钝顶螺旋藻抗突变作用的研究
作者：杨庆 仝国辉
单位：北京市卫生防疫站(100013)
关键词：螺旋藻；抗突变作用；微核试验；睾丸染色体畸变试验
中国慢性病预防与控制990205 摘要 对钝顶螺旋藻的抗突变作用进行了研究。结果表明：钝顶螺旋藻在2 000 mg/kg剂量下，对环磷酰胺所致小鼠骨髓细胞微核增加有拮抗作用(P<0.05)，对丝裂霉素所致小鼠睾丸染色体畸变在染色体畸变细胞率指标上具有拮抗作用(P<0.05)，在性染色体单价体，常染色体单价体，具有拮抗趋势，但无统计学意义(P>0.05)。在67，670 mg/kg两个低剂量下，对环磷酰胺所致小鼠骨髓细胞微核和对丝裂霉素所致小鼠睾丸染色体畸变在染色体畸变细胞率增高的拮抗作用无统计学差异(P>0.05)。
Antimutagenic Study on Spirulina
, 百拇医药
Yang Qing,et al;Beijing Anti-epidemic Station(100013)
Abstract Antimutagenic effect of SSP was studied by mouse bone cell marrow micronucleus test and mouse testicle chromosome aberration test.It showed that under the dosage of 2 000 mg/kg of SSP,the SSP had the antagonism to the frequencies of mouse bone marrow micronucleus induced by the cyclophosphamide and those of mouse testicle chromosome aberration induced by mitomycin(P<0.05).However,at the dosage of 67,670 mg/kg of SSP,it showed no antagonistic action(P>0.05).
, 百拇医药
Key words Spirulina Antimutagenic Micronucleus Chromosome aberration
当前人类生存环境中诱变剂的种类和含量大幅度增加，因此，筛选具有抗突变功能的物质成为近几年研究热点，螺旋藻(SP)作为一种保健食品，它的各种保健作用引起了极大关注。我们采用小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠睾丸染色体畸变试验对钝顶螺旋藻(SSP)的抗突变作用进行探讨。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 受试物 钝顶螺旋藻，人推荐摄入量为4.0 g/d。
1.1.2 动物 昆明种小鼠，100只，雄性，体重25～30 g，由中国科学院遗传研究所提供。
, 百拇医药 1.2 试验方法
1.2.1 抗小鼠骨髓细胞微核试验 动物随机分为五组，分别为阴性对照组和阳性对照组，三个受试组剂量分别为人推荐摄入量的1倍、10倍、30倍，分别为67、670、2000 mg/kg BW，受试组连续给予受试物30天，每天一次经口给予受试物，在试验末期最后2天，取材前30小时对除阴性组外的所有动物经口给予致突变物(环磷酰胺40 mg/kg BW)两次(中间隔24小时)，受试物组给予致突变物1小时后再给予受试物，第二次给予阳性物后6小时取动物胸骨制片、固定、染色、镜检，每只动物计数1 000个嗜多染红细胞中微核细胞数，最后进行统计学分析。
1.2.2 抗小鼠睾丸染色体畸变试验 将动物随机分为五组，三个剂量组剂量采用人推荐摄入量的1倍、10倍、30倍，即67、670、2000 mg/kgBW和阴性对照组及致突变物对照组，受试物组连续给予受试物30天，每天一次，经口灌胃，取材前12天，各组经口给予丝裂霉素C(2 mg/kgBW)一次，受试物组连续给予受试物12天，30天后处死动物前6小时各组小鼠腹腔注射秋水仙素(4 mg/kgBW)6小时后取小鼠双侧睾丸，常规制片、染色，在显微镜下每只小鼠记数100个初级精母细胞中的染色体畸变数，最后进行统计学分析，按Kastenbaum和Bownan统计方法进行统计检验。
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 抗小鼠骨髓细胞微核试验
从表1中可见，钝顶螺旋藻各剂量组的微核率与阳性对照组相比均有所降低，且随着剂量的增加下降幅度加大，经统计学t检验，高剂量组的下降具有统计学意义(P<0.05)。试验结果表明：钝顶螺旋藻对环磷酰胺所致小鼠骨髓细胞微核增加有拮抗作用。
表1 钝顶螺旋藻抗小鼠骨髓细胞微核试验结果 组 别
剂 量
(mg/kgBW)
动物数
(只)
嗜多染
, 百拇医药 细胞数(个)
有微核细胞数
(个)
微核率
阴性对照
-
10
104
15
1.5
钝顶螺旋藻
低剂量
67
, 百拇医药
10
104
491
49.1
中剂量
670
10
104
365
36.5
高剂量
2 000
10
, 百拇医药
104
291
29.1*
阳性对照
环磷酰胺
(40 mg/kgBW)
10
104
507
50.7
注：*表示与阳性对照组相比有显著性差异，P<0.05，表2同
, 百拇医药 2.2 抗小鼠睾丸染色体畸变试验
由表2中结果可见，钝顶螺旋藻各剂量组与阳性对照组相比，在性染色体单价体、常染色体单价体、染色体畸变细胞数各个指标上均有所下降，经统计分析，高剂量组在染色体畸变细胞数下降具有统计学意义(P<0.05)。在小鼠睾丸染色体畸变试验中染色体畸变细胞数率的差异是十分重要的指标。所以我们认为钝顶螺旋藻对丝裂霉素所致小鼠睾丸染色体畸变具有拮抗作用。
表2 钝顶螺旋藻抗小鼠睾丸染色体畸变试验结果 组 别
剂 量
(mg/kg BW)
动物数
(只)
观察中期相
, 百拇医药
细胞数
性染色体单价体
常染色体单价体
染色体畸变细胞数
(个)
(%)
(个)
(%)
(个)
(%)
阴性对照
-
10
, 百拇医药
103
30
3.0
6
0.6
0
0
钝顶螺旋藻
低剂量
67
10
103
45
, http://www.100md.com
4.5
9
0.9
14
1.4
中剂量
670
10
103
49
4.9
10
1.0
, http://www.100md.com
6
0.6
高剂量
2 000
10
103
94
9.4
13
1.3
2
0.2*
阳性对照
, http://www.100md.com
丝裂霉素
(2 mg/kgBW)
10
103
114
11.4
27
2.7
18
1.8
注：染色体畸变细胞数包括：染色体断片，断裂、粉碎化、桥等
3 讨论
, 百拇医药
螺旋藻这一古老的生物，到本世纪已被相当多的人所认识与利用。由于其有丰富的营养价值，因此是较好的保健食品。研究表明螺旋藻有抗辐射，抗诱变，防癌抗癌等多种作用〔1,2〕。
此次实验结果表明：钝顶螺旋藻在2 000 mg/kg对环磷酰胺所致小鼠骨髓细胞微核增加有拮抗作用(P<0.05)。对丝裂霉素所致小鼠睾丸染色体畸变在染色体畸变细胞率指标上具有拮抗作用(P<0.05)。但在67，670 mg/kg两个剂量下，虽有拮抗趋势，但无统计学差异(P>0.05)。可能是剂量小所造成的。阮继红曾观察到钝顶螺旋藻多糖可使小鼠PCE微核率下降〔3〕。有报道钝顶螺旋藻对小鼠S180和宫颈癌U14有明显抑制作用。当剂量为50 mg/kg体重时，抑癌率分别达53.4%和49.04%。刘力生研究表明，螺旋藻多糖在200 mg/kg体重剂量时可显著抑制小鼠体内骨肉瘤细胞的增殖，抑制腹水型肝癌细胞DNA和蛋白质合成。当前普遍认为螺旋藻抗突变、抗癌、抗辐射的机理可能是：增强机体免疫功能，尤其是细胞免疫功能提高，既能抗辐射，又能使癌的增殖生长受到抑制。因此认为螺旋藻抗突变、抗癌、抗辐射是多种成分、多种作用的综合结果〔4～6〕。
, 百拇医药
参考文献
1 程双奇.螺旋藻的营养价值.营养学报，1990，12(4)∶415
2 胡龙.螺旋藻胶囊的药理与毒理研究.中成药，1995，17(7)∶28
3 阮继红，等.螺旋藻多糖抗辐射的研究.遗传，1988，10(2)∶27
4 王俏先.钝顶螺旋藻的抗癌作用及对免疫功能的影响.癌症，1996，15(6)∶423
5 刘力生，等.螺旋藻多糖对移植性癌细胞的抑制作用及其机理的研究.海洋科学，1991，5∶33
6 陈锋.螺旋藻抗辐射防癌抗癌作用研究现状.癌变.畸变.突变，1994，6(5)∶63
(收稿：1998-07-05), 百拇医药
单位：北京市卫生防疫站(100013)
关键词：螺旋藻；抗突变作用；微核试验；睾丸染色体畸变试验
中国慢性病预防与控制990205 摘要 对钝顶螺旋藻的抗突变作用进行了研究。结果表明：钝顶螺旋藻在2 000 mg/kg剂量下，对环磷酰胺所致小鼠骨髓细胞微核增加有拮抗作用(P<0.05)，对丝裂霉素所致小鼠睾丸染色体畸变在染色体畸变细胞率指标上具有拮抗作用(P<0.05)，在性染色体单价体，常染色体单价体，具有拮抗趋势，但无统计学意义(P>0.05)。在67，670 mg/kg两个低剂量下，对环磷酰胺所致小鼠骨髓细胞微核和对丝裂霉素所致小鼠睾丸染色体畸变在染色体畸变细胞率增高的拮抗作用无统计学差异(P>0.05)。
Antimutagenic Study on Spirulina
, 百拇医药
Yang Qing,et al;Beijing Anti-epidemic Station(100013)
Abstract Antimutagenic effect of SSP was studied by mouse bone cell marrow micronucleus test and mouse testicle chromosome aberration test.It showed that under the dosage of 2 000 mg/kg of SSP,the SSP had the antagonism to the frequencies of mouse bone marrow micronucleus induced by the cyclophosphamide and those of mouse testicle chromosome aberration induced by mitomycin(P<0.05).However,at the dosage of 67,670 mg/kg of SSP,it showed no antagonistic action(P>0.05).
, 百拇医药
Key words Spirulina Antimutagenic Micronucleus Chromosome aberration
当前人类生存环境中诱变剂的种类和含量大幅度增加，因此，筛选具有抗突变功能的物质成为近几年研究热点，螺旋藻(SP)作为一种保健食品，它的各种保健作用引起了极大关注。我们采用小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠睾丸染色体畸变试验对钝顶螺旋藻(SSP)的抗突变作用进行探讨。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 受试物 钝顶螺旋藻，人推荐摄入量为4.0 g/d。
1.1.2 动物 昆明种小鼠，100只，雄性，体重25～30 g，由中国科学院遗传研究所提供。
, 百拇医药 1.2 试验方法
1.2.1 抗小鼠骨髓细胞微核试验 动物随机分为五组，分别为阴性对照组和阳性对照组，三个受试组剂量分别为人推荐摄入量的1倍、10倍、30倍，分别为67、670、2000 mg/kg BW，受试组连续给予受试物30天，每天一次经口给予受试物，在试验末期最后2天，取材前30小时对除阴性组外的所有动物经口给予致突变物(环磷酰胺40 mg/kg BW)两次(中间隔24小时)，受试物组给予致突变物1小时后再给予受试物，第二次给予阳性物后6小时取动物胸骨制片、固定、染色、镜检，每只动物计数1 000个嗜多染红细胞中微核细胞数，最后进行统计学分析。
1.2.2 抗小鼠睾丸染色体畸变试验 将动物随机分为五组，三个剂量组剂量采用人推荐摄入量的1倍、10倍、30倍，即67、670、2000 mg/kgBW和阴性对照组及致突变物对照组，受试物组连续给予受试物30天，每天一次，经口灌胃，取材前12天，各组经口给予丝裂霉素C(2 mg/kgBW)一次，受试物组连续给予受试物12天，30天后处死动物前6小时各组小鼠腹腔注射秋水仙素(4 mg/kgBW)6小时后取小鼠双侧睾丸，常规制片、染色，在显微镜下每只小鼠记数100个初级精母细胞中的染色体畸变数，最后进行统计学分析，按Kastenbaum和Bownan统计方法进行统计检验。
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 抗小鼠骨髓细胞微核试验
从表1中可见，钝顶螺旋藻各剂量组的微核率与阳性对照组相比均有所降低，且随着剂量的增加下降幅度加大，经统计学t检验，高剂量组的下降具有统计学意义(P<0.05)。试验结果表明：钝顶螺旋藻对环磷酰胺所致小鼠骨髓细胞微核增加有拮抗作用。
表1 钝顶螺旋藻抗小鼠骨髓细胞微核试验结果 组 别
剂 量
(mg/kgBW)
动物数
(只)
嗜多染
, 百拇医药 细胞数(个)
有微核细胞数
(个)
微核率
阴性对照
-
10
104
15
1.5
钝顶螺旋藻
低剂量
67
, 百拇医药
10
104
491
49.1
中剂量
670
10
104
365
36.5
高剂量
2 000
10
, 百拇医药
104
291
29.1*
阳性对照
环磷酰胺
(40 mg/kgBW)
10
104
507
50.7
注：*表示与阳性对照组相比有显著性差异，P<0.05，表2同
, 百拇医药 2.2 抗小鼠睾丸染色体畸变试验
由表2中结果可见，钝顶螺旋藻各剂量组与阳性对照组相比，在性染色体单价体、常染色体单价体、染色体畸变细胞数各个指标上均有所下降，经统计分析，高剂量组在染色体畸变细胞数下降具有统计学意义(P<0.05)。在小鼠睾丸染色体畸变试验中染色体畸变细胞数率的差异是十分重要的指标。所以我们认为钝顶螺旋藻对丝裂霉素所致小鼠睾丸染色体畸变具有拮抗作用。
表2 钝顶螺旋藻抗小鼠睾丸染色体畸变试验结果 组 别
剂 量
(mg/kg BW)
动物数
(只)
观察中期相
, 百拇医药
细胞数
性染色体单价体
常染色体单价体
染色体畸变细胞数
(个)
(%)
(个)
(%)
(个)
(%)
阴性对照
-
10
, 百拇医药
103
30
3.0
6
0.6
0
0
钝顶螺旋藻
低剂量
67
10
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, http://www.100md.com
4.5
9
0.9
14
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中剂量
670
10
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10
1.0
, http://www.100md.com
6
0.6
高剂量
2 000
10
103
94
9.4
13
1.3
2
0.2*
阳性对照
, http://www.100md.com
丝裂霉素
(2 mg/kgBW)
10
103
114
11.4
27
2.7
18
1.8
注：染色体畸变细胞数包括：染色体断片，断裂、粉碎化、桥等
3 讨论
, 百拇医药
螺旋藻这一古老的生物，到本世纪已被相当多的人所认识与利用。由于其有丰富的营养价值，因此是较好的保健食品。研究表明螺旋藻有抗辐射，抗诱变，防癌抗癌等多种作用〔1,2〕。
此次实验结果表明：钝顶螺旋藻在2 000 mg/kg对环磷酰胺所致小鼠骨髓细胞微核增加有拮抗作用(P<0.05)。对丝裂霉素所致小鼠睾丸染色体畸变在染色体畸变细胞率指标上具有拮抗作用(P<0.05)。但在67，670 mg/kg两个剂量下，虽有拮抗趋势，但无统计学差异(P>0.05)。可能是剂量小所造成的。阮继红曾观察到钝顶螺旋藻多糖可使小鼠PCE微核率下降〔3〕。有报道钝顶螺旋藻对小鼠S180和宫颈癌U14有明显抑制作用。当剂量为50 mg/kg体重时，抑癌率分别达53.4%和49.04%。刘力生研究表明，螺旋藻多糖在200 mg/kg体重剂量时可显著抑制小鼠体内骨肉瘤细胞的增殖，抑制腹水型肝癌细胞DNA和蛋白质合成。当前普遍认为螺旋藻抗突变、抗癌、抗辐射的机理可能是：增强机体免疫功能，尤其是细胞免疫功能提高，既能抗辐射，又能使癌的增殖生长受到抑制。因此认为螺旋藻抗突变、抗癌、抗辐射是多种成分、多种作用的综合结果〔4～6〕。
, 百拇医药
参考文献
1 程双奇.螺旋藻的营养价值.营养学报，1990，12(4)∶415
2 胡龙.螺旋藻胶囊的药理与毒理研究.中成药，1995，17(7)∶28
3 阮继红，等.螺旋藻多糖抗辐射的研究.遗传，1988，10(2)∶27
4 王俏先.钝顶螺旋藻的抗癌作用及对免疫功能的影响.癌症，1996，15(6)∶423
5 刘力生，等.螺旋藻多糖对移植性癌细胞的抑制作用及其机理的研究.海洋科学，1991，5∶33
6 陈锋.螺旋藻抗辐射防癌抗癌作用研究现状.癌变.畸变.突变，1994，6(5)∶63
(收稿：1998-07-05), 百拇医药
参见：首页 > 药业版 > 保健品 > 专题 > 螺旋藻