血管内超声评价麝香保心丸对血管内皮功能的保护作用
作者：罗心平 朱军 施海明 曾治宇 范维琥 戴瑞鸿
单位：200040 上海医科大学华山医院心内科
关键词：冠状动脉硬化；血管内膜；草本植物；血管内膜
中华物理医学与康复杂志990219
【中图号】 R318.03;R541.4
血管内皮舒张功能损害在动脉粥样硬化(atheroscleorsis,AS)的发生、发展中发挥重要作用[1-3],寻求逆转这种血管功能异常的药物有重要意义。研究发现:Statin类药物在改善内皮功能方面有明显效果,但中药方面却缺乏类似的研究。麝香保心丸(heart-protecting musk pill HMP)是一种治疗冠心病的有效中成药，可扩张冠脉、增加心肌血供[4-6];为探讨其对血管内皮舒张功能的保护作用,本文采用血管内超声显像进行研究。
, 百拇医药
1 材 料 与 方 法
1.1 动物分组及模型建立
参照文献[7]的方法复制高胆固醇血症动物模型。雄性纯种新西兰家兔30只，体质量2.4～3.1 kg(上海医科大学实验动物中心提供)，常规饲养一周后称质量并随机分为二组：①正常对照组(C组,8只)，喂饲基础颗粒饲料(120～150) g/d。②高脂血症模型组(22只)，喂饲造模饲料：基础颗粒饲料+质量分数为3%的猪油+质量浓度为10 g/L的胆固醇粉(分析纯,上海化学试剂供应站提供)(120～150) g/d。6周后继续喂饲造模饲料，并随机分为三组，每天用不同药物灌胃二周：高脂血症对照组(HC组,7只)，用生理盐水10 ml/d灌胃；麝香保心丸组(HMP组,8只)，每天4粒麝香保心丸(上海中药一厂,批号970119A)灌胃。舒降之组(SIM组,7只)，每天舒降之2.5 mg(美国MSD公司,批号95010)灌胃。实验第8周时测量下列项目。
, 百拇医药
1.2 观察指标及检测方法
1.2.1 血脂测定 8周时经耳中央动脉采血测定。用HITACHI 7170A型自动生化分析仪、采用氧化酶法检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。
1.2.2 血管内超声显像测量血管内皮舒张反应性 将动物用质量浓度为30 g/L戊巴比妥钠1 ml/kg静脉麻醉。固定后常规分离颈总动脉；插入5 F动脉鞘,然后导入导引钢丝(0.014 in);沿钢丝在X光透视下插入腔内超声导管、尖端固定于胸主动脉(10～12胸椎水平)。用CVIS INSIGHT III型(美国Boston scientific公司)血管内超声显像系统描记基础状态下主动脉腔内超声图像,随后参照文献[2,8,9]方法,动脉内注射乙酰胆碱生理盐水〔10 μg/ml.min-1,终浓度约为(10-5～10-6) mol/L〕,注射后2 min重复记录主动脉腔内超声图像。然后动脉内注射硝酸甘油生理盐水(40 μg/ml.min-1),注射后3 min再次记录主动脉腔内超声图像。每只动物重复测定血管反应二处，测量血管管腔截面积(mm2)及血管腔直径(mm),平均后计值;最后计算血管的舒缩变化值(与基础测值的差值)占基础测值的百分比:即血管舒缩变化的百分比(△%),进行组间比较。
, 百拇医药
1.3 统计学处理
采用方差分析及配对t检验比较。
2 结 果
2.1 麝香保心丸对兔血脂的影响
8周时动物处死前血脂测定结果见表1。与HC组比较,加用麝香保心丸或舒降之2周后SIM组及HMP组的TC和LDL-C显著降低(P<0.05)，而TG却无明显改变(P>0.05)；SIM组与HMP组之间相比也有明显差异(P<0.05),说明舒降之有明显的降脂作用,麝香保心丸也能明显抑制TC和LDL-C的上升趋势。
表1 四组家兔8周时血脂的测定结果比较(mmol/L,
±s) 组别
例数
, 百拇医药
TG
TC
LDL-C
C组
8
0.81±0.27
1.38±0.24
0.70±0.19
HC组
7
1.31±0.69
22.04±2.16#
, http://www.100md.com
14.48±2.31#
HMP组
8
1.02±0.45
13.24±1.61#*
10.98±2.24#*
SIM组
7
0.82±0.80
10.42±1.83#*△
6.73±1.20#*△
, http://www.100md.com
注:与C组相比 #P<0.05;与HC组相比 *P<0.05;与HMP组相比△P<0.05
2.2 麝香保心丸对动脉内皮功能的保护作用
如表2,3及图1所示,与C组比较:高脂血症损害后HC组的动脉对乙酰胆碱呈异常的收缩反应, 动脉截面积及直径均明显缩小(P<0.05), 动脉截面积及直径收缩百分比增大(P<0.05)，说明内皮依赖性血管舒张功能受损;但动脉对硝酸甘油仍保持舒张反应(P>0.05)。与HC组比较,麝香保心丸和舒降之使用2周后,内皮依赖性血管舒张功能异常的程度明显减轻(P<0.05);动脉截面积及直径收缩百分比减小。各组动物血管对硝酸甘油的舒张反应无明显差异(P>0.05),提示高脂血症的损害位点在内皮细胞的一氧化氮系统，两种药物可能是通过该途径发挥保护作用。
表2 乙酰胆碱或硝酸甘油给药后动物胸主动脉管腔直径与截面积的变化(±s) 组别
, 百拇医药
例数
血管截面积(mm2)
血管腔径(mm)
Base
Post-Ach
Post-NTG
Base
Post-Ach
Post-NTG
C组
8
16.11±4.90
, 百拇医药
17.21±4.56
17.86±5.70
4.43±0.58
4.73±0.64
4.81±0.70
HC组
7
17.25±3.15
10.76±1.99*
18.91±3.13
4.60±0.46
3.36±0.25*
, http://www.100md.com
4.93±0.44
HMP组
8
18.45±6.17
15.21±5.57△
19.91±6.54
4.78±0.84
4.15±0.91△
5.11±0.86
SIM组
7
15.93±4.56
, 百拇医药
13.06±3.96*△
17.51±4.51
4.40±0.69
4.03±0.73*△
4.71±0.65
注:Base:基础状况;Post-Ach:乙酰胆碱注射后2 min;Post-NTG:硝酸甘油注射后3 min
与C组相比 * P<0.05;与HC组相比 △ P<0.05
表3 注射乙酰胆碱或硝酸甘油后动脉截面积及直径舒张百分比的比较(±s) 组别
, 百拇医药
例数
乙酰胆碱注射后
硝酸甘油注射后
(面积mm2,△%)
(直径mm,△%)
(面积mm2,△%)
(直径mm,△%)
C组
8
8.20±6.34
6.75±2.92
10.35±4.72
, 百拇医药
8.50±4.48
HC组
7
-37.43±6.41#
-26.43±6.85#
8.93±2.58
7.32±1.47
HMP组
8
-18.25±6.02#*
-13.79±6.32#*
, 百拇医药
8.12±1.64
7.06±1.90
SIM组
7
-17.00±4.80#*
-8.48±5.15#*
10.88±4.93
7.46±3.54
注:“-”表示动脉收缩;△%舒缩变化值占基础状况测值的百分比:与C组相比#P<0.05;*与HC组相比P<0.05
, 百拇医药
A为C组,B为HC组,C为HMP组。
A1、B1、C1为基础状态,A2、B2、C2为Ach注射2 min后,A3、B3、C3为NTG注射后3 min。
可见Ach注射后C组表现为动脉舒张,HC组为收缩,HMP组亦为收缩,但收缩幅度减轻。NTG注射后各组动物均表现为舒张反应
图1 各组动物注射乙酰胆碱或硝酸甘油后不同的血管反应性
3 讨 论
3.1 麝香保心丸对血脂水平的影响
本组资料发现用麝香保心丸后血胆固醇水平有下降趋势,但这种作用明显较舒降之弱(P<0.05)。其调脂作用的机理不明,可能与其组份中含有人参等降脂成分[10]有关;但本文资料并不足以说明麝香保心丸可作为降脂药物应用。
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3.2 血管内超声评价血管舒缩功能的敏感性
血管内超声成像是将微型超声探头直接置于血管腔内,探测血管截面积及血管腔径,它是一种研究血管舒缩功能的新方法[8]。Reddy等[9]的研究表明:其对血管舒缩变化的敏感性高于动脉造影,可发现动脉壁的微小病变及舒缩变化。本研究采用该项技术,获得血管图像清楚,符合研究要求。
3.3 麝香保心丸对内皮依赖性血管舒张功能的影响
研究发现:乙酰胆碱可通过M受体引起血管收缩,也可通过内皮细胞释放内皮源性血管舒张因子(一氧化氮)导致血管舒张;其对血管作用的净效果取决于两种反应的平衡结果。本组资料C组用药后出现动脉舒张,反映出内皮依赖性血管舒张功能正常;而HC组用药后却呈明显的收缩反应、血管腔径及截面积显著减小,反映出内皮依赖性血管舒张功能异常[2,3]。动物实验及临床研究均已证实:高脂血症可导致血管内皮依赖性舒张功能损害,表现为对乙酰胆碱等物质呈矛盾的收缩反应,这种血管反应性异常在AS斑块出现之前就已发生、损害范围涉及心脏外膜血管和心肌微循环,它既可是AS的早期表现,也可能在导致冠脉痉挛、诱发冠心病事件中发挥重要作用[13]。因此, 寻求逆转这种血管功能异常的药物有重要意义。研究已证实:Statin类药物在改善内皮功能方面有明显效果,它可能是这类药物临床试验明显降低病死率和冠心病事件的机理之一[2]，本实验采用舒降之作为阳性对照药，用药后内皮舒张功能明显改善,与文献相符。本组资料提示:麝香保心丸也可明显改善血管内皮舒张功能异常。作为一种中成药，该药成本低、毒副反应少，同时可扩张血管、增加心肌血流量[4],临床适应范围广泛,资料提示它不仅是一种急救中药,而且还有作为保护内皮功能的一种药物而应用于临床的前景。
, http://www.100md.com
参 考 文 献
1 Bogaty P,Hackett D,Davies G,et al.Vasoreactivity of culprit lesion in unstable angina. Circulation,1994,90:5-10.
2 Leung WH,Lau CP,Wong CK,et al.Beneficial effect of cholesterol-lowering therapy on coronary endothlium-dependent relaxation in hypercholesterolaemic patients. Lancet,1993,341:1496-1500.
3 Harrison DG,Ohara Y. Physiologic consequences of increased vascular oxidant stresses in hypercholesterolemia and atherosclerosis: implication for impaired vasomotion. Am J Cardiol,1995,75:75-81.
, http://www.100md.com
4 罗海明，戴瑞鸿，王受益，等.麝香保心丸改善心肌缺血作用的核心脏影像学研究.中国中西医结合杂志,1996,16：323-325.
5 王智慧,孙健,白丽霞,等.麝香保心丸治疗冠心病心绞痛的疗效及对血栓素A2和前列腺素的影响.上海医药,1996,8:21-22.
6 郝玉明,王凤飞,刘素云.麝香保心丸的急性心肌梗塞患者的心肌保护作用.上海医药,1996,12:21-22.
7 Xu GR,Salen G,Shefer S,et al. Unexpected inhibition of cholesterol 7αhydroxylase by cholesterol in new Zealand white and watanabe heritable hyperlipidemic rabbits. J Clin Invest,1995,95:1497-1504.
, 百拇医药
8 Mille RM,Biuett JM,Nichole WW,et al.Endothelial dysfunction early after heart transplantation:assessment with intravascular ultrasound and Doppler. Circulation,1992,86:1171-1176.
9 Reddy KG,Nair R,Sheehan HM,et al.Evidence that selective endothelial dysfunction may occur in the absence of angiographic or ultrasound atherosclerosis in patients with risk factors for atherosclerosis.JACC,1994,23:833-843.
10 史载祥，陈可翼.第二届中西医结合抗动脉硬化、血栓症及一级预防国际会议述要.中国中西医结合杂志,1995,15：62-63.
(收稿 1998-01-05 修回 1998-08-15), http://www.100md.com
单位：200040 上海医科大学华山医院心内科
关键词：冠状动脉硬化；血管内膜；草本植物；血管内膜
中华物理医学与康复杂志990219
【中图号】 R318.03;R541.4
血管内皮舒张功能损害在动脉粥样硬化(atheroscleorsis,AS)的发生、发展中发挥重要作用[1-3],寻求逆转这种血管功能异常的药物有重要意义。研究发现:Statin类药物在改善内皮功能方面有明显效果,但中药方面却缺乏类似的研究。麝香保心丸(heart-protecting musk pill HMP)是一种治疗冠心病的有效中成药，可扩张冠脉、增加心肌血供[4-6];为探讨其对血管内皮舒张功能的保护作用,本文采用血管内超声显像进行研究。
, 百拇医药
1 材 料 与 方 法
1.1 动物分组及模型建立
参照文献[7]的方法复制高胆固醇血症动物模型。雄性纯种新西兰家兔30只，体质量2.4～3.1 kg(上海医科大学实验动物中心提供)，常规饲养一周后称质量并随机分为二组：①正常对照组(C组,8只)，喂饲基础颗粒饲料(120～150) g/d。②高脂血症模型组(22只)，喂饲造模饲料：基础颗粒饲料+质量分数为3%的猪油+质量浓度为10 g/L的胆固醇粉(分析纯,上海化学试剂供应站提供)(120～150) g/d。6周后继续喂饲造模饲料，并随机分为三组，每天用不同药物灌胃二周：高脂血症对照组(HC组,7只)，用生理盐水10 ml/d灌胃；麝香保心丸组(HMP组,8只)，每天4粒麝香保心丸(上海中药一厂,批号970119A)灌胃。舒降之组(SIM组,7只)，每天舒降之2.5 mg(美国MSD公司,批号95010)灌胃。实验第8周时测量下列项目。
, 百拇医药
1.2 观察指标及检测方法
1.2.1 血脂测定 8周时经耳中央动脉采血测定。用HITACHI 7170A型自动生化分析仪、采用氧化酶法检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。
1.2.2 血管内超声显像测量血管内皮舒张反应性 将动物用质量浓度为30 g/L戊巴比妥钠1 ml/kg静脉麻醉。固定后常规分离颈总动脉；插入5 F动脉鞘,然后导入导引钢丝(0.014 in);沿钢丝在X光透视下插入腔内超声导管、尖端固定于胸主动脉(10～12胸椎水平)。用CVIS INSIGHT III型(美国Boston scientific公司)血管内超声显像系统描记基础状态下主动脉腔内超声图像,随后参照文献[2,8,9]方法,动脉内注射乙酰胆碱生理盐水〔10 μg/ml.min-1,终浓度约为(10-5～10-6) mol/L〕,注射后2 min重复记录主动脉腔内超声图像。然后动脉内注射硝酸甘油生理盐水(40 μg/ml.min-1),注射后3 min再次记录主动脉腔内超声图像。每只动物重复测定血管反应二处，测量血管管腔截面积(mm2)及血管腔直径(mm),平均后计值;最后计算血管的舒缩变化值(与基础测值的差值)占基础测值的百分比:即血管舒缩变化的百分比(△%),进行组间比较。
, 百拇医药
1.3 统计学处理
采用方差分析及配对t检验比较。
2 结 果
2.1 麝香保心丸对兔血脂的影响
8周时动物处死前血脂测定结果见表1。与HC组比较,加用麝香保心丸或舒降之2周后SIM组及HMP组的TC和LDL-C显著降低(P<0.05)，而TG却无明显改变(P>0.05)；SIM组与HMP组之间相比也有明显差异(P<0.05),说明舒降之有明显的降脂作用,麝香保心丸也能明显抑制TC和LDL-C的上升趋势。
表1 四组家兔8周时血脂的测定结果比较(mmol/L,
±s) 组别例数
, 百拇医药
TG
TC
LDL-C
C组
8
0.81±0.27
1.38±0.24
0.70±0.19
HC组
7
1.31±0.69
22.04±2.16#
, http://www.100md.com
14.48±2.31#
HMP组
8
1.02±0.45
13.24±1.61#*
10.98±2.24#*
SIM组
7
0.82±0.80
10.42±1.83#*△
6.73±1.20#*△
, http://www.100md.com
注:与C组相比 #P<0.05;与HC组相比 *P<0.05;与HMP组相比△P<0.05
2.2 麝香保心丸对动脉内皮功能的保护作用
如表2,3及图1所示,与C组比较:高脂血症损害后HC组的动脉对乙酰胆碱呈异常的收缩反应, 动脉截面积及直径均明显缩小(P<0.05), 动脉截面积及直径收缩百分比增大(P<0.05)，说明内皮依赖性血管舒张功能受损;但动脉对硝酸甘油仍保持舒张反应(P>0.05)。与HC组比较,麝香保心丸和舒降之使用2周后,内皮依赖性血管舒张功能异常的程度明显减轻(P<0.05);动脉截面积及直径收缩百分比减小。各组动物血管对硝酸甘油的舒张反应无明显差异(P>0.05),提示高脂血症的损害位点在内皮细胞的一氧化氮系统，两种药物可能是通过该途径发挥保护作用。
表2 乙酰胆碱或硝酸甘油给药后动物胸主动脉管腔直径与截面积的变化(
±s) 组别, 百拇医药
例数
血管截面积(mm2)
血管腔径(mm)
Base
Post-Ach
Post-NTG
Base
Post-Ach
Post-NTG
C组
8
16.11±4.90
, 百拇医药
17.21±4.56
17.86±5.70
4.43±0.58
4.73±0.64
4.81±0.70
HC组
7
17.25±3.15
10.76±1.99*
18.91±3.13
4.60±0.46
3.36±0.25*
, http://www.100md.com
4.93±0.44
HMP组
8
18.45±6.17
15.21±5.57△
19.91±6.54
4.78±0.84
4.15±0.91△
5.11±0.86
SIM组
7
15.93±4.56
, 百拇医药
13.06±3.96*△
17.51±4.51
4.40±0.69
4.03±0.73*△
4.71±0.65
注:Base:基础状况;Post-Ach:乙酰胆碱注射后2 min;Post-NTG:硝酸甘油注射后3 min
与C组相比 * P<0.05;与HC组相比 △ P<0.05
表3 注射乙酰胆碱或硝酸甘油后动脉截面积及直径舒张百分比的比较(
±s) 组别, 百拇医药
例数
乙酰胆碱注射后
硝酸甘油注射后
(面积mm2,△%)
(直径mm,△%)
(面积mm2,△%)
(直径mm,△%)
C组
8
8.20±6.34
6.75±2.92
10.35±4.72
, 百拇医药
8.50±4.48
HC组
7
-37.43±6.41#
-26.43±6.85#
8.93±2.58
7.32±1.47
HMP组
8
-18.25±6.02#*
-13.79±6.32#*
, 百拇医药
8.12±1.64
7.06±1.90
SIM组
7
-17.00±4.80#*
-8.48±5.15#*
10.88±4.93
7.46±3.54
注:“-”表示动脉收缩;△%舒缩变化值占基础状况测值的百分比:与C组相比#P<0.05;*与HC组相比P<0.05
, 百拇医药
A为C组,B为HC组,C为HMP组。
A1、B1、C1为基础状态,A2、B2、C2为Ach注射2 min后,A3、B3、C3为NTG注射后3 min。
可见Ach注射后C组表现为动脉舒张,HC组为收缩,HMP组亦为收缩,但收缩幅度减轻。NTG注射后各组动物均表现为舒张反应
图1 各组动物注射乙酰胆碱或硝酸甘油后不同的血管反应性
3 讨 论
3.1 麝香保心丸对血脂水平的影响
本组资料发现用麝香保心丸后血胆固醇水平有下降趋势,但这种作用明显较舒降之弱(P<0.05)。其调脂作用的机理不明,可能与其组份中含有人参等降脂成分[10]有关;但本文资料并不足以说明麝香保心丸可作为降脂药物应用。
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3.2 血管内超声评价血管舒缩功能的敏感性
血管内超声成像是将微型超声探头直接置于血管腔内,探测血管截面积及血管腔径,它是一种研究血管舒缩功能的新方法[8]。Reddy等[9]的研究表明:其对血管舒缩变化的敏感性高于动脉造影,可发现动脉壁的微小病变及舒缩变化。本研究采用该项技术,获得血管图像清楚,符合研究要求。
3.3 麝香保心丸对内皮依赖性血管舒张功能的影响
研究发现:乙酰胆碱可通过M受体引起血管收缩,也可通过内皮细胞释放内皮源性血管舒张因子(一氧化氮)导致血管舒张;其对血管作用的净效果取决于两种反应的平衡结果。本组资料C组用药后出现动脉舒张,反映出内皮依赖性血管舒张功能正常;而HC组用药后却呈明显的收缩反应、血管腔径及截面积显著减小,反映出内皮依赖性血管舒张功能异常[2,3]。动物实验及临床研究均已证实:高脂血症可导致血管内皮依赖性舒张功能损害,表现为对乙酰胆碱等物质呈矛盾的收缩反应,这种血管反应性异常在AS斑块出现之前就已发生、损害范围涉及心脏外膜血管和心肌微循环,它既可是AS的早期表现,也可能在导致冠脉痉挛、诱发冠心病事件中发挥重要作用[13]。因此, 寻求逆转这种血管功能异常的药物有重要意义。研究已证实:Statin类药物在改善内皮功能方面有明显效果,它可能是这类药物临床试验明显降低病死率和冠心病事件的机理之一[2]，本实验采用舒降之作为阳性对照药，用药后内皮舒张功能明显改善,与文献相符。本组资料提示:麝香保心丸也可明显改善血管内皮舒张功能异常。作为一种中成药，该药成本低、毒副反应少，同时可扩张血管、增加心肌血流量[4],临床适应范围广泛,资料提示它不仅是一种急救中药,而且还有作为保护内皮功能的一种药物而应用于临床的前景。
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参 考 文 献
1 Bogaty P,Hackett D,Davies G,et al.Vasoreactivity of culprit lesion in unstable angina. Circulation,1994,90:5-10.
2 Leung WH,Lau CP,Wong CK,et al.Beneficial effect of cholesterol-lowering therapy on coronary endothlium-dependent relaxation in hypercholesterolaemic patients. Lancet,1993,341:1496-1500.
3 Harrison DG,Ohara Y. Physiologic consequences of increased vascular oxidant stresses in hypercholesterolemia and atherosclerosis: implication for impaired vasomotion. Am J Cardiol,1995,75:75-81.
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4 罗海明，戴瑞鸿，王受益，等.麝香保心丸改善心肌缺血作用的核心脏影像学研究.中国中西医结合杂志,1996,16：323-325.
5 王智慧,孙健,白丽霞,等.麝香保心丸治疗冠心病心绞痛的疗效及对血栓素A2和前列腺素的影响.上海医药,1996,8:21-22.
6 郝玉明,王凤飞,刘素云.麝香保心丸的急性心肌梗塞患者的心肌保护作用.上海医药,1996,12:21-22.
7 Xu GR,Salen G,Shefer S,et al. Unexpected inhibition of cholesterol 7αhydroxylase by cholesterol in new Zealand white and watanabe heritable hyperlipidemic rabbits. J Clin Invest,1995,95:1497-1504.
, 百拇医药
8 Mille RM,Biuett JM,Nichole WW,et al.Endothelial dysfunction early after heart transplantation:assessment with intravascular ultrasound and Doppler. Circulation,1992,86:1171-1176.
9 Reddy KG,Nair R,Sheehan HM,et al.Evidence that selective endothelial dysfunction may occur in the absence of angiographic or ultrasound atherosclerosis in patients with risk factors for atherosclerosis.JACC,1994,23:833-843.
10 史载祥，陈可翼.第二届中西医结合抗动脉硬化、血栓症及一级预防国际会议述要.中国中西医结合杂志,1995,15：62-63.
(收稿 1998-01-05 修回 1998-08-15), http://www.100md.com