骨及钙化组织脱钙后除酸方法的改良
作者：蒋绍仟
单位：蒋绍仟(重庆市三峡中心医院病理科，万县 404000)
关键词：骨和骨组织；脱钙技术
临床与实验病理学杂志990233中国图书分类号 R329-34
文献标识码 A 文章编号 1001-7399(1999)02-0106-01
骨及钙化组织石蜡切片，一般先经有机酸或无机酸稀溶液浸渍脱钙，再用流水洗涤24 h，除去组织内的酸〔1〕，然后才能按常规脱水、浸蜡、切片、HE染色。此种方法除酸时间长，而且染色效果并不十分理想，在不同程度上延误了患者的诊断与治疗。我们经过反复实践，探索出一种有效的快速除酸方法，染色效果满意。现将此改良除酸方法介绍如下。
1 材料和方法
活检骨及钙化组织，锯成1.2 cm×1.2 cm×0.3 cm薄片；10%中性福尔马林固定；10%硝酸脱钙；水洗1 min；置入2%氢氧化钠液浸渍10 min；流水洗涤10 min；梯度乙醇脱水。浸蜡、包埋、切片、HE染色。脱水，封固。
2 结果
使用此改良方法除酸制成的切片，经常规HE染色，细胞核呈不同程度紫蓝色，鲜艳，清晰，对比度强。可与传统除酸方法的切片染色相当。染片保存数年后复检，无褪色现象。
3 讨论
骨及钙化组织脱钙后再除酸是石蜡切片中特有的过程，也是HE染色中的不足之处。我们在实际工作中体会到，应用2%氢氧化钠液处理10 min，再行流水洗涤10 min，就可完成整个除酸过程，并且具有以下优点：(1)由于2%氢氧化钠液是一种强碱稀溶液，能很快渗入到组织细胞中，使组织细胞除酸或中和化，大大缩短了流水洗涤时间。传统用5%硫酸钠浸渍过夜，再行流水洗涤24 h〔2，3〕，这种除酸方法时间长达36～48 h，而改良法除酸只需20余min即可完成除酸过程。(2)经此改良法除酸制成的切片对苏木素嗜染性强，效果稳定。与非脱钙切片同时染色，着色无异，弥补了传统除酸制成的切片需要延长苏木素染色时间的弊病，操作方便、易于掌握。染片保存数年后复检，并无褪色现象，有利存档或回顾性研究。
作者简介：蒋绍仟，男，50岁，主管技师
参考文献
1 吕 荣，南 耘，胡蕴玉. 骨切片固定液和脱钙剂的筛选及效果观察. 临床与实验病理学杂志，1992；8(3)：229
2 CFA卡林著(孔庆雷译). 组织病理学与组织化学技术手册. 北京：科学技术出版社，1982：63
3 刘介眉，严庆汉，路英杰等. 病理组织染色的理论方法和应用. 北京：人民卫生出版社，1983：135
收稿日期：1998-06-17
修回日期：1998-10-16, 百拇医药
单位：蒋绍仟(重庆市三峡中心医院病理科，万县 404000)
关键词：骨和骨组织；脱钙技术
临床与实验病理学杂志990233中国图书分类号 R329-34
文献标识码 A 文章编号 1001-7399(1999)02-0106-01
骨及钙化组织石蜡切片，一般先经有机酸或无机酸稀溶液浸渍脱钙，再用流水洗涤24 h，除去组织内的酸〔1〕，然后才能按常规脱水、浸蜡、切片、HE染色。此种方法除酸时间长，而且染色效果并不十分理想，在不同程度上延误了患者的诊断与治疗。我们经过反复实践，探索出一种有效的快速除酸方法，染色效果满意。现将此改良除酸方法介绍如下。
1 材料和方法
活检骨及钙化组织，锯成1.2 cm×1.2 cm×0.3 cm薄片；10%中性福尔马林固定；10%硝酸脱钙；水洗1 min；置入2%氢氧化钠液浸渍10 min；流水洗涤10 min；梯度乙醇脱水。浸蜡、包埋、切片、HE染色。脱水，封固。
2 结果
使用此改良方法除酸制成的切片，经常规HE染色，细胞核呈不同程度紫蓝色，鲜艳，清晰，对比度强。可与传统除酸方法的切片染色相当。染片保存数年后复检，无褪色现象。
3 讨论
骨及钙化组织脱钙后再除酸是石蜡切片中特有的过程，也是HE染色中的不足之处。我们在实际工作中体会到，应用2%氢氧化钠液处理10 min，再行流水洗涤10 min，就可完成整个除酸过程，并且具有以下优点：(1)由于2%氢氧化钠液是一种强碱稀溶液，能很快渗入到组织细胞中，使组织细胞除酸或中和化，大大缩短了流水洗涤时间。传统用5%硫酸钠浸渍过夜，再行流水洗涤24 h〔2，3〕，这种除酸方法时间长达36～48 h，而改良法除酸只需20余min即可完成除酸过程。(2)经此改良法除酸制成的切片对苏木素嗜染性强，效果稳定。与非脱钙切片同时染色，着色无异，弥补了传统除酸制成的切片需要延长苏木素染色时间的弊病，操作方便、易于掌握。染片保存数年后复检，并无褪色现象，有利存档或回顾性研究。
作者简介：蒋绍仟，男，50岁，主管技师
参考文献
1 吕 荣，南 耘，胡蕴玉. 骨切片固定液和脱钙剂的筛选及效果观察. 临床与实验病理学杂志，1992；8(3)：229
2 CFA卡林著(孔庆雷译). 组织病理学与组织化学技术手册. 北京：科学技术出版社，1982：63
3 刘介眉，严庆汉，路英杰等. 病理组织染色的理论方法和应用. 北京：人民卫生出版社，1983：135
收稿日期：1998-06-17
修回日期：1998-10-16, 百拇医药