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编号:10230960
16组54种动物药材的红外光谱鉴别研究
http://www.100md.com 《中草药》 1999年第2期
     作者:姜大成 张 洁 邓明鲁

    单位:中医学院中药系(130021)

    关键词:动物药;红外光谱;鉴别

    中草药/990230 摘 要 运用红外光谱对16组54种动物药材进行了鉴别研究。结果表明:绝大多数动物药材红外光谱鉴别特征明显,稳定性、重现性较好,可作为药材鉴别依据。

    红外光谱鉴别中药材是近年来发展起来的一种中药材鉴别方法。由于红外光谱具有特征性强、取样量小、简便、快速、准确等特点,不仅广泛用于西药药品的鉴别,近年来亦愈来愈多地应用于中药材的鉴别研究。但从文献的报道来看〔1~4〕,研究的多为植物药和矿物药,而动物药的红外光谱鉴别研究较少。我们继“中药材红外光谱鉴别技术”课题完成之后(1989年通过省级鉴定),又在动物药的红外光谱鉴别方面做了大量工作,通过对16组54种动物药的红外光谱鉴别研究,积累了一定的经验,初步摸索了一些规律,现综合报道如下。
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    1 实验与结果

    1.1 仪器与试剂:NICLET*5DX-FTIR(傅立叶变换红外光谱仪,美国)。溴化钾(优级纯,过200目筛后,经马福炉400℃灼烧4 h后置干燥器中备用),无水乙醇、丙酮、氯仿、石油醚(60℃~90℃)均为分析纯。

    1.2 实验方法

    1.2.1 样品处理:将各药材样品(均经高士贤、邓明鲁教授鉴定)干燥后粉碎,过40目筛,装瓶备用。精密称取各样品适量,每种样品称4份,置容量瓶中;分别加入50%乙醇、丙酮、氯仿、石油醚至刻度,室温浸泡24 h,然后60 ℃水浴温浸4 h(石油醚小于60 ℃);补充损失的溶剂,过滤,制成每毫升相当原药材5 mg的浸提液备用。另外称取各样品粉末1份1.5 mg,供直接粉末压片。

    1.2.2 压片:用干燥洁净注射器分别吸取浸提液1~2 mL(同组相同处理条件的样品取样量保持一致),置玛瑙乳钵中,用冷风挥干溶剂后加入150 mg溴化钾,研磨均匀,装入模具压片,另取粉末样品直接在玛瑙乳钵中与溴化钾研磨均匀后压片。
, 百拇医药
    1.2.3 仪器条件及上机操作:以溴化钾空白片为参比,将样品置于光路,扫描次数为60次/分,测定范围4 000~400 cm-1,用电子计算机程序控制进行测定。所测图谱存于磁盘中,自动放大并经平滑处理,打印图谱。

    表1 不同处理条件各组药材红外光谱鉴别情况 编号

    组别

    粉末

    50%乙醇

    丙酮

    氯仿

    石油醚

    1

    水蛭
, 百拇医药
    ++

    2

    蜈蚣

    ++

    +

    ++

    +

    3

    土鳖虫

    +

    +

    +

    +

    ++
, 百拇医药
    4

    桑螵蛸

    ++

    ++

    -

    ++

    5

    蝉蜕

    ++

    -

    +

    -

    6

    冬虫夏草
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    -

    ++

    +

    +

    -

    7

    虻虫

    -

    ++

    -

    -

    8

    露蜂房

    +
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    +

    +

    +

    9

    蚂蚁

    ++

    +

    -

    -

    -

    10

    蛤蟆油

    +

    ++
, 百拇医药
    +

    +

    -

    11

    龟板

    +

    ++

    +

    ++

    +

    12

    蛤蚧

    +

    ++
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    ++

    ++

    ++

    13

    蕲蛇

    +

    ++

    ++

    ++

    ++

    14

    五灵脂

    ++

    ++
, 百拇医药
    -

    -

    -

    15

    鹿鞭

    +

    ++

    16

    虎骨

    +

    ++

    ++

    ++

    -
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    注:++差别非常显著 +明显 -不明显 空白为未做1.3 实验结果:每种样品制备5张红外光谱图,即粉末、50%乙醇、丙酮、氯仿、石油醚5种不同处理条件。将每组药材相同处理条件样品的红外光谱图放在一起进行比较(此步骤也可在计算机里完成),每组药材不同处理条件的红外光谱鉴别情况见表1。限于篇幅,每组比较药材只选择1种样品处理条件的红外光谱予以报道(表2)。

    2 小结与讨论

    2.1 由于动物药的化学成分复杂,已知成分很少,并且药材中大都含有大量的蛋白质、脂肪等相似成分,运用一般的理化鉴别方法效果都不甚理想,而红外光谱由于具有灵敏性高、特征性强、操作简单、取样量小等一般量化方法所无法相比的优点,在应用于动物药真伪鉴别研究中,效果较为理想,通过我们的实验完全说明了这一点。在16组药材的5种处理条件下的样品,80%的红外光谱比较都有鉴别意义,并且每组药材至少有一种条件可以达到鉴别的目的。

    表2 54种动物药材的红外光谱鉴别 组别
, 百拇医药
    原动物

    处理条件

    峰位或波数

    区间(cm-1)

    鉴别特征

    水蛭

    ①宽体金线蛭

    Whitmania piagra

    50%乙醇

    1 500,1 490

    (2)有两个明显吸收峰;(1)无

    ②光润金线蛭
, 百拇医药
    W.laevis

    蜈蚣

    ③少棘蜈蚣

    Scolopendra mutilans

    50%乙醇

    1 300~1 000

    (3)有3个吸收峰,中间1个最强;(4)有1个强峰,1个肩峰;(5)有4个弱峰

    ④多棘蜈蚣

    S.multidens

    ⑤墨江蜈蚣

    S.mojiangica
, 百拇医药
    土鳖虫

    ⑥地鳖

    Eupolyphaga sinensis

    石油醚

    1 800~1 700

    (6)有1个锐峰,低频一侧有1个裂分峰;(7)只有1个锐峰,而无裂分峰

    ⑦冀地鳖

    Polyphaga plancyi

    桑螵蛸

    ⑧南方刀螂

    Tenodera aridifolia
, 百拇医药
    50%乙醇

    1 200~1 000

    (8)有1个高强裂分峰;(9)有1个宽峰;(10)有1个中强峰

    ⑨大刀螂

    T.sinensis

    10拒斧螳螂

    Hierodula patellifera

    蝉蜕

    11黑蚱

    Cryptotympana pustulata

    氯仿
, 百拇医药
    1 800~1 600

    (11)和(14)都有1个强峰;(12)有1个小峰和1个裂分峰;(13)有2个裂分峰

    1 600~1 400

    (11)有1个裂分三峰;(14)有1个裂分四峰

    12山蝉

    Tikicen flammatus

    13朝鲜黑背鸣蝉

    Onlotympanacoreana

    14蟪蛄

    Platypleura kaempferi
, 百拇医药
    冬虫夏草

    15冬虫夏草

    Cordyceps sinensis

    50%乙醇

    1 710~1 570

    (15)有1个多重裂分宽峰,且1 710 cm-1处裂分1个明显锐峰;(16)则为1个无裂分的宽强峰

    16凉山虫草

    C.lianghanensis

    虻虫

    17双斑黄虻

, 百拇医药     Atylotus bivittateinus

    丙酮

    1 380~1 340

    (17)为1个锐强峰;(18)为1个锐强裂分峰

    18华虻

    Tabanus mandarinus

    露蜂房

    19墨胸胡蜂

    Vespa velautina nigrithorex

    丙酮

    1 800~1 500
, 百拇医药
    (24)有1个强峰(1 600 cm-1);(22)有1个较强裂分峰(1 660,1 630 cm-1);其它为1个多裂分的宽吸收带,其中(20)在1740,处有1个独立的吸收峰

    1 500~1 300

    各样品都有1个尖锐裂分强峰(1 460、1 390 cm-1),但此二峰强度的比例有所不同

    20柞蚕马峰

    Polistes gallicus gallicus

    21斯马峰

    P.snelleni

    22澳门马峰
, 百拇医药
    P.macaensis

    23和马峰

    P.rothneyi iwatai

    24陆马峰

    P.rothneyi grahami

    25约马峰 P.jokahamae

    蚂蚁

    26红林蚁

    Formica rufa

    粉末

    1 250~1 000
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    (26)有3个吸收峰;(27)有4个吸收峰

    27拟黑多刺蚁

    Polyhachis vicina

    蛤蟆油

    28中国林蛙

    Rana temporaria chensinensis

    50%乙醇

    1 500~1 350

    (28)有1个明显裂分的三重峰,而(29)为1个宽峰

    29中华大蟾蜍

    Bufo bufo gargarizans
, 百拇医药
    龟板

    30乌龟

    Chinemys reevesii

    氯仿

    1 200~1 000

    (30)只有1个单强峰(1 800 cm-1);(31)和(33)为1个裂分强峰(1 100、1 030 cm-1);(32)为1个强峰(1 100 cm-1),两侧各有一个小尖峰;(34)为1个低频一侧有肩峰的宽峰

    31黄喉水龟

    Clemmys mutica

    32平胸龟
, 百拇医药
    Platysternon megalephalum

    33缅甸陆龟

    Testudo elongata

    34凹甲陆龟

    T.impressa

    蛤蚧

    35大壁虎(蛤蚧)

    Gekko gecko

    50%乙醇

    1 800~1 500

    (38)和(40)为1个单强峰,(40)两侧还有若干个肩峰;其它均出现不同程度的裂分,(35)为双裂分,1 700 cm-1处为锐峰,1 660 cm-1处为馒头样裂分峰;(36)、(37)分别双裂后,在低频一侧又再一次双裂;(39)为1个双裂分峰,强度相等;(41)为1个多重裂分峰
, 百拇医药
    36多疣壁虎 G.japonicus

    37蜡皮蜥

    Leiolepis belliana rubritaeniata

    38丽斑麻晰

    Eremias angus

    39红瘰疣螈

    Tylototriton verrucosus

    40东方蝾螈

    Cynops orientalis

    41山溪鲵

, 百拇医药     Batrachuperus pinehonii

    蕲蛇

    42尖吻蝮

    Deinagkistrodon acutus

    50%乙醇

    1 220~1 000

    (42)在1 140 cm-1处有1个锐强峰,在1 050处有1个中强峰;(43)有3个弱峰;(44)同(43),但强度较大;(45)有4个弱尖峰;(46)有1个中强峰(1 120 cm-1),两侧各有1个弱峰(1 200、1 050 cm-1);(47)有1个锐强峰(1 120 cm-1),低频一侧有1个肩峰(1 030 cm-1)
, 百拇医药
    43银环蛇

    Bungarus multicinctus multicinctus

    44烙铁头

    Trimeresu mucroszuamarus

    45滑鼠蛇 Ptyas mucosus

    46全环蛇

    Bungarus fasciatus

    47百花锦蛇

    Elaphe moellendorffi

    五灵脂
, 百拇医药
    48复齿鼯鼠

    Trogopterus xanthipes

    50%乙醇

    1 480~1 320

    (48)有1个较强的宽峰(1412 cm-1);(49)有1个高强锐峰(1 388 cm-1)

    49鼠兔Ochotons sbb

    鹿鞭

    50梅花鹿

    Cervus nippon

    氯仿
, 百拇医药
    2 000~1 800

    (50)只有1个锐强峰(1 820 cm-1);(51)有1个弱宽峰(1 820 cm-1)和1个锐强峰(1 870 cm-1);(52)有1个锐强裂分峰(1 890,1 870 cm-1)

    51马鹿

    C.elaphus

    52牛

    Bos taurusdomesticus

    虎骨

    53虎

    Panthera tigris
, 百拇医药
    50%乙醇

    1 745

    (53)有1个明显锐强峰;(54)无

    54黑熊

    Selenarctos thibetanus

    2.2 红外光谱鉴别中药材关键是要把具有差异性的化学成分富集起来,使其表现在红外光谱上〔5〕,所以样品的化学前处理非常重要。依据经验,我们选用50%乙醇、丙酮、氯仿、石油醚作为溶媒制备浸提液,这样可以把药材中各种极性的成分绝大部分提取出来,使其表现在红外光谱上。实验结果表明,这种化学处理的方法基本是可行的,大多数都具有鉴别意义,其中尤其以50%乙醇处理的样品最为理想。

    2.3 判断比较各组药材红外光谱的异同,主要依据以下两点:一是在某一波数处鉴别的各方是否有明显的吸收峰、吸收峰是否裂分、某一区间吸收峰数目多少或峰位不同,这些可以认为是非常明显的鉴别指标,如水蛭、虎骨、虻虫等;二是在某一波数处,鉴别各方的吸收峰数目相同但形状和强度有明显差异,以及肩峰的位置或裂分情况不同,指纹区面貌不同等,这些都是明显的鉴别指标,如土鳖虫、露峰房等。总之,要注意比较红外光谱的全貌,而不是对吸收峰进行归宿。
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    2.4 由于鉴别的药材中各种化学成分相似程度不一样,也不排除5种化学前处理条件的红外光谱完全相同的可能。此时,如有必要可采取其它手段进一步分离,再用红外光谱进行比较。

    *Address:Jinang Dacheng of Chinese Materia Medica,Changchun College of Traditional Chinese Medicine,Changchun.

    作者简介:姜大成,男,1982年毕业于长春中医学院中药系,毕业后留校任教至今,1995年晋升为副教授,1998年破格晋升为教授。中国药学会高级会员。目前主要从事中药鉴定学和动物药资源方面的教学和科研,曾先后主持,参加和完成6项省级以上的科研课题,参加编,著作6部,撰写科研论文40多篇,完成的主要课题有“中药材红外光谱鉴定技术”,“龟板扩大资源的研究”等

    参 考 文 献

    [1] 张 洁,等.中药材红外鉴定图谱.长春:吉林科技出版社,1991:25

    [2] 阎文玫主编.中药材真伪鉴定.北京:人民卫生出版社,1994:48

    [3] 田进国,等.中草药,1989,20(5):29

    [4] 邱泽雨,等.中成药,1989,11(8):16

    [5] 姜大成,等.中药材,1993,16(7):42

    (1998-04-08收稿), 百拇医药