CFU-GM的抑制试验不仅有助于了解免疫功能紊乱在SAA发病过程中的作用， 而且是预测SAA患者免疫抑制治疗疗效的简便有效方法。
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参考文献
[1] 张之南主编.血液病诊断及疗效标准.天津：天津科学技术出 版社，1991.31-32，34-35
[2] 高瑞兰，虞荣喜，马逢顺，等.骨髓体外培养BFU-E、CFU-E和CFU-GM 对63例再生障碍性贫血的临床研究.中华内科杂志，1991，30：268
[3] Young NS,Barret AJ.The treatment of severe acquired aplastic an emia.Blood,1995,85:3367
[4] Marsh JCW,Gordon-smith E.Treatment of aplastic anemia with ant ilymphocyte globulin and cyclosporin.Int J Hematol,1995,62:133
[5] Leonard EM,Raefsky E,Griffith D,et al.Cycyclosporin therapy of aplastic anemia,congenital and acquired red cell aplasia.Br J Haematol,1989,77:2 78
[6] 邵宗鸿，阵克奇，陈桂彬，等.严重型再生障碍性贫血患者血清IL-2、S IL-2R水平与免疫抑制治疗关系的研究.中华血液学杂志，1997，18：180
(1998-07-06 收稿), http://www.100md.com