nm23-H1，p53的表达与大肠癌浸润转移关系的研究——附128例分析
作者：刘京山 孙立中 魏东燕
单位：刘京山 孙立中(北京首钢总医院外科 100043)；魏东燕(北京首钢总医院病理科 100043)
关键词：抗转移基因；p53；大肠癌浸润转移
中国内镜杂志990204 应用SP免疫组织化学技术检测了128例大肠癌标本中的nm23-H1，p53的表达情况，并探讨它们的表达与肿瘤浸润转移的关系，结果显示大肠癌中nm23-H1，p53的表达分别为73.4%，53.1%。nm23-H1的表达与淋巴结转移有关(P<0.025)，p53的表达与肿瘤浸润转移有关(P<0.05)。提示nm23-H1主要作用于大肠癌转移过程，p53的表达在肿瘤浸润转移及细胞增殖中起重要作用。
分类号 R735.3
RELATIONS BETWEEN EXPRESSIONS OF NM23-H1，p53 INVASION AND METASTASIS OF COLORECTAL CARCINOMA
, 百拇医药
Liu Jingshan,Sun Lizhong,Wei Dongyan.
Department of General Surgery
General Hospital of Capital Steel-iron Company,Beijing 100043，P.R.China
Objective:To investigate the relationship of the expression of anti-metastatic oncogene(nm23-H1) and p53 gene protein in invasions and metastasis of colorectal cancer.Method:All sections from 128 cases of colorectal carcinomes were sectioned for HE staining,treated with streptavidin peroxidase(SP) immunohistochemical staining,then by diaminobenzidin substrate.Date were analyzed with χ2 test.Results:94 of 128(73.4%) cases showed positive expression of nm23-H1 and 53.1% of tumors were positive in p53.Among these p53 positive cases,the expression of p53 is higher in those tumors which have extended through the serosa than in those to the muscularis cases with lymphocytic in filtration were showed higher levels of expression of p53 than those without positive node.Conclusion:Low level of expression of nm23-H1 attenuate the host defensive power against cancer invasion.This study suggested that nm23-H1 protein mainly exerts its biological function in the cancer metastasis progression.While mutation p53 promote the cancer cells proliferation.this demonstrates that the expression of p53 could play an important role in invasion and matastasis of colorectal cancer cells which have higher level of p53 could downregulate the nm23-H1 gene.
, 百拇医药
Key words:Anti-metastatic oncogene;p53;Colorectal cancer;Invasion metastasis
免疫组织化学方法是近年来兴起的一种分子生物学技术，可对人体标本从正常经癌前病变到癌的发展过程进行基因水平的研究[1]。
我院应用此种方法，研究大肠癌中nm23-H1、p53的表达，并探讨它们的表达与大肠癌浸润程度、淋巴结转移状况以及它们之间的相互关系。
1 临床资料与方法
1.1 临床资料
自1987～1997年共行大肠癌切除术128例，其中女性71例，男性57例，年龄32～81岁。病变部位：升结肠癌36例，横结肠癌6例，降结肠癌18例，乙状结肠癌21例，直肠癌47例。肿瘤最大直径1.0～11cm，平均5.3cm。大体分型：隆起型53例，溃疡型56例，浸润型19例。镜下组织学分类：管状腺癌103例，粘液腺癌16例，乳头状腺癌9例。Dukes分期：A期48例，B期24例，C期36例，D期20例。区域淋巴结转移者56例，无转移者72例。
, 百拇医药
1.2 方法
全部切片经HE染色后行SP免疫组织化学染色DAB显色。全部数据采用χ2及相关性检验。
2 结果
2.1 nm23-H1的表达主要位于细胞浆内，胞核可见弱阳性。128例大肠癌nm23-H1阳性表达94例，大肠癌淋巴结转移阳性者nm23-H1表达显著低于淋巴结转移阴性者(P<0.025)，详见表1。
表1 128例大肠癌nm23-H1的表达 生物学指标
例数
-
+
++
, 百拇医药
阳性率(%)
组织类型
管状腺癌
103
24
53
26
76
粘液腺癌
16
12
2
2
, 百拇医药 25
乳头状腺癌
9
0
3
6
100
浸润程度
粘膜及粘膜下层
5
0
2
3
100
, 百拇医药
肌 层
29
2
19
8
93
浆膜层
69
19
32
18
72
浆膜外
25
, 百拇医药
16
7
2
36
淋巴结转移
阳性组
76
31
40
5
59
阴性组
52
5
, 百拇医药
21
26
90
2.2 p53的表达定位于细胞核内，128例大肠癌中p53阳性表达68例，本组大肠癌中p53的表达肿瘤浸润浆膜外者高于浸润至肌层者(P<0.05)；淋巴结转移阳性者p53表达显著高于淋巴结转移阴性者，(P<0.01)，详见表2。表2 128例大肠癌p53的表达 生物学指标
例数
-
+
++
阳性率(%)
组织类型
, 百拇医药
管状腺癌
103
24
53
26
76
粘液腺癌
16
3
3
10
81
乳头状腺癌
, http://www.100md.com 9
7
2
0
22
浸润程度
粘膜及粘膜下层
5
5
0
0
0
肌 层
29
, 百拇医药
20
7
2
31
浆膜层
69
31
33
5
55
浆膜外
25
3
6
, 百拇医药
16
88
淋巴转移
阳性组
76
25
32
19
67
阴性组
52
34
14
4
, 百拇医药
34
2.3 本组nm23-H1阴性大肠癌中的p53阳性率显著高于nm23-H1阳性者(P<0.001)，p53的过表达与nm23-H1低表达有关。两者关系详见表3。
表3 128例大肠癌nm23-H1与p53的表达关系 nn23-H1
例数
p53
-
+
++
阳性率(%)
-
36
, http://www.100md.com
5
12
19
85
+
58
29
27
2
50
++
34
27
5
, 百拇医药
2
22
3 讨论
3.1 抗转移癌基因nm23-H1是一种肿瘤的转移抑制基因[2]，可分为nm23-H1、nm23-H2两种，其中nm23-H1的mRNA水平与癌转移关系更为密切。人类的nm23-H1由152个氨基酸所组成的17KU蛋白质，其表达产物为二磷酸核苷激酶[3]。该基因可能通过影响细胞内微管的聚合/解聚和G蛋白介导的信号传导，而参与肿瘤的发生和发展。本组资料显示，nm23-H1的低表达与大肠癌浸润程度和淋巴结转移有关，说明nm23-H1的低表达减弱了抑制肿瘤转移的能力。提示nm23-H1主要作用于大肠的转移过程。检测nm23-H1的表达，可做为预测大肠癌转移情况的一项较好指标。
3.2 p53基因被认为是目前人类肿瘤中最常发生变化的基因[4]，它位于染色体17p13.1上，有野生型和突变型之分，突变型为一种致癌基因，它可导致细胞持续分裂和癌变[5]。本组资料显示，p53过表达与大肠癌浸润程度和淋巴结转移有关。突变型p53有促进肿瘤细胞增殖的作用，表明p53的表达提示大肠癌中增殖活跃的癌细胞浸润转移的可能性大。
, 百拇医药
3.3 人类nm23-H1基因失活和p53基因突变常为体细胞等位基因缺失的结果[6]。由于p53突变一般发生在细胞癌变过程，而nm23-H1基因失活主要发生在肿瘤转移过程。本组资料发现大肠癌中nm23-H1低表达与p53过表达有关，提示p53基因突变与nm23-H1基因的失活有一定影响作用，由此可推测突变型p53可能对nm23-H1起负调控作用，其抑制作用机制尚有待进一步研究。但由此说明突变型p53抑制细胞增殖能力减弱，S期的细胞增多，细胞增殖活跃，提示p53过表达可在大肠癌的浸润转移过程和细胞增殖过程中均起重要作用，故检测p53与nm23-H1的表达对于判断肿瘤患者的预后有重要意义。 参考文献
1 杨光霖.胃肠道肿瘤研究新动向.中华病理学杂志，1997；3；131
2 纪小龙，施作霖.诊断免疫组织化学.北京：军事医学科学出版社，1997：43
3 Steeg PS,Cohn KH,Leone A,et al.Tumor metastasis and nm23:current concepts.Cancer Cells,1994；3:256～258
, http://www.100md.com
4 Liotta LA,Steeg PS,Willian G,et al.Cancer metastasis and angiogenesis:an imbalance of positive and negative regulation.Cell,1991；64:326～329
5 姚开泰.抑瘤基因.细胞周期.DNA修复与肿瘤易感性.中国科学基金，1997；2：17
6 Baker SJ,Fearon ER,Nigro JM,et al.chromosome 17 delations and p53 gene mutations in colorectal carcinomas.Science，1989；244:215～219
(1999-02-04收稿 张宝善审稿), 百拇医药
单位：刘京山 孙立中(北京首钢总医院外科 100043)；魏东燕(北京首钢总医院病理科 100043)
关键词：抗转移基因；p53；大肠癌浸润转移
中国内镜杂志990204 应用SP免疫组织化学技术检测了128例大肠癌标本中的nm23-H1，p53的表达情况，并探讨它们的表达与肿瘤浸润转移的关系，结果显示大肠癌中nm23-H1，p53的表达分别为73.4%，53.1%。nm23-H1的表达与淋巴结转移有关(P<0.025)，p53的表达与肿瘤浸润转移有关(P<0.05)。提示nm23-H1主要作用于大肠癌转移过程，p53的表达在肿瘤浸润转移及细胞增殖中起重要作用。
分类号 R735.3
RELATIONS BETWEEN EXPRESSIONS OF NM23-H1，p53 INVASION AND METASTASIS OF COLORECTAL CARCINOMA
, 百拇医药
Liu Jingshan,Sun Lizhong,Wei Dongyan.
Department of General Surgery
General Hospital of Capital Steel-iron Company,Beijing 100043，P.R.China
Objective:To investigate the relationship of the expression of anti-metastatic oncogene(nm23-H1) and p53 gene protein in invasions and metastasis of colorectal cancer.Method:All sections from 128 cases of colorectal carcinomes were sectioned for HE staining,treated with streptavidin peroxidase(SP) immunohistochemical staining,then by diaminobenzidin substrate.Date were analyzed with χ2 test.Results:94 of 128(73.4%) cases showed positive expression of nm23-H1 and 53.1% of tumors were positive in p53.Among these p53 positive cases,the expression of p53 is higher in those tumors which have extended through the serosa than in those to the muscularis cases with lymphocytic in filtration were showed higher levels of expression of p53 than those without positive node.Conclusion:Low level of expression of nm23-H1 attenuate the host defensive power against cancer invasion.This study suggested that nm23-H1 protein mainly exerts its biological function in the cancer metastasis progression.While mutation p53 promote the cancer cells proliferation.this demonstrates that the expression of p53 could play an important role in invasion and matastasis of colorectal cancer cells which have higher level of p53 could downregulate the nm23-H1 gene.
, 百拇医药
Key words:Anti-metastatic oncogene;p53;Colorectal cancer;Invasion metastasis
免疫组织化学方法是近年来兴起的一种分子生物学技术，可对人体标本从正常经癌前病变到癌的发展过程进行基因水平的研究[1]。
我院应用此种方法，研究大肠癌中nm23-H1、p53的表达，并探讨它们的表达与大肠癌浸润程度、淋巴结转移状况以及它们之间的相互关系。
1 临床资料与方法
1.1 临床资料
自1987～1997年共行大肠癌切除术128例，其中女性71例，男性57例，年龄32～81岁。病变部位：升结肠癌36例，横结肠癌6例，降结肠癌18例，乙状结肠癌21例，直肠癌47例。肿瘤最大直径1.0～11cm，平均5.3cm。大体分型：隆起型53例，溃疡型56例，浸润型19例。镜下组织学分类：管状腺癌103例，粘液腺癌16例，乳头状腺癌9例。Dukes分期：A期48例，B期24例，C期36例，D期20例。区域淋巴结转移者56例，无转移者72例。
, 百拇医药
1.2 方法
全部切片经HE染色后行SP免疫组织化学染色DAB显色。全部数据采用χ2及相关性检验。
2 结果
2.1 nm23-H1的表达主要位于细胞浆内，胞核可见弱阳性。128例大肠癌nm23-H1阳性表达94例，大肠癌淋巴结转移阳性者nm23-H1表达显著低于淋巴结转移阴性者(P<0.025)，详见表1。
表1 128例大肠癌nm23-H1的表达 生物学指标
例数
-
+
++
, 百拇医药
阳性率(%)
组织类型
管状腺癌
103
24
53
26
76
粘液腺癌
16
12
2
2
, 百拇医药 25
乳头状腺癌
9
0
3
6
100
浸润程度
粘膜及粘膜下层
5
0
2
3
100
, 百拇医药
肌 层
29
2
19
8
93
浆膜层
69
19
32
18
72
浆膜外
25
, 百拇医药
16
7
2
36
淋巴结转移
阳性组
76
31
40
5
59
阴性组
52
5
, 百拇医药
21
26
90
2.2 p53的表达定位于细胞核内，128例大肠癌中p53阳性表达68例，本组大肠癌中p53的表达肿瘤浸润浆膜外者高于浸润至肌层者(P<0.05)；淋巴结转移阳性者p53表达显著高于淋巴结转移阴性者，(P<0.01)，详见表2。表2 128例大肠癌p53的表达 生物学指标
例数
-
+
++
阳性率(%)
组织类型
, 百拇医药
管状腺癌
103
24
53
26
76
粘液腺癌
16
3
3
10
81
乳头状腺癌
, http://www.100md.com 9
7
2
0
22
浸润程度
粘膜及粘膜下层
5
5
0
0
0
肌 层
29
, 百拇医药
20
7
2
31
浆膜层
69
31
33
5
55
浆膜外
25
3
6
, 百拇医药
16
88
淋巴转移
阳性组
76
25
32
19
67
阴性组
52
34
14
4
, 百拇医药
34
2.3 本组nm23-H1阴性大肠癌中的p53阳性率显著高于nm23-H1阳性者(P<0.001)，p53的过表达与nm23-H1低表达有关。两者关系详见表3。
表3 128例大肠癌nm23-H1与p53的表达关系 nn23-H1
例数
p53
-
+
++
阳性率(%)
-
36
, http://www.100md.com
5
12
19
85
+
58
29
27
2
50
++
34
27
5
, 百拇医药
2
22
3 讨论
3.1 抗转移癌基因nm23-H1是一种肿瘤的转移抑制基因[2]，可分为nm23-H1、nm23-H2两种，其中nm23-H1的mRNA水平与癌转移关系更为密切。人类的nm23-H1由152个氨基酸所组成的17KU蛋白质，其表达产物为二磷酸核苷激酶[3]。该基因可能通过影响细胞内微管的聚合/解聚和G蛋白介导的信号传导，而参与肿瘤的发生和发展。本组资料显示，nm23-H1的低表达与大肠癌浸润程度和淋巴结转移有关，说明nm23-H1的低表达减弱了抑制肿瘤转移的能力。提示nm23-H1主要作用于大肠的转移过程。检测nm23-H1的表达，可做为预测大肠癌转移情况的一项较好指标。
3.2 p53基因被认为是目前人类肿瘤中最常发生变化的基因[4]，它位于染色体17p13.1上，有野生型和突变型之分，突变型为一种致癌基因，它可导致细胞持续分裂和癌变[5]。本组资料显示，p53过表达与大肠癌浸润程度和淋巴结转移有关。突变型p53有促进肿瘤细胞增殖的作用，表明p53的表达提示大肠癌中增殖活跃的癌细胞浸润转移的可能性大。
, 百拇医药
3.3 人类nm23-H1基因失活和p53基因突变常为体细胞等位基因缺失的结果[6]。由于p53突变一般发生在细胞癌变过程，而nm23-H1基因失活主要发生在肿瘤转移过程。本组资料发现大肠癌中nm23-H1低表达与p53过表达有关，提示p53基因突变与nm23-H1基因的失活有一定影响作用，由此可推测突变型p53可能对nm23-H1起负调控作用，其抑制作用机制尚有待进一步研究。但由此说明突变型p53抑制细胞增殖能力减弱，S期的细胞增多，细胞增殖活跃，提示p53过表达可在大肠癌的浸润转移过程和细胞增殖过程中均起重要作用，故检测p53与nm23-H1的表达对于判断肿瘤患者的预后有重要意义。 参考文献
1 杨光霖.胃肠道肿瘤研究新动向.中华病理学杂志，1997；3；131
2 纪小龙，施作霖.诊断免疫组织化学.北京：军事医学科学出版社，1997：43
3 Steeg PS,Cohn KH,Leone A,et al.Tumor metastasis and nm23:current concepts.Cancer Cells,1994；3:256～258
, http://www.100md.com
4 Liotta LA,Steeg PS,Willian G,et al.Cancer metastasis and angiogenesis:an imbalance of positive and negative regulation.Cell,1991；64:326～329
5 姚开泰.抑瘤基因.细胞周期.DNA修复与肿瘤易感性.中国科学基金，1997；2：17
6 Baker SJ,Fearon ER,Nigro JM,et al.chromosome 17 delations and p53 gene mutations in colorectal carcinomas.Science，1989；244:215～219
(1999-02-04收稿 张宝善审稿), 百拇医药