支气管和肺泡灌洗液细胞DNA分析(附72例报告)
作者：李德明
单位：常州市第一人民医院 邮政编码：213003
关键词：肺癌 DNA分析 支气管肺泡灌洗液 流式细胞仪
江苏医药990312 摘要 对肺癌组(48例)和对照组(24例)患者的病灶部位进行支气管和肺泡灌洗，将回收的灌洗液用流式细胞仪进行细胞脱氧核糖核酸(DNA)含量分析。结果：以异倍体细胞阳性为标准，对肺癌诊断的敏感性为41.67%，特异性为91.67%，正确性为91.91%。以异倍体细胞≥34.11%为诊断标准，敏感性为16.67%，特异性与正确性均为100%。作者认为用流式细胞仪对支气管和肺泡灌洗液细胞的DNA含量分析是诊断肺癌的一种有价值的方法。
纤支镜检查是目前诊断肺癌的主要手段。虽然中央型肺癌的活检阳性率可达90%左右，但周围型肺癌的阳性率较低，尤其是位于上叶尖段的病灶，常难以钳取到病灶部位的标本。近20年来流式细胞仪(FCM)对细胞DNA含量分析显示约90%的肿瘤可出现异倍体细胞，这个发现对肺癌的诊断提供了新的研究途径[1，2]。自1996年以来，我院对因肺部良、恶性病变而作纤支镜检查的患者，开展了用FCM对支气管和肺泡灌洗液(统称BALF)细胞DNA含量分析，以探讨其对肺癌的诊断价值。
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材料和方法
一、研究对象
1.肺癌组(48例)：为首次治疗前作纤支镜检查确诊的患者。其中腺癌14例，鳞癌23例，燕麦细胞癌1例，未定型癌10例。按解剖部位分：中央型肺癌28例(男24例，女4例)，年龄52～79岁，平均63.00±7.28岁。周围型肺癌20例(男13例，女7例)，年龄48～74岁，平均62.40±8.34岁。
2.对照组(24例)：男16例，女8例。年龄37～73岁，平均55.50±12.07岁。其中肺炎10例，支气管扩张继发感染、咯血13例，支气管炎伴轻度支气管粘膜鳞状上皮细胞不典型增生1例。这些患者均经抗感染与对症支持治疗后痊愈出院。
二、研究方法
1.所有患者在常规纤支镜检查时，均先做病灶处的活检，然后用生理盐水对支气管内窥见的病变及其邻近的肺段进行灌洗；对不能窥见的周围性病变，经引流支气管进行支气管肺泡灌洗。每次灌洗液量10ml，总量不超过100ml，回收液量为30～50ml。活检标本送病理科检查，根据病理学检查结果分为肺癌组与对照组。BALF送实验室用FCM做细胞DNA含量分析。以正常人细胞G0/1峰均道值作为正常二倍体细胞的标准，出现一个或以上的额外峰为异倍体细胞阳性。根据异倍体细胞阳性情况与DNA指数(DI)进行对肺癌诊断的敏感性、特异性与正确性分析。
, 百拇医药
2.统计学分析：用四格表χ2检验、行×列表χ2检验、两样本均数比较的t检验。
结 果
FCM对BALF细胞DNA分析结果：中央型肺癌、周围型肺癌与对照组异倍体的阳性数分别为12/28例、8/20例与2/24例，异倍体细胞的出现除在中央型肺癌与周围型肺癌之间无差别(χ2＝0.039，P>0.75)外，对照组与中央型肺癌(χ2＝7.83，P<0.01)和与周围型肺癌(χ2＝8.82，P<0.05)之间均有明显差别。腺癌、鳞癌与其它癌(燕麦细胞癌与未定型癌合并后作统计学处理)之间异倍体的阳性数分别为9/14例、5/23例与4/11例，有差异(χ2＝7.455，γ＝2，P<0.025)，腺癌与鳞癌之间的差异更明显(χ2＝6.698，P<0.01)，肺癌组与对照组的异倍体细胞含量(见附表)有差别(t＝2.2358，P<0.05)。
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附表 肺癌组与对照组的异倍体细胞含量分析 组别
例数
异倍体细胞含量(%)
DI值
分布范围
±s
分布范围±s
肺癌组
20
, 百拇医药
5.14～90.09
36.61±28.62
0.86～2.03
1.22±0.23
对照组
2
13.37～30.55
21.96±12.15
1.14～1.22
1.18±0.06
以异倍体细胞阳性作为肺癌的诊断标准，敏感性为41.67%，特异性为91.67%，正确性为90.91%。若以异倍体细胞含量(对照组的+s)≥34.11%为肺癌的诊断标准，敏感性为16.67%，特异性与正确性均为100%。DI值在肺癌组与对照组之间无差别(t＝0.344，P>0.05)。
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讨 论
刘国祥等[2]测定肺癌细胞发现异倍体肿瘤占88.57%，而正常肺组织细胞与良性肺病变细胞皆为二倍体细胞，故认为细胞内DNA含量异常可作为诊断肺癌有价值的指标。本组中无论是中央型肺癌，还是周围型肺癌，其异倍体细胞的阳性率均明显高于肺部良性病变。以异倍体细胞作为诊断肺癌的标准，敏感性(41.67%)低于Yoss等[3]报道的58%与陶敏等[4]报告的81%，但特异性则与二者(91%与92%)相似。因其对肺癌的诊断正确性不是100%，故不能以此作为诊断肺癌的可靠指标。若以异倍体细胞≥34.11%作为诊断肺癌的标准，虽敏感性有较大降低，但其特异性与正确性均达100%。故认为在临床上高度怀疑肺癌，且胸部X线平片或CT扫描提示肺癌的影像时，若BALF细胞中异倍体细胞超过34.11%，可作为诊断肺癌的有价值的指标。
本组资料提示异倍体细胞的阳性率腺癌高于鳞癌。但因燕麦细胞癌仅发现1例，而其它癌细胞的类型不能确定，所以，异倍体细胞在其它各种癌细胞之间的关系尚不能确定。
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在纤支镜检查时发现有明显充血、水肿与坏死的中央型肺癌，BALF中异倍体细胞的阳性率高于无此种外观者。有一部分周围型肺癌患者，在X线电视透视下做经纤支镜肺活检时，活检钳无法到达病灶处进行活检。所以认为肺癌患者异倍体出现假阴性的原因，除一小部分为二倍体肿瘤外，亦与肿瘤尚未溃破至气道或肺泡和周围型肺癌压迫其周围的气道，使之扭曲、移位、闭塞等情况有关。此亦为不同作者所报告的阳性率高低不一的原因，因不同作者的研究对象的组合情况不同。至于假阳性的原因，可能与癌前期病变或因炎性病变致细胞变性、化生或坏死有关。
参考文献
[1] Barlogie B, et al. Cancer Res 1978；38：333.
[2] 刘国祥，等.中华结核和呼吸杂志 1992；15(5)：290.
[3] Yoss EB, et al. Chest 1989；96：54.
[4] 陶敏，等.中华结核和呼吸杂志 1996；19(4)：222.
(1998年5月25日收稿 同年8月23日修回), http://www.100md.com
单位：常州市第一人民医院 邮政编码：213003
关键词：肺癌 DNA分析 支气管肺泡灌洗液 流式细胞仪
江苏医药990312 摘要 对肺癌组(48例)和对照组(24例)患者的病灶部位进行支气管和肺泡灌洗，将回收的灌洗液用流式细胞仪进行细胞脱氧核糖核酸(DNA)含量分析。结果：以异倍体细胞阳性为标准，对肺癌诊断的敏感性为41.67%，特异性为91.67%，正确性为91.91%。以异倍体细胞≥34.11%为诊断标准，敏感性为16.67%，特异性与正确性均为100%。作者认为用流式细胞仪对支气管和肺泡灌洗液细胞的DNA含量分析是诊断肺癌的一种有价值的方法。
纤支镜检查是目前诊断肺癌的主要手段。虽然中央型肺癌的活检阳性率可达90%左右，但周围型肺癌的阳性率较低，尤其是位于上叶尖段的病灶，常难以钳取到病灶部位的标本。近20年来流式细胞仪(FCM)对细胞DNA含量分析显示约90%的肿瘤可出现异倍体细胞，这个发现对肺癌的诊断提供了新的研究途径[1，2]。自1996年以来，我院对因肺部良、恶性病变而作纤支镜检查的患者，开展了用FCM对支气管和肺泡灌洗液(统称BALF)细胞DNA含量分析，以探讨其对肺癌的诊断价值。
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材料和方法
一、研究对象
1.肺癌组(48例)：为首次治疗前作纤支镜检查确诊的患者。其中腺癌14例，鳞癌23例，燕麦细胞癌1例，未定型癌10例。按解剖部位分：中央型肺癌28例(男24例，女4例)，年龄52～79岁，平均63.00±7.28岁。周围型肺癌20例(男13例，女7例)，年龄48～74岁，平均62.40±8.34岁。
2.对照组(24例)：男16例，女8例。年龄37～73岁，平均55.50±12.07岁。其中肺炎10例，支气管扩张继发感染、咯血13例，支气管炎伴轻度支气管粘膜鳞状上皮细胞不典型增生1例。这些患者均经抗感染与对症支持治疗后痊愈出院。
二、研究方法
1.所有患者在常规纤支镜检查时，均先做病灶处的活检，然后用生理盐水对支气管内窥见的病变及其邻近的肺段进行灌洗；对不能窥见的周围性病变，经引流支气管进行支气管肺泡灌洗。每次灌洗液量10ml，总量不超过100ml，回收液量为30～50ml。活检标本送病理科检查，根据病理学检查结果分为肺癌组与对照组。BALF送实验室用FCM做细胞DNA含量分析。以正常人细胞G0/1峰均道值作为正常二倍体细胞的标准，出现一个或以上的额外峰为异倍体细胞阳性。根据异倍体细胞阳性情况与DNA指数(DI)进行对肺癌诊断的敏感性、特异性与正确性分析。
, 百拇医药
2.统计学分析：用四格表χ2检验、行×列表χ2检验、两样本均数比较的t检验。
结 果
FCM对BALF细胞DNA分析结果：中央型肺癌、周围型肺癌与对照组异倍体的阳性数分别为12/28例、8/20例与2/24例，异倍体细胞的出现除在中央型肺癌与周围型肺癌之间无差别(χ2＝0.039，P>0.75)外，对照组与中央型肺癌(χ2＝7.83，P<0.01)和与周围型肺癌(χ2＝8.82，P<0.05)之间均有明显差别。腺癌、鳞癌与其它癌(燕麦细胞癌与未定型癌合并后作统计学处理)之间异倍体的阳性数分别为9/14例、5/23例与4/11例，有差异(χ2＝7.455，γ＝2，P<0.025)，腺癌与鳞癌之间的差异更明显(χ2＝6.698，P<0.01)，肺癌组与对照组的异倍体细胞含量(见附表)有差别(t＝2.2358，P<0.05)。
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附表 肺癌组与对照组的异倍体细胞含量分析 组别
例数
异倍体细胞含量(%)
DI值
分布范围
±s分布范围
±s肺癌组
20
, 百拇医药
5.14～90.09
36.61±28.62
0.86～2.03
1.22±0.23
对照组
2
13.37～30.55
21.96±12.15
1.14～1.22
1.18±0.06
以异倍体细胞阳性作为肺癌的诊断标准，敏感性为41.67%，特异性为91.67%，正确性为90.91%。若以异倍体细胞含量(对照组的
+s)≥34.11%为肺癌的诊断标准，敏感性为16.67%，特异性与正确性均为100%。DI值在肺癌组与对照组之间无差别(t＝0.344，P>0.05)。, http://www.100md.com
讨 论
刘国祥等[2]测定肺癌细胞发现异倍体肿瘤占88.57%，而正常肺组织细胞与良性肺病变细胞皆为二倍体细胞，故认为细胞内DNA含量异常可作为诊断肺癌有价值的指标。本组中无论是中央型肺癌，还是周围型肺癌，其异倍体细胞的阳性率均明显高于肺部良性病变。以异倍体细胞作为诊断肺癌的标准，敏感性(41.67%)低于Yoss等[3]报道的58%与陶敏等[4]报告的81%，但特异性则与二者(91%与92%)相似。因其对肺癌的诊断正确性不是100%，故不能以此作为诊断肺癌的可靠指标。若以异倍体细胞≥34.11%作为诊断肺癌的标准，虽敏感性有较大降低，但其特异性与正确性均达100%。故认为在临床上高度怀疑肺癌，且胸部X线平片或CT扫描提示肺癌的影像时，若BALF细胞中异倍体细胞超过34.11%，可作为诊断肺癌的有价值的指标。
本组资料提示异倍体细胞的阳性率腺癌高于鳞癌。但因燕麦细胞癌仅发现1例，而其它癌细胞的类型不能确定，所以，异倍体细胞在其它各种癌细胞之间的关系尚不能确定。
, http://www.100md.com
在纤支镜检查时发现有明显充血、水肿与坏死的中央型肺癌，BALF中异倍体细胞的阳性率高于无此种外观者。有一部分周围型肺癌患者，在X线电视透视下做经纤支镜肺活检时，活检钳无法到达病灶处进行活检。所以认为肺癌患者异倍体出现假阴性的原因，除一小部分为二倍体肿瘤外，亦与肿瘤尚未溃破至气道或肺泡和周围型肺癌压迫其周围的气道，使之扭曲、移位、闭塞等情况有关。此亦为不同作者所报告的阳性率高低不一的原因，因不同作者的研究对象的组合情况不同。至于假阳性的原因，可能与癌前期病变或因炎性病变致细胞变性、化生或坏死有关。
参考文献
[1] Barlogie B, et al. Cancer Res 1978；38：333.
[2] 刘国祥，等.中华结核和呼吸杂志 1992；15(5)：290.
[3] Yoss EB, et al. Chest 1989；96：54.
[4] 陶敏，等.中华结核和呼吸杂志 1996；19(4)：222.
(1998年5月25日收稿 同年8月23日修回), http://www.100md.com