金刚健骨片对绝经后骨质疏松症骨形成与骨吸收失衡的双向调节作用
作者：姚共和 谢林 郭振球
单位：湖南中医学院第一附属医院 (410007 长沙)
关键词：骨质疏松症；绝经；内分泌激素；中药治疗
中国中医骨伤科990203 摘要 目的：探讨金刚健骨片防止绝经后骨质疏松症的机理。方法：摘除雌性SD大鼠双侧卵巢制成动物模型，灌药13周断头取血，用放免法测定动物血清内分泌激素E2，BGP，CT，PTH。结果：金刚健骨片和对比药物骨松宝，尼尔雌醇均能提高模型鼠E2，BGP，CT水平，抑制PTH分泌。结论：金刚健骨片对绝经后骨质疏松症骨形成与骨吸收失衡具有双向调节作用。
Dobuble Adjusting for the Imbalance of Bone Formation and Absortion of Postmenopausal Osteoporosis with the Treatment of Jin Gan Jian Gu Pian
, 百拇医药
Yao Gonghe,Xie Lin,Guo Zhenqiu，et al
The First Affiliated Hospital of Hunan Traditional Chinese Medical College (410007)
ABSTRACT Objective:To probe into the mechanism of preventing postmenopausal osteoporosis with the treatment of Jin Gan Jian Gu Pian.(JGJGP).Method:After extrocting both sides of overia of femal SD rats,feeding the rats with Medicine (observating or controlling medicines) for 13 weeks,then taking rats' blood by deraction,and determinating E2,BGP,CT,PTH,of Serum.Result:Increacing the contents of E2,BGP,CT of the rats serum and inhibiting the secretion of PTH with JGJGP(observating medicine),GUSONGBAO and Nyiestriol (controlling medicine).Conclusion:JGJGP has the action of double adjustion for the imbalance of bone formation and absorbtion of postmenopausal osteoporosis.
, 百拇医药
KEY WORDS Osteoporosis Menopause Endocrinehormone Treatment of Chinese Medicine
金刚健骨片是我院治疗绝经后骨质疏松症的院内自制剂，临床应用2年多来，疗效显著，有效率达94.5%以上。现代医学研究结果表明：绝经后骨质疏松症的发生机理主要是骨形成与骨吸收的细胞过程偶联(coupting)出现缺陷，骨再建呈负平衡，而雌激素能刺激骨细胞制造骨基质，骨钙素(BGP)可促进骨基质的成熟、促进骨形成，降钙素(CT)可减少骨吸收；甲状旁腺激素(PTH)可促进骨吸收，减少骨形成。因此，我们选用雌二醇(E2)，骨钙素(BGP)，降钙素(CT)，甲状旁腺激素(PTH)为观察指标，探讨金刚健骨片对绝经后骨质疏松症骨形成与骨吸收的影响。
材料与方法
1 动物来源与造模方法
, 百拇医药
1.1 动物来源 14月龄雌性SD大鼠，体重340±4g，购自上海西晋尔-必凯实验动物有限公司，编号01310，合格证书医动字第(02-49-2号)，动物级别：清洁级。
1.2 动物造模方法 去势模型鼠，乙醚麻醉，严格无菌操作，取腹部正中切口，进入腹腔，完整摘除双侧卵巢，彻底止血后，分两层依次缝合肌肉和皮肤；正常假手术鼠，切口同前，进入腹腔后切除左，右两侧肠系膜各一小段，其重量基本与两侧卵巢重量齐同，止血缝合。两组动物均于5天后拆线，在同样环境中自由饮水、摄食、13周后，再将动物分组给药13周，然后将大鼠断头取血，分离血清待测。
2 动物分组与给药方法
2.1 药物 金刚健骨片，主要由鹿角胶、杜仲、肉苁蓉、牛膝等多味药物组成，湖南中医学院附一医院药剂科生产，湖南省药政局注册号卫剂3-0001，0.3克/片，60片/每瓶。骨松宝颗粒剂，主要由淫羊藿、生地黄、牡蛎等9味药组成，贵州富华药业有限责任公司生产，黔卫药准字(1996)第100079号，10g/包。
, 百拇医药
尼尔雌醇片，北京四环制药二厂出品，京卫药准字(93)第034号。1mg/片，10片/盒。
2.2 动物分组 将60只SD大鼠按随机区组设计，先称体重分层，再随机分为6组(A、B、C、D、E、F)，每组10只，分别于动物造模3个月后，即模型成功后给药，每周灌胃6次，将药物按人鼠剂量换算，溶解于凉开水中，每天灌胃液体量为4ml/只。
A组、C组：分别为金刚健骨片高，低两个治疗剂量组。C组按0.66g/kg体重给药，A组按2.64g/kg体重给药，高、低两组剂量比为4∶1灌胃，每周6次，共13周。
B组：模型空白组。造模成功后，不给任何药物，每日给凉开水4ml/只，灌胃，每周6次，共13周。
D组：骨松宝治疗组。造模成功后，按2.2g/kg体重给骨松宝溶解于4ml凉开水中灌胃，每周6次，共13周。
, 百拇医药
E组：尼尔雌醇组，造模成功后，按0.15mg/kg体重周给药，每周仅灌药1次，每次溶解于4ml凉开水中，另每周灌凉开水5次，每次4ml。共13周。
F组：假手术空白组。假手术，不去卵巢，不给任何药物，每日给凉开水4ml/只灌胃，每周6次，共13周。
3 观测指标
测定动物血清雌二醇(E2)，降钙素(CT)，骨钙素(BGP)，甲状旁腺激素(PTH)。均采用放射免疫法，试剂盒购自中国原子能研究所，按试剂盒说明进行操作。
结果与分析
1 血清雌二醇测定结果 假手术空白组(F)与尼尔雌醇组(E)血清中E2含量明显高于其他各组，差异有非常显著意义(P<0.1)，模型空白组(B)E2含量最低，与其他各组比较差异有非常显著意义(P<0.1)或显著意义(P<0.05)，金刚健骨片高、低剂量组(A、C)及骨松宝组(D)三组E2含量比较，差异无显著意义(P>0.05)，见表1，说明三组中药均能提高模型动物血清中E2含量。
, 百拇医药
表1 各组动物治疗后血清E2含量相互比较(秩和检验) 组别
例数
血清E2含量
卡方值
P值
SNK检验
C
D
A
B
E
F
C
, 百拇医药
10
27.5798±10.1079
-
D
10
31.57±7.0098
2.34*
-
A
10
30.3361±12.3825
, 百拇医药
1.60*
1.87*
-
35.03
0.000
B
10
21.4493±4.8898
4.76△△
4.17△
4.28△△
, http://www.100md.com
-
E
10
53.9746±11.246
7.20△△
10.74△△
8.48△△
7.70△△
-
F
10
60.4711±19.5209
, 百拇医药
6.20△△
7.94△△
6.93△△
6.79△△
1.07*
-
注：* P>0.05；△ P<0.05；△△ P<0.01
2 血清骨钙素测定结果 模型空白组(B)血清BGP含量最低，其次为尼尔雌醇组(E)，两组比较，差异无显著意义(P>0.05)，金刚健骨片高剂量组(A)与模型空白组(B)及尼尔雌醇组(E)比较，差异有非常显著意义(P<0.01)或显著意义(P<0.05)，金刚健骨片低剂量组(C)与模型空白组(B)比较，差异有显著意义(P<0.05)，其余各组之间相互比较，差异没有显著意义(P>0.05)，说明补肾填精活血方金刚健骨片能显著提高血清BGP含量，骨松宝组(D)BGP含量虽较模型空白组、尼尔雌孵组高，但差异无显著意义(P>0.05)，见表2。
, 百拇医药
表2 各组动物治疗后血清BGP含量相互比较(方差分析)
组别
例数
(n)
血清BGP含量
(ng/ml)
F值
P值
SNK检验
C
D
A
, 百拇医药
B
E
F
C
10
12.4536±2.7564
-
D
10
10.751±3.2225
2.46*
-
A
, 百拇医药
10
11.2105±3.125
1.56*
0.58*
-
4.2268
0.0031
B
10
7.9579±2.0079
5.64△△
3.50*
, http://www.100md.com
4.08△
-
E
10
8.7931±1.6931
4.59△
2.46*
3.03*
1.05*
-
F
10
, 百拇医药
10.4408±2.3869
2.52*
0.39*
0.97*
3.11*
2.07*
-
注：* P>0.05；△ P<0.05；△△ P<0.01
3 血清降钙素测定结果 模型空白组(B)CT水平最低，与其它各组比较差异有显著意义(P<0.05)或非常显著意义(P<0.01)，其它各组间相互比较，差异没有显著意义(P>0.05)，见表3，说明金刚健骨片、骨松宝、尼尔雌醇能明显提高血清CT水平，抑制骨吸收，促进骨形成。
, 百拇医药
表3 各组动物治疗后血清CT含量相互比较(秩和检验) 组别
例数
(n)
血清S-CT含量
(ng/ml)
卡方值
P值
SNK检验
C
D
A
B
E
, http://www.100md.com
F
C
10
192.0659±50.6908
-
D
10
176.8964±40.2691
2.30*
-
A
10
185.3287±84.2004
, 百拇医药
2.35*
1.20*
-
11.95
0.0354
B
10
131.4519±47.7968
5.09△△
5.18△△
6.07△△
, 百拇医药
-
E
10
163.3881±33.2256
2.45*
1.71*
1.34*
7.7△△
-
F
10
207.3804±59.354
, 百拇医药
1.84*
2.78*
2.71*
4.87△△
2.71*
-
注：* P>0.05；△ P<0.05；△△ P<0.01
4 血清甲状旁腺激素测定结果 模型空白组(B)PTH水平最高，与其它各组比较，差异均有非常显著意义(P<0.01)或显著意义(P<0.05)，其它各组间相互比较，差异多无显著意义(P>0.05)，说明经治疗模型动物骨吸收受到抑制，见表4。
, http://www.100md.com
表4 各组动物治疗后血清PTH含量相互比较(秩和检验) 组别
例数
(n)
血清PTH含量
(ng/dl)
卡方值
P值
SNK检验
C
D
A
B
E
, http://www.100md.com
F
C
10
51.8251±6.5509
-
D
10
46.2158±9.1712
3.14*
-
A
10
56.1466±12.9785
, http://www.100md.com
1.81*
2.99*
-
12.68
0.0256
B
10
64.0532±10.6769
4.33△
4.48△
5.85△△
, http://www.100md.com
-
E
10
52.7752±15.4863
0.67*
2.71*
2.03*
5.30△△
-
F
10
48.6003±17.2689
, 百拇医药
3.23△
1.44*
3.00*
4.78△△
2.62*
-
注：* P>0.05；△ P<0.05；△△ P<0.01讨论
雌激素能刺激骨细胞制造骨基质，促进骨形成。绝经后卵巢功能逐渐衰退，雌激素分泌减少，而导致骨代谢不平衡，破骨细胞骨吸收活跃，成骨细胞的形成相应减弱，机体内完成一个骨建周期，必然损失一部分骨量，日久而致骨质疏松症。国内外许多研究表明：采用雌激素替代治疗，能直接改善绝经后妇女骨代谢，有效地防止绝经后头几年骨的进行性丢失，降低骨质疏松症骨折的危险程度，但短期服用，其疗效难以持久，需长期服用(7年以上)才能保持远程疗效，[1]因而很容易导致各种并发症的发生，如乳腺癌、子宫内膜癌等严重并发症，[2]因此，我们把目光转向中医药宝库，运用中医药辨证施治骨质疏松症，结果发现补肾填精活血中药制剂金刚健骨片能提高模型大鼠血清E2水平，改善骨代谢，减少骨丢失。这种作用的产生，可能主要是通过中药调整下丘脑-垂体-性腺轴或肾上腺轴的功能来实现的。另有报道认为，补肾中药可以提高性腺上雌激素受体水平[3]和绝经后妇女白细胞上雌激素受体含量，[4]据此而推测也可能提高成骨细胞上雌激素受体水平，[5]使较小量的雌激素发挥较大的生理效应，这也可能是中医药治疗骨质疏松症的疗效机制之一。
, 百拇医药
骨钙素参与钙代谢的调节，在骨组织发育中发挥钙化作用，促进骨基质成熟，其主要存在于骨组织中，约占骨蛋白的1～2%，是骨内非胶原蛋白的主要成分，目前认为BGP主要由成骨细胞产生，并沉积在骨细胞的间质细胞外，同时也可释放入血液中，血中BGP与骨内BGP含量呈密切正相关关系，[6]因此，血中BGP含量可直接反映骨的形成状况。尼尔雌醇组BGP含量与空白模型组相似，均较低，差异无显著意义(P>0.05)，而金刚健骨片、骨松宝组BGP含量均有不同程度的提高，说明中医药治疗骨质疏松症的作用是多方面的，既能抑制骨的吸收，又能刺激成骨，产生较多骨基质，使骨代谢转化为正态平衡。
降钙素对骨的作用是直接抑制骨质吸收，主要是抑制破骨细胞的数量和活性，同时也调节成骨细胞的活性而促进骨生成过程，降钙素的这种抑制骨吸收的作用，在整体动物和骨细胞培养实验中均已得到证实。[7]由于降钙素的作用，骨钙释放减少，又从血浆中摄取钙，使骨的生成相应增加。绝经后妇女雌激素缺乏而致降钙素水平下降，是绝经后骨质疏松发病的重要原因。本实验中可见模型空白组动物血清中CT水平最低，与其它各组比较差异均有显著或非常显著意义(P<0.05,P<0.01)，而其他各组间比较差异没有显著意义(P>0.05)，说明金刚健骨片等中药制剂同尼尔雌醇一样具有同样的提高血清CT水平，从而抑制骨吸收，促进骨生成的作用。降钙素是甲状腺中C细胞所分泌的，中药提高CT水平，是通过提高雌激素水平。间接提高甲状腺分泌CT的功能，还是直接作用于甲状腺需要进一步深入的研究。
, 百拇医药
甲状旁腺激素对骨的作用主要是促进骨吸收，通过作用于破骨细胞来实现。PTH对各种骨细胞的共同作用是促进Ca++从细胞外液进入及从线粒体释出，因而使细胞浆Ca++浓度增加，核糖核酸的合成增加，进而细胞分裂并转变为破骨细胞，使破骨细胞增多；如果破骨细胞内钙离子增加，可刺激溶酶体酶释放出水解酶，分解骨的有机基质，引起骨的溶化，释放出钙，使血钙水平升高，并且破骨细胞内钙离子增加还可抑制柠檬酸脱氨酶，从而产生大量的柠檬酸和乳酸，扩散到骨基质中，使骨周围PH值降低，使骨盐进一步溶解释放。绝经后妇女随着年龄的增加，1.25(OH)2D3相应减少，肠钙吸收减少，继而血钙下降，从而刺激PTH分泌增加，增加骨的吸收，动员骨钙释放入血。我们的研究结果发现，模型空白组PTH水平最高，与其他各组差异有非常显著意义(P<0.01)或显著意义(P<0.05)，说明骨吸收亢进，而其余各组间差异没有显著意义(P>0.05)，说明中药可通过抑制PTH的分泌来抑制骨吸收。
, http://www.100md.com 雌激素、降钙素、甲状旁腺激素三者关系密切，雌激素能拮抗甲状旁腺激素的骨吸收作用，减少骨组织对PTH骨吸收作用的敏感性，此外雌激素又能直接影响降钙素的分泌，使血中CT含量增加，抑制骨质的吸收，刺激成骨细胞的活性。补肾填精活血方金刚健骨片治疗骨质疏松症的作用可能是通过提高雌性激素水平及成骨细胞中雌激素受体含量，拮抗PTH的骨吸收作用等机制，从而实现对绝经后骨质疏松症骨形成与骨吸收失衡的双向调节作用，达到骨代谢正态平衡。
参考文献
1.Eelson DT.Zhang-Y,Hannan-MT,et al.The effect of postmenpausal estrogn therapy on bone density in elderly women.N Engl Med,1993,329:11141～11146
2.Gamble-CL.Osteoporosis:drug and nondrug therapies for the patient at risk.Geriatrics,1995,AUG:50(8):39～43
, http://www.100md.com
3.魏美娟，俞瑾.补肾药对雄性激素致无排卵大鼠垂体及卵巢形态学变化观察.中国中西医结合杂志，1993，13(9)：521～523
4.张学庆，邹大金.更年期综合症患者白细胞雌激素受体的变化及六味地黄丸的疗效.中国中西医结合杂志，1993，13(9)：521～523
5.宋献文，石印玉，沈培芝，等.补肾中药对骨质疏松大鼠骨骼的影响.中国骨伤，1997，10(5)：13～15
6.Johansen JS.Plasma BGP:an indicator of spontaneous bone loss and estrogen treatment in postmenopusal woman.Eur.J clin Invest,1988,8(1):191
7.Fenton AJ,Maxtin TJ,nicholosn GC.Long-Term culture of disaggregated rat osteoclasts:inhibition of bone resorption and reduction of osteoclast-Like cel number by calcitionin and PTHrp.J cell Phtsiol,1993,155:1
(收稿：1998-8-3), 百拇医药
单位：湖南中医学院第一附属医院 (410007 长沙)
关键词：骨质疏松症；绝经；内分泌激素；中药治疗
中国中医骨伤科990203 摘要 目的：探讨金刚健骨片防止绝经后骨质疏松症的机理。方法：摘除雌性SD大鼠双侧卵巢制成动物模型，灌药13周断头取血，用放免法测定动物血清内分泌激素E2，BGP，CT，PTH。结果：金刚健骨片和对比药物骨松宝，尼尔雌醇均能提高模型鼠E2，BGP，CT水平，抑制PTH分泌。结论：金刚健骨片对绝经后骨质疏松症骨形成与骨吸收失衡具有双向调节作用。
Dobuble Adjusting for the Imbalance of Bone Formation and Absortion of Postmenopausal Osteoporosis with the Treatment of Jin Gan Jian Gu Pian
, 百拇医药
Yao Gonghe,Xie Lin,Guo Zhenqiu，et al
The First Affiliated Hospital of Hunan Traditional Chinese Medical College (410007)
ABSTRACT Objective:To probe into the mechanism of preventing postmenopausal osteoporosis with the treatment of Jin Gan Jian Gu Pian.(JGJGP).Method:After extrocting both sides of overia of femal SD rats,feeding the rats with Medicine (observating or controlling medicines) for 13 weeks,then taking rats' blood by deraction,and determinating E2,BGP,CT,PTH,of Serum.Result:Increacing the contents of E2,BGP,CT of the rats serum and inhibiting the secretion of PTH with JGJGP(observating medicine),GUSONGBAO and Nyiestriol (controlling medicine).Conclusion:JGJGP has the action of double adjustion for the imbalance of bone formation and absorbtion of postmenopausal osteoporosis.
, 百拇医药
KEY WORDS Osteoporosis Menopause Endocrinehormone Treatment of Chinese Medicine
金刚健骨片是我院治疗绝经后骨质疏松症的院内自制剂，临床应用2年多来，疗效显著，有效率达94.5%以上。现代医学研究结果表明：绝经后骨质疏松症的发生机理主要是骨形成与骨吸收的细胞过程偶联(coupting)出现缺陷，骨再建呈负平衡，而雌激素能刺激骨细胞制造骨基质，骨钙素(BGP)可促进骨基质的成熟、促进骨形成，降钙素(CT)可减少骨吸收；甲状旁腺激素(PTH)可促进骨吸收，减少骨形成。因此，我们选用雌二醇(E2)，骨钙素(BGP)，降钙素(CT)，甲状旁腺激素(PTH)为观察指标，探讨金刚健骨片对绝经后骨质疏松症骨形成与骨吸收的影响。
材料与方法
1 动物来源与造模方法
, 百拇医药
1.1 动物来源 14月龄雌性SD大鼠，体重340±4g，购自上海西晋尔-必凯实验动物有限公司，编号01310，合格证书医动字第(02-49-2号)，动物级别：清洁级。
1.2 动物造模方法 去势模型鼠，乙醚麻醉，严格无菌操作，取腹部正中切口，进入腹腔，完整摘除双侧卵巢，彻底止血后，分两层依次缝合肌肉和皮肤；正常假手术鼠，切口同前，进入腹腔后切除左，右两侧肠系膜各一小段，其重量基本与两侧卵巢重量齐同，止血缝合。两组动物均于5天后拆线，在同样环境中自由饮水、摄食、13周后，再将动物分组给药13周，然后将大鼠断头取血，分离血清待测。
2 动物分组与给药方法
2.1 药物 金刚健骨片，主要由鹿角胶、杜仲、肉苁蓉、牛膝等多味药物组成，湖南中医学院附一医院药剂科生产，湖南省药政局注册号卫剂3-0001，0.3克/片，60片/每瓶。骨松宝颗粒剂，主要由淫羊藿、生地黄、牡蛎等9味药组成，贵州富华药业有限责任公司生产，黔卫药准字(1996)第100079号，10g/包。
, 百拇医药
尼尔雌醇片，北京四环制药二厂出品，京卫药准字(93)第034号。1mg/片，10片/盒。
2.2 动物分组 将60只SD大鼠按随机区组设计，先称体重分层，再随机分为6组(A、B、C、D、E、F)，每组10只，分别于动物造模3个月后，即模型成功后给药，每周灌胃6次，将药物按人鼠剂量换算，溶解于凉开水中，每天灌胃液体量为4ml/只。
A组、C组：分别为金刚健骨片高，低两个治疗剂量组。C组按0.66g/kg体重给药，A组按2.64g/kg体重给药，高、低两组剂量比为4∶1灌胃，每周6次，共13周。
B组：模型空白组。造模成功后，不给任何药物，每日给凉开水4ml/只，灌胃，每周6次，共13周。
D组：骨松宝治疗组。造模成功后，按2.2g/kg体重给骨松宝溶解于4ml凉开水中灌胃，每周6次，共13周。
, 百拇医药
E组：尼尔雌醇组，造模成功后，按0.15mg/kg体重周给药，每周仅灌药1次，每次溶解于4ml凉开水中，另每周灌凉开水5次，每次4ml。共13周。
F组：假手术空白组。假手术，不去卵巢，不给任何药物，每日给凉开水4ml/只灌胃，每周6次，共13周。
3 观测指标
测定动物血清雌二醇(E2)，降钙素(CT)，骨钙素(BGP)，甲状旁腺激素(PTH)。均采用放射免疫法，试剂盒购自中国原子能研究所，按试剂盒说明进行操作。
结果与分析
1 血清雌二醇测定结果 假手术空白组(F)与尼尔雌醇组(E)血清中E2含量明显高于其他各组，差异有非常显著意义(P<0.1)，模型空白组(B)E2含量最低，与其他各组比较差异有非常显著意义(P<0.1)或显著意义(P<0.05)，金刚健骨片高、低剂量组(A、C)及骨松宝组(D)三组E2含量比较，差异无显著意义(P>0.05)，见表1，说明三组中药均能提高模型动物血清中E2含量。
, 百拇医药
表1 各组动物治疗后血清E2含量相互比较(秩和检验) 组别
例数
血清E2含量
卡方值
P值
SNK检验
C
D
A
B
E
F
C
, 百拇医药
10
27.5798±10.1079
-
D
10
31.57±7.0098
2.34*
-
A
10
30.3361±12.3825
, 百拇医药
1.60*
1.87*
-
35.03
0.000
B
10
21.4493±4.8898
4.76△△
4.17△
4.28△△
, http://www.100md.com
-
E
10
53.9746±11.246
7.20△△
10.74△△
8.48△△
7.70△△
-
F
10
60.4711±19.5209
, 百拇医药
6.20△△
7.94△△
6.93△△
6.79△△
1.07*
-
注：* P>0.05；△ P<0.05；△△ P<0.01
2 血清骨钙素测定结果 模型空白组(B)血清BGP含量最低，其次为尼尔雌醇组(E)，两组比较，差异无显著意义(P>0.05)，金刚健骨片高剂量组(A)与模型空白组(B)及尼尔雌醇组(E)比较，差异有非常显著意义(P<0.01)或显著意义(P<0.05)，金刚健骨片低剂量组(C)与模型空白组(B)比较，差异有显著意义(P<0.05)，其余各组之间相互比较，差异没有显著意义(P>0.05)，说明补肾填精活血方金刚健骨片能显著提高血清BGP含量，骨松宝组(D)BGP含量虽较模型空白组、尼尔雌孵组高，但差异无显著意义(P>0.05)，见表2。
, 百拇医药
表2 各组动物治疗后血清BGP含量相互比较(方差分析)
组别例数
(n)
血清BGP含量
(ng/ml)
F值
P值
SNK检验
C
D
A
, 百拇医药
B
E
F
C
10
12.4536±2.7564
-
D
10
10.751±3.2225
2.46*
-
A
, 百拇医药
10
11.2105±3.125
1.56*
0.58*
-
4.2268
0.0031
B
10
7.9579±2.0079
5.64△△
3.50*
, http://www.100md.com
4.08△
-
E
10
8.7931±1.6931
4.59△
2.46*
3.03*
1.05*
-
F
10
, 百拇医药
10.4408±2.3869
2.52*
0.39*
0.97*
3.11*
2.07*
-
注：* P>0.05；△ P<0.05；△△ P<0.01
3 血清降钙素测定结果 模型空白组(B)CT水平最低，与其它各组比较差异有显著意义(P<0.05)或非常显著意义(P<0.01)，其它各组间相互比较，差异没有显著意义(P>0.05)，见表3，说明金刚健骨片、骨松宝、尼尔雌醇能明显提高血清CT水平，抑制骨吸收，促进骨形成。
, 百拇医药
表3 各组动物治疗后血清CT含量相互比较(秩和检验) 组别
例数
(n)
血清S-CT含量
(ng/ml)
卡方值
P值
SNK检验
C
D
A
B
E
, http://www.100md.com
F
C
10
192.0659±50.6908
-
D
10
176.8964±40.2691
2.30*
-
A
10
185.3287±84.2004
, 百拇医药
2.35*
1.20*
-
11.95
0.0354
B
10
131.4519±47.7968
5.09△△
5.18△△
6.07△△
, 百拇医药
-
E
10
163.3881±33.2256
2.45*
1.71*
1.34*
7.7△△
-
F
10
207.3804±59.354
, 百拇医药
1.84*
2.78*
2.71*
4.87△△
2.71*
-
注：* P>0.05；△ P<0.05；△△ P<0.01
4 血清甲状旁腺激素测定结果 模型空白组(B)PTH水平最高，与其它各组比较，差异均有非常显著意义(P<0.01)或显著意义(P<0.05)，其它各组间相互比较，差异多无显著意义(P>0.05)，说明经治疗模型动物骨吸收受到抑制，见表4。
, http://www.100md.com
表4 各组动物治疗后血清PTH含量相互比较(秩和检验) 组别
例数
(n)
血清PTH含量
(ng/dl)
卡方值
P值
SNK检验
C
D
A
B
E
, http://www.100md.com
F
C
10
51.8251±6.5509
-
D
10
46.2158±9.1712
3.14*
-
A
10
56.1466±12.9785
, http://www.100md.com
1.81*
2.99*
-
12.68
0.0256
B
10
64.0532±10.6769
4.33△
4.48△
5.85△△
, http://www.100md.com
-
E
10
52.7752±15.4863
0.67*
2.71*
2.03*
5.30△△
-
F
10
48.6003±17.2689
, 百拇医药
3.23△
1.44*
3.00*
4.78△△
2.62*
-
注：* P>0.05；△ P<0.05；△△ P<0.01讨论
雌激素能刺激骨细胞制造骨基质，促进骨形成。绝经后卵巢功能逐渐衰退，雌激素分泌减少，而导致骨代谢不平衡，破骨细胞骨吸收活跃，成骨细胞的形成相应减弱，机体内完成一个骨建周期，必然损失一部分骨量，日久而致骨质疏松症。国内外许多研究表明：采用雌激素替代治疗，能直接改善绝经后妇女骨代谢，有效地防止绝经后头几年骨的进行性丢失，降低骨质疏松症骨折的危险程度，但短期服用，其疗效难以持久，需长期服用(7年以上)才能保持远程疗效，[1]因而很容易导致各种并发症的发生，如乳腺癌、子宫内膜癌等严重并发症，[2]因此，我们把目光转向中医药宝库，运用中医药辨证施治骨质疏松症，结果发现补肾填精活血中药制剂金刚健骨片能提高模型大鼠血清E2水平，改善骨代谢，减少骨丢失。这种作用的产生，可能主要是通过中药调整下丘脑-垂体-性腺轴或肾上腺轴的功能来实现的。另有报道认为，补肾中药可以提高性腺上雌激素受体水平[3]和绝经后妇女白细胞上雌激素受体含量，[4]据此而推测也可能提高成骨细胞上雌激素受体水平，[5]使较小量的雌激素发挥较大的生理效应，这也可能是中医药治疗骨质疏松症的疗效机制之一。
, 百拇医药
骨钙素参与钙代谢的调节，在骨组织发育中发挥钙化作用，促进骨基质成熟，其主要存在于骨组织中，约占骨蛋白的1～2%，是骨内非胶原蛋白的主要成分，目前认为BGP主要由成骨细胞产生，并沉积在骨细胞的间质细胞外，同时也可释放入血液中，血中BGP与骨内BGP含量呈密切正相关关系，[6]因此，血中BGP含量可直接反映骨的形成状况。尼尔雌醇组BGP含量与空白模型组相似，均较低，差异无显著意义(P>0.05)，而金刚健骨片、骨松宝组BGP含量均有不同程度的提高，说明中医药治疗骨质疏松症的作用是多方面的，既能抑制骨的吸收，又能刺激成骨，产生较多骨基质，使骨代谢转化为正态平衡。
降钙素对骨的作用是直接抑制骨质吸收，主要是抑制破骨细胞的数量和活性，同时也调节成骨细胞的活性而促进骨生成过程，降钙素的这种抑制骨吸收的作用，在整体动物和骨细胞培养实验中均已得到证实。[7]由于降钙素的作用，骨钙释放减少，又从血浆中摄取钙，使骨的生成相应增加。绝经后妇女雌激素缺乏而致降钙素水平下降，是绝经后骨质疏松发病的重要原因。本实验中可见模型空白组动物血清中CT水平最低，与其它各组比较差异均有显著或非常显著意义(P<0.05,P<0.01)，而其他各组间比较差异没有显著意义(P>0.05)，说明金刚健骨片等中药制剂同尼尔雌醇一样具有同样的提高血清CT水平，从而抑制骨吸收，促进骨生成的作用。降钙素是甲状腺中C细胞所分泌的，中药提高CT水平，是通过提高雌激素水平。间接提高甲状腺分泌CT的功能，还是直接作用于甲状腺需要进一步深入的研究。
, 百拇医药
甲状旁腺激素对骨的作用主要是促进骨吸收，通过作用于破骨细胞来实现。PTH对各种骨细胞的共同作用是促进Ca++从细胞外液进入及从线粒体释出，因而使细胞浆Ca++浓度增加，核糖核酸的合成增加，进而细胞分裂并转变为破骨细胞，使破骨细胞增多；如果破骨细胞内钙离子增加，可刺激溶酶体酶释放出水解酶，分解骨的有机基质，引起骨的溶化，释放出钙，使血钙水平升高，并且破骨细胞内钙离子增加还可抑制柠檬酸脱氨酶，从而产生大量的柠檬酸和乳酸，扩散到骨基质中，使骨周围PH值降低，使骨盐进一步溶解释放。绝经后妇女随着年龄的增加，1.25(OH)2D3相应减少，肠钙吸收减少，继而血钙下降，从而刺激PTH分泌增加，增加骨的吸收，动员骨钙释放入血。我们的研究结果发现，模型空白组PTH水平最高，与其他各组差异有非常显著意义(P<0.01)或显著意义(P<0.05)，说明骨吸收亢进，而其余各组间差异没有显著意义(P>0.05)，说明中药可通过抑制PTH的分泌来抑制骨吸收。
, http://www.100md.com 雌激素、降钙素、甲状旁腺激素三者关系密切，雌激素能拮抗甲状旁腺激素的骨吸收作用，减少骨组织对PTH骨吸收作用的敏感性，此外雌激素又能直接影响降钙素的分泌，使血中CT含量增加，抑制骨质的吸收，刺激成骨细胞的活性。补肾填精活血方金刚健骨片治疗骨质疏松症的作用可能是通过提高雌性激素水平及成骨细胞中雌激素受体含量，拮抗PTH的骨吸收作用等机制，从而实现对绝经后骨质疏松症骨形成与骨吸收失衡的双向调节作用，达到骨代谢正态平衡。
参考文献
1.Eelson DT.Zhang-Y,Hannan-MT,et al.The effect of postmenpausal estrogn therapy on bone density in elderly women.N Engl Med,1993,329:11141～11146
2.Gamble-CL.Osteoporosis:drug and nondrug therapies for the patient at risk.Geriatrics,1995,AUG:50(8):39～43
, http://www.100md.com
3.魏美娟，俞瑾.补肾药对雄性激素致无排卵大鼠垂体及卵巢形态学变化观察.中国中西医结合杂志，1993，13(9)：521～523
4.张学庆，邹大金.更年期综合症患者白细胞雌激素受体的变化及六味地黄丸的疗效.中国中西医结合杂志，1993，13(9)：521～523
5.宋献文，石印玉，沈培芝，等.补肾中药对骨质疏松大鼠骨骼的影响.中国骨伤，1997，10(5)：13～15
6.Johansen JS.Plasma BGP:an indicator of spontaneous bone loss and estrogen treatment in postmenopusal woman.Eur.J clin Invest,1988,8(1):191
7.Fenton AJ,Maxtin TJ,nicholosn GC.Long-Term culture of disaggregated rat osteoclasts:inhibition of bone resorption and reduction of osteoclast-Like cel number by calcitionin and PTHrp.J cell Phtsiol,1993,155:1
(收稿：1998-8-3), 百拇医药