针灸治疗中风机理研究近况整肠生预防部队夏秋季肠炎效果观察整肠生纠正腹透中菌群失调1例征订通知
作者：朱月伟
单位：310003 浙江省杭州市下城区妇幼保健院
关键词：
血管内皮生长因子及受体对肿瘤的抑制作用 及基因治疗研究进展
血管内皮生长因子(VEGF)是一种特异性的、与血管形成有关的主要调节因子。血管的发生和生长在胚胎发育、创伤修复生理过程中或炎症、视网膜病和肿瘤的快速生长及转移等病理过程都起着重要作用。因此抑制血管生成已成为抗肿瘤治疗的一个新策略[1～3]，我们可以利用VEGE的反义核酸和中和抗体，或通过屏蔽VEGF受体等方法来抑制肿瘤的生长和转移。
1 VEGF的结构和功能
VEGF是1989年David等[4]首先从牛垂体滤泡星状细胞培养液中分离纯化出来的，并证明是由两个相同的多肽链通过二硫键构成的同源二聚体糖蛋白，分子量46KD，每个亚基分子量23KD。根据mRNA水平剪接的不同，按其所含氨基酸数分四种形式，即VEGF121、VEGF165、VEGF189和VEGF206。VEGF121是不能同肝素结合的弱酸性多肽，VEGF165是碱性结合蛋白，后两种比VEGF165更显碱性，同肝素有很高的亲和力。VEGF多肽链的N端有一段典型的信号肽，其第一位氨基酸是丙氨酸，C端富含碱性氨基酸，由于等电点和亲和力的不同可影响VEGF单体的生物学特性。VEGF是一类多功能的生长因子，由多种细胞分泌，并通过旁分泌机制作用于血管内皮细胞。VEGF可强烈促使血管内皮有丝分裂，并可促使血管形成，也是目前发现的最强增加血管通透性的物质之一。VEGF是增加人和兔静止期血管内皮细胞NO的释放及维持血管的张力[5～6]。
, 百拇医药
2 VEGF受体的结构和功能
VEGF对血管内皮细胞的特异性作用是由于内皮细胞表面有VEGF特异性受体。VEGF受体在人类为KDR(Kinase-domain insert containing receptor)和flt-1 (fms-like tyrosine kinase)，在鼠类的同源基因称fik-1和tkrC，在鸟类为Quek 1和Quek 2[7]。
KDR和flt-1受体的分子量为180KD的糖蛋白，为Ⅲ型膜受体酪氨酸激酶，胞外区含七个免疫球蛋白样结构和16个保守的半胱氨酸残基。flt-1和KDR具有34%的同源性，胞内激酶区有特异的插入序列。VEGF与受体有高度亲和力，flt-1是VEGF的特异性受体，也是VEGF发挥生物活性的介导物质，在血管内皮细胞之间以及内皮细胞与间质之间起重要作用。胚胎的内皮细胞、胚肝及造血干细胞也有flt-1的表达，因此flt-1不仅影响血管生长，也影响血管及造血干细胞分化。KDR在血管发生和生长中起作用，正常的脾、肾、心、肺组织表达水平较高。flt-1主要表达于胎盘、脑、心和肺，在伤口周围和肉芽组织中呈高表达。
, 百拇医药
3 VEGF及其受体在肿瘤中表达的意义
已有报导，在胃肠道腺癌、胃癌、膀胱癌、黑色素瘤和恶性中枢神经系统肿瘤中VEGF呈高表达，瘤中内皮细胞也是呈阳性，而且表达有VEGF受体的flt-1或KDR mRNA，表明flt-1和KDR在肿瘤的生长和新血管形成中起重要作用。这种作用在血管母细胞瘤、血管外皮瘤和艾滋病时的Kaposi肉瘤等高度血管化的肿瘤中尤为明显。Plate等证明VEGF由胶质瘤细胞产生和分泌，作用于表达VEGF受体的肿瘤血管内皮细胞。flt-1在胶质瘤血管内皮细胞表达，而在成年脑和肾的血管内皮细胞无表达，KDR或称flt-1 mRNA在胶质母细胞瘤血管内皮中与flt-1共同表达。由于flt-1和KDR在正常成年脑血管内皮细胞不表达，所以VEGF的这两种受体的并列增高，在控制肿瘤血管生成上被认为起着关键作用[8]。
4 VEGF及其受体在抗血管形成和基因治疗中的研究进展
, 百拇医药
已知VEGF对肿瘤血管生成起重要作用，这给人们一个很好的揭示，即如果能找到一种抑制和阻断血管形成途径，就可使原发的甚至转移的肿瘤控制在浸润前期，这将对控制恶性肿瘤发展和促进其治疗是一个极大的贡献。这种假设已经在动物实验中证实，如用VEGF单抗，反义VEGF、天然或人工合成的血管生成抑制剂都已取的很好的效果。Taki等发现夫马菌素(fumagillin)的类似物TNP-470对多种胶质瘤细胞系和裸鼠体内的移植瘤有显著抑制肿瘤生长的作用，此时血管明显减少。但是由于VEGF的生物半衰期不足6min，因此疗效是短暂的。于是人们便采用基因治疗的手段，通过基因转移技术将携带VEGF或其受体的基因载体准确地转移到治疗部位，并导入血管内皮细胞，这是在药物定位传送的基础上发展起来的新技术。血管壁基因转移常用的载体有： 逆转录病毒载体、腺病毒载体、质粒DNA载体。质粒DNA加脂质载体以及质粒DNA加脂质体加病毒外壳载体[9～11]。目前倾向于以VEGF DNA代替重组VEGF蛋白进行基因治疗，优点是VEGF DNA基因转移所致局部虽剂量小，但它可持续分泌，安全性能及生物学活性比较VEGF蛋白要好，且价格低廉。Coreg[12]等的研究已证实在体内表达的VEGF抑制因子是经剪切改变了的flt-1 VEGF受体。这种改变转录后mRNA剪切时保留了一个内含子，在翻译过程中作为第一终止密码，翻译出来的flt-1蛋白仅是VEGF受体胞外部分7个免疫球蛋白样(Lg-like)结构中的6个，而没有跨膜区与胞内区的酪氨酸激酶区，这个产物称之为可溶性flt-1(sflt-1)。sflt-1与VEGF结合的亲和力、特异性和完整的flt-1一样，flt-1由血管内皮细胞表达，能够通过和VEGF结合而抑制血管内皮细胞对VEGF反应，另外，它还可和细胞上完整的flt-1的胞外区结合抑制其胞内区TK段的活性以及下游区信号的激活。
, 百拇医药
VEGF及其受体的基因治疗的研究在国外还刚刚起步，尚缺乏经验，在使用上也存在一定的难度，如怎样使VEGF及其受体的载体在治疗时达到高浓度而不影响正常体内血管的生成等，相信随着人类对VEGF的研究逐步深入，人们会尽快克服这些困难，使基因治疗逐步从实验室走向临床。
参考文献
1 Harri AL.Brest.Cancer Res Treat.1996，38：97
2 Risall W，Esser S，Engelhardt B.Pathol Biol.1998，46(3)：171
3 张晓实，姚榛祥.国外医学生理、病理科学与临床分册.1998，18(1)：81
4 David W.Science.1989，246：1306
, 百拇医药
5 Takeshita.Lab Invest.1996，75(4)：487
6 Van der zee.Circulation.1997，95(4)：1030
7 Kolch US.Brest Cancer Res Treat.1995，36：139
8 Risau W.Kidney Int Suppl.1998，67：S3
9 Witte L，Hichlin DJ，Zhu Z，et al.Cancer Metastasis Rev.1998，17(2)：155
10 陈汝福.国外医学肿瘤学分册.1998，25(4)：211
11 Borrgstrom P，Hillan K，Sriramarao P，et al.Cancer Res.1996，56：4032
, 百拇医药
12 Croeg K，Richard L，Gustaw C，et al.Natl.Acad.sci.USA 1998，95：8795
收稿： 1999-03-13
中国微生态学杂志 2000年第2期第12卷 临床研究
整肠生预防部队夏秋季肠炎效果观察
作者：王柏青 杨忠臣 骆稽酉 关丽 吕天成 朱军
单位：中国人民解放军第203医院，黑龙江 齐齐哈尔 161000
关键词：整肠生；肠炎；感染性腹泻.
中国微生态学杂志 1999年第4期第11卷 临床研究
, 百拇医药
整肠生纠正腹透中菌群失调1例
作者：骆稽酉 曲淑敏 丁虹
单位：骆稽酉 天津市第三医院 300250；曲淑敏 丁虹 天津市第二医院 300141
关键词：
中国微生态学杂志 2000年第3期第12卷 消息
征订通知
作者：
单位：中国微生态学杂志编辑部
关键词：, http://www.100md.com
单位：310003 浙江省杭州市下城区妇幼保健院
关键词：
血管内皮生长因子及受体对肿瘤的抑制作用 及基因治疗研究进展
血管内皮生长因子(VEGF)是一种特异性的、与血管形成有关的主要调节因子。血管的发生和生长在胚胎发育、创伤修复生理过程中或炎症、视网膜病和肿瘤的快速生长及转移等病理过程都起着重要作用。因此抑制血管生成已成为抗肿瘤治疗的一个新策略[1～3]，我们可以利用VEGE的反义核酸和中和抗体，或通过屏蔽VEGF受体等方法来抑制肿瘤的生长和转移。
1 VEGF的结构和功能
VEGF是1989年David等[4]首先从牛垂体滤泡星状细胞培养液中分离纯化出来的，并证明是由两个相同的多肽链通过二硫键构成的同源二聚体糖蛋白，分子量46KD，每个亚基分子量23KD。根据mRNA水平剪接的不同，按其所含氨基酸数分四种形式，即VEGF121、VEGF165、VEGF189和VEGF206。VEGF121是不能同肝素结合的弱酸性多肽，VEGF165是碱性结合蛋白，后两种比VEGF165更显碱性，同肝素有很高的亲和力。VEGF多肽链的N端有一段典型的信号肽，其第一位氨基酸是丙氨酸，C端富含碱性氨基酸，由于等电点和亲和力的不同可影响VEGF单体的生物学特性。VEGF是一类多功能的生长因子，由多种细胞分泌，并通过旁分泌机制作用于血管内皮细胞。VEGF可强烈促使血管内皮有丝分裂，并可促使血管形成，也是目前发现的最强增加血管通透性的物质之一。VEGF是增加人和兔静止期血管内皮细胞NO的释放及维持血管的张力[5～6]。
, 百拇医药
2 VEGF受体的结构和功能
VEGF对血管内皮细胞的特异性作用是由于内皮细胞表面有VEGF特异性受体。VEGF受体在人类为KDR(Kinase-domain insert containing receptor)和flt-1 (fms-like tyrosine kinase)，在鼠类的同源基因称fik-1和tkrC，在鸟类为Quek 1和Quek 2[7]。
KDR和flt-1受体的分子量为180KD的糖蛋白，为Ⅲ型膜受体酪氨酸激酶，胞外区含七个免疫球蛋白样结构和16个保守的半胱氨酸残基。flt-1和KDR具有34%的同源性，胞内激酶区有特异的插入序列。VEGF与受体有高度亲和力，flt-1是VEGF的特异性受体，也是VEGF发挥生物活性的介导物质，在血管内皮细胞之间以及内皮细胞与间质之间起重要作用。胚胎的内皮细胞、胚肝及造血干细胞也有flt-1的表达，因此flt-1不仅影响血管生长，也影响血管及造血干细胞分化。KDR在血管发生和生长中起作用，正常的脾、肾、心、肺组织表达水平较高。flt-1主要表达于胎盘、脑、心和肺，在伤口周围和肉芽组织中呈高表达。
, 百拇医药
3 VEGF及其受体在肿瘤中表达的意义
已有报导，在胃肠道腺癌、胃癌、膀胱癌、黑色素瘤和恶性中枢神经系统肿瘤中VEGF呈高表达，瘤中内皮细胞也是呈阳性，而且表达有VEGF受体的flt-1或KDR mRNA，表明flt-1和KDR在肿瘤的生长和新血管形成中起重要作用。这种作用在血管母细胞瘤、血管外皮瘤和艾滋病时的Kaposi肉瘤等高度血管化的肿瘤中尤为明显。Plate等证明VEGF由胶质瘤细胞产生和分泌，作用于表达VEGF受体的肿瘤血管内皮细胞。flt-1在胶质瘤血管内皮细胞表达，而在成年脑和肾的血管内皮细胞无表达，KDR或称flt-1 mRNA在胶质母细胞瘤血管内皮中与flt-1共同表达。由于flt-1和KDR在正常成年脑血管内皮细胞不表达，所以VEGF的这两种受体的并列增高，在控制肿瘤血管生成上被认为起着关键作用[8]。
4 VEGF及其受体在抗血管形成和基因治疗中的研究进展
, 百拇医药
已知VEGF对肿瘤血管生成起重要作用，这给人们一个很好的揭示，即如果能找到一种抑制和阻断血管形成途径，就可使原发的甚至转移的肿瘤控制在浸润前期，这将对控制恶性肿瘤发展和促进其治疗是一个极大的贡献。这种假设已经在动物实验中证实，如用VEGF单抗，反义VEGF、天然或人工合成的血管生成抑制剂都已取的很好的效果。Taki等发现夫马菌素(fumagillin)的类似物TNP-470对多种胶质瘤细胞系和裸鼠体内的移植瘤有显著抑制肿瘤生长的作用，此时血管明显减少。但是由于VEGF的生物半衰期不足6min，因此疗效是短暂的。于是人们便采用基因治疗的手段，通过基因转移技术将携带VEGF或其受体的基因载体准确地转移到治疗部位，并导入血管内皮细胞，这是在药物定位传送的基础上发展起来的新技术。血管壁基因转移常用的载体有： 逆转录病毒载体、腺病毒载体、质粒DNA载体。质粒DNA加脂质载体以及质粒DNA加脂质体加病毒外壳载体[9～11]。目前倾向于以VEGF DNA代替重组VEGF蛋白进行基因治疗，优点是VEGF DNA基因转移所致局部虽剂量小，但它可持续分泌，安全性能及生物学活性比较VEGF蛋白要好，且价格低廉。Coreg[12]等的研究已证实在体内表达的VEGF抑制因子是经剪切改变了的flt-1 VEGF受体。这种改变转录后mRNA剪切时保留了一个内含子，在翻译过程中作为第一终止密码，翻译出来的flt-1蛋白仅是VEGF受体胞外部分7个免疫球蛋白样(Lg-like)结构中的6个，而没有跨膜区与胞内区的酪氨酸激酶区，这个产物称之为可溶性flt-1(sflt-1)。sflt-1与VEGF结合的亲和力、特异性和完整的flt-1一样，flt-1由血管内皮细胞表达，能够通过和VEGF结合而抑制血管内皮细胞对VEGF反应，另外，它还可和细胞上完整的flt-1的胞外区结合抑制其胞内区TK段的活性以及下游区信号的激活。
, 百拇医药
VEGF及其受体的基因治疗的研究在国外还刚刚起步，尚缺乏经验，在使用上也存在一定的难度，如怎样使VEGF及其受体的载体在治疗时达到高浓度而不影响正常体内血管的生成等，相信随着人类对VEGF的研究逐步深入，人们会尽快克服这些困难，使基因治疗逐步从实验室走向临床。
参考文献
1 Harri AL.Brest.Cancer Res Treat.1996，38：97
2 Risall W，Esser S，Engelhardt B.Pathol Biol.1998，46(3)：171
3 张晓实，姚榛祥.国外医学生理、病理科学与临床分册.1998，18(1)：81
4 David W.Science.1989，246：1306
, 百拇医药
5 Takeshita.Lab Invest.1996，75(4)：487
6 Van der zee.Circulation.1997，95(4)：1030
7 Kolch US.Brest Cancer Res Treat.1995，36：139
8 Risau W.Kidney Int Suppl.1998，67：S3
9 Witte L，Hichlin DJ，Zhu Z，et al.Cancer Metastasis Rev.1998，17(2)：155
10 陈汝福.国外医学肿瘤学分册.1998，25(4)：211
11 Borrgstrom P，Hillan K，Sriramarao P，et al.Cancer Res.1996，56：4032
, 百拇医药
12 Croeg K，Richard L，Gustaw C，et al.Natl.Acad.sci.USA 1998，95：8795
收稿： 1999-03-13
中国微生态学杂志 2000年第2期第12卷 临床研究
整肠生预防部队夏秋季肠炎效果观察
作者：王柏青 杨忠臣 骆稽酉 关丽 吕天成 朱军
单位：中国人民解放军第203医院，黑龙江 齐齐哈尔 161000
关键词：整肠生；肠炎；感染性腹泻.
中国微生态学杂志 1999年第4期第11卷 临床研究
, 百拇医药
整肠生纠正腹透中菌群失调1例
作者：骆稽酉 曲淑敏 丁虹
单位：骆稽酉 天津市第三医院 300250；曲淑敏 丁虹 天津市第二医院 300141
关键词：
中国微生态学杂志 2000年第3期第12卷 消息
征订通知
作者：
单位：中国微生态学杂志编辑部
关键词：, http://www.100md.com