海洛因染毒小鼠睾丸和附睾组织病理学改变
作者：文夏玲 蔡亚娜 谢宝缪 何惠平
单位：文夏玲 蔡亚娜 (广州市师范学院生物系 510400)； 谢宝缪 何惠平 (广东东莞市中学)
关键词：
卫生毒理学杂志990228 海洛因(Heroin)，学名*****(Diacetylmorphine hydrochloride)，白色结晶性粉末，无臭，味苦，具有吗啡的镇痛和麻醉功能，易成瘾。滥用海洛因可导致下丘脑-垂体-性腺轴功能紊乱，睾丸生精功能明显障碍。有关海洛因所致的睾丸、附睾组织结构的改变及形态定量分析的报道尚不多见。本实验通过腹腔注射制成小鼠染毒模型，观察了睾丸及附睾的组织病理学变化，并对小鼠睾丸初级精母细胞的形态参数进行了分析。
材料与方法
健康雄性昆明小鼠28只，体重20～25g，随机分成3个剂量组及生理盐水对照组。每天分别腹腔注射以生理盐水溶解的0.025%、0.050%、0.100%的海洛因溶液各1ml。对照组除每日注射生理盐水1ml外，其它饲养与实验组相同。3周后处死动物，取睾丸及附睾组织，Bouin氏液固定，石蜡包埋切片，H.E.染色，光镜进行组织学观察，并应用图像分析系统对睾丸初级精母细胞进行形态测量，每例测量50个细胞，分别测得细胞面积、细胞周长、核面积、浆面积、核浆比例、核灰度、圆形度7项形态参数，进行比较分析。
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结果与讨论
1.光镜观察：对照组小鼠睾丸、附睾组织结构正常，睾丸生精小管上皮有5～7层生精细胞，细胞排列紧密，界限清晰；附睾管内含大量成熟精子。低剂量组小鼠睾丸、附睾组织未见明显的病理改变。中剂量组小鼠睾丸曲细精管上皮不同程度出现细胞排列不整齐，细胞界限不清；附睾管内出现精子细胞。高剂量组小鼠生精管壁细胞明显地出现上皮层次减少，仅有2～3层，细胞排列疏松，界限模糊，精子细胞和精子减少，并发现曲细精管腔内有脱落的生精细胞；附睾管内除成熟精子外，还含有精子细胞和精母细胞。
2.形态定量分析：应用图像分析系统对小鼠初级精母细胞的细胞面积、细胞周长、核面积、浆面积、核浆比例、核灰度、圆形度进行了测量，结果见附表。
附表 不同剂量组小鼠初级精母细胞的形态定量比较(
±s)
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对照组
低剂量组
中剂量组
高剂量组
细胞面积(μm2)
15.2±0.44
16.2±0.85
15.5±0.57
19.0±0.46*
细胞周长(μm)
17.9±0.87
18.2±0.66
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18.1±0.42
20.2±0.53**
核面积
9.6±0.33
9.8±0.40
9.2±0.25
10.0±0.36
浆面积
5.6±0.55
6.4±0.68
6.3±0.57
9.0±0.44*
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核浆比例
63.15±0.48
60.70±0.54
59.42±0.60
52.77±0.59*
核灰度
30.24±0.54
29.31±0.78
31.95±0.54
32.21±0.82
圆形度
0.97±0.15
, 百拇医药
0.95±0.16
0.90±0.20**
0.88±0.17**
*P<0.01，**P<0.001
(1)低剂量组各形态参数较对照组差异无显著性；(2)中剂量组除圆形度较对照组有显著减小外，其它形态参数(细胞面积、细胞周长、核面积、浆面积、核浆比例、核灰度)与对照组相比无显著差异；(3)高剂量组初级精母细胞核面积、核灰度与对照组相比无显著差异，细胞面积、细胞周长及浆面积较对照组明显增大(P<0.01)，而核浆比例、圆形度较对照组减小(P<0.05)。
有学者曾对海洛因中毒大鼠睾丸、附睾组织进行了定性观察，发现海洛因中毒组睾丸生精上皮层次减少，管腔内精子减少，并发现脱落的生精细胞及较多的异常精子。本实验结果与上述结果基本一致，且实验组随海洛因剂量的增加，睾丸、附睾的病变加重。精子发生过程中在初级精母细胞时期进行DNA复制，并进行第一次成熟分裂，它直接影响后期生精细胞及精子的生成，故此期是精子发生的重要阶段。我们利用形态定量分析系统，测量了初级精母细胞的各形态参数，结果显示，高剂量组小鼠初级精母细胞的细胞面积、细胞周长、核浆比例及细胞圆形度均有影响。
睾丸、附睾组织及功能上的异常，可能是通过下丘脑-垂体-性腺轴途径而起作用，海洛因的体内水解产物吗啡可降低下丘脑多巴胺(DA)的活性，增强5-羟色胺(5-HT)的活性，从而泌乳素(PRL)分泌减弱，黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSHH)释放减少，进而睾酮(T)分泌抑制。分析认为，生殖细胞形态学的异常改变，可能是生精细胞分化发育的微环境受到严重影响所致。, 百拇医药
单位：文夏玲 蔡亚娜 (广州市师范学院生物系 510400)； 谢宝缪 何惠平 (广东东莞市中学)
关键词：
卫生毒理学杂志990228 海洛因(Heroin)，学名*****(Diacetylmorphine hydrochloride)，白色结晶性粉末，无臭，味苦，具有吗啡的镇痛和麻醉功能，易成瘾。滥用海洛因可导致下丘脑-垂体-性腺轴功能紊乱，睾丸生精功能明显障碍。有关海洛因所致的睾丸、附睾组织结构的改变及形态定量分析的报道尚不多见。本实验通过腹腔注射制成小鼠染毒模型，观察了睾丸及附睾的组织病理学变化，并对小鼠睾丸初级精母细胞的形态参数进行了分析。
材料与方法
健康雄性昆明小鼠28只，体重20～25g，随机分成3个剂量组及生理盐水对照组。每天分别腹腔注射以生理盐水溶解的0.025%、0.050%、0.100%的海洛因溶液各1ml。对照组除每日注射生理盐水1ml外，其它饲养与实验组相同。3周后处死动物，取睾丸及附睾组织，Bouin氏液固定，石蜡包埋切片，H.E.染色，光镜进行组织学观察，并应用图像分析系统对睾丸初级精母细胞进行形态测量，每例测量50个细胞，分别测得细胞面积、细胞周长、核面积、浆面积、核浆比例、核灰度、圆形度7项形态参数，进行比较分析。
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结果与讨论
1.光镜观察：对照组小鼠睾丸、附睾组织结构正常，睾丸生精小管上皮有5～7层生精细胞，细胞排列紧密，界限清晰；附睾管内含大量成熟精子。低剂量组小鼠睾丸、附睾组织未见明显的病理改变。中剂量组小鼠睾丸曲细精管上皮不同程度出现细胞排列不整齐，细胞界限不清；附睾管内出现精子细胞。高剂量组小鼠生精管壁细胞明显地出现上皮层次减少，仅有2～3层，细胞排列疏松，界限模糊，精子细胞和精子减少，并发现曲细精管腔内有脱落的生精细胞；附睾管内除成熟精子外，还含有精子细胞和精母细胞。
2.形态定量分析：应用图像分析系统对小鼠初级精母细胞的细胞面积、细胞周长、核面积、浆面积、核浆比例、核灰度、圆形度进行了测量，结果见附表。
附表 不同剂量组小鼠初级精母细胞的形态定量比较(
±s), 百拇医药
对照组
低剂量组
中剂量组
高剂量组
细胞面积(μm2)
15.2±0.44
16.2±0.85
15.5±0.57
19.0±0.46*
细胞周长(μm)
17.9±0.87
18.2±0.66
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18.1±0.42
20.2±0.53**
核面积
9.6±0.33
9.8±0.40
9.2±0.25
10.0±0.36
浆面积
5.6±0.55
6.4±0.68
6.3±0.57
9.0±0.44*
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核浆比例
63.15±0.48
60.70±0.54
59.42±0.60
52.77±0.59*
核灰度
30.24±0.54
29.31±0.78
31.95±0.54
32.21±0.82
圆形度
0.97±0.15
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0.95±0.16
0.90±0.20**
0.88±0.17**
*P<0.01，**P<0.001
(1)低剂量组各形态参数较对照组差异无显著性；(2)中剂量组除圆形度较对照组有显著减小外，其它形态参数(细胞面积、细胞周长、核面积、浆面积、核浆比例、核灰度)与对照组相比无显著差异；(3)高剂量组初级精母细胞核面积、核灰度与对照组相比无显著差异，细胞面积、细胞周长及浆面积较对照组明显增大(P<0.01)，而核浆比例、圆形度较对照组减小(P<0.05)。
有学者曾对海洛因中毒大鼠睾丸、附睾组织进行了定性观察，发现海洛因中毒组睾丸生精上皮层次减少，管腔内精子减少，并发现脱落的生精细胞及较多的异常精子。本实验结果与上述结果基本一致，且实验组随海洛因剂量的增加，睾丸、附睾的病变加重。精子发生过程中在初级精母细胞时期进行DNA复制，并进行第一次成熟分裂，它直接影响后期生精细胞及精子的生成，故此期是精子发生的重要阶段。我们利用形态定量分析系统，测量了初级精母细胞的各形态参数，结果显示，高剂量组小鼠初级精母细胞的细胞面积、细胞周长、核浆比例及细胞圆形度均有影响。
睾丸、附睾组织及功能上的异常，可能是通过下丘脑-垂体-性腺轴途径而起作用，海洛因的体内水解产物吗啡可降低下丘脑多巴胺(DA)的活性，增强5-羟色胺(5-HT)的活性，从而泌乳素(PRL)分泌减弱，黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSHH)释放减少，进而睾酮(T)分泌抑制。分析认为，生殖细胞形态学的异常改变，可能是生精细胞分化发育的微环境受到严重影响所致。, 百拇医药