妊高征患者血浆5－羟色胺检测的临床意义
作者：欧玉清 邢继强 和庆余 赵文霞 赵莲茹
单位：欧玉清 邢继强：佳木斯大学医学院中心实验室；和庆余：佳木斯大学医学院病生教研室；赵文霞 赵莲茹：佳木斯中心医院
关键词：妊高征；5-羟色胺；荧光分光光度法
黑龙江医药科学990208
提要 本实验采用荧光分光光度法，检测21例妊高征患者组(实验组)和21例正常妊娠晚期组(对照组)血小板中5-羟色胺(5-HT)和血浆中5-HT及5-羟吲哚(5-HIAA)的含量。结果：妊高征组血浆中5-HT和5-HIAA含量明显高于对照组，而且与病情严重程度呈正相关，轻、中、重三组t检验均为P<0.01。妊高征组血小板中5-HT含量明显低于对照组而且下降水平与病情严重程度呈负相关，轻、中、重3组t检验均为P<0.01。结论：妊高征血浆中5-HT、5-HIAA的含量和血小板中5-HT的含量与妊高征发病机理及预后密切相关。
, http://www.100md.com
Clinical significance of the detection of 5-HT in the patients with hypertension complication of pregnacy
Ou Yuqing, et al
Abstract The platelet 5-HT level and the plasma 5-HT and 5-HIAA levels were detected in the 21 patients with hypertension complication of pregnacy as experimental group and 21 normal women in their late pregnant period as control group using fluorophotometry. The results revealed that the plasma 5-HT and 5-HIAA levels were much higher in the control one, showing a positive relation to the condition with P<0.01 for t test in mild, moderate or severe conditions. The platelet 5-HT level was much lower in the experimental group than that in the control one, showing a negative relation to the condition, with P<0.01 for t test in mild, moderate or severe conditions. It is concluded that the plasma 5-HT and 5-HIAA levels as well as the platelet 5-HT level are closely related to the pathogensis and prognosis of the disease.
, 百拇医药
Key words hypertension complication of pregnancy; 5-HT; fluorophotometry
5-HT在生物体内广泛分布，具有很强的生理活性，人体中的5-HT主要是由色氨酸经羟化、脱羧而成。色氨酸与5-HT的代谢主要在中枢和外围两个系统，5-HT从储存部位或从血小板中释放出来，具有强烈的生理活性，本文测定妊高征患者血浆中5-HT、5-HIAA和血小板中5-HT的含量，旨在了解其在妊高征的发病机理中的作用。
1 材料与方法
1.1 一般资料及分组
妊高征组：随机抽取住院妊高征患者21人，以乐杰主编妇产科学(第4版)妊高征分类为标准[1]，轻度妊高征6例，中度妊高征6例，重度妊高征9例，平均孕周(37±2)周，平均年龄(26±2)岁。对照组：随机抽取同期住院孕晚期病人21人，平均孕周(39±1)周，平均年龄(24±2)岁。以上两组均为初产、单胎，无慢性高血压，糖尿病及其它疾病。
, 百拇医药
1.2 样品的检测
1.2.1 原理
血小板和血浆标本在除去蛋白后，标本中的5-HT和5-HIAA在强酸环境中与荧光激发剂邻苯二甲醛(OPT)作用，加热生成特异性荧光缩合物，经加入三氯甲烷洗脱减少非特异荧光，用荧光分光光度计测定其荧光值。
1.2.2 血样采取
两组病人均于入院后即抽取肘静脉血6ml，加入含有乙二胺四乙酸二钠(DETA)的试管中抗凝，30min内分离血浆和血小板。
1.2.3 操作方法
将抗凝血800转/分，离心10min，准确吸取上层富含血小板血浆(PRP)0.5ml置于含等量0.4% EDTA二钠溶液的试管内，该管经3500转/分，离心15min，管底白色沉淀即为血小板。将上清贫血小板血浆(dppp)尽数倾于另一试管中，血小板凝块试管加入1ml重蒸馏水，振荡充分破坏血小板成液状。然后分别取血小板、血浆1ml除去蛋白后，取上清分别加入OPT/HCl混合液、三氯甲烷，充分混匀后静置分层，取上层液1ml测定5-HT、5-HAA、Ex350、Em475。所需试剂均为市售分析纯。仪器为日本产RF-5000型荧光分光光度计测定仪。
, 百拇医药
2 结果
见附表。
附表 各组血浆、血小板中5-HT和5-HIAA含量(
±s) 测试对象
例数
血浆中
血小板中
5-HT(nmol/L)
5-HIAA(nmol/L)
5-HT(nmol/109)
对照组
, 百拇医药
21
52.18±11.93
45.63±7.57
5.14±0.32
实验组
轻度妊高症
6
123.46±26.19
73.57±12.94
4.10±0.23
中度妊高症
6
, 百拇医药
160.17±22.27
88.73±32.84
3.04±0.29
重度妊高症
9
228.29±15.51
124.78±13.94
2.72±0.34
P<0.01
妊高征组血浆中5-HT、5-HIAA含量明显高于对照组而且与病情严重程度呈正相关，轻、中、重3组t检验均为P<0.01。妊高征组血小板中5-HT的含量低于对照组而且下降水平与病情严重程度呈负相关，轻、中、重3组t检验均为P<0.01。
, 百拇医药
3 讨论
妊高征的病因发病机理有许多学说[2]，目前无可靠的实验室检测手段，国内外采用多种方法测定妊高征患者5-HT浓度，结果报告不一。Corneis等[3,4]报道妊高征患者血浆中5-HT明显高于正常孕晚期妇女，因为孕晚期妇女血液处于高凝状态。血小板纤溶之间处于一种高水平的相对动态平衡状态，为防止出血而呈现的一种生理保护机制，但是妊高征时打破这种动态平衡，在强大的动因下血小板大量破坏短时间内释放出大量5-HT进入血浆，超出血管内皮细胞清除MAO代谢能力，同时血小板对5-HT摄入功能下降。另一方面健康的血管内膜是对5-HT缩血管效应的有效屏障，内膜细胞的单胺氧化酶能降解5-HT，在血管内膜受损时则减少血管壁前列环素的合成，降低5-HT的酶解，导致血管收缩和血浆5-HT升高[5]，5-HT增多又可损伤血管内膜，引起内膜细胞收缩，5-HT缩血管的直接作用，在有内膜损伤的血管其收缩作用显著加强。间接作用是加强去甲肾上腺素、血管紧张素Ⅱ、组织胺、前列腺素F2c等物质对血管的收缩，5-HT的这二种作用均通过5-HT受体，使全身小动脉痉挛日益严重。导致重要脏器缺血、缺氧.出现不同程度损害。特别是肾功能异常可影响5-HIAA排出。血浆中5-HT、5-HIAA升高也是妊高征发生水肿、蛋白尿原因之一。本组病例在重度妊高征中有2例血浆中5-HT异常升高，血小板中5-HT异常下降并发胎盘早剥和luGR各1例符合文献报道。妊高征患者的胎盘脐带血管对5-HT的敏感性较正常孕妇增高1.7倍，本组实验表明妊高征病人血浆中5-HT升高与病情严重程度呈正相关。本研究提示：5-HT含量的变化是妊高征病因，它反应全身细小血管痉挛情况和病情进展程度，5-HT含量可做为妊高征监测指标，判断预后，指导临床治疗具有一定临床实用价值。
, 百拇医药
参考文献
1.乐杰主编.妇产科学.第4版,北京:人民出版社1996,113～119
2.吴其夏主编.体液因素和血液循环病理生理学.北京:北京医科大学中国协和医科大学联合出版社,1991,13～23
3.Cornelis M Gustaaf A. Platelet-poor plasma serotonin in normal and preeclamptic pregnancy clin chem 1993,39,1675
4.任东平,杨慧庚,罗亚宁,等.妊高征患者血浆及血小板中5-羟色胺含量测定.中华妇产科学,1997,32(1)12～13
5.Vannoutte PM. 5-hydroxytryptamine and vascular disease, Federation proc,1983;42:233
(1998-09-13收稿), http://www.100md.com
单位：欧玉清 邢继强：佳木斯大学医学院中心实验室；和庆余：佳木斯大学医学院病生教研室；赵文霞 赵莲茹：佳木斯中心医院
关键词：妊高征；5-羟色胺；荧光分光光度法
黑龙江医药科学990208
提要 本实验采用荧光分光光度法，检测21例妊高征患者组(实验组)和21例正常妊娠晚期组(对照组)血小板中5-羟色胺(5-HT)和血浆中5-HT及5-羟吲哚(5-HIAA)的含量。结果：妊高征组血浆中5-HT和5-HIAA含量明显高于对照组，而且与病情严重程度呈正相关，轻、中、重三组t检验均为P<0.01。妊高征组血小板中5-HT含量明显低于对照组而且下降水平与病情严重程度呈负相关，轻、中、重3组t检验均为P<0.01。结论：妊高征血浆中5-HT、5-HIAA的含量和血小板中5-HT的含量与妊高征发病机理及预后密切相关。
, http://www.100md.com
Clinical significance of the detection of 5-HT in the patients with hypertension complication of pregnacy
Ou Yuqing, et al
Abstract The platelet 5-HT level and the plasma 5-HT and 5-HIAA levels were detected in the 21 patients with hypertension complication of pregnacy as experimental group and 21 normal women in their late pregnant period as control group using fluorophotometry. The results revealed that the plasma 5-HT and 5-HIAA levels were much higher in the control one, showing a positive relation to the condition with P<0.01 for t test in mild, moderate or severe conditions. The platelet 5-HT level was much lower in the experimental group than that in the control one, showing a negative relation to the condition, with P<0.01 for t test in mild, moderate or severe conditions. It is concluded that the plasma 5-HT and 5-HIAA levels as well as the platelet 5-HT level are closely related to the pathogensis and prognosis of the disease.
, 百拇医药
Key words hypertension complication of pregnancy; 5-HT; fluorophotometry
5-HT在生物体内广泛分布，具有很强的生理活性，人体中的5-HT主要是由色氨酸经羟化、脱羧而成。色氨酸与5-HT的代谢主要在中枢和外围两个系统，5-HT从储存部位或从血小板中释放出来，具有强烈的生理活性，本文测定妊高征患者血浆中5-HT、5-HIAA和血小板中5-HT的含量，旨在了解其在妊高征的发病机理中的作用。
1 材料与方法
1.1 一般资料及分组
妊高征组：随机抽取住院妊高征患者21人，以乐杰主编妇产科学(第4版)妊高征分类为标准[1]，轻度妊高征6例，中度妊高征6例，重度妊高征9例，平均孕周(37±2)周，平均年龄(26±2)岁。对照组：随机抽取同期住院孕晚期病人21人，平均孕周(39±1)周，平均年龄(24±2)岁。以上两组均为初产、单胎，无慢性高血压，糖尿病及其它疾病。
, 百拇医药
1.2 样品的检测
1.2.1 原理
血小板和血浆标本在除去蛋白后，标本中的5-HT和5-HIAA在强酸环境中与荧光激发剂邻苯二甲醛(OPT)作用，加热生成特异性荧光缩合物，经加入三氯甲烷洗脱减少非特异荧光，用荧光分光光度计测定其荧光值。
1.2.2 血样采取
两组病人均于入院后即抽取肘静脉血6ml，加入含有乙二胺四乙酸二钠(DETA)的试管中抗凝，30min内分离血浆和血小板。
1.2.3 操作方法
将抗凝血800转/分，离心10min，准确吸取上层富含血小板血浆(PRP)0.5ml置于含等量0.4% EDTA二钠溶液的试管内，该管经3500转/分，离心15min，管底白色沉淀即为血小板。将上清贫血小板血浆(dppp)尽数倾于另一试管中，血小板凝块试管加入1ml重蒸馏水，振荡充分破坏血小板成液状。然后分别取血小板、血浆1ml除去蛋白后，取上清分别加入OPT/HCl混合液、三氯甲烷，充分混匀后静置分层，取上层液1ml测定5-HT、5-HAA、Ex350、Em475。所需试剂均为市售分析纯。仪器为日本产RF-5000型荧光分光光度计测定仪。
, 百拇医药
2 结果
见附表。
附表 各组血浆、血小板中5-HT和5-HIAA含量(
±s) 测试对象例数
血浆中
血小板中
5-HT(nmol/L)
5-HIAA(nmol/L)
5-HT(nmol/109)
对照组
, 百拇医药
21
52.18±11.93
45.63±7.57
5.14±0.32
实验组
轻度妊高症
6
123.46±26.19
73.57±12.94
4.10±0.23
中度妊高症
6
, 百拇医药
160.17±22.27
88.73±32.84
3.04±0.29
重度妊高症
9
228.29±15.51
124.78±13.94
2.72±0.34
P<0.01
妊高征组血浆中5-HT、5-HIAA含量明显高于对照组而且与病情严重程度呈正相关，轻、中、重3组t检验均为P<0.01。妊高征组血小板中5-HT的含量低于对照组而且下降水平与病情严重程度呈负相关，轻、中、重3组t检验均为P<0.01。
, 百拇医药
3 讨论
妊高征的病因发病机理有许多学说[2]，目前无可靠的实验室检测手段，国内外采用多种方法测定妊高征患者5-HT浓度，结果报告不一。Corneis等[3,4]报道妊高征患者血浆中5-HT明显高于正常孕晚期妇女，因为孕晚期妇女血液处于高凝状态。血小板纤溶之间处于一种高水平的相对动态平衡状态，为防止出血而呈现的一种生理保护机制，但是妊高征时打破这种动态平衡，在强大的动因下血小板大量破坏短时间内释放出大量5-HT进入血浆，超出血管内皮细胞清除MAO代谢能力，同时血小板对5-HT摄入功能下降。另一方面健康的血管内膜是对5-HT缩血管效应的有效屏障，内膜细胞的单胺氧化酶能降解5-HT，在血管内膜受损时则减少血管壁前列环素的合成，降低5-HT的酶解，导致血管收缩和血浆5-HT升高[5]，5-HT增多又可损伤血管内膜，引起内膜细胞收缩，5-HT缩血管的直接作用，在有内膜损伤的血管其收缩作用显著加强。间接作用是加强去甲肾上腺素、血管紧张素Ⅱ、组织胺、前列腺素F2c等物质对血管的收缩，5-HT的这二种作用均通过5-HT受体，使全身小动脉痉挛日益严重。导致重要脏器缺血、缺氧.出现不同程度损害。特别是肾功能异常可影响5-HIAA排出。血浆中5-HT、5-HIAA升高也是妊高征发生水肿、蛋白尿原因之一。本组病例在重度妊高征中有2例血浆中5-HT异常升高，血小板中5-HT异常下降并发胎盘早剥和luGR各1例符合文献报道。妊高征患者的胎盘脐带血管对5-HT的敏感性较正常孕妇增高1.7倍，本组实验表明妊高征病人血浆中5-HT升高与病情严重程度呈正相关。本研究提示：5-HT含量的变化是妊高征病因，它反应全身细小血管痉挛情况和病情进展程度，5-HT含量可做为妊高征监测指标，判断预后，指导临床治疗具有一定临床实用价值。
, 百拇医药
参考文献
1.乐杰主编.妇产科学.第4版,北京:人民出版社1996,113～119
2.吴其夏主编.体液因素和血液循环病理生理学.北京:北京医科大学中国协和医科大学联合出版社,1991,13～23
3.Cornelis M Gustaaf A. Platelet-poor plasma serotonin in normal and preeclamptic pregnancy clin chem 1993,39,1675
4.任东平,杨慧庚,罗亚宁,等.妊高征患者血浆及血小板中5-羟色胺含量测定.中华妇产科学,1997,32(1)12～13
5.Vannoutte PM. 5-hydroxytryptamine and vascular disease, Federation proc,1983;42:233
(1998-09-13收稿), http://www.100md.com