苦味酸天狼猩红染色在心脏胶原纤维定量分析中的应用
作者：郑伟
单位：福建医科大学病理解剖学教研室 (福州 350004)
关键词：天狼猩红染色；胶原纤维；定量分析
福建医科大学学报990247
胶原纤维是结缔组织中的三种纤维之一,分布广,含量多。在对动脉硬化的心脏的胶原纤维和肌纤维的定量分析中, 应用苦味酸天狼猩红染色因为染色对比度清晰, 有利于胶原纤维的图像识别,测量心肌中胶原纤维容积分数,效果良好。兹介绍如下。
1 方法与结果
1.1 试剂配制 苦味酸天狼猩红染液0.1g天狼猩红,溶解于100ml苦味酸饱和液中。
1.2 染色方法
(1)切片脱蜡至水。(2)蒸馏水洗3次。(3)苦味酸天狼猩红染液染30～60min。(4)无水酒精直接分化与脱水。(5)二甲苯透明,中性树胶封片。
1.3 染色结果
胶原纤维呈猩红色(粗大胶原纤维颜色尤其鲜艳),肌纤维黄色(附图)。
附图 胶原纤维呈红色(粗大胶原纤维颜色鲜艳)，肌纤维黄色。×200
2 讨 论
胶原纤维是由成纤维细胞产生的一种纤维蛋白成分, 常常被酸性染料染色。例如在VG染色中用0.1%酸性品红苦味酸饱和液 ,使胶原纤维呈红色。该法在病理诊断上用于鉴定纤维、平滑肌和神经来源的肿瘤有一定的意义。但作者发现在对动脉硬化的心脏进行胶原纤维定量测定时,VG染色的切片中胶原纤维和心肌纤维在图像分割、识别中不能明显区分开来,主要原因是胶原纤维着染的红色不够鲜艳,而心肌中胶原纤维的分割、识别,图像分析系统是采用边界检出和对灰度相近的区域进行聚类分析等方法进行,所以染色不鲜艳或两种纤维红、黄色相混杂, 这样染色效果测得的胶原纤维面积有相当的误差。
天狼猩红是阴离子强酸染料, 易与胶原纤维中的碱性基团反应。所以苦味酸天狼猩红染液可使胶原纤维特异性地着染为猩红色,非胶原纤维部分不见猩红色背景,这样的染色结果使得胶原纤维的图像识别效果良好。为心室胶原容积分数测量的准确性提供了保证。同时在图像分析中, 同一组切片的厚度及染色时间要一致,显微镜光照强度亦要前后一致,以保证同一组切片所测数据间的可比性。
苦味酸天狼猩红染色与VG染色一样,亦可用苏木素复染细胞核(但在胶原纤维定量分析中不复染核), 使其在光镜下更有助于确定胶原纤维在组织内的分布及与周围细胞的关系, 以便做出正确的病理诊断。
(收稿：1999-12-30), 百拇医药
单位：福建医科大学病理解剖学教研室 (福州 350004)
关键词：天狼猩红染色；胶原纤维；定量分析
福建医科大学学报990247
胶原纤维是结缔组织中的三种纤维之一,分布广,含量多。在对动脉硬化的心脏的胶原纤维和肌纤维的定量分析中, 应用苦味酸天狼猩红染色因为染色对比度清晰, 有利于胶原纤维的图像识别,测量心肌中胶原纤维容积分数,效果良好。兹介绍如下。
1 方法与结果
1.1 试剂配制 苦味酸天狼猩红染液0.1g天狼猩红,溶解于100ml苦味酸饱和液中。
1.2 染色方法
(1)切片脱蜡至水。(2)蒸馏水洗3次。(3)苦味酸天狼猩红染液染30～60min。(4)无水酒精直接分化与脱水。(5)二甲苯透明,中性树胶封片。
1.3 染色结果
胶原纤维呈猩红色(粗大胶原纤维颜色尤其鲜艳),肌纤维黄色(附图)。
附图 胶原纤维呈红色(粗大胶原纤维颜色鲜艳)，肌纤维黄色。×200
2 讨 论
胶原纤维是由成纤维细胞产生的一种纤维蛋白成分, 常常被酸性染料染色。例如在VG染色中用0.1%酸性品红苦味酸饱和液 ,使胶原纤维呈红色。该法在病理诊断上用于鉴定纤维、平滑肌和神经来源的肿瘤有一定的意义。但作者发现在对动脉硬化的心脏进行胶原纤维定量测定时,VG染色的切片中胶原纤维和心肌纤维在图像分割、识别中不能明显区分开来,主要原因是胶原纤维着染的红色不够鲜艳,而心肌中胶原纤维的分割、识别,图像分析系统是采用边界检出和对灰度相近的区域进行聚类分析等方法进行,所以染色不鲜艳或两种纤维红、黄色相混杂, 这样染色效果测得的胶原纤维面积有相当的误差。
天狼猩红是阴离子强酸染料, 易与胶原纤维中的碱性基团反应。所以苦味酸天狼猩红染液可使胶原纤维特异性地着染为猩红色,非胶原纤维部分不见猩红色背景,这样的染色结果使得胶原纤维的图像识别效果良好。为心室胶原容积分数测量的准确性提供了保证。同时在图像分析中, 同一组切片的厚度及染色时间要一致,显微镜光照强度亦要前后一致,以保证同一组切片所测数据间的可比性。
苦味酸天狼猩红染色与VG染色一样,亦可用苏木素复染细胞核(但在胶原纤维定量分析中不复染核), 使其在光镜下更有助于确定胶原纤维在组织内的分布及与周围细胞的关系, 以便做出正确的病理诊断。
(收稿：1999-12-30), 百拇医药