续断对Alzheimer病模型大鼠海马结构淀粉样沉积的影响1
作者：胡海涛 杨 杰 钱亦华 张樟进 王唯析 胡晓丹
单位：西安医科大学解剖教研室，西安 710061
关键词：续断；Alzheimer病；β-淀粉样蛋白；大鼠
中国老年学杂志/990321
摘 要 目的 探讨续断抗衰老作用的机理。方法 用续断(2g/d/只)对AD模型大鼠灌胃治疗3个月。通过行为测试，光镜免疫细胞化学ABC法，对AD大鼠行为改变，海马结构齿状回和CA1区AP-Li神经元的形态和数目，β-AP的沉积变化进行了观察。结果 续断组大鼠较对照组受电击次数减少，潜伏期延长(P<0.01)，海马结构齿状回和CA1区AP-Li神经元的数目较对照组均有明显减少(P<0.01)，β-AP样反应染色减少。结论 续断可以恢复AD模型大鼠的学习记忆缺损，有抑制和清除海马结构齿状回和CA1区β-AP的沉积的作用。
, 百拇医药
Effects of dipsacus asper on β-AP
deposit in hippocampal structure of the rat AD disease model
Hu Haitao Yang Jie Qian Yihua et al
Department of Anatomy,Xi'an Medical University Xi'an 710061
The mechanism of dipsacus asper's antiaging action was detected with th e model of dementia.The rats were treated by dipsacus asper 2g/d,po.The alterna tion of rat's behaviour,the number and the average area as well as absorbance of AP-Li neurons and β-AP deposit in hippocampal structure were observed.The re su lts showed that after three monthes' treatment the fuequency of electric shock w as decreased,incubation period was prolonged.the number of AP-Li neuron in CAI region and dentate gyrus were decreased.The results suggest that dipsacus asper can recover the learning and memorizing abilities of the AD rats,and the mechani sm was suggested that the prevent of β-AP from depositing and the deposited β-AP in CAI region and dentate gyrus can be cleared by the drug.
, 百拇医药
Key words Dipsacus asper Hippocampus β-amyloid prot ein Rat
续断有补肝肾，强筋骨，通血脉之功能，近年研究发现续断具有抗衰老作用，但作用机制不详〔1〕。Alzheimer病(AD)是最常见的老年性痴呆，目前国内外尚无理想有效的治疗方法。为此，我们用AD模型，大鼠进行了有关续断对AD治疗作用的实验研究。
1 材料和方法
1.1 实验动物与分组 选用健康SD成年大鼠20只，随机分为续断组和对照组，每组10只。
1.2 痴呆模型的建立 实验开始前，全部大鼠先做行为测试即一次性避暗回避试验，记录10 min内受电击次数及每次潜伏期。两组大鼠均用三氯化铝(AlCl3)溶液，按50mgAlCl3/100g体重/d灌胃，连续3个月，再进行行为测试，10min内电击次数大于对照值2倍，平均潜伏期小于对照组20%者为成功AD模型。续断组AD模型小鼠用续断(按2g/d/只)灌胃治疗，对照组用等量的蒸馏水代替。
, 百拇医药
1.3 海马结构淀粉样蛋白免疫反应阳性神经元的形态学观察及测定 各组大鼠分别于治疗3个月后处死。处死前均先做行为测试。常规灌注、固定、取脑、振动切片。免疫细胞化学ABC法，光镜下观察海马结构齿状回和CA1区淀粉样蛋白免疫反应阳性(AP-Li)神经元的形态和数目变化。以上结果均进行统计学t检验处理。
2 结 果
2.1 行为测试 续断组大鼠治疗3个月后，较对照组大鼠受电击次数减少，潜伏期延长，两者之间均有显著性差异(P<0.01)，见表1。
表1 AD模型大鼠受电击次数和潜伏期的变化(
±s) 组别
n
电击次数
, 百拇医药
潜伏期
对照组
10
2.31±0.58
50.31±24.41
续断组
10
1.44±0.501)
94.25±19.651)
与对照组比较：1)P<0.01，下表同
2.2 海马结构齿状回和CA1区AP-Li神经元的形态和数目的变化 对照组大鼠海马结构内可见大量的AP-Li神经元，多呈梭形和锥体形，主要集中分布于齿状回和CA1区。β-淀粉样蛋白(β-AP)阳性反应产物呈棕黄色细颗粒状，位于神经元核周质和突起及其分支。续断组大鼠海马结构AP-Li神经元形态、分布与对照组无明显变化，但数目明显减少(P<0.01)(表2)，β-AP阳性反应产物明显减少。
, http://www.100md.com
表2 AD模型大鼠海马结构AP-Li神经元数目变化(±s) 组别
n
齿状回
CA1区
对照组
10
19.98±7.21
25.50±6.40
续断阻
10
12.86±5.361)
, 百拇医药
14.31±5.871)
3 讨 论
AD患者临床表现主要是记忆功能、语言功能和认知功能的缺损。学习记忆功能的改善是AD治疗效果的重要指标。行为测试结果显示续断治疗3个月后AD大鼠受电击次数和潜伏期较对照组明显减少和增长，表明AD大鼠的学习记忆状况有明显改善，说明续断可恢复AD模型大鼠的记忆缺损。
β-AP是β-淀粉样前体蛋白的病理性裂解产物，正常情况下不表达。β-AP具有明显的神经毒素作用，其在神经元中和突触间的沉积是导致AD患者痴呆的最重要的原因〔3〕。本实验结果显示续断组大鼠治疗3个月后海马结构齿状回和CA1区的AP-Li神经元数量均较对照组明显减少，β-AP样免疫反应染色减弱，表明续断有抑制和清除海马结构β-AP沉积的作用。结合行为测试结果，我们认为续断对AD模型大鼠的治疗作用是通过抑制和清除海马结构β-AP的沉积来实现的。
, 百拇医药
1 国家自然科学基金资助(39400178)
作者简介：胡海涛，男，52岁，教授，博导，从事神经生物学研究
4 参考文献
1 傅仁杰，葛茂根，孟家眉 et al.老年期痴呆证治座谈.中医杂志，1991；32(1)：39
2 张永之，薛 智.川续断中皂甙Ⅹ、Ⅺ和Ⅻ的结构研究.药学学报，1993；28(5)：358
3 徐 铃.阿茨海默病的生化与分子生物学研究新进展.国外医学*老年医学分册，1994；15(1)：4
〔1998-12-14收稿〕, 百拇医药
单位：西安医科大学解剖教研室，西安 710061
关键词：续断；Alzheimer病；β-淀粉样蛋白；大鼠
中国老年学杂志/990321
摘 要 目的 探讨续断抗衰老作用的机理。方法 用续断(2g/d/只)对AD模型大鼠灌胃治疗3个月。通过行为测试，光镜免疫细胞化学ABC法，对AD大鼠行为改变，海马结构齿状回和CA1区AP-Li神经元的形态和数目，β-AP的沉积变化进行了观察。结果 续断组大鼠较对照组受电击次数减少，潜伏期延长(P<0.01)，海马结构齿状回和CA1区AP-Li神经元的数目较对照组均有明显减少(P<0.01)，β-AP样反应染色减少。结论 续断可以恢复AD模型大鼠的学习记忆缺损，有抑制和清除海马结构齿状回和CA1区β-AP的沉积的作用。
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Effects of dipsacus asper on β-AP
deposit in hippocampal structure of the rat AD disease model
Hu Haitao Yang Jie Qian Yihua et al
Department of Anatomy,Xi'an Medical University Xi'an 710061
The mechanism of dipsacus asper's antiaging action was detected with th e model of dementia.The rats were treated by dipsacus asper 2g/d,po.The alterna tion of rat's behaviour,the number and the average area as well as absorbance of AP-Li neurons and β-AP deposit in hippocampal structure were observed.The re su lts showed that after three monthes' treatment the fuequency of electric shock w as decreased,incubation period was prolonged.the number of AP-Li neuron in CAI region and dentate gyrus were decreased.The results suggest that dipsacus asper can recover the learning and memorizing abilities of the AD rats,and the mechani sm was suggested that the prevent of β-AP from depositing and the deposited β-AP in CAI region and dentate gyrus can be cleared by the drug.
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Key words Dipsacus asper Hippocampus β-amyloid prot ein Rat
续断有补肝肾，强筋骨，通血脉之功能，近年研究发现续断具有抗衰老作用，但作用机制不详〔1〕。Alzheimer病(AD)是最常见的老年性痴呆，目前国内外尚无理想有效的治疗方法。为此，我们用AD模型，大鼠进行了有关续断对AD治疗作用的实验研究。
1 材料和方法
1.1 实验动物与分组 选用健康SD成年大鼠20只，随机分为续断组和对照组，每组10只。
1.2 痴呆模型的建立 实验开始前，全部大鼠先做行为测试即一次性避暗回避试验，记录10 min内受电击次数及每次潜伏期。两组大鼠均用三氯化铝(AlCl3)溶液，按50mgAlCl3/100g体重/d灌胃，连续3个月，再进行行为测试，10min内电击次数大于对照值2倍，平均潜伏期小于对照组20%者为成功AD模型。续断组AD模型小鼠用续断(按2g/d/只)灌胃治疗，对照组用等量的蒸馏水代替。
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1.3 海马结构淀粉样蛋白免疫反应阳性神经元的形态学观察及测定 各组大鼠分别于治疗3个月后处死。处死前均先做行为测试。常规灌注、固定、取脑、振动切片。免疫细胞化学ABC法，光镜下观察海马结构齿状回和CA1区淀粉样蛋白免疫反应阳性(AP-Li)神经元的形态和数目变化。以上结果均进行统计学t检验处理。
2 结 果
2.1 行为测试 续断组大鼠治疗3个月后，较对照组大鼠受电击次数减少，潜伏期延长，两者之间均有显著性差异(P<0.01)，见表1。
表1 AD模型大鼠受电击次数和潜伏期的变化(
±s) 组别n
电击次数
, 百拇医药
潜伏期
对照组
10
2.31±0.58
50.31±24.41
续断组
10
1.44±0.501)
94.25±19.651)
与对照组比较：1)P<0.01，下表同
2.2 海马结构齿状回和CA1区AP-Li神经元的形态和数目的变化 对照组大鼠海马结构内可见大量的AP-Li神经元，多呈梭形和锥体形，主要集中分布于齿状回和CA1区。β-淀粉样蛋白(β-AP)阳性反应产物呈棕黄色细颗粒状，位于神经元核周质和突起及其分支。续断组大鼠海马结构AP-Li神经元形态、分布与对照组无明显变化，但数目明显减少(P<0.01)(表2)，β-AP阳性反应产物明显减少。
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表2 AD模型大鼠海马结构AP-Li神经元数目变化(
±s) 组别n
齿状回
CA1区
对照组
10
19.98±7.21
25.50±6.40
续断阻
10
12.86±5.361)
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14.31±5.871)
3 讨 论
AD患者临床表现主要是记忆功能、语言功能和认知功能的缺损。学习记忆功能的改善是AD治疗效果的重要指标。行为测试结果显示续断治疗3个月后AD大鼠受电击次数和潜伏期较对照组明显减少和增长，表明AD大鼠的学习记忆状况有明显改善，说明续断可恢复AD模型大鼠的记忆缺损。
β-AP是β-淀粉样前体蛋白的病理性裂解产物，正常情况下不表达。β-AP具有明显的神经毒素作用，其在神经元中和突触间的沉积是导致AD患者痴呆的最重要的原因〔3〕。本实验结果显示续断组大鼠治疗3个月后海马结构齿状回和CA1区的AP-Li神经元数量均较对照组明显减少，β-AP样免疫反应染色减弱，表明续断有抑制和清除海马结构β-AP沉积的作用。结合行为测试结果，我们认为续断对AD模型大鼠的治疗作用是通过抑制和清除海马结构β-AP的沉积来实现的。
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1 国家自然科学基金资助(39400178)
作者简介：胡海涛，男，52岁，教授，博导，从事神经生物学研究
4 参考文献
1 傅仁杰，葛茂根，孟家眉 et al.老年期痴呆证治座谈.中医杂志，1991；32(1)：39
2 张永之，薛 智.川续断中皂甙Ⅹ、Ⅺ和Ⅻ的结构研究.药学学报，1993；28(5)：358
3 徐 铃.阿茨海默病的生化与分子生物学研究新进展.国外医学*老年医学分册，1994；15(1)：4
〔1998-12-14收稿〕, 百拇医药