C—erbB—2过表达与乳腺癌的发病学及转移的关系
作者：刘复兴 甘亚平 李 云
单位：咸宁医学院病理学教研室，咸宁 437100
关键词：乳腺癌；癌基因蛋白；免疫组织化学
咸宁医学院学报990205 摘 要 目的：研究C—erbB—2癌基因激活在乳腺癌发病及生物学行为诸方面的作用。方法：用免疫组化SABC法检测了48例乳腺癌及其癌前病变中C—erbB—2癌蛋白的表达。结果：C—erbB—2癌蛋白的表达在乳腺癌与乳腺囊肿病之间以及不同类型乳腺癌之间差异显著，而与淋巴结转移与否无明显相关性。结论：C—erbB—2过表达可能发生在乳腺癌变之后和淋巴结转移之前，在乳腺癌分类诊断上有参考价值。
中图分类号 R739.65
The Relationship between the Over-expression of
, 百拇医药
C—erbB—2 Protein and the Carcinogenesis
and Metastasis of Breast Carcinoma
Liu Fuxing，Gan Yaping,Li Yuan
Department of Pathology,Xianning Medical College,Xianning 437100
ABSTRACT Objective To understand the action of the activation of C—erbB—2 oncogene on pathogenesis end biological behavior of the breast carcinoma.Methods The immunohistochemical—SABC—method was employed to detect the expression of protooncogene C—erbB—2 in carcinoma and precancerous lesions of breast.Results There were significant differences of C—erbB—2 protein expression among the various types of breast carcinoma or between the breast carcinoma and mammary cystic disease,but no difference was found between the groups of breast carcinoma with or without lymph node metastasis.Conclusion The results show that C—erbB—2 oncoprotein overexpression occurs after cancerous change of mammary duct epithelia and prior to the occurrence of lymph node metastasis.It may be a valuable reference for histologic classification of breast carcinoma.
, http://www.100md.com
KEY WORDS Breast carcinoma;C—erbB—2;Oncoprotein;Immunohistochemistry
乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一，在我国其发病率呈不断上升的趋势，严重威胁妇女生命。但乳腺癌发病机理还不清楚，而大量研究表明，癌基因、抗癌基因的异常与其发生发展密切相关。为了解癌基因C—erbB—2激活在乳腺癌发病及生物学行为等方面的作用，用免疫组化SABC方法检测了乳腺浸润性导管癌及其癌前病变中C—erbB—2癌蛋白的表达，为探讨乳腺癌发生机理提供参考。
1 资料和方法
1.1病例标本
48例乳腺浸润性导管癌患者(女性，年龄36～72岁，平均50.4岁)，其中实体癌44例(单纯癌28例，硬癌10例，不典型髓样癌6例)；混合癌4例。将其中有资料记载有或无淋巴结转移的20例标本分为两组：12例转移阳性，8例阴性。癌前病变选取乳腺囊肿病伴部分导管上皮不典型增生共10例。
, http://www.100md.com
1.2 主要试剂
一抗，鼠抗人C—erbB—2系Dako公司产品，SABC(Strept Avidin—Biotin Complex)试剂盒系武汉博士德(Boster)公司产品。
1.3 染色方法
按说明书采用SABC法，DAB显色，苏木素复染。用正常血清代一抗作阴性对照，用结肠癌阳染标本作阳性对照。
1.4 结果评判
每张切片连续计数1 000个癌细胞中阳性细胞数，取百分率<10%定为(+)，11%～50%为(
)，>51%为(
)，无阳性显示记作(-)。用χ2和u检验进行统计分析。
, 百拇医药
2 结 果
2.1阳性反应定位
C—erbB—2阳性颗粒呈棕黄色，定位于胞膜；多数阳性细胞胞浆亦出现黄染阳性颗粒(见附图)。
附图 C—erbB—2阳性颗粒定位于癌细胞膜上，部分细胞胞浆呈阳性反应(SABC法，10×40倍)
2.2 乳腺癌与癌前病变中C—erbB—2的表达
10例乳腺囊肿病伴上皮不典型增生，除1例(10%)见不典型增生的囊壁上皮少数细胞弱阳性外，余均呈阴性。48例浸润性导管癌有32例(66.72%)显示强弱不一的阳性反应。癌与癌前病变C—erbB—2表达差异明显(u=3.294，0.01
2.3 不同类型乳腺癌C—erbB—2的表达
28例单纯癌有22例(45.8%)呈阳性反应；10例硬癌仅2例(20%)呈较弱阳性，6例不典型髓样癌中全部(100%)呈阳性；4例混合癌有2例(50%)阳性。各型之间C—erbB—2蛋白表达差异显著(χ2=65.3714，0.005
表1 各型乳腺癌C—erbB—2蛋白的表达 分 型
例数
C—erbB—2表达级别
阳性率(%)
-
+
, 百拇医药
实体癌
单纯癌
28
6
6
2
14
45.8
硬 癌
10
8
0
2
0
, 百拇医药
20.0
髓样癌
6
0
2
2
2
100
混 合 癌
4
2
0
2
0
, 百拇医药
50
χ2=65.3714，0.005
2.4 淋巴结转移与乳腺癌C—erbB—2表达的关系
有局部淋巴结转移组乳腺癌12例中6例呈C—erbB—2阳性，占50%。而无淋巴结转移的8例有4例呈阳性，亦占50%，两组间无统计意义上的差异(u=0，P>0.05，表2)。
表2 淋巴结转移与乳腺癌C—erbB—2蛋白的表达 淋巴结转移分组
例数
C—erbB—2表达级别
(%)
-
, http://www.100md.com
+
阳性组
12
6
2
2
2
50
阴性组
8
4
, http://www.100md.com
0
0
4
50
3 讨 论
乳腺癌的发生有多种癌基因和抗癌基因的参与[1]。其中C—erbB—2基因是与Avian erythroblastosis virus 转化基因同源的细胞癌基因，位于17号染色体长臂，编码一跨膜糖蛋白。其结构与表皮生长因子受体相似[2]。该基因在乳腺癌中的扩增报道不一致[3～4]，其蛋白表达水平的研究结果亦存在差异[5～6]。本实验结果显示，48例乳腺癌中有32例表现出C—erbB—2蛋白阳性反应，阳性率66.7%。说明C—erbB—2基因激活在乳腺癌发病中起一定作用。①从乳腺癌前病变—囊肿病伴上皮不典型增生C—erbB—2蛋白表达水平明显低于乳腺浸润性癌来看，C—erbB—2过表达即该基因表型改变发生在癌变之后，在影响乳腺癌生物学行为方面发挥作用。②不同类型乳腺癌中C—erbB—2表达存在显著差异，这正是上述观点的另一佐证。其中以不典型髓样癌表达率最高(100%)，说明C—erbB—2基因激活正是不典型髓样癌预后较差的原因之一。而硬癌表达率仅20%，可能是该 型癌组织有多量纤维组织及淋巴细胞混杂，“稀释”了肿瘤细胞DNA含量[1]，以至于蛋白表达受到影响之故。③本实验淋巴结转移组乳腺癌C—erbB—2表达并不高于非转移组，可能是该基因表型的改变出现在肿瘤转移之前[7]。此外，肿瘤组织的异质性及许多基因表现的多效性(pleiotropy)亦可能影响该 癌蛋白的检出率[2、8]。
, 百拇医药
参考文献
1 陈艺华.癌基因、抗癌基因异常与人乳腺癌。中华病理学杂志.1994；23(2)：122
2 Cohen JA,Weiner DB,More KF,et al.Exprission of pattern of the neu(NGL) gene encoded growth factor recopter protein in normal and transformed epithelial tissue of the digestive tract.Oncogene,1989；4(1)：81
3 Biunno I,Pozzi MR,Piexotti MA.Structure and expression of oncogenes in surgical specimens of human breast carcinoma.Br J Cancer,1988；57：464
, 百拇医药
4 Fontaine J,Tesseraux M,Klein V,et al.Gene amplification and expression of the neu (C—erbB—2) sequence in human breast carcinoma.Oncology,1988；45：360
5 Mc Cann A,Dervan PA,Johnston PA,et al.C—erbB—2 oncoprotein exprcssion in primary human tumors.Cancer,1990；65：88
6 Spandidos DA,Yiagnisis M,Papadimitriou K,et al.Ras,C—myc and C—erbB—2 oncoprotein in human breast cancer.Anticancer Res,1989；9：1385
7 Markar APh,Desmedt EJ,Potter CRD,et al.NEU (C—erbB—2) oncogene in breast cancer and it′s possible association with the risk of distant metastasis.Acta Oncologica,1990；29：931
8 王吾如.关于癌转移分子病理学研究.中华病理学杂志，1994；23(4)：197
收稿日期：1999-02-06, 百拇医药
单位：咸宁医学院病理学教研室，咸宁 437100
关键词：乳腺癌；癌基因蛋白；免疫组织化学
咸宁医学院学报990205 摘 要 目的：研究C—erbB—2癌基因激活在乳腺癌发病及生物学行为诸方面的作用。方法：用免疫组化SABC法检测了48例乳腺癌及其癌前病变中C—erbB—2癌蛋白的表达。结果：C—erbB—2癌蛋白的表达在乳腺癌与乳腺囊肿病之间以及不同类型乳腺癌之间差异显著，而与淋巴结转移与否无明显相关性。结论：C—erbB—2过表达可能发生在乳腺癌变之后和淋巴结转移之前，在乳腺癌分类诊断上有参考价值。
中图分类号 R739.65
The Relationship between the Over-expression of
, 百拇医药
C—erbB—2 Protein and the Carcinogenesis
and Metastasis of Breast Carcinoma
Liu Fuxing，Gan Yaping,Li Yuan
Department of Pathology,Xianning Medical College,Xianning 437100
ABSTRACT Objective To understand the action of the activation of C—erbB—2 oncogene on pathogenesis end biological behavior of the breast carcinoma.Methods The immunohistochemical—SABC—method was employed to detect the expression of protooncogene C—erbB—2 in carcinoma and precancerous lesions of breast.Results There were significant differences of C—erbB—2 protein expression among the various types of breast carcinoma or between the breast carcinoma and mammary cystic disease,but no difference was found between the groups of breast carcinoma with or without lymph node metastasis.Conclusion The results show that C—erbB—2 oncoprotein overexpression occurs after cancerous change of mammary duct epithelia and prior to the occurrence of lymph node metastasis.It may be a valuable reference for histologic classification of breast carcinoma.
, http://www.100md.com
KEY WORDS Breast carcinoma;C—erbB—2;Oncoprotein;Immunohistochemistry
乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一，在我国其发病率呈不断上升的趋势，严重威胁妇女生命。但乳腺癌发病机理还不清楚，而大量研究表明，癌基因、抗癌基因的异常与其发生发展密切相关。为了解癌基因C—erbB—2激活在乳腺癌发病及生物学行为等方面的作用，用免疫组化SABC方法检测了乳腺浸润性导管癌及其癌前病变中C—erbB—2癌蛋白的表达，为探讨乳腺癌发生机理提供参考。
1 资料和方法
1.1病例标本
48例乳腺浸润性导管癌患者(女性，年龄36～72岁，平均50.4岁)，其中实体癌44例(单纯癌28例，硬癌10例，不典型髓样癌6例)；混合癌4例。将其中有资料记载有或无淋巴结转移的20例标本分为两组：12例转移阳性，8例阴性。癌前病变选取乳腺囊肿病伴部分导管上皮不典型增生共10例。
, http://www.100md.com
1.2 主要试剂
一抗，鼠抗人C—erbB—2系Dako公司产品，SABC(Strept Avidin—Biotin Complex)试剂盒系武汉博士德(Boster)公司产品。
1.3 染色方法
按说明书采用SABC法，DAB显色，苏木素复染。用正常血清代一抗作阴性对照，用结肠癌阳染标本作阳性对照。
1.4 结果评判
每张切片连续计数1 000个癌细胞中阳性细胞数，取百分率<10%定为(+)，11%～50%为(
)，>51%为()，无阳性显示记作(-)。用χ2和u检验进行统计分析。, 百拇医药
2 结 果
2.1阳性反应定位
C—erbB—2阳性颗粒呈棕黄色，定位于胞膜；多数阳性细胞胞浆亦出现黄染阳性颗粒(见附图)。
附图 C—erbB—2阳性颗粒定位于癌细胞膜上，部分细胞胞浆呈阳性反应(SABC法，10×40倍)
2.2 乳腺癌与癌前病变中C—erbB—2的表达
10例乳腺囊肿病伴上皮不典型增生，除1例(10%)见不典型增生的囊壁上皮少数细胞弱阳性外，余均呈阴性。48例浸润性导管癌有32例(66.72%)显示强弱不一的阳性反应。癌与癌前病变C—erbB—2表达差异明显(u=3.294，0.01
2.3 不同类型乳腺癌C—erbB—2的表达
28例单纯癌有22例(45.8%)呈阳性反应；10例硬癌仅2例(20%)呈较弱阳性，6例不典型髓样癌中全部(100%)呈阳性；4例混合癌有2例(50%)阳性。各型之间C—erbB—2蛋白表达差异显著(χ2=65.3714，0.005
表1 各型乳腺癌C—erbB—2蛋白的表达 分 型
例数
C—erbB—2表达级别
阳性率(%)
-
+
, 百拇医药
实体癌
单纯癌
28
6
6
2
14
45.8
硬 癌
10
8
0
2
0
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20.0
髓样癌
6
0
2
2
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100
混 合 癌
4
2
0
2
0
, 百拇医药
50
χ2=65.3714，0.005
2.4 淋巴结转移与乳腺癌C—erbB—2表达的关系
有局部淋巴结转移组乳腺癌12例中6例呈C—erbB—2阳性，占50%。而无淋巴结转移的8例有4例呈阳性，亦占50%，两组间无统计意义上的差异(u=0，P>0.05，表2)。
表2 淋巴结转移与乳腺癌C—erbB—2蛋白的表达 淋巴结转移分组
例数
C—erbB—2表达级别
(%)
-
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阳性组
12
6
2
2
2
50
阴性组
8
4
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0
4
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3 讨 论
乳腺癌的发生有多种癌基因和抗癌基因的参与[1]。其中C—erbB—2基因是与Avian erythroblastosis virus 转化基因同源的细胞癌基因，位于17号染色体长臂，编码一跨膜糖蛋白。其结构与表皮生长因子受体相似[2]。该基因在乳腺癌中的扩增报道不一致[3～4]，其蛋白表达水平的研究结果亦存在差异[5～6]。本实验结果显示，48例乳腺癌中有32例表现出C—erbB—2蛋白阳性反应，阳性率66.7%。说明C—erbB—2基因激活在乳腺癌发病中起一定作用。①从乳腺癌前病变—囊肿病伴上皮不典型增生C—erbB—2蛋白表达水平明显低于乳腺浸润性癌来看，C—erbB—2过表达即该基因表型改变发生在癌变之后，在影响乳腺癌生物学行为方面发挥作用。②不同类型乳腺癌中C—erbB—2表达存在显著差异，这正是上述观点的另一佐证。其中以不典型髓样癌表达率最高(100%)，说明C—erbB—2基因激活正是不典型髓样癌预后较差的原因之一。而硬癌表达率仅20%，可能是该 型癌组织有多量纤维组织及淋巴细胞混杂，“稀释”了肿瘤细胞DNA含量[1]，以至于蛋白表达受到影响之故。③本实验淋巴结转移组乳腺癌C—erbB—2表达并不高于非转移组，可能是该基因表型的改变出现在肿瘤转移之前[7]。此外，肿瘤组织的异质性及许多基因表现的多效性(pleiotropy)亦可能影响该 癌蛋白的检出率[2、8]。
, 百拇医药
参考文献
1 陈艺华.癌基因、抗癌基因异常与人乳腺癌。中华病理学杂志.1994；23(2)：122
2 Cohen JA,Weiner DB,More KF,et al.Exprission of pattern of the neu(NGL) gene encoded growth factor recopter protein in normal and transformed epithelial tissue of the digestive tract.Oncogene,1989；4(1)：81
3 Biunno I,Pozzi MR,Piexotti MA.Structure and expression of oncogenes in surgical specimens of human breast carcinoma.Br J Cancer,1988；57：464
, 百拇医药
4 Fontaine J,Tesseraux M,Klein V,et al.Gene amplification and expression of the neu (C—erbB—2) sequence in human breast carcinoma.Oncology,1988；45：360
5 Mc Cann A,Dervan PA,Johnston PA,et al.C—erbB—2 oncoprotein exprcssion in primary human tumors.Cancer,1990；65：88
6 Spandidos DA,Yiagnisis M,Papadimitriou K,et al.Ras,C—myc and C—erbB—2 oncoprotein in human breast cancer.Anticancer Res,1989；9：1385
7 Markar APh,Desmedt EJ,Potter CRD,et al.NEU (C—erbB—2) oncogene in breast cancer and it′s possible association with the risk of distant metastasis.Acta Oncologica,1990；29：931
8 王吾如.关于癌转移分子病理学研究.中华病理学杂志，1994；23(4)：197
收稿日期：1999-02-06, 百拇医药