转化生长因子β在胃癌细胞内的表达
作者：邹益友 伍赶球 冯德云 郑晖
单位：邹益友(湖南医科大学湘雅医院消化内科 410008)；伍赶球(湖南医科大学组胚教研室)；冯德云 郑晖(湖南医科大学病理教研室)
关键词：胃癌；转化生长因子β
中国内镜杂志990201 目的：观察胃癌细胞内转化生长因子(TGF)β的表达情况，探讨胃癌发展过程中TGF β的可能作用。方法：42例经胃镜活检、病理检查证实为胃癌。44例浅表性胃炎的活检组织，采用免疫细胞化学方法—SP法显示TGF β1及β2，其表达强度采用等级表示(由弱到强依次为-、±、+、++、+++)。结果：在42例胃癌患者，TGF β1无1例强阳性(+++)，中度阳性(++)1例，低度阳性(+)10例，可疑阳性(±)3例，阴性(-)28例，阳性率为26.2%。TGF β2强阳性(+++)5例，中度阳性(++)16例，低度阳性(+)13例，可疑阳性(±)2例，阴性(-)6例；阳性率为81.0%。44例浅表性胃炎患者，TGF β1无1例阳性(+～+++)，可疑阳性(±)4例，阴性(-)40例。TGF β2无1例中度阳性及强阳性(++～+++)，低度阳性(+)10例，可疑阳性(±)1例，阴性(-)33例；阳性率为22.7%。胃癌患者的TGF β1、β2阳性率均明显高于浅表性胃炎，TGF β2的阳性率在胃癌更高于TGF β1。结论：TGF β1，尤其是TGF β2表达的增强是胃癌恶性演变的一个标志。
, 百拇医药
分类号 R735.2
TRANSFORMING GROWTH FACTOR β EXPRESSION IN THE GASTRIC CANCER CELLS
Zou Yiyou1，Wu Ganqiu2，Feng Deyun3
1 Division of Gastroenterology of Xiang ya Hospital,Changsha,Hunan 410008,P.R.China
2 Department of Histology and Embryology of Hunan Medical University,Changsha,Hunan 410078,P.R.China
, 百拇医药
3 Department of Pathology of Hunan Medical University,Changsha,Hunan 410078,P.R.China
Taking immunological cytochemical method,transforming growth factor (TGF) β1 and β2 expression in the gastric cancer cells were observed among 42 cases.The results showed that TGF β1 and β2 expression was intensified,especially TGFβ2.The positive rates of TGF β1 and β2 was 26.2% and 81.0% respectively among 42 cases,being obviously higher as comparing with 0.0% and 22.7% of total positive rate in superficial gastritis among 44 cases.This paper speculated that the increase of TGFβ1 and β2 expression in the gastric cancer cell may be an independent cellular marker in gastric cancer evolvement.
, http://www.100md.com
Key words:Gastric cancer;Transforming growth factor β
转化生长因子(TGF)β对正常上皮细胞发挥着普遍的生长抑制作用，但在胃癌的发生发展过程中，TGF β的表达和作用如何，目前尚未十分明了。近有观点认为[1，3]，TGF β1不仅不抑制癌细胞的生长，甚至刺激癌细胞的生长。为进一步明确TGF β在胃癌发展中的作用，我们采用胃癌活检组织，观察了TGF β家庭中β1和β2在胃癌细胞内的表达。
1 材料和方法
1.1 标本
42例均经胃镜活检、病理证实确诊为胃癌的患者，男性20例，女性22例，平均年龄(49.9±13.5)岁，其中年龄最大72岁，最小26岁。胃癌的病理组织学类型中，低分化腺癌28例(66.7%)，印戒细胞癌5例(11.9%)，中、高分化腺癌3例(7.1%)，高分化腺癌2例(4.8%)，低、未分化腺癌1例(2.4%)，未分化腺癌1例(2.4%)，中、低分化腺癌1例(2.4%)，中、中分化腺癌1例(2.4%)。同时，还收集了44例浅表性胃炎的活检组织，均按常规制作成石蜡包埋块。
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1.2 试剂
抗TGF β1和TGF β2武汉博士德公司生产；SP试剂盒系福州迈新生物技术公司生产。
1.3 方法
1.3.1 具体步骤按SP法进行。
1.3.2 对照 用缓冲液代替一抗作空白对照；以试剂盒所附阳性片作阳性对照。
1.3.3 TGF β阳性强度评估 根据切片中着色深浅半定量分级：-(阴性)，±(可疑)，+(弱阳性)，++(阳性)，+++(强阳性)。
1.4 资料记录和处理
所有科研资料录入电脑的Office 97 Excel中，利用Exce 97分析和处理资料。差异显著性采用卡方检验。
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2 结果
2.1 胃癌与浅表性胃炎组织内TGF β的表达
TGF β的阳性产物为棕黄色，分布于细胞质，见图1。在42例胃癌患者，TGF β1无1例强阳性(+++)，中度阳性(++)1例，低度阳性(+)10例，可疑阳性(±)3例，阴性(-)28例；阳性率为26.2%。TGF β2强阳性(+++)5例，中度阳性(++)16例，低度阳性(+)13例，可疑阳性(±)2例，阴性(-)6例；阳性率为81.0%。44例浅表性胃炎患者，TGF β1无1例阳性(+～+++)，可疑阳性(±)4例，阴性(-)40例。TGF β2无1例中度阳性及强阳性(++～+++)，低度阳性(+)10例，可疑阳性(±)1例，阴性(-)33例；阳性率为22.7%。见附表。
附表 胃癌与浅表性胃炎的TGF β的表达情况
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表达强度
阳性率(%)
-
±
+
++
+++
胃癌
TGF β1
28
3
10
1
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0
26.2
TGF β2
6
2
13
16
5
81.0
浅表性胃炎
TGF β1
40
4
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0
0
0
0.0
TGF β2
33
1
10
0
0
22.7
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图1 胃癌细胞TGF β2 SP法×400
2.2 胃癌与浅表性胃炎患者TGF β阳性率比较
经卡方检验，42例胃癌患者TGF β1、TGF β2阳性率分别与44例浅表性胃炎患者TGF β1、TGF β2阳性率相比较，差异有高度显著性，胃癌患者的TGF β2阳性率比TGF β1更高，见图2。
图2 胃癌与浅表性胃炎患者TGF β阳性率比较
3 讨论
TGF β存在于大多数正常组织及细胞内以及损伤修复、炎症反应的局部区域，其主要的生物学作用是刺激成纤维细胞和基质细胞合成胶原纤维连接蛋白及蛋白多糖等细胞外基质，阻止已合成的基质降解，对单核细胞、巨噬细胞有趋化作用。对上皮细胞而言，TGF β通常发挥着普遍的生长抑制效应，但有部分研究者认为[1，3]，在结直肠癌、胃癌等某些肿瘤，在其发生发展过程中，可摆脱TGF β1的抑制甚至被TGF β1刺激而生长。
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本文采用免疫细胞化学方法，观察了胃癌活检标本癌细胞内TGF β1、TGF β2的表达。结果表明，在42例胃癌患者，两类TGF β表达的强度及阳性率均有提高，尤其是TGF β2的表达更是明显。胃癌细胞具有表达TGF β1的功能已见于文献[3，4]，本文显示了胃癌细胞表达TGF β2的功能更为突出。
在胃癌发生以后，TGF β表达增强的生物学意义可能并非在于刺激癌细胞的生长。首先，目前并无直接证据表明TGF β刺激胃癌细胞生长；再者，已有实验证据表明，TGF βⅡR(TGF βⅡ受体)基因在胃癌细胞发生了突变[3，5，6]，受体的减少与TGF β1的升高呈负相关，因此，TGF β在胃癌细胞内的升高很有可能只与胃癌的恶性演变相伴随，仅仅是胃癌不良预后的一个标志，这与Robson[2]等将TGF β1的表达作为结直肠肿瘤预后不良的标志相一致。有关TGF β2与TGF βⅡR在胃癌恶化中的关系值得研究。
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总之，本文结果显示，在胃癌细胞内TGF β1和TGF β2表达增强，胃癌患者的阳性率明显升高，尤以TGF β2更明显，并推测TGF β表达的增强可作为胃癌恶性演变的一个标志。
参考文献
1 Van Laethem JL,Resibois A,Adler M,et al.Localization of transforming growth factor β1 precursor and latent TGF β1 binding protein in colorectal adenomas.Dig Dis Sci,1996；41:1741～1748
2 Robson H,Anderson E,James RD,et al.Transforming growth factor β1 expression in human colorectal tumours:an independent prognostic marker in a subgroup of poor progmosis patients.Br J Cancer,1996；74:753～758
, http://www.100md.com
3 许洪卫，陈 莉，王元和，等.胃癌组织TGF β1和TGF βⅡ型受体表达的临床意义.中华消化杂志，1998；18(6)：346～348
4 Takagi A,Kamiya S,Koga Y,et al.Analysis of inter leukin-8 secretion induced by helicobacter pylori from the gastric epithelial cell line MKN45:a mechanism independent of the intensity of cytotoxicity.J Gastroenterol Hepatol,1997；12(5):368～372
5 Wu MS,Lee CW,Shun CT,et al.Clinicopathological significance of altered loci of replication error and microsatellite instability-associated mutations in gastric cancer.Cancer Res,1998；58(7):1494～1497
6 Moss SF.Review article:Cellular markers in the gastric precancerous process.Aliment Pharmacol Ther,1998；12(Suppll):91～109
(1999-01-18收稿 张熙纯审稿), 百拇医药
单位：邹益友(湖南医科大学湘雅医院消化内科 410008)；伍赶球(湖南医科大学组胚教研室)；冯德云 郑晖(湖南医科大学病理教研室)
关键词：胃癌；转化生长因子β
中国内镜杂志990201 目的：观察胃癌细胞内转化生长因子(TGF)β的表达情况，探讨胃癌发展过程中TGF β的可能作用。方法：42例经胃镜活检、病理检查证实为胃癌。44例浅表性胃炎的活检组织，采用免疫细胞化学方法—SP法显示TGF β1及β2，其表达强度采用等级表示(由弱到强依次为-、±、+、++、+++)。结果：在42例胃癌患者，TGF β1无1例强阳性(+++)，中度阳性(++)1例，低度阳性(+)10例，可疑阳性(±)3例，阴性(-)28例，阳性率为26.2%。TGF β2强阳性(+++)5例，中度阳性(++)16例，低度阳性(+)13例，可疑阳性(±)2例，阴性(-)6例；阳性率为81.0%。44例浅表性胃炎患者，TGF β1无1例阳性(+～+++)，可疑阳性(±)4例，阴性(-)40例。TGF β2无1例中度阳性及强阳性(++～+++)，低度阳性(+)10例，可疑阳性(±)1例，阴性(-)33例；阳性率为22.7%。胃癌患者的TGF β1、β2阳性率均明显高于浅表性胃炎，TGF β2的阳性率在胃癌更高于TGF β1。结论：TGF β1，尤其是TGF β2表达的增强是胃癌恶性演变的一个标志。
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分类号 R735.2
TRANSFORMING GROWTH FACTOR β EXPRESSION IN THE GASTRIC CANCER CELLS
Zou Yiyou1，Wu Ganqiu2，Feng Deyun3
1 Division of Gastroenterology of Xiang ya Hospital,Changsha,Hunan 410008,P.R.China
2 Department of Histology and Embryology of Hunan Medical University,Changsha,Hunan 410078,P.R.China
, 百拇医药
3 Department of Pathology of Hunan Medical University,Changsha,Hunan 410078,P.R.China
Taking immunological cytochemical method,transforming growth factor (TGF) β1 and β2 expression in the gastric cancer cells were observed among 42 cases.The results showed that TGF β1 and β2 expression was intensified,especially TGFβ2.The positive rates of TGF β1 and β2 was 26.2% and 81.0% respectively among 42 cases,being obviously higher as comparing with 0.0% and 22.7% of total positive rate in superficial gastritis among 44 cases.This paper speculated that the increase of TGFβ1 and β2 expression in the gastric cancer cell may be an independent cellular marker in gastric cancer evolvement.
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Key words:Gastric cancer;Transforming growth factor β
转化生长因子(TGF)β对正常上皮细胞发挥着普遍的生长抑制作用，但在胃癌的发生发展过程中，TGF β的表达和作用如何，目前尚未十分明了。近有观点认为[1，3]，TGF β1不仅不抑制癌细胞的生长，甚至刺激癌细胞的生长。为进一步明确TGF β在胃癌发展中的作用，我们采用胃癌活检组织，观察了TGF β家庭中β1和β2在胃癌细胞内的表达。
1 材料和方法
1.1 标本
42例均经胃镜活检、病理证实确诊为胃癌的患者，男性20例，女性22例，平均年龄(49.9±13.5)岁，其中年龄最大72岁，最小26岁。胃癌的病理组织学类型中，低分化腺癌28例(66.7%)，印戒细胞癌5例(11.9%)，中、高分化腺癌3例(7.1%)，高分化腺癌2例(4.8%)，低、未分化腺癌1例(2.4%)，未分化腺癌1例(2.4%)，中、低分化腺癌1例(2.4%)，中、中分化腺癌1例(2.4%)。同时，还收集了44例浅表性胃炎的活检组织，均按常规制作成石蜡包埋块。
, http://www.100md.com
1.2 试剂
抗TGF β1和TGF β2武汉博士德公司生产；SP试剂盒系福州迈新生物技术公司生产。
1.3 方法
1.3.1 具体步骤按SP法进行。
1.3.2 对照 用缓冲液代替一抗作空白对照；以试剂盒所附阳性片作阳性对照。
1.3.3 TGF β阳性强度评估 根据切片中着色深浅半定量分级：-(阴性)，±(可疑)，+(弱阳性)，++(阳性)，+++(强阳性)。
1.4 资料记录和处理
所有科研资料录入电脑的Office 97 Excel中，利用Exce 97分析和处理资料。差异显著性采用卡方检验。
, 百拇医药
2 结果
2.1 胃癌与浅表性胃炎组织内TGF β的表达
TGF β的阳性产物为棕黄色，分布于细胞质，见图1。在42例胃癌患者，TGF β1无1例强阳性(+++)，中度阳性(++)1例，低度阳性(+)10例，可疑阳性(±)3例，阴性(-)28例；阳性率为26.2%。TGF β2强阳性(+++)5例，中度阳性(++)16例，低度阳性(+)13例，可疑阳性(±)2例，阴性(-)6例；阳性率为81.0%。44例浅表性胃炎患者，TGF β1无1例阳性(+～+++)，可疑阳性(±)4例，阴性(-)40例。TGF β2无1例中度阳性及强阳性(++～+++)，低度阳性(+)10例，可疑阳性(±)1例，阴性(-)33例；阳性率为22.7%。见附表。
附表 胃癌与浅表性胃炎的TGF β的表达情况
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表达强度
阳性率(%)
-
±
+
++
+++
胃癌
TGF β1
28
3
10
1
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0
26.2
TGF β2
6
2
13
16
5
81.0
浅表性胃炎
TGF β1
40
4
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0
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TGF β2
33
1
10
0
0
22.7
, 百拇医药
图1 胃癌细胞TGF β2 SP法×400
2.2 胃癌与浅表性胃炎患者TGF β阳性率比较
经卡方检验，42例胃癌患者TGF β1、TGF β2阳性率分别与44例浅表性胃炎患者TGF β1、TGF β2阳性率相比较，差异有高度显著性，胃癌患者的TGF β2阳性率比TGF β1更高，见图2。
图2 胃癌与浅表性胃炎患者TGF β阳性率比较
3 讨论
TGF β存在于大多数正常组织及细胞内以及损伤修复、炎症反应的局部区域，其主要的生物学作用是刺激成纤维细胞和基质细胞合成胶原纤维连接蛋白及蛋白多糖等细胞外基质，阻止已合成的基质降解，对单核细胞、巨噬细胞有趋化作用。对上皮细胞而言，TGF β通常发挥着普遍的生长抑制效应，但有部分研究者认为[1，3]，在结直肠癌、胃癌等某些肿瘤，在其发生发展过程中，可摆脱TGF β1的抑制甚至被TGF β1刺激而生长。
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本文采用免疫细胞化学方法，观察了胃癌活检标本癌细胞内TGF β1、TGF β2的表达。结果表明，在42例胃癌患者，两类TGF β表达的强度及阳性率均有提高，尤其是TGF β2的表达更是明显。胃癌细胞具有表达TGF β1的功能已见于文献[3，4]，本文显示了胃癌细胞表达TGF β2的功能更为突出。
在胃癌发生以后，TGF β表达增强的生物学意义可能并非在于刺激癌细胞的生长。首先，目前并无直接证据表明TGF β刺激胃癌细胞生长；再者，已有实验证据表明，TGF βⅡR(TGF βⅡ受体)基因在胃癌细胞发生了突变[3，5，6]，受体的减少与TGF β1的升高呈负相关，因此，TGF β在胃癌细胞内的升高很有可能只与胃癌的恶性演变相伴随，仅仅是胃癌不良预后的一个标志，这与Robson[2]等将TGF β1的表达作为结直肠肿瘤预后不良的标志相一致。有关TGF β2与TGF βⅡR在胃癌恶化中的关系值得研究。
, http://www.100md.com
总之，本文结果显示，在胃癌细胞内TGF β1和TGF β2表达增强，胃癌患者的阳性率明显升高，尤以TGF β2更明显，并推测TGF β表达的增强可作为胃癌恶性演变的一个标志。
参考文献
1 Van Laethem JL,Resibois A,Adler M,et al.Localization of transforming growth factor β1 precursor and latent TGF β1 binding protein in colorectal adenomas.Dig Dis Sci,1996；41:1741～1748
2 Robson H,Anderson E,James RD,et al.Transforming growth factor β1 expression in human colorectal tumours:an independent prognostic marker in a subgroup of poor progmosis patients.Br J Cancer,1996；74:753～758
, http://www.100md.com
3 许洪卫，陈 莉，王元和，等.胃癌组织TGF β1和TGF βⅡ型受体表达的临床意义.中华消化杂志，1998；18(6)：346～348
4 Takagi A,Kamiya S,Koga Y,et al.Analysis of inter leukin-8 secretion induced by helicobacter pylori from the gastric epithelial cell line MKN45:a mechanism independent of the intensity of cytotoxicity.J Gastroenterol Hepatol,1997；12(5):368～372
5 Wu MS,Lee CW,Shun CT,et al.Clinicopathological significance of altered loci of replication error and microsatellite instability-associated mutations in gastric cancer.Cancer Res,1998；58(7):1494～1497
6 Moss SF.Review article:Cellular markers in the gastric precancerous process.Aliment Pharmacol Ther,1998；12(Suppll):91～109
(1999-01-18收稿 张熙纯审稿), 百拇医药