石蜡包埋颈全喉大切片的制备与体会
作者：殷平 李静
单位：殷平 李静(黑龙江省牡丹江医学院病理学教研室，牧丹江 157011)
关键词：石蜡包埋；切片制备；染色方法
石蜡包埋颈全喉大切片的制备与体会分类号 R446 文献标识码 A
文章编号 1001-7399(1999)03-0223-01
过去在制备大切片时，一般应用明胶包埋，但切片太厚(400 μm)，影响观察〔1〕。我们利用石蜡包埋制备颈全喉大切片，取得了良好的结果。
1 材料和方法
1.1 尸检材料为全喉和手术切除的喉癌标本。根据需要从水平、冠状和矢状三个方向把喉切开，用15%的福尔马林固定。
1.2 取材时应使用刀锋锐利的解剖刀具，对于已有钙化的甲状软骨用5%的硝酸水溶液进行脱钙，时间限于72 h为宜，脱钙后用流水充分冲洗。
1.3 制片过程〔2〕：脱水、浸蜡、包埋、切片、染色与封固。将切取的全喉放在适当容器内(有盖)，依次进行脱水、透明和浸蜡：75%乙醇脱水12 h，85%乙醇脱水12 h，95%乙醇脱水12 h，无水乙醇(Ⅰ)12 h，无水乙醇(Ⅱ)12 h，二甲苯(Ⅰ)透明6 h，二甲苯(Ⅱ)透明6 h；浸蜡3次，每次6 h，蜡温在56℃左右。包埋时将石蜡先放入特制的包埋槽内，然后将组织轻轻压住等到蜡开始凝固为止。在应用轮转式切片机切片时，因标本固定器较小，不能固定较大蜡块，我们在标本固定器上安装了一个特制的“凹”形金属片夹，石蜡切片厚度在10～15 μm之间。蜡片置于7 cm×5 cm×0.3 cm普通玻璃片上。烤片后即可用二甲苯和梯度乙醇脱蜡。苏木素染色8 min，伊红染色6 min。然后切片，脱水，二甲苯透明，其操作过程宜慢。用透明塑料硬膜代替盖玻片封固，稍后即可观察。
2 体会
贴附于玻片的全喉大切片，经过常规HE染色和特殊染色，可得到满意的全喉大切片。在切片制作过程中我们有以下几点体会：(1)对已有钙化的甲状软骨，因脱钙液对核内染色质有损害，影响观察效果，因此脱钙时间越短越好，用5%硝酸时应在72 h以内。(2)在显微镜下检查力锋，切刀必须保持锋利、平整。(3)修整蜡块，使蜡块四周整齐，上下宽度一致，切片动作要快。(4)刀刃上粘附的蜡要擦净，以免切片卷曲和撕裂。切片切取后放在40℃～45℃的温水中展平。颈全喉大切片的优点：(1)克服了过去组织块小、教师讲解抽象的缺点，教师可携带大切片用于理论教学。(2)制作过程简单，可应用于日常病理检验工作。(3)可应用于观察癌组织的生长方向和浸润范围，为临床提供治疗依据。
通过颈全喉大切片的制备，可为其它部位病理大切片的制备提供借鉴。
作者简介：殷 平，男，36岁，硕士，副教授。研究方向：肿瘤病理与发生机制
参考文献
1，王德田，刘鸿瑞，严洪珍. 石蜡包埋整叶肺组织大切片的制作与体会. 中华病理学杂志，1998；27(6)：460～462
2，龚志锦，詹洲. 病理组织制片和染色技术. 上海：上海科学技术出版社，1994：85
收稿日期：1999-03-10, 百拇医药
单位：殷平 李静(黑龙江省牡丹江医学院病理学教研室，牧丹江 157011)
关键词：石蜡包埋；切片制备；染色方法
石蜡包埋颈全喉大切片的制备与体会分类号 R446 文献标识码 A
文章编号 1001-7399(1999)03-0223-01
过去在制备大切片时，一般应用明胶包埋，但切片太厚(400 μm)，影响观察〔1〕。我们利用石蜡包埋制备颈全喉大切片，取得了良好的结果。
1 材料和方法
1.1 尸检材料为全喉和手术切除的喉癌标本。根据需要从水平、冠状和矢状三个方向把喉切开，用15%的福尔马林固定。
1.2 取材时应使用刀锋锐利的解剖刀具，对于已有钙化的甲状软骨用5%的硝酸水溶液进行脱钙，时间限于72 h为宜，脱钙后用流水充分冲洗。
1.3 制片过程〔2〕：脱水、浸蜡、包埋、切片、染色与封固。将切取的全喉放在适当容器内(有盖)，依次进行脱水、透明和浸蜡：75%乙醇脱水12 h，85%乙醇脱水12 h，95%乙醇脱水12 h，无水乙醇(Ⅰ)12 h，无水乙醇(Ⅱ)12 h，二甲苯(Ⅰ)透明6 h，二甲苯(Ⅱ)透明6 h；浸蜡3次，每次6 h，蜡温在56℃左右。包埋时将石蜡先放入特制的包埋槽内，然后将组织轻轻压住等到蜡开始凝固为止。在应用轮转式切片机切片时，因标本固定器较小，不能固定较大蜡块，我们在标本固定器上安装了一个特制的“凹”形金属片夹，石蜡切片厚度在10～15 μm之间。蜡片置于7 cm×5 cm×0.3 cm普通玻璃片上。烤片后即可用二甲苯和梯度乙醇脱蜡。苏木素染色8 min，伊红染色6 min。然后切片，脱水，二甲苯透明，其操作过程宜慢。用透明塑料硬膜代替盖玻片封固，稍后即可观察。
2 体会
贴附于玻片的全喉大切片，经过常规HE染色和特殊染色，可得到满意的全喉大切片。在切片制作过程中我们有以下几点体会：(1)对已有钙化的甲状软骨，因脱钙液对核内染色质有损害，影响观察效果，因此脱钙时间越短越好，用5%硝酸时应在72 h以内。(2)在显微镜下检查力锋，切刀必须保持锋利、平整。(3)修整蜡块，使蜡块四周整齐，上下宽度一致，切片动作要快。(4)刀刃上粘附的蜡要擦净，以免切片卷曲和撕裂。切片切取后放在40℃～45℃的温水中展平。颈全喉大切片的优点：(1)克服了过去组织块小、教师讲解抽象的缺点，教师可携带大切片用于理论教学。(2)制作过程简单，可应用于日常病理检验工作。(3)可应用于观察癌组织的生长方向和浸润范围，为临床提供治疗依据。
通过颈全喉大切片的制备，可为其它部位病理大切片的制备提供借鉴。
作者简介：殷 平，男，36岁，硕士，副教授。研究方向：肿瘤病理与发生机制
参考文献
1，王德田，刘鸿瑞，严洪珍. 石蜡包埋整叶肺组织大切片的制作与体会. 中华病理学杂志，1998；27(6)：460～462
2，龚志锦，詹洲. 病理组织制片和染色技术. 上海：上海科学技术出版社，1994：85
收稿日期：1999-03-10, 百拇医药