普罗布考片剂溶出度及稳定性考察
作者：韩丽梅 王卓 刘百里 肖兰
单位：韩丽梅 刘百里 肖兰 沈阳药科大学成人教育学院；王卓 沈阳药大集琦药业有限责任公司， 沈阳 110015
关键词：普罗布考片剂；溶出度；高效液相色谱；稳定性
沈阳药科大学学报990202 摘 要 利用紫外法和高效液相色谱法对普罗布考片剂的溶出度及稳定性进行考察，结果表明：溶出45 min时，溶出度达70%以上；高温80℃放置10天，含量下降2%，降解产物>1%；高湿(RH 92.5%)条件下溶出度略有下降，其它条件各项指标均未发生明显改变；加速实验及室温留样2年，其各项指标均未发生明显改变，可暂定有效期为2年.普罗布考片剂应于低温、密闭、干燥处保存.
分类号 R944.4
An Investigation of the Dissolution and Stability
, http://www.100md.com
of Probucol Tablets
Han Limei,Wang Zhuo，Liu Baili，Xiao Lan
The College of Adult Education,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015
Abstract The dissolution and stability of probucol tablets were studied by UV and HPLC methods.The results obtained indicated that:(1)The dissolution of probucol was over 70% at 45 min.(2)The content of probucol was reduced by 2% and the degraded product was over 1% at 80℃ and in 10 days;The dissolution had been little reduced at RH 92.5%,the other items had no obvious change.Stored at room temperature for 2 years all of the examined items had not varied,the storage life can be determined as 2 years.The probucol tablets should be tightly sealed and stored at a cool and dry place.
, 百拇医药
Key words probucol tablets;dissolution;HPLC;stability
普罗布考(probucol)其英文名为4，4′-[(1-methylethylidene)bis(thio)]bis[2,6-bis(1，1-dimethylethyl)phenol]，是一种有效的高脂质血症治疗剂，对动脉粥样硬化有很好的预防和治疗作用，尤其适用于家族性高血脂症.普罗布考为白色结晶性粉末，不溶于水，溶于乙醇和石油醚中，易溶于氯仿和丙醇.美国药典第ⅩⅩⅠⅠ版和日本药局方均收载此药.国外对该药研究较多〔1，2〕，我国对此药报道较少.近年来我们研制了普罗布考片剂，用紫外法和高效液相色谱法对普罗布考片剂的溶出度及稳定性进行了考察.
1 仪器与药品
普罗布考原料药及对照品(沈阳药科大学药物所合成研究室提供)；普罗布考片剂(自制)；分析用试剂(分析纯)，高效液相用试剂(色谱纯)；溶出度测定仪(美国汉森公司)；78X-2型片剂四用测定仪(上海黄海药检仪器厂)；UV-260紫外可见分光光度仪(日本岛津)；NEL80N 1022型液相色谱仪(PE 公司)，LC 295型紫外可见检测器(PE 公司)，LC 250型泵(PE公司),Microline320型打印机.
, 百拇医药
2 方法与结果
2.1 标准曲线测定
精密称取适量普罗布考对照品，用少量正丙醇溶解后，再用正丙醇溶液(4→10 mL)稀释成30 mg/L溶液，然后分别量取1、2、3、4、5 mL，再用上述正丙醇溶液稀释至10 mL，在(242±1)nm处测定吸收度，以浓度C对吸收度A进行线性回归，线性范围3～15 mg/L，回归方程为：C=-0.311 9+24.85 A(r=0.999 8).
2.2 普罗布考在溶出介质中的稳定性考察
以正丙醇溶液(4→10 mL)为溶剂，配制普罗布考3种浓度的供试液，其浓度分别为4.96、9.92和14.8 mg/L.供试液经37℃恒温2 h，测定恒温前后的吸收度，其恒温前后吸收度的变化率分别为0.930%、0.919%和-0.772%，表明普罗布考在正丙醇溶液(4→10 mL)中，经37℃恒温2 h吸收度相对稳定.
, 百拇医药
2.3 普罗布考片剂溶出度测定
取本品依法测定〔3〕，转速为80 r/min，以正丙醇400 mL加水至1 000 mL为溶出介质，依法操作，在5、10、20、30、45、60 min时分别取样5 mL，同时补加溶出介质5 mL，取出的样品用0.8 μm的微孔滤膜过滤后，精密量取1.0 mL，加正丙醇溶液(4→10 mL)稀释至10 mL，在(242±1)nm处测定吸收度，按标准曲线计算每片的溶出百分率.5批样品溶出曲线见图1.
Fig.1 Dissolution rate curves of probucol tablest for 5 batches
2.4 普罗布考片剂含量测定方法
2.4.1 色谱条件
, 百拇医药
色谱柱为Spherisorb C8(30 cm×4.0 mm,10 μm)，流动相〔4〕V(乙腈)∶V(水)=85∶15，流速1.5 mL/min，检测波长242 nm，量程0.08 AUFS，纸速0.8 cm/min.理论塔板数按普罗布考峰计算不少于4 300.
空白辅料干扰实验及普罗布考水解产物实验表明，辅料不干扰主药的测定，同时主药与杂质有较好的分离效果.
2.4.2 线性关系、精密度及回收率实验
精密称取普罗布考对照品98 mg，用10 mL无水乙醇溶解，转移置50 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度.精密量取0.5、1.0、2.0、2.5、3.0 mL于25 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度.分别取20 μL注入液相色谱仪，记录峰面积.以峰面积(A)对浓度(C)进行线性回归，线性范围为：39.52～237.1 mg/L，回归方程为：C=0.120 4+31.99×10-6A(r=0.999 8，n=5).精密度：配制3个浓度的普罗布考溶液，分别进样20 μL，重复10次，测得RSD分别为15.68 mg/mL，0.78%;39.75 mg/L，0.67%；102.3 mg/L，0.58%，重现性良好.
, 百拇医药
回收率试验：分别精密称取普罗布考对照品5份，按处方比例加入适量辅料，分别按片剂含量测定方法制成80%、100%、120%的溶液进行测定.精密称量普罗布考对照品98 mg，用10 mL无水乙醇溶解，用流动相稀释置50 mL量瓶中，精密量取2 mL置25 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，进样20 μL，记录峰面积.按外标法计算供试品中普罗布考含量，回收率为(99.4±1.00)%，RSD为1.01%(n=5).
2.4.3 片剂含量测定
对照品溶液制备方法同上述“回收率实验”；供试品溶液制备：精密称取供试品20片，研成粉末，精密称取片粉适量(相当于含主药98 mg)用10 mL无水乙醇溶解，用流动相稀释置50 mL量瓶中，混匀，静止，过滤，弃去初滤液，精密量取续滤液2 mL，置25 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀.供试品溶液与对照品溶液分别进样20 μL，记录峰面积.按外标法计算供试品中普罗布考含量.
, 百拇医药
2.5 降解产物测定(色谱条件同“2.4.1”)
取本品20片研成粉末，精密称取片粉适量(相当于含主药50 mg)，用5 mL无水乙醇溶解，并用流动相稀释置25 mL量瓶中，混匀，静置，过滤，弃去初滤液，取续滤液.进样20 μL，记录色谱图.按归一化法计算普罗布考片剂中杂质的含量.
2.6 普罗布考片剂稳定性实验结果
2.6.1 影响因素试验
将普罗布考片剂进行光照(照度为3 200 Lx)、高温(40℃、60℃、80℃)、高湿(RH92.5%、RH75%)、空气暴露等试验，分别放置10天，于第0、1、3、5、10天取样，按上述实验方法考察其外观性状、溶出度、降解产物及含量的变化情况.结果表明：本品对光比较稳定；于80℃放置10天样品外观微黄，普罗布考含量下降约2%，降解产物大于1%，故本品应该在避免高温情况下贮存；在92.5%的相对湿度下，溶出度下降，因此，本品应该避免高湿环境或密闭保存(见表1).
, 百拇医药
Tab.1 Stability of the preparation under different conditions for 10 days/n=6,%
Indices
Dissolution
Degradation product
Content
0 d
5 d
10 d
0 d
5 d
10 d
, http://www.100md.com
0 d
5 d
10 d
3 200 Lx
77.46
77.13
80.80
0.44
0.45
0.57
101.2
100.3
100.7
, 百拇医药
40℃
77.46
83.10
84.56
0.44
0.41
0.48
101.2
101.5
101.6
60℃
77.46
85.06
, 百拇医药
88.21
0.44
0.45
0.53
101.2
101.3
101.1
80℃
77.46
83.05
92.10
0.44
0.76
, http://www.100md.com
1.13
101.2
100.4
98.5
RH 92.5%
77.46
75.23
68.69
0.44
0.39
0.49
101.2
101.4
, http://www.100md.com
100.6
RH 75%
77.46
78.82
72.48
0.44
0.42
0.47
101.2
101.3
100.9
Exposition in air
, 百拇医药 77.46
76.54
78.32
0.44
0.46
0.46
101.2
101.7
101.5
2.6.2 加速实验
将样品置棕色玻璃瓶中，用软木塞经蜡封密闭后，置相对湿度75%的(40±1)℃恒温箱中，于0、1、2、3个月取样考察上述指标，结果见表2.Tab.2 Stability of the preparation under accelerated test/n=6,% Month
, 百拇医药
Dissolution
Degradation product
Content
0
77.46
0.44
101.2
1
78.42
0.39
101.5
2
, 百拇医药 76.59
0.46
100.7
3
77.17
0.50
100.4
2.6.3 室温留样考察
将样品置棕色玻璃瓶中，用软木塞经蜡封密闭后，置于室温长期放置，定期取样考察各项指标.结果表明，室温留样2年各项指标基本不变，暂定有效期为2年(见表3).Tab.3 Stability of the preparation under room temperature/n=6,%
Batch
, 百拇医药
Dissolution
Degradation product
Content
0mo
6mo
12mo
24mo
0mo
6mo
12mo
24mo
0mo
, 百拇医药 6mo
12mo
24mo
930401
78.03
75.85
78.03
76.12
0.44
0.43
0.52
0.62
101.2
, 百拇医药
101.8
100.6
99.9
030405
75.84
74.27
75.48
73.41
0.35
0.45
0.44
0.50
99.8
, 百拇医药
99.2
100.3
98.5
030407
74.99
73.87
75.80
76.25
0.40
0.41
0.38
0.56
99.1
, http://www.100md.com
99.2
98.5
97.7
3 讨论 a.普罗布考为脂溶性药物，水中溶解度较低，因此溶出介质中加入适量正丙醇增溶.
b.实验表明，普罗布考在37℃溶出介质中放置2 h后，紫外吸收度未见明显改变，说明该介质可用于溶出度考察.介质不干扰溶出度试验中主药的含量测定.普罗布考片剂溶出45 min时，溶出度大于70%.
c.普罗布考片剂稳定性实验结果表明，该药在高温高湿条件下不稳定，高温时外观、含量均有变化，高湿时溶出度下降，因此，本品应低温、密闭保存；从加速实验结果和室温留样考察结果可见，样品含量等各项指标均没有明显改变，说明样品有效期可暂定2年.
, http://www.100md.com d.采用高效液相色谱法测定普罗布考片剂含量及其降解产物，该法灵敏度高，测定结果准确，操作简便.
2制药系；3药学系1990级学生
参考文献
1 Doi N,Ikuta N,Tomizawa H.Bioavailability-improved oral solid preparations containing probucol and water-soluble polymers.Jpn Kokai Tokkyo Koho,JP 0215，026[9015026](Cl.A6 1K31/10).1990-01-18
2 Doi N,Ikuta N,Tomizawa H.Solid pharmaceuicals of probucol containing pantethine with improved bio-availability.Jpn Ko Kai Tokkyo Koho,JP 02157222[90157222](Cl.A61K31/10).1990-06-18
3 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典：二部.北京：化学工业出版社，广东科技出版社，1995.附录XC：326
4 The United States Pharmacopoeial Convention Inc.The United States PharmacopoeiaⅩⅩⅡ∶Ⅱ.Rockville:The United States Pharmacopoeial Inc，1990.1143～1144
收稿日期:1998-07-10, http://www.100md.com
单位：韩丽梅 刘百里 肖兰 沈阳药科大学成人教育学院；王卓 沈阳药大集琦药业有限责任公司， 沈阳 110015
关键词：普罗布考片剂；溶出度；高效液相色谱；稳定性
沈阳药科大学学报990202 摘 要 利用紫外法和高效液相色谱法对普罗布考片剂的溶出度及稳定性进行考察，结果表明：溶出45 min时，溶出度达70%以上；高温80℃放置10天，含量下降2%，降解产物>1%；高湿(RH 92.5%)条件下溶出度略有下降，其它条件各项指标均未发生明显改变；加速实验及室温留样2年，其各项指标均未发生明显改变，可暂定有效期为2年.普罗布考片剂应于低温、密闭、干燥处保存.
分类号 R944.4
An Investigation of the Dissolution and Stability
, http://www.100md.com
of Probucol Tablets
Han Limei,Wang Zhuo，Liu Baili，Xiao Lan
The College of Adult Education,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015
Abstract The dissolution and stability of probucol tablets were studied by UV and HPLC methods.The results obtained indicated that:(1)The dissolution of probucol was over 70% at 45 min.(2)The content of probucol was reduced by 2% and the degraded product was over 1% at 80℃ and in 10 days;The dissolution had been little reduced at RH 92.5%,the other items had no obvious change.Stored at room temperature for 2 years all of the examined items had not varied,the storage life can be determined as 2 years.The probucol tablets should be tightly sealed and stored at a cool and dry place.
, 百拇医药
Key words probucol tablets;dissolution;HPLC;stability
普罗布考(probucol)其英文名为4，4′-[(1-methylethylidene)bis(thio)]bis[2,6-bis(1，1-dimethylethyl)phenol]，是一种有效的高脂质血症治疗剂，对动脉粥样硬化有很好的预防和治疗作用，尤其适用于家族性高血脂症.普罗布考为白色结晶性粉末，不溶于水，溶于乙醇和石油醚中，易溶于氯仿和丙醇.美国药典第ⅩⅩⅠⅠ版和日本药局方均收载此药.国外对该药研究较多〔1，2〕，我国对此药报道较少.近年来我们研制了普罗布考片剂，用紫外法和高效液相色谱法对普罗布考片剂的溶出度及稳定性进行了考察.
1 仪器与药品
普罗布考原料药及对照品(沈阳药科大学药物所合成研究室提供)；普罗布考片剂(自制)；分析用试剂(分析纯)，高效液相用试剂(色谱纯)；溶出度测定仪(美国汉森公司)；78X-2型片剂四用测定仪(上海黄海药检仪器厂)；UV-260紫外可见分光光度仪(日本岛津)；NEL80N 1022型液相色谱仪(PE 公司)，LC 295型紫外可见检测器(PE 公司)，LC 250型泵(PE公司),Microline320型打印机.
, 百拇医药
2 方法与结果
2.1 标准曲线测定
精密称取适量普罗布考对照品，用少量正丙醇溶解后，再用正丙醇溶液(4→10 mL)稀释成30 mg/L溶液，然后分别量取1、2、3、4、5 mL，再用上述正丙醇溶液稀释至10 mL，在(242±1)nm处测定吸收度，以浓度C对吸收度A进行线性回归，线性范围3～15 mg/L，回归方程为：C=-0.311 9+24.85 A(r=0.999 8).
2.2 普罗布考在溶出介质中的稳定性考察
以正丙醇溶液(4→10 mL)为溶剂，配制普罗布考3种浓度的供试液，其浓度分别为4.96、9.92和14.8 mg/L.供试液经37℃恒温2 h，测定恒温前后的吸收度，其恒温前后吸收度的变化率分别为0.930%、0.919%和-0.772%，表明普罗布考在正丙醇溶液(4→10 mL)中，经37℃恒温2 h吸收度相对稳定.
, 百拇医药
2.3 普罗布考片剂溶出度测定
取本品依法测定〔3〕，转速为80 r/min，以正丙醇400 mL加水至1 000 mL为溶出介质，依法操作，在5、10、20、30、45、60 min时分别取样5 mL，同时补加溶出介质5 mL，取出的样品用0.8 μm的微孔滤膜过滤后，精密量取1.0 mL，加正丙醇溶液(4→10 mL)稀释至10 mL，在(242±1)nm处测定吸收度，按标准曲线计算每片的溶出百分率.5批样品溶出曲线见图1.
Fig.1 Dissolution rate curves of probucol tablest for 5 batches
2.4 普罗布考片剂含量测定方法
2.4.1 色谱条件
, 百拇医药
色谱柱为Spherisorb C8(30 cm×4.0 mm,10 μm)，流动相〔4〕V(乙腈)∶V(水)=85∶15，流速1.5 mL/min，检测波长242 nm，量程0.08 AUFS，纸速0.8 cm/min.理论塔板数按普罗布考峰计算不少于4 300.
空白辅料干扰实验及普罗布考水解产物实验表明，辅料不干扰主药的测定，同时主药与杂质有较好的分离效果.
2.4.2 线性关系、精密度及回收率实验
精密称取普罗布考对照品98 mg，用10 mL无水乙醇溶解，转移置50 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度.精密量取0.5、1.0、2.0、2.5、3.0 mL于25 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度.分别取20 μL注入液相色谱仪，记录峰面积.以峰面积(A)对浓度(C)进行线性回归，线性范围为：39.52～237.1 mg/L，回归方程为：C=0.120 4+31.99×10-6A(r=0.999 8，n=5).精密度：配制3个浓度的普罗布考溶液，分别进样20 μL，重复10次，测得RSD分别为15.68 mg/mL，0.78%;39.75 mg/L，0.67%；102.3 mg/L，0.58%，重现性良好.
, 百拇医药
回收率试验：分别精密称取普罗布考对照品5份，按处方比例加入适量辅料，分别按片剂含量测定方法制成80%、100%、120%的溶液进行测定.精密称量普罗布考对照品98 mg，用10 mL无水乙醇溶解，用流动相稀释置50 mL量瓶中，精密量取2 mL置25 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，进样20 μL，记录峰面积.按外标法计算供试品中普罗布考含量，回收率为(99.4±1.00)%，RSD为1.01%(n=5).
2.4.3 片剂含量测定
对照品溶液制备方法同上述“回收率实验”；供试品溶液制备：精密称取供试品20片，研成粉末，精密称取片粉适量(相当于含主药98 mg)用10 mL无水乙醇溶解，用流动相稀释置50 mL量瓶中，混匀，静止，过滤，弃去初滤液，精密量取续滤液2 mL，置25 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀.供试品溶液与对照品溶液分别进样20 μL，记录峰面积.按外标法计算供试品中普罗布考含量.
, 百拇医药
2.5 降解产物测定(色谱条件同“2.4.1”)
取本品20片研成粉末，精密称取片粉适量(相当于含主药50 mg)，用5 mL无水乙醇溶解，并用流动相稀释置25 mL量瓶中，混匀，静置，过滤，弃去初滤液，取续滤液.进样20 μL，记录色谱图.按归一化法计算普罗布考片剂中杂质的含量.
2.6 普罗布考片剂稳定性实验结果
2.6.1 影响因素试验
将普罗布考片剂进行光照(照度为3 200 Lx)、高温(40℃、60℃、80℃)、高湿(RH92.5%、RH75%)、空气暴露等试验，分别放置10天，于第0、1、3、5、10天取样，按上述实验方法考察其外观性状、溶出度、降解产物及含量的变化情况.结果表明：本品对光比较稳定；于80℃放置10天样品外观微黄，普罗布考含量下降约2%，降解产物大于1%，故本品应该在避免高温情况下贮存；在92.5%的相对湿度下，溶出度下降，因此，本品应该避免高湿环境或密闭保存(见表1).
, 百拇医药
Tab.1 Stability of the preparation under different conditions for 10 days/n=6,%
Indices
Dissolution
Degradation product
Content
0 d
5 d
10 d
0 d
5 d
10 d
, http://www.100md.com
0 d
5 d
10 d
3 200 Lx
77.46
77.13
80.80
0.44
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0.57
101.2
100.3
100.7
, 百拇医药
40℃
77.46
83.10
84.56
0.44
0.41
0.48
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101.5
101.6
60℃
77.46
85.06
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88.21
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, http://www.100md.com
1.13
101.2
100.4
98.5
RH 92.5%
77.46
75.23
68.69
0.44
0.39
0.49
101.2
101.4
, http://www.100md.com
100.6
RH 75%
77.46
78.82
72.48
0.44
0.42
0.47
101.2
101.3
100.9
Exposition in air
, 百拇医药 77.46
76.54
78.32
0.44
0.46
0.46
101.2
101.7
101.5
2.6.2 加速实验
将样品置棕色玻璃瓶中，用软木塞经蜡封密闭后，置相对湿度75%的(40±1)℃恒温箱中，于0、1、2、3个月取样考察上述指标，结果见表2.Tab.2 Stability of the preparation under accelerated test/n=6,% Month
, 百拇医药
Dissolution
Degradation product
Content
0
77.46
0.44
101.2
1
78.42
0.39
101.5
2
, 百拇医药 76.59
0.46
100.7
3
77.17
0.50
100.4
2.6.3 室温留样考察
将样品置棕色玻璃瓶中，用软木塞经蜡封密闭后，置于室温长期放置，定期取样考察各项指标.结果表明，室温留样2年各项指标基本不变，暂定有效期为2年(见表3).Tab.3 Stability of the preparation under room temperature/n=6,%
Batch
, 百拇医药
Dissolution
Degradation product
Content
0mo
6mo
12mo
24mo
0mo
6mo
12mo
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0mo
, 百拇医药 6mo
12mo
24mo
930401
78.03
75.85
78.03
76.12
0.44
0.43
0.52
0.62
101.2
, 百拇医药
101.8
100.6
99.9
030405
75.84
74.27
75.48
73.41
0.35
0.45
0.44
0.50
99.8
, 百拇医药
99.2
100.3
98.5
030407
74.99
73.87
75.80
76.25
0.40
0.41
0.38
0.56
99.1
, http://www.100md.com
99.2
98.5
97.7
3 讨论 a.普罗布考为脂溶性药物，水中溶解度较低，因此溶出介质中加入适量正丙醇增溶.
b.实验表明，普罗布考在37℃溶出介质中放置2 h后，紫外吸收度未见明显改变，说明该介质可用于溶出度考察.介质不干扰溶出度试验中主药的含量测定.普罗布考片剂溶出45 min时，溶出度大于70%.
c.普罗布考片剂稳定性实验结果表明，该药在高温高湿条件下不稳定，高温时外观、含量均有变化，高湿时溶出度下降，因此，本品应低温、密闭保存；从加速实验结果和室温留样考察结果可见，样品含量等各项指标均没有明显改变，说明样品有效期可暂定2年.
, http://www.100md.com d.采用高效液相色谱法测定普罗布考片剂含量及其降解产物，该法灵敏度高，测定结果准确，操作简便.
2制药系；3药学系1990级学生
参考文献
1 Doi N,Ikuta N,Tomizawa H.Bioavailability-improved oral solid preparations containing probucol and water-soluble polymers.Jpn Kokai Tokkyo Koho,JP 0215，026[9015026](Cl.A6 1K31/10).1990-01-18
2 Doi N,Ikuta N,Tomizawa H.Solid pharmaceuicals of probucol containing pantethine with improved bio-availability.Jpn Ko Kai Tokkyo Koho,JP 02157222[90157222](Cl.A61K31/10).1990-06-18
3 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典：二部.北京：化学工业出版社，广东科技出版社，1995.附录XC：326
4 The United States Pharmacopoeial Convention Inc.The United States PharmacopoeiaⅩⅩⅡ∶Ⅱ.Rockville:The United States Pharmacopoeial Inc，1990.1143～1144
收稿日期:1998-07-10, http://www.100md.com