血清一氧化氮水平测定在皮肌炎中的临床意义
作者：范 利 段巧建 刘盛秀 沈际佳
单位：范 利 段巧建 刘盛秀 安徽医科大学附属医院皮肤科， 安徽 合肥 230022；沈际佳 安徽医科大学基础医学部， 安徽 合肥 230032
关键词：皮肌炎；一氧化氮
疾病控制杂志990212
【摘要】 目的 研究血清一氧化氮浓度在皮肌炎发生发展中的作用及临床意义。方法 应用化学比色法对38例不同病期皮肌炎患者进行一氧化氮浓度的测定。结果 皮肌炎患者活动期血清一氧化氮水平高于正常对照组，差异有显著性(P<0.05)。皮肌炎缓解期血清一氧化氮水平与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论 一氧化氮可能参与皮肌炎的炎症反应。一氧化氮测定对了解病情程度，评价疗效及探讨皮肌炎的发病机理有一定价值。
【中图分类号】 R478 【文献标识码】 A 【文章编号】 1008-6013(1999)02-0099-02
, http://www.100md.com
The measurement of the level of nitric oxide in serum and its clinical significance in patients with dermatomyositis
FAN Li, DUAN Qiao-jian, LIU Sheng-xiu, SHEN Ji-jia.
Department of dermatology, Affilicated Hospital of Anhui Medical University, Hefei 230022, China
【Abstract】 Objective To study the role and clinical significance concentration of nitric oxide in the development of dermatomyositis. Methods The concentration of nitric oxide in serum was measured by chemocolorimetry in 38 patients with dermatomyositis. Results The concentration of nitric oxide in serum was (6.31±0.45) μmol。L-1 in patients with dermatomyositis at active stage higher than (5.87±0.38) μmol。L-1 in normal control group (P<0.05). The concentration of nitric oxide in dermatomyositis at recovery stage was not changed in comparison with normal control group (P>0.05). Conclusion It was suggested that nitric oxide may participate inflammatory reaction in patients with dermatomyositis. Assay of nitric oxide is worthy in estimating severity, therapeutic evaluation and pathogenesis in patients with dermatomyositis.
, 百拇医药
【Key words】 dermatomyositis; nitric oxide
皮肌炎是一种以皮炎、肌炎为主并伴有各种内脏病变的全身性自身免疫性疾病。在其病理生理过程中，因其免疫方面等多因素失调而导致体内各种因子的变化。本文旨在以一氧化氮(NO)作为一项新的化学指标，为皮肌炎的诊断、监测等方面探讨新的依据。现将结果报告如下。
1 对象与方法
1.1 对象 皮肌炎患者38例，其中男18例，女20例，年龄18～70岁，病程2个月～8年。符合诊断标准[1]。病情活动程度根据临床症状和实验室检查积分而定。另设正常对照组25例。
1.2 方法 抽取清晨空腹静脉血2 ml，常规分离血清，取0.5 ml加入2.0 ml 75 mol。L-1 ZnSO4溶液混匀，再加入2.5 ml 55 mmol。L-1 NaOH溶液静置10 min后，3 000 r离心后去蛋白血清。采用军事医科院放射医学研究所提供的NO测试盒，根据NO遇氧和水即可生成硝酸及亚硝酸盐，硝酸盐又与磺胺及苯乙烯二胺盐酸盐反应，生成粉红色偶氮化合物的原理，在721型分光光度计上经546 nm比色测吸光值而间接换算NO浓度。操作严格按说明书进行。
, 百拇医药
2 结果
皮肌炎患者活动组和非活动组与正常对照组血清NO浓度比较(表1)。表中资料显示：皮肌炎活动组血清NO浓度高于正常对照组，差异有显著性。非活动组与正常对照组比较差异无显著性。
表1 皮肌炎活动组、非活动组与对照组血清NO浓度比较(
±s) 组 别
n
NO(μmol。L-1)
t
P
正常对照组
, 百拇医药 25
5.87±0.38
-
-
皮肌炎活动组
20
6.31±0.45
2.15
<0.05
皮肌炎非活动组
18
5.74±0.96
1.37
, 百拇医药
>0.05
3 讨论
近几年许多研究结果表明NO有很多重要的生理功能：使血管平滑肌松弛、维持正常的血流、抑制血小板集聚；有神经介质样作用和免疫调节作用；作为传递介质和调节介质，调节内皮细胞、平滑肌细胞和神经功能，参与炎症与组织细胞损伤和增殖等，尤其在血管和自身免疫性疾病中起重要作用。
NO是一种无色气体，作为免疫杀伤的生理信使，又是病理状态下的活性介质，它是一个不稳定的多活性的自由基，生物半衰期很短，只有3～5 min，便迅速分解成亚硝酸盐和硝酸盐。NO是由NO合成酶(NOS)催化L-精氨酸而生成的。NO生成后能迅速经生物膜和体液扩散至临近靶细胞激活鸟苷酸环化酶进而使cGMP合成增加并发挥第二信使作用。通常有三种不同类型的NOS，如内皮性NOS(eNOS)、神经性NOS(nNOS)和诱导性NOS(iNOS)。在内皮、小脑、巨噬细胞、肾、上皮细胞、肝及皮肤等组织都有NOS的活性分布，这些细胞本身具有或在炎性及免疫因素刺激后能活化合成NOS，从而具有生成NO能力。有研究表明[2]，在自身免疫疾病中有大量被激活的巨噬细胞，使诱导性NOS充分表达导致NO水平升高。本次研究结果显示：皮肌炎活动组与正常人对照组比较有升高，经统计学处理，差异有显著性(P<0.05)；而皮肌炎非活动组与正常对照组比较则差异无显著性(P>0.05)。我们认为由于皮肌炎是一种自身免疫性疾病，在其活动期中其自身免疫病灶的巨噬细胞等持续产生大量的NO，从而使NO合成增加。这种酶合成的NO作为宿主防御机制摧毁侵入机体的异物，含量的升高表明机体免疫机制增强，但免疫刺激产生的大量NO对那些表达NO合成酶的细胞自身及其附近的细胞有毒性作用，而NO本身能与血红蛋白、超氧化阴离子结合而失去生物活性。皮肌炎活动期血清NO含量高于正常而非活动期无明显变化，提示可能由于此时皮肌炎本身病情重，炎症反应强烈，刺激巨噬细胞浸润增加，分泌更多的NO。而单核巨噬细胞作为抗原递呈细胞结合某种抗原后，活化CD4阳性细胞，引起该病的细胞和免疫反应，随后又通过相互作用使它们进行下去。
, 百拇医药
有研究表明，低剂量的NO可参与免疫应答的信息传递，而高水平NO则导致细胞毒性作用，介导免疫损伤。因此，应指出的是NO具有双重性，一方面对机体起到保护作用，如杀伤或抑制肿瘤细胞和杀伤病原微生物，减轻炎症反应，但过量的NO可损伤DNA，使DNA硝基化引起核酸复制、转录翻译障碍、甚至使核酸分子断裂，最终导致基因突变和癌变，加重了炎性反应和过度破坏组织[3]。由此，我们设想在治疗皮肌炎患者时可以采取抑制NO合成酶活性，切断NO合成途径，促进NO排泄等以便减少全身或局部一氧化氮的含量。通过本次研究，我们认为检测皮肌炎患者血清NO水平有助于临床上对该病的诊断、监测和治疗，其临床应用价值值得进一步研究与探讨。
作者简介：范 利，女，40岁，副教授，副主任医师，主要从事临床皮肤病、性病研究
沈际佳，男，43岁，博士生，副教授
参考文献
[1] 杨国亮主编. 皮肤病学. 上海：上海医科大学出版社，1992.510～512.
[2] Kolb H, Kolb-Bachofen V. Nitric oxide: a pathogenetic factor in autoimmunity. Immunol Today, 1992,13:157～160.
[3] 罗高兴.内源性一氧化氮合成的调节. 国外医学。临床生物化学与检验学分册，1996，17(1)：11～13.
收稿日期 1999-04-16, http://www.100md.com
单位：范 利 段巧建 刘盛秀 安徽医科大学附属医院皮肤科， 安徽 合肥 230022；沈际佳 安徽医科大学基础医学部， 安徽 合肥 230032
关键词：皮肌炎；一氧化氮
疾病控制杂志990212
【摘要】 目的 研究血清一氧化氮浓度在皮肌炎发生发展中的作用及临床意义。方法 应用化学比色法对38例不同病期皮肌炎患者进行一氧化氮浓度的测定。结果 皮肌炎患者活动期血清一氧化氮水平高于正常对照组，差异有显著性(P<0.05)。皮肌炎缓解期血清一氧化氮水平与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论 一氧化氮可能参与皮肌炎的炎症反应。一氧化氮测定对了解病情程度，评价疗效及探讨皮肌炎的发病机理有一定价值。
【中图分类号】 R478 【文献标识码】 A 【文章编号】 1008-6013(1999)02-0099-02
, http://www.100md.com
The measurement of the level of nitric oxide in serum and its clinical significance in patients with dermatomyositis
FAN Li, DUAN Qiao-jian, LIU Sheng-xiu, SHEN Ji-jia.
Department of dermatology, Affilicated Hospital of Anhui Medical University, Hefei 230022, China
【Abstract】 Objective To study the role and clinical significance concentration of nitric oxide in the development of dermatomyositis. Methods The concentration of nitric oxide in serum was measured by chemocolorimetry in 38 patients with dermatomyositis. Results The concentration of nitric oxide in serum was (6.31±0.45) μmol。L-1 in patients with dermatomyositis at active stage higher than (5.87±0.38) μmol。L-1 in normal control group (P<0.05). The concentration of nitric oxide in dermatomyositis at recovery stage was not changed in comparison with normal control group (P>0.05). Conclusion It was suggested that nitric oxide may participate inflammatory reaction in patients with dermatomyositis. Assay of nitric oxide is worthy in estimating severity, therapeutic evaluation and pathogenesis in patients with dermatomyositis.
, 百拇医药
【Key words】 dermatomyositis; nitric oxide
皮肌炎是一种以皮炎、肌炎为主并伴有各种内脏病变的全身性自身免疫性疾病。在其病理生理过程中，因其免疫方面等多因素失调而导致体内各种因子的变化。本文旨在以一氧化氮(NO)作为一项新的化学指标，为皮肌炎的诊断、监测等方面探讨新的依据。现将结果报告如下。
1 对象与方法
1.1 对象 皮肌炎患者38例，其中男18例，女20例，年龄18～70岁，病程2个月～8年。符合诊断标准[1]。病情活动程度根据临床症状和实验室检查积分而定。另设正常对照组25例。
1.2 方法 抽取清晨空腹静脉血2 ml，常规分离血清，取0.5 ml加入2.0 ml 75 mol。L-1 ZnSO4溶液混匀，再加入2.5 ml 55 mmol。L-1 NaOH溶液静置10 min后，3 000 r离心后去蛋白血清。采用军事医科院放射医学研究所提供的NO测试盒，根据NO遇氧和水即可生成硝酸及亚硝酸盐，硝酸盐又与磺胺及苯乙烯二胺盐酸盐反应，生成粉红色偶氮化合物的原理，在721型分光光度计上经546 nm比色测吸光值而间接换算NO浓度。操作严格按说明书进行。
, 百拇医药
2 结果
皮肌炎患者活动组和非活动组与正常对照组血清NO浓度比较(表1)。表中资料显示：皮肌炎活动组血清NO浓度高于正常对照组，差异有显著性。非活动组与正常对照组比较差异无显著性。
表1 皮肌炎活动组、非活动组与对照组血清NO浓度比较(
±s) 组 别n
NO(μmol。L-1)
t
P
正常对照组
, 百拇医药 25
5.87±0.38
-
-
皮肌炎活动组
20
6.31±0.45
2.15
<0.05
皮肌炎非活动组
18
5.74±0.96
1.37
, 百拇医药
>0.05
3 讨论
近几年许多研究结果表明NO有很多重要的生理功能：使血管平滑肌松弛、维持正常的血流、抑制血小板集聚；有神经介质样作用和免疫调节作用；作为传递介质和调节介质，调节内皮细胞、平滑肌细胞和神经功能，参与炎症与组织细胞损伤和增殖等，尤其在血管和自身免疫性疾病中起重要作用。
NO是一种无色气体，作为免疫杀伤的生理信使，又是病理状态下的活性介质，它是一个不稳定的多活性的自由基，生物半衰期很短，只有3～5 min，便迅速分解成亚硝酸盐和硝酸盐。NO是由NO合成酶(NOS)催化L-精氨酸而生成的。NO生成后能迅速经生物膜和体液扩散至临近靶细胞激活鸟苷酸环化酶进而使cGMP合成增加并发挥第二信使作用。通常有三种不同类型的NOS，如内皮性NOS(eNOS)、神经性NOS(nNOS)和诱导性NOS(iNOS)。在内皮、小脑、巨噬细胞、肾、上皮细胞、肝及皮肤等组织都有NOS的活性分布，这些细胞本身具有或在炎性及免疫因素刺激后能活化合成NOS，从而具有生成NO能力。有研究表明[2]，在自身免疫疾病中有大量被激活的巨噬细胞，使诱导性NOS充分表达导致NO水平升高。本次研究结果显示：皮肌炎活动组与正常人对照组比较有升高，经统计学处理，差异有显著性(P<0.05)；而皮肌炎非活动组与正常对照组比较则差异无显著性(P>0.05)。我们认为由于皮肌炎是一种自身免疫性疾病，在其活动期中其自身免疫病灶的巨噬细胞等持续产生大量的NO，从而使NO合成增加。这种酶合成的NO作为宿主防御机制摧毁侵入机体的异物，含量的升高表明机体免疫机制增强，但免疫刺激产生的大量NO对那些表达NO合成酶的细胞自身及其附近的细胞有毒性作用，而NO本身能与血红蛋白、超氧化阴离子结合而失去生物活性。皮肌炎活动期血清NO含量高于正常而非活动期无明显变化，提示可能由于此时皮肌炎本身病情重，炎症反应强烈，刺激巨噬细胞浸润增加，分泌更多的NO。而单核巨噬细胞作为抗原递呈细胞结合某种抗原后，活化CD4阳性细胞，引起该病的细胞和免疫反应，随后又通过相互作用使它们进行下去。
, 百拇医药
有研究表明，低剂量的NO可参与免疫应答的信息传递，而高水平NO则导致细胞毒性作用，介导免疫损伤。因此，应指出的是NO具有双重性，一方面对机体起到保护作用，如杀伤或抑制肿瘤细胞和杀伤病原微生物，减轻炎症反应，但过量的NO可损伤DNA，使DNA硝基化引起核酸复制、转录翻译障碍、甚至使核酸分子断裂，最终导致基因突变和癌变，加重了炎性反应和过度破坏组织[3]。由此，我们设想在治疗皮肌炎患者时可以采取抑制NO合成酶活性，切断NO合成途径，促进NO排泄等以便减少全身或局部一氧化氮的含量。通过本次研究，我们认为检测皮肌炎患者血清NO水平有助于临床上对该病的诊断、监测和治疗，其临床应用价值值得进一步研究与探讨。
作者简介：范 利，女，40岁，副教授，副主任医师，主要从事临床皮肤病、性病研究
沈际佳，男，43岁，博士生，副教授
参考文献
[1] 杨国亮主编. 皮肤病学. 上海：上海医科大学出版社，1992.510～512.
[2] Kolb H, Kolb-Bachofen V. Nitric oxide: a pathogenetic factor in autoimmunity. Immunol Today, 1992,13:157～160.
[3] 罗高兴.内源性一氧化氮合成的调节. 国外医学。临床生物化学与检验学分册，1996，17(1)：11～13.
收稿日期 1999-04-16, http://www.100md.com