汉防己甲素抗肝纤维化研究进展
作者：李定国 陆汉明 陈颖伟
单位：上海第二医科大学附属新华医院 上海市 200092
关键词：肝硬化/治疗；肝硬化，实验性/治疗；肝硬化/病理学；汉防己甲素/治疗应用
世界华人消化杂志990228
中国图书资料分类号 R575
Subject headings liver cirrhosis/therapy; liver cirrhosis/pathology; liver cirrhosis, expremental/therapy; tetrandrine/therapeutic use
汉防己甲素(又称粉防己碱;Tetrandrine; Tet)是从防己科千金藤属植物粉防己(stephania tetrandra S. Moore)的块根中分离出的主要生物碱，其分子式为C33H42N2O6 ，化学结构属于双苄基异喹啉类. 现代药理研究证实，Tet是一种钙离子拮抗剂，主要作用于钙离子通道，影响钙离子的跨膜转运以及在细胞内的分布利用. 近年来,Tet对肝纤维化的防治作用已渐渐为人们所重视. 随着肝脏细胞分离培养技术的建立及分子生物学技术的进步，Tet抗肝纤维化的研究已深入到细胞、亚细胞及分子水平. 本文就近年来的有关研究作一综述.
, 百拇医药
1 Tet对大鼠实验性肝纤维化的影响
用四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化模型，研究Tet对实验性肝纤维化的防治作用. 结果显示各期治疗组大鼠肝组织及血清透明质酸(hyaluronic acid, HA)含量、血清谷丙转氨酶活性(ALT)均低于模型对照组(P<0.01). 3wk时治疗组大鼠肝脏细胞变性、坏死及炎细胞浸润程度均显著低于模型对照组. 12wk时模型对照组成纤维细胞增生达2.8级，HE及VG染色均示假小叶形成；而治疗组虽有成纤维细胞及胶原增生，但肝小叶形态完整. 表明Tet能显著改善肝功能，减轻肝脏病理损害程度，抑制肝脏细胞外基质形成[1]. Tet能抑制肝纤维化大鼠肝组织中储脂细胞(Ito细胞)的增殖转化，使Ⅳ型胶原沉积减少，结蛋白阳性细胞数显著少于生理盐水对照组(P<0.01). Tet治疗组的Ito细胞数量及Ito细胞和粗面内质网平均面积也较生理盐水对照组减少(P<0.05)[2,3]. 在肝硬变门脉高压大鼠中，Tet可使肝细胞损害减轻，肝内纤维组织减少，ALT、碱性磷酸酶(ALP)和血清总胆红素(STB)降至正常[4]. Tet也可降低门脉高压大鼠的门静脉压力和平均动脉压[5]. Tet对血清Ⅲ型前胶原肽(procollagen Ⅲ peptide, PⅢP)、HA和肝内炎症等均有明显抑制作用，与传统抗纤维化药物秋水仙碱的效果接近；对Ito细胞的增殖转化及胶原沉积的抑制则优于秋水仙碱，且该药无明显毒副作用[6].
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2 Tet抗肝纤维化的细胞学研究
肝纤维化系由肝结缔组织弥漫增生所致，是多种慢性肝病发展成肝硬变的渐进过程. 参与肝纤维化形成的细胞主要有成纤维细胞、Ito细胞、免疫活性细胞、肝细胞、内皮细胞及库普弗细胞等. 这些细胞分泌产生胶原等过多的细胞外基质，与细胞成分共同在肝脏内沉积，导致肝纤维化.
2.1 Tet对成纤维细胞生长增殖的影响 成纤维细胞能大量合成和分泌胶原蛋白、纤维连接蛋白(fibronectin, FN)、HA及层连蛋白(laminin, LN)等结缔组织接地基质成分. 因此，它的生长增殖对肝纤维化的形成具有不可忽视的作用. 采用流式细胞术观察不同浓度的Tet(10，20，30，40，50，60μg/mL)对3T6成纤维细胞生长增殖的影响，结果表明Tet能显著延缓细胞G1-S期的进程，抑制S期DNA的含量而增加G1和G2期蛋白质的含量，使细胞呈现不平衡生长直至死亡. 此作用具有一定的量效关系. 加入外源性的Ca2+及ATP证明，Tet对成纤维细胞生长增殖的作用与阻断Ca2+内流无关[7，8]. 也有研究报道，Tet(1.0μg/mL)阻止细胞由G1期进入S期，Tet(1.5，2.0μg/mL)则能显著增加3T6细胞G2+M期细胞，降低细胞RNA含量，增加细胞蛋白质含量，但DNA含量不变，使细胞不平衡生长，从而对其增殖产生剂量依赖性的抑制作用[9]. 以3H-脯氨酸掺入量及掺入抑制率为指标，观察Tet对3T6成纤维细胞增殖及胶原合成的影响，结果表明，10μg/mL～50μg/mL浓度范围内，Tet能显著抑制3T6成纤维细胞的胶原合成，此抑制作用与浓度成正相关. 倒置显微镜下观察发现细胞生长良好，无明显形态改变，表明Tet对细胞增殖及胶原合成的抑制作用非直接杀伤作用，而是在分子水平上起作用[10]. Tet也可浓度依赖性地抑制人胚肺成纤维细胞的增殖及胶原合成，抑制率随时间延长而升高.
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2.2 Tet对肝细胞生长增殖的影响 肝细胞为肝脏的实质细胞，占肝脏90%以上，既能合成Ⅰ，Ⅳ型胶原，又能合成硫酸软骨素及HA等基质. 在生理条件下，其胶原合成很少，但在某些病理条件下其合成胶原的能力明显增强. 在体外培养的肝细胞中直接加入CCl4造成损伤模型，观察细胞膜流动性及细胞内Ca2+浓度. 结果表明Tet可明显抑制CCl4引起的肝细胞存活率降低和乳酸脱氢酶的释放，稳定Ca2+浓度，保持细胞膜流动性，具有保护肝细胞的作用[11]. 采用流式细胞技术检测不同浓度的Tet对大鼠RBL肝细胞生长增殖的影响. 结果显示随着Tet浓度的增加(10，20，30，40，50，60μg/mL)，G1-S期的进程加速，且S期DNA含量及G1和G2期蛋白质含量均增加，呈正量效关系. 经加入外源性Ca2+及ATP证明Tet促进肝细胞生长增殖的作用与阻断Ca2+内流无关. 结果提示具有钙通道阻断作用的Tet可促进肝细胞生长增殖[12]. 但也有研究得出不同结论[10,13]. 以3H-胸腺嘧啶(3H-TdR)、3H-脯氨酸掺入量及掺入抑制率为指标，研究Tet对人胎肝细胞及大鼠肝细胞DNA及胶原合成的影响. 结果显示10μg/mL～50μg/mL浓度范围内，Tet能明显抑制两种细胞DNA及胶原合成，抑制程度与浓度呈正相关.
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2.3 Tet对Ito细胞生长增殖的影响 Ito细胞位于肝窦周围间隙内，其功能是储存脂肪和维生素A. 此外还可产生结缔组织和基质. 现在认为Ito细胞是肝小叶内一种相对不活动的成纤维细胞，在一定的条件下可转化为成纤维细胞，在肝硬变的发生发展中具有重要作用. 它是正常及肝纤维化时产生胶原的主要细胞. 在CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型中，Tet能明显抑制肝组织中Ito细胞的增殖及转化[2，6]. 体外培养的Ito细胞中加入Tet后，其DNA及胶原合成显著受抑，抑制程度与Tet浓度及作用时间成正相关. Tet还可阻断血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor; PDGF)的促Ito细胞增殖及胶原合成作用. 结果提示Tet除直接作用外，还通过抑制PDGF的作用而起到间接的抗肝纤维化作用[14].
3 Tet抗肝纤维化的亚细胞学研究
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肝实质细胞富含线粒体(mitochondria, Mc)、微粒体(microsome, Ms)、溶酶体(lysosome, Ls)等细胞器. 研究表明，Mc和Ms的作用不再限于能量代谢与蛋白质合成，它们还参与调节胞质游离Ca2+的浓度，其对Ca2+“封闭”作用的丧失是导致细胞损伤、死亡的重要原因，而持续的肝损伤往往会导致肝纤维化. Mc中的单胺氧化酶(monoamine oxidase; MAO)是参与胶原合成代谢的酶，血清中MAO活性升高是反映肝纤维化形成的灵敏指标. N-乙酰-β-氨基葡糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase, NAG)则广泛分布于Mc，因参与基质蛋白多糖分解而与肝纤维化有关. 血清中NAG活力升高，表明基质的合成分解均很活跃. 在CCl4-诱导大鼠模型中的实验说明小剂量Tet能明显降低Mc的MAC和NAG活性；增加Mc对Ca2+的主动摄取，减少其被动释放；增加Mc内膜表层和脂双层中心处的流动性及巯基含量(SH)[10，11]. 结果提示小剂量Tet具有良好的Mc保护和抗纤维化作用. Tet也可增加Ms中的SH含量，降低MS的NAG活性，增加Ms的标志酶-葡萄糖-6、磷酸酶-的活性，对Ms具有良好的保护作用.
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4 Tet抗肝纤维化的分子生物学研究
体外培养的3T6细胞中，以cDNA为探针进行核酸分子杂交[15]. 结果显示Tet能显著降低3T6细胞Ⅰ，Ⅲ，Ⅳ型前胶原mRNA水平(P<0.05～0.01). 在CCl4大鼠肝纤维化模型中，Tet早期治疗组显著降低了Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型前胶原mRNA水平(P<0.05～0.01)，提示Tet对Ⅰ，Ⅲ，Ⅳ型胶原基因的表达具有抑制作用是在转录水平上[16]. Tet亦可降低肝纤维化时PDGF,PDGF受体β(platelet-derived growth factor receptor, PDGFRβ)及转化生长因子β1(tansforming growth factor, TGFβ1)的mRNA表达水平，提示Tet可能通过抑制TGFβ1，PDGF等肝纤维化相关生长因子的表达而间接抑制胶原合成[17，18].
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5 Tet治疗肝硬变和慢性肝病临床观察
33例肝硬变患者口服Tet 3mo后，其静脉色氨酸耐量试验明显改善；服药18mo后，血清Ⅲ型前胶原肽(procollagen Ⅲ peptide, PⅢP)含量显著下降(P<0.01)[19]. 54例肝硬变患者口服Tet治疗后，随访18mo，结果血清HA，PⅢP、肝组织Ⅰ，Ⅲ型胶原与治疗前相比有显著差异(P<0.05～0.01). 与用肝泰乐治疗的对照组比较也有统计学意义(P<0.01). Tet治疗组患者肝肾功能也有不同程度改善[20]. 115例慢性肝病患者口服Tet治疗后随访6mo，结果发现：血清HA，PⅢP含量较治疗前显著降低(P<0.01)；14例(15.4%)肝纤维化消失，54例(58.1%)胶原纤维沉积明显减轻，19例(20.4%)胶原纤维轻度减轻；炎细胞浸润明显减轻或消失，Ito细胞数量减少，与肝泰乐对照组相比有显著差异(P<0.001)[14]. 结果表明Tet对临床上肝纤维化的治疗有确实的疗效.
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总之，Tet对肝纤维化的防治作用已为实验和临床等各方面所证实. 随着对Tet药代动力学、药物配伍、最佳药物剂型及其用药疗程等各方面的深入研究，Tet可望作为一种被广泛应用于临床的抗肝纤维化药物.
通讯作者 李定国
6 参考文献
[1] 范列英，孔宪涛，高峰. 汉防己甲素对实验性大鼠肝纤维化防治作用的研究. 解放军医学杂志，1994；19：444-446
[2] 王要军，孙自勤，权启镇，张志坚，刘晓峰，江学良. 汉防己甲素对实验性肝纤维化Ⅳ型胶原及储脂细胞的影响. 新消化病学杂志，1994；2：78-79
[3] 权启镇，孙自勤，李定国，王要军，车建途，齐风. 钙拮抗剂抗肝纤维化的实验与临床研究. 新消化病学杂志，1994：2：214-217
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[4] 穆毅，申耀宗，储一芳. 汉防己甲素对肝硬化门脉高压大鼠胃粘膜及肝脏的影响. 中华消化杂志，1996；16：213-216
[5] Liu TB, Lin HC, Huang YT, Sun CM, Hong CY. Portal hypotensive effect of tetrandrine and verapamil in portal hypertensive rats. J Pharm Pharmacol, 1997;49:85-88
[6] 孙自勤，王要军，权启镇，张志坚. 汉防己甲素和秋水仙碱抗肝纤维化的作用比较. 中国药理学通报，1996；12：345-347
[7] 刘玉兰，李定国，陆汉明，徐芹芳. 四种钙拮抗剂对3T6成纤维细胞的调控. 北京医学，1996；18：26-29
, 百拇医药
[8] 刘玉兰，李定国，陆汉明. 汉防己甲素对RBL细胞及3T6成纤维细胞的影响. 中西医结合肝病杂志，1994；4：21-23
[9] 刘学松，李定国，陆汉明，徐芹芳. 汉防己甲素及维拉帕米对成纤维细胞生长增殖的影响. 新消化病学杂志，1997；5：82-83
[10] 范列英，孔宪涛，高峰，高春芳，候健. 汉防己甲素对成纤维细胞、人胎肝细胞DNA及胶原合成的影响. 临床肝胆杂志，1995；11：25-26
[11] Chen XH, Hu YM, Liao YQ. Protective effect of tetrandrine on CCl4-injured hepatocytes. Acta Pharmacologica Sinica, 1996;17:348-350
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[12] 刘玉兰，李定国，陆汉明，徐芹芳. 汉防己甲素对肝细胞生长增殖的影响. 上海第二医科大学学报，1995；15：212-215
[13] 范列英，孔宪涛，高春芳. 汉防己甲素对大鼠肝细胞、贮脂细胞DNA及胶原合成的影响. 中华消化杂志，1994；14：281-283
[14] 田字彬，刘思良，李定国，陆汉明. 汉防己甲素对血小板衍生生长因子促细胞增殖效应的阻断作用. 中华医学杂志，1997；77：50-53
[15] 李定国，刘玉兰，陆汉明，蒋祖民，徐芹芳. 汉防己甲素对肝纤维化大鼠线粒体的影响. 中华消化杂志，1994；14：339-341
[16] 刘玉兰，李定国，陆汉明，蒋祖民，徐芹芳. 钙拮抗剂治疗肝纤维化的亚细胞学研究. 新 消化病学杂志，1996；4：3-5
, 百拇医药
[17] 刘学松. 钙拮抗剂对大鼠实验性肝纤维化胶原基因表达的影响. 博士学位论文(待发表)，1994
[18] 田字彬. 生长因子在肝纤维化发病机制中的作用. 博士学位论文(待发表)，1995
[19] 李定国，夏维新，陆汉明，李宣海，蒋祖民，权启镇. 血清Ⅲ型前胶原肽在钙通道阻滞剂治疗肝纤维化中的意义. 中华内科杂志，1990；29：453-456
[20] 权启镇，徐俊，李定国，齐风. 汉防己甲素对肝硬化患者血清透明质酸及Ⅲ型前胶原肽含量的影响. 上海医学，1993；16：562-564
收稿日期 1998-08-18, http://www.100md.com
单位：上海第二医科大学附属新华医院 上海市 200092
关键词：肝硬化/治疗；肝硬化，实验性/治疗；肝硬化/病理学；汉防己甲素/治疗应用
世界华人消化杂志990228
中国图书资料分类号 R575
Subject headings liver cirrhosis/therapy; liver cirrhosis/pathology; liver cirrhosis, expremental/therapy; tetrandrine/therapeutic use
汉防己甲素(又称粉防己碱;Tetrandrine; Tet)是从防己科千金藤属植物粉防己(stephania tetrandra S. Moore)的块根中分离出的主要生物碱，其分子式为C33H42N2O6 ，化学结构属于双苄基异喹啉类. 现代药理研究证实，Tet是一种钙离子拮抗剂，主要作用于钙离子通道，影响钙离子的跨膜转运以及在细胞内的分布利用. 近年来,Tet对肝纤维化的防治作用已渐渐为人们所重视. 随着肝脏细胞分离培养技术的建立及分子生物学技术的进步，Tet抗肝纤维化的研究已深入到细胞、亚细胞及分子水平. 本文就近年来的有关研究作一综述.
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1 Tet对大鼠实验性肝纤维化的影响
用四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化模型，研究Tet对实验性肝纤维化的防治作用. 结果显示各期治疗组大鼠肝组织及血清透明质酸(hyaluronic acid, HA)含量、血清谷丙转氨酶活性(ALT)均低于模型对照组(P<0.01). 3wk时治疗组大鼠肝脏细胞变性、坏死及炎细胞浸润程度均显著低于模型对照组. 12wk时模型对照组成纤维细胞增生达2.8级，HE及VG染色均示假小叶形成；而治疗组虽有成纤维细胞及胶原增生，但肝小叶形态完整. 表明Tet能显著改善肝功能，减轻肝脏病理损害程度，抑制肝脏细胞外基质形成[1]. Tet能抑制肝纤维化大鼠肝组织中储脂细胞(Ito细胞)的增殖转化，使Ⅳ型胶原沉积减少，结蛋白阳性细胞数显著少于生理盐水对照组(P<0.01). Tet治疗组的Ito细胞数量及Ito细胞和粗面内质网平均面积也较生理盐水对照组减少(P<0.05)[2,3]. 在肝硬变门脉高压大鼠中，Tet可使肝细胞损害减轻，肝内纤维组织减少，ALT、碱性磷酸酶(ALP)和血清总胆红素(STB)降至正常[4]. Tet也可降低门脉高压大鼠的门静脉压力和平均动脉压[5]. Tet对血清Ⅲ型前胶原肽(procollagen Ⅲ peptide, PⅢP)、HA和肝内炎症等均有明显抑制作用，与传统抗纤维化药物秋水仙碱的效果接近；对Ito细胞的增殖转化及胶原沉积的抑制则优于秋水仙碱，且该药无明显毒副作用[6].
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2 Tet抗肝纤维化的细胞学研究
肝纤维化系由肝结缔组织弥漫增生所致，是多种慢性肝病发展成肝硬变的渐进过程. 参与肝纤维化形成的细胞主要有成纤维细胞、Ito细胞、免疫活性细胞、肝细胞、内皮细胞及库普弗细胞等. 这些细胞分泌产生胶原等过多的细胞外基质，与细胞成分共同在肝脏内沉积，导致肝纤维化.
2.1 Tet对成纤维细胞生长增殖的影响 成纤维细胞能大量合成和分泌胶原蛋白、纤维连接蛋白(fibronectin, FN)、HA及层连蛋白(laminin, LN)等结缔组织接地基质成分. 因此，它的生长增殖对肝纤维化的形成具有不可忽视的作用. 采用流式细胞术观察不同浓度的Tet(10，20，30，40，50，60μg/mL)对3T6成纤维细胞生长增殖的影响，结果表明Tet能显著延缓细胞G1-S期的进程，抑制S期DNA的含量而增加G1和G2期蛋白质的含量，使细胞呈现不平衡生长直至死亡. 此作用具有一定的量效关系. 加入外源性的Ca2+及ATP证明，Tet对成纤维细胞生长增殖的作用与阻断Ca2+内流无关[7，8]. 也有研究报道，Tet(1.0μg/mL)阻止细胞由G1期进入S期，Tet(1.5，2.0μg/mL)则能显著增加3T6细胞G2+M期细胞，降低细胞RNA含量，增加细胞蛋白质含量，但DNA含量不变，使细胞不平衡生长，从而对其增殖产生剂量依赖性的抑制作用[9]. 以3H-脯氨酸掺入量及掺入抑制率为指标，观察Tet对3T6成纤维细胞增殖及胶原合成的影响，结果表明，10μg/mL～50μg/mL浓度范围内，Tet能显著抑制3T6成纤维细胞的胶原合成，此抑制作用与浓度成正相关. 倒置显微镜下观察发现细胞生长良好，无明显形态改变，表明Tet对细胞增殖及胶原合成的抑制作用非直接杀伤作用，而是在分子水平上起作用[10]. Tet也可浓度依赖性地抑制人胚肺成纤维细胞的增殖及胶原合成，抑制率随时间延长而升高.
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2.2 Tet对肝细胞生长增殖的影响 肝细胞为肝脏的实质细胞，占肝脏90%以上，既能合成Ⅰ，Ⅳ型胶原，又能合成硫酸软骨素及HA等基质. 在生理条件下，其胶原合成很少，但在某些病理条件下其合成胶原的能力明显增强. 在体外培养的肝细胞中直接加入CCl4造成损伤模型，观察细胞膜流动性及细胞内Ca2+浓度. 结果表明Tet可明显抑制CCl4引起的肝细胞存活率降低和乳酸脱氢酶的释放，稳定Ca2+浓度，保持细胞膜流动性，具有保护肝细胞的作用[11]. 采用流式细胞技术检测不同浓度的Tet对大鼠RBL肝细胞生长增殖的影响. 结果显示随着Tet浓度的增加(10，20，30，40，50，60μg/mL)，G1-S期的进程加速，且S期DNA含量及G1和G2期蛋白质含量均增加，呈正量效关系. 经加入外源性Ca2+及ATP证明Tet促进肝细胞生长增殖的作用与阻断Ca2+内流无关. 结果提示具有钙通道阻断作用的Tet可促进肝细胞生长增殖[12]. 但也有研究得出不同结论[10,13]. 以3H-胸腺嘧啶(3H-TdR)、3H-脯氨酸掺入量及掺入抑制率为指标，研究Tet对人胎肝细胞及大鼠肝细胞DNA及胶原合成的影响. 结果显示10μg/mL～50μg/mL浓度范围内，Tet能明显抑制两种细胞DNA及胶原合成，抑制程度与浓度呈正相关.
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2.3 Tet对Ito细胞生长增殖的影响 Ito细胞位于肝窦周围间隙内，其功能是储存脂肪和维生素A. 此外还可产生结缔组织和基质. 现在认为Ito细胞是肝小叶内一种相对不活动的成纤维细胞，在一定的条件下可转化为成纤维细胞，在肝硬变的发生发展中具有重要作用. 它是正常及肝纤维化时产生胶原的主要细胞. 在CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型中，Tet能明显抑制肝组织中Ito细胞的增殖及转化[2，6]. 体外培养的Ito细胞中加入Tet后，其DNA及胶原合成显著受抑，抑制程度与Tet浓度及作用时间成正相关. Tet还可阻断血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor; PDGF)的促Ito细胞增殖及胶原合成作用. 结果提示Tet除直接作用外，还通过抑制PDGF的作用而起到间接的抗肝纤维化作用[14].
3 Tet抗肝纤维化的亚细胞学研究
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肝实质细胞富含线粒体(mitochondria, Mc)、微粒体(microsome, Ms)、溶酶体(lysosome, Ls)等细胞器. 研究表明，Mc和Ms的作用不再限于能量代谢与蛋白质合成，它们还参与调节胞质游离Ca2+的浓度，其对Ca2+“封闭”作用的丧失是导致细胞损伤、死亡的重要原因，而持续的肝损伤往往会导致肝纤维化. Mc中的单胺氧化酶(monoamine oxidase; MAO)是参与胶原合成代谢的酶，血清中MAO活性升高是反映肝纤维化形成的灵敏指标. N-乙酰-β-氨基葡糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase, NAG)则广泛分布于Mc，因参与基质蛋白多糖分解而与肝纤维化有关. 血清中NAG活力升高，表明基质的合成分解均很活跃. 在CCl4-诱导大鼠模型中的实验说明小剂量Tet能明显降低Mc的MAC和NAG活性；增加Mc对Ca2+的主动摄取，减少其被动释放；增加Mc内膜表层和脂双层中心处的流动性及巯基含量(SH)[10，11]. 结果提示小剂量Tet具有良好的Mc保护和抗纤维化作用. Tet也可增加Ms中的SH含量，降低MS的NAG活性，增加Ms的标志酶-葡萄糖-6、磷酸酶-的活性，对Ms具有良好的保护作用.
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4 Tet抗肝纤维化的分子生物学研究
体外培养的3T6细胞中，以cDNA为探针进行核酸分子杂交[15]. 结果显示Tet能显著降低3T6细胞Ⅰ，Ⅲ，Ⅳ型前胶原mRNA水平(P<0.05～0.01). 在CCl4大鼠肝纤维化模型中，Tet早期治疗组显著降低了Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型前胶原mRNA水平(P<0.05～0.01)，提示Tet对Ⅰ，Ⅲ，Ⅳ型胶原基因的表达具有抑制作用是在转录水平上[16]. Tet亦可降低肝纤维化时PDGF,PDGF受体β(platelet-derived growth factor receptor, PDGFRβ)及转化生长因子β1(tansforming growth factor, TGFβ1)的mRNA表达水平，提示Tet可能通过抑制TGFβ1，PDGF等肝纤维化相关生长因子的表达而间接抑制胶原合成[17，18].
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5 Tet治疗肝硬变和慢性肝病临床观察
33例肝硬变患者口服Tet 3mo后，其静脉色氨酸耐量试验明显改善；服药18mo后，血清Ⅲ型前胶原肽(procollagen Ⅲ peptide, PⅢP)含量显著下降(P<0.01)[19]. 54例肝硬变患者口服Tet治疗后，随访18mo，结果血清HA，PⅢP、肝组织Ⅰ，Ⅲ型胶原与治疗前相比有显著差异(P<0.05～0.01). 与用肝泰乐治疗的对照组比较也有统计学意义(P<0.01). Tet治疗组患者肝肾功能也有不同程度改善[20]. 115例慢性肝病患者口服Tet治疗后随访6mo，结果发现：血清HA，PⅢP含量较治疗前显著降低(P<0.01)；14例(15.4%)肝纤维化消失，54例(58.1%)胶原纤维沉积明显减轻，19例(20.4%)胶原纤维轻度减轻；炎细胞浸润明显减轻或消失，Ito细胞数量减少，与肝泰乐对照组相比有显著差异(P<0.001)[14]. 结果表明Tet对临床上肝纤维化的治疗有确实的疗效.
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总之，Tet对肝纤维化的防治作用已为实验和临床等各方面所证实. 随着对Tet药代动力学、药物配伍、最佳药物剂型及其用药疗程等各方面的深入研究，Tet可望作为一种被广泛应用于临床的抗肝纤维化药物.
通讯作者 李定国
6 参考文献
[1] 范列英，孔宪涛，高峰. 汉防己甲素对实验性大鼠肝纤维化防治作用的研究. 解放军医学杂志，1994；19：444-446
[2] 王要军，孙自勤，权启镇，张志坚，刘晓峰，江学良. 汉防己甲素对实验性肝纤维化Ⅳ型胶原及储脂细胞的影响. 新消化病学杂志，1994；2：78-79
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[4] 穆毅，申耀宗，储一芳. 汉防己甲素对肝硬化门脉高压大鼠胃粘膜及肝脏的影响. 中华消化杂志，1996；16：213-216
[5] Liu TB, Lin HC, Huang YT, Sun CM, Hong CY. Portal hypotensive effect of tetrandrine and verapamil in portal hypertensive rats. J Pharm Pharmacol, 1997;49:85-88
[6] 孙自勤，王要军，权启镇，张志坚. 汉防己甲素和秋水仙碱抗肝纤维化的作用比较. 中国药理学通报，1996；12：345-347
[7] 刘玉兰，李定国，陆汉明，徐芹芳. 四种钙拮抗剂对3T6成纤维细胞的调控. 北京医学，1996；18：26-29
, 百拇医药
[8] 刘玉兰，李定国，陆汉明. 汉防己甲素对RBL细胞及3T6成纤维细胞的影响. 中西医结合肝病杂志，1994；4：21-23
[9] 刘学松，李定国，陆汉明，徐芹芳. 汉防己甲素及维拉帕米对成纤维细胞生长增殖的影响. 新消化病学杂志，1997；5：82-83
[10] 范列英，孔宪涛，高峰，高春芳，候健. 汉防己甲素对成纤维细胞、人胎肝细胞DNA及胶原合成的影响. 临床肝胆杂志，1995；11：25-26
[11] Chen XH, Hu YM, Liao YQ. Protective effect of tetrandrine on CCl4-injured hepatocytes. Acta Pharmacologica Sinica, 1996;17:348-350
, http://www.100md.com
[12] 刘玉兰，李定国，陆汉明，徐芹芳. 汉防己甲素对肝细胞生长增殖的影响. 上海第二医科大学学报，1995；15：212-215
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收稿日期 1998-08-18, http://www.100md.com