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编号:10233270
复方参七汤抑制大鼠胃癌的实验研究*
http://www.100md.com 《世界华人消化杂志》 1999年第2期
     作者:陈玉泉 沈洪薰 周树军 陈 莉 于 秀 陆丽萍

    单位:陈玉泉 沈洪薰 周树军 于 秀 陆丽萍 南通医学院 1附属医院普外科; 陈 莉 病理教研室 江苏省南通市 226001

    关键词:胃肿瘤/治疗;复方参七汤;中草药;疾病模型,动物

    世界华人消化杂志990209 摘 要

    目的 中草药对胃癌有抑制作用,但其作用的有关机制尚不清楚,通过诱发大鼠胃癌模型,研究复方参七汤对胃癌的抑制作用.

    方法 采用N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG) 100mg/L连续喂养Wistar大鼠9mo,制成胃癌模型,实验大鼠在喂养MNNG的同时,连续喂给中药复方参七汤18mL/kg. 观察实验组和对照组胃癌的发生率.
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    结果 实验组胃癌发生率为6.9%(3/43),对照组胃癌发生率为58.9%(23/39). 两组比较有显著差异(P<0.01).

    结论 复方参七汤能显著降低MNNG诱发的大鼠胃癌发生率,对胃癌有明显的抑制和预防作用.

    中国图书资料分类号 R735.2

    Experimental study of the inhibitory effect of fufang shenqitang on

    gastric adenocarcinoma of rats

    CHEN Yu-Quan1, SHEN Hong-Xun1, ZHOU Shu-Jun1, CHEN Li2, YU Xiu1 and LU Li-Ping1
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    1Department of General Surgery,2 Department of Pathology, Affiliated Hospital of Nantong Medical College, Nantong 226001, Jiangsu Province, China

    Subject headings stomach neoplasms/therapy; drugs, Chinese herbal medicine; disease models, animal

    Abstract

    AIM Chinese herbal medicine has an inhibitory effect on gastric carcinoma. The mechanisms for this effect remain unknown. The aim of this study is to establish the animal model of gastric adenocarcinoma by N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) and to study the inhibitory effect of fufangshenqitang (FFSQT) on gastric adenocarcinoma.
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    METHODS One hundred Wistar rats were given 100mg/L of MNNG for nine months and 1mL/week saturated solution of sodium chloride (NaCl) in the first six weeks, to establish the animal model of gastric adenocarcinoma. Meanwhile, each rat of experiment group was given 18mL/kg FFSQT. After nine months the incidence of induced gastric adenocarcinoma in two groups was observed.

    RESULTS The incidence of gastric adenocarcinoma of experiment group was 6.9% (3/43) and that of control group was 58.9% (23/39). There was a significant difference in the incidence of gastric adenocarcinoma between the two groups (P<0.01).
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    CONCLUSION Prolonged administration of FFSQT results in a significant reduction in the incidence of stomach cancer on Wistar rats induced by MNNG. FFSQT has obviously preventive as well as inhibitory effects against gastric adenocarcinoma.

    0 引言

    中草药防治胃癌的研究长期以来多见于临床. 近年来,对单味中草药体外抑癌试验,移植瘤和诱发瘤的实验研究报告逐渐增多,但与祖国传统医学习惯广泛使用复方汤剂有所不同,有关复方汤剂对化学致癌剂诱发动物胃癌的抑制试验尚未见报告. 我院经长期随访一组复方参七汤治疗胃癌术后病例,提高五年生存率为80%的基础上,应用复方参七汤对人胃癌细胞株体外抑制试验,发现有显著的抑制胃癌细胞分裂和集落形成作用,高浓度时具有直接杀伤作用[1]. 研究复方参七汤对MNNG诱发Wistar大鼠胃腺癌的抑制作用,证明复方参七汤有抑制和预防胃癌的作用,现报告如下.
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    1 材料和方法

    1.1 材料 纯系Wistar 大鼠,♂,6周龄,体重45g左右,共100只,分成两组各50只. 实验组喂给致癌剂MNNG同时,连续喂给中药复方参七汤,对照组为单纯喂给化学致癌剂MNNG. 化学致癌剂:N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-Methyl-N'-Nitro-N-Nitrosoguanidine,简称MNNG),淡黄色结晶,为日本东京化成试剂公司产品,配成100mg/L,由大鼠每日自由摄取,连续9mo. 中药复方参七汤:作者经验方,现为协定方剂,由参三七,人参,当归,陈皮,茯苓,木香,黄芪,制川乌,制草乌,半枝莲,甘草,谷芽,麦芽组成,每帖中药煎成200mL药液备用. 按大鼠体重18mL/kg加入颗粒饲料中,喂给实验组大鼠,连续9mo. 氯化钠:为本市售卖精制食盐,前6wk饱和氯化钠溶液灌胃1mL,1次/wk. 饲养Wistar大鼠条件:本院实验动物中心楼内饲养,室温18℃~25℃,湿度30%~50%,每笼5只大鼠,标记饲养,喂以颗粒饲料.
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    1.2 观察指标 每日观察2次,加以记录,每1mo~2mo测量体重1次. 在实验期间,死亡大鼠一律作尸检,实验结束,所有大鼠处死后,检查胃、十二指肠、小肠、大肠、心、肝、肺等脏器. 胃、十二指肠沿大弯剪开,观察粘膜病变,100mL/L福尔马林溶液固定,常规石蜡包埋,连续5μm切片,HE染色,以肉眼和显微镜观察形态学改变.

    2 结果

    实验组:50只大鼠实验期间自然死亡7只,尸解均无胃十二指肠肿瘤发生,自然死亡率14%(7/50),喂养9mo,生存大鼠43只,分批处死大鼠. 发现32只大鼠胃未见有明显的癌前病变及癌瘤,11只大鼠胃存在各种不同病变,其中再生型的异型增生8只,病灶均在1cm以内,胃腺癌3只(肿瘤均位于胃窦部,病灶为1.0cm×0.3cm和0.8cm×0.8cm结节及0.5cm×0.5cm). 病理诊断分别为乳头状腺癌、低分化腺癌和粘液腺癌. 癌的发生率为6.9%(3/43).
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    对照组:50只Wistar大鼠实验期间自然死亡11只,自然死亡率为22%(11/50),其中6mo内自然死亡7只,均无胃十二指肠肿瘤发生,7mo~9mo死亡4只,内有3只无肿瘤,1只在胃窦部发现一肿瘤5cm×3.5cm×3.0cm,病理诊断为胃未分化腺癌. 喂养9mo,生存39只大鼠,分批杀死,发现胃粘膜有癌前病变16只,其中胃腺瘤型的异型增生5只(病灶大小在0.3cm~1.2cm之间)再生型异型增生11只(病灶大小在0.2cm~1.0cm之间). 胃腺癌23只,肿瘤位于胃窦小弯侧19只,大弯侧2只. 大体形态呈肿块型11只. 肿瘤最大者3.3cm×3.0cm,最小者0.8cm×0.9cm. 大体形态呈菜花样4只,病灶最大者2.5cm×2.5cm,最小者0.5cm×0.5cm. 大体形态呈溃疡型4只,病灶大小在0.4cm~0.6cm之间,大体形态呈结节样改变3只,病灶大小在0.4cm~0.8cm,大体形态呈粘膜糜烂1只,病灶为1.0cm×0.6cm. 病理诊断:乳头状腺癌6只,管状腺癌11只,低分化腺癌2只,未分化癌2只,粘液腺癌3只,十二指肠肿瘤5只,肿瘤大小在0.8cm~2.6cm之间,病理诊断为十二指肠腺癌3只,粘液腺癌2只(表1).
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    表1 喂养9mo大鼠和十二指肠病理改变 (n) 组

    别

    生存数

    正

    常

    胃异型增生

    胃 癌

    十二指肠癌

    再生型

    腺瘤型

    乳头状

    管状

    低
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    未

    粘液癌

    腺癌

    粘液癌

    实验组

    43

    32

    8

    0

    1

    1

    0

    0

    1
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    0

    0

    对照组

    39

    0

    11

    5

    6

    11

    2

    3

    1

    3

    2
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    3 讨论

    3.1 化学致癌剂诱发大鼠胃癌模型 文献报告有小鼠、大鼠和犬等. 选用小鼠者,致癌时间长达19mo,致癌率为41.3%[2]. 选用犬作胃癌模型[3,4],优于大鼠或小鼠,因犬胃囊容量与人相似,可长期随访和反复定期进行纤维内镜检查,并可进行粘膜活检,可发现实验犬投药后胃粘膜最初病变为充血,继而红白相间伴糜烂等,镜下示腺体萎缩和程度不等的异型增生,最后发生胃癌. 但也存在着缺点,饲养不如小鼠或大鼠方便,经费耗资大,不能成批制成胃癌模型. 本组选用大鼠,纯系雄性,致癌时间和致癌发生率与林炳水et al[5]和朱正纲et al[6]报告相似,致癌时间分别为15mo和9mo,致癌发生率分别为35.7%(5/24)和80.7%(50/62),本组致癌时间为9mo,胃癌发生率为58.9%(23/39). 化学致癌剂的选择. 常用化学致癌剂有多环碳氢化合物,氨基偶氮化合物,芳香胺类,霉菌毒素和亚硝胺类等. 本组选用亚硝胺类化学物. 不同结构的亚硝基胺有不同的器官亲和性,如二烷基亚硝胺可诱发动物肝癌,不对称的亚硝胺如N-甲基苄基亚硝胺可诱发犬的胃癌,而选用N-甲基-N'-亚硝基胍可诱发大鼠胃癌. 本组选用化学致癌剂MNNG成功地诱发了大鼠胃癌模型,在诱发胃癌的同时,还诱发十二指肠腺癌. 氯化钠的应用问题. 本组应用MNNG诱发大鼠胃癌的6wk,加用1mL,1次/wk饱和氯化钠溶液灌胃. 目的在于促进胃癌模型的成功. 由于氯化钠可破坏胃粘膜屏障,易受MNNG的作用,加速出现胃癌前期病变.
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    3.2 复方参七汤对大鼠诱发胃癌的抑制作用 ①本组诱发大鼠胃腺癌的标准参照张宗显提出的:“凡已有明显癌变的细胞及腺组织,并浸润至粘膜下层(即透过粘膜肌层)即可定为癌. 因随着时间的推延,癌组织可从粘膜下层逐渐浸润到肌层及浆膜层,甚至发生转移”. 根据这一标准本实验组的胃癌发生率为6.9%,对照组为58.9%. 两组有显著性差异,P<0.01(χ2=25.54)从癌前病变比较,实验组胃粘膜呈正常表现者32只,异型增生8只. 而对照组无一正常. 异型增生16只,两者有显著差异. 研究结果表明,复方参七汤具有保护大鼠胃粘膜屏障,免受MNNG的损害,以致实验组有74.4%(32/43)大鼠胃粘膜呈正常表现,同时还减轻胃粘膜损害程度,实验组的癌前病变为18.5%,而对照组癌前病变为41.0%. 表明复方参七汤可降低MNNG诱发的Wistar大鼠胃癌发生率,具有防癌及抑癌的作用. ②胃癌的确切病因尚不清楚,而自然界中广泛存在的亚硝胺类化合物可能是其中重要的一个因素,此类化合物通过饮食到达胃,作用于胃粘膜,引起癌前期病变,随后导致癌变. 对患有癌前病变的患者,从预防的角度长期服用复方参七汤,就可能降低胃癌的发生,从而起到防癌的作用. ③目前胃癌的主要治疗手段为手术切除,但术后5a生存率平均在50%左右,降低术后胃癌复发率和提高5a生存率以及治疗不能手术切除的晚期胃癌是对胃癌这一常见恶性肿瘤研究的主要课题. 大多数学者主张综合疗法来防治胃癌,我们随访了一组胃癌术后长期服用复方参七汤的病例,5a生存率高达80%,因此胃癌术后服用复方参七汤可以预防复发和提高5a生存率,成为综合治疗措施中一项重要手段. ④祖国医学传统习惯多采用复方汤剂,在胡品津[7]报告大蒜天然提取物二烯丙基硫醚对亚硝基胍诱发的大鼠腺癌胃粘膜损害的保护作用和林炳水报告中药大枣对MNNG诱发大鼠胃腺癌有抑制作用,史桂芝et al[8]报告甘草,白屈菜阻断亚硝基胍致胃癌作用的研究中,多为单味中药,本研究采用复方参七汤系经验方,符合中医中药的传统习惯,研究结果表明,复方参七汤具有明显预防性抑制胃癌的作用.
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    作者简介:陈玉泉,男,1928.10.14生江苏省南通市人,汉族,1953年毕业于南通医学院本科、外科学教授、主任医师、江苏省中西医结合学会常务理事,江苏省中华医学会外科顾问,主要从事普通外科,肝胆胰外科,发表论文80篇.

    *江苏省中医管理局资助课题,No.93第16号.

    通讯作者 陈玉泉,226001,南通医学院附属医院普外科,江苏省南通市.

    *西寺路20号

    Supported by the Health Baseau of Jiangsa Province no (93) 16.

    Correspondence to:CHEN Yu-Quan, Department of General Surgery, Affiliated Hospital of Nantong Medical college; Nantong 226001, Jiangsu Province, China
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    Tel. +86.513-5119356.(0)

    4 参考文献

    [1] 沈洪薰,周树军,陈玉泉,陆丽萍,顾星星. 复方参七汤对人胃癌细胞株体外抑制作用的观察. 南通医学院学报,1995;15:532-

    [2] 张宗显,李玉琼,李光蓉,孙振贤. 亚硝基胍诱发小鼠胃癌及幽门腺区上皮细胞超微结构的改变. 中华肿瘤杂志,1982;4:161-

    [3] Sugimnra T, Fugimura S. Production of stomach cancer in dog by N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine. Gann,1971;62:67-
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    [4] 江绍基,萧树东,胡运彪,王瑞年,刘文忠,姚季生. 实验性犬胃癌模型建立的研究. 肿瘤,1985;5:145-

    [5] 林炳水,窦桂荣,崔振环. 中药大枣对MNNG大鼠胃癌抑制作用的初步观察. 肿瘤学附刊,1982;9:62-

    [6] 朱正纲,燕敏,尹浩然,朱寿柱,林言箴,王瑞年. 甲硝基胍诱发大鼠胃癌的实验研究. 上海第二医科大学学报,1992;12:121-

    [7] 胡品津. 大蒜天然提取物二烯丙基硫醚对亚硝基胍诱发的大鼠腺胃粘膜损害的保护作用. 中华肿瘤杂志,1990;12:429

    [8] 史桂芝,李吉友,纪新华,谢玉泉,孙鹤龄,梁益新. 甘草、白屈菜阻断亚硝基胍致胃癌作用的研究. 中华预防医学杂志,1992;26:165-

    收稿日期 1998-04-20 修回日期 1998-11-18, http://www.100md.com