新型免疫抑制剂来氟米特合成的改进*
作者：陈卫民 徐继红
单位：第一军医大学药物研究所，广州，510515
关键词：来氟米特；免疫抑制剂；合成
新型免疫抑制剂来氟米特合成的改进摘要：目的 合成新型免疫抑制剂来氟米特。方法 以乙酰乙酸乙酯为原料与N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛反应，所得产物同盐酸羟胺反应合成5-甲基-4-异噁唑甲酸乙酯；后者经水解、酰氯化，与对三氟甲基苯胺反应合成出来氟米特。结果 所得产品结构均经IR、1HNMR、MS等光谱鉴定。
中图分类号：O623
Improvement of synthesis of leflunomide as immunosuppressive drug
, http://www.100md.com Chen Weimin, Xu Jihong
Institute of Pharmaceutical Sciences, First Military Medical University, Guangzhou, 510515
Abstract：Objective To synthesize the new immunosuppressive drug, Leflunomide. Methods Reaction of ethyl acetoacetate with N,N-dimethylfomamide dimethyl acetal gave ethyl 2-dimethylaminomethyleneacetoac-etate which reacted with hydroxylamine hydrochloride to afford 5-methyl-4-isoxazolecarboxylate. The ester was hydrolyzed to the corresponding carboxylic acid which reacted with thionyl chloride to yield 5-methyl-4-isoxazolecarboxylic acid chloride. Final reaction of the acid chloride with p-trifluoromethylaniline produced the Leflunomide. Results The structures of the products were identified by IR, 1HNMR, MS.
, http://www.100md.com
Key words：leflunomide; immunosuppressive drug; synthesis
来氟米特(leflunomide，LEF)是一种新型免疫抑制剂[1]，最近的研究显示该化合物与环孢素合用可延长动物器官移植的存活[2]。我们在参考有关文献[3～5]的基础上对该化合物的合成工艺进行了研究,合成路线如下：
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂 熔点用X4型显微熔点测定仪测定(温度未校正)；红外光谱(IR)用NICOLET FT-IR红外光谱仪测定(KBr压片)；核磁共振氢谱(1HNMR)用JOEL FX90Q核磁共振光谱仪测定(CDCl3为溶剂，TMS为内标)；质谱(MS)用VG ZAB-HS 质谱仪 测定(FAB)。
, http://www.100md.com
1.2 N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛的合成 N，N-二甲基甲酰胺58.4 g(0.8 mol)加硫酸二甲酯100.8 g(0.8 mol)于500 ml的三口瓶中，N2保护下先室温反应1 h，然后升温于60～80℃反应2 h。冰盐浴冷却反应瓶至0℃，滴加甲醇钠(18.4 g钠与260 ml绝对甲醇反应制得)，控温于0℃左右，约1 h加完。于室温搅拌2 h。常压下蒸出甲醇。最后分馏出产品66.8 g (收率：70.2%)，104~105℃/97.5 kPa (731.3 mmHg ) 。
1.3 5-甲基-4-异噁唑甲酸乙酯(3)的合成 36.4 g(0.28 mol)乙酰乙酸乙酯加41 g(0.34 mol)N，2. N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛，3. 搅拌回流1 h。减压蒸出过量的缩醛，4. 得橙红色溶液。加300 ml甲醇，5.21 g(0.3 mol)盐酸羟胺，6.回流1 h。蒸出约200 ml甲醇，7. 冷置，8. 加水300 ml。以二氯甲烷萃取(100 ml 4次)，9.合并萃取液，10.水洗(100 ml 2次)。无水硫酸镁干燥。蒸去二氯甲烷，11.减压蒸馏，12.收集90~ 95℃/2.67 kPa (20.03 mmHg) 馏分，13.得无色透明液体31g(收率：71.4%)。IR υ(cm-1):1 720, 1 613, 1 483, 1 420, 1 384; 1HNMR δ(ppm)：1.37 (3 H, t, EtCH3), 2.2.69 (3 H, s, CH3-5), 4.35 (2 H, q, CH2), 8.47 (1 H, s, H-3).
, 百拇医药
1.4 5-甲基-4-异噁唑甲酸(4)的合成 37 g(0.24 mol)化合物3加100 ml浓盐酸，加热回流1 h。放冷，加70 ml水，再蒸去溶剂，得灰色固体。加50 ml丙酮，再蒸去丙酮。以甲苯重结晶，得25.1 g产品(回收率：83.7%)。mp：145~147℃。IR (KBr) υ(cm-1)：3200~ 2500, 1696, 1615, 1490, 1 462, 1HNMR δ(ppm)：2.71(3 H, s, CH3), 8.52 (1 H, s, H-3), 12.07 (1 H, s, COOH) 。
1.5 5-甲基-4-异噁唑甲酰氯(5)的合成 20g(0.16mol)化合物 4 置于250 ml三口瓶中，滴加70 ml氯化亚砜。滴完后于120℃加热回流1h。冷至室温，蒸去过量的氯化亚砜。加乙腈(20ml 2次)，并减压蒸出。所得溶液立即用于下一步反应。
, http://www.100md.com 1.6 来氟米特的合成 将45 g(0.28 mol)对三氟甲基苯胺溶于360ml干燥的乙腈中，滴加22.5 g(0.15mol)5的60ml乙腈溶液，室温搅拌1 h。抽滤。滤液蒸干。以210ml甲苯重结晶，得32.8 g产品(回收率：81%), mp：162~ 163 ℃。IR (KBr) υ(cm-1)：3332(-NH)，1 693 (C=O)，1609，1539，1321，1 117，1 060，1HNMR δ(ppm)：2.74(3 H，s，-CH3)，7.56 (2 H，d，benzene H-2，H-6)，7.90 (2 H，d，benzene H-3，H-5)，8.99 (1 H，s，H-3)，10.86 (1H，s，-MS m/z (%)：271 (M+1，100%)，162，150。
2 结果与讨论
来氟米特的合成已有文献报道[3]，但该专利文献只描述了终产品的合成。我们参照有关文献[4，5]从易得原料入手，对其进行全合成。并对工艺进行了合理的改进：(1) 改进了N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛的合成，采用N2保护使无水操作易于进行，产率提高；(2) 由化合物 1合成3采用一锅法，避免了文献方法合成2的分子蒸馏方法，使操作更简单；(3) 由化合物4合成6也不分离纯化5，而是直接将5与对三氟甲基苯胺反应，使产率得以提高。
, http://www.100md.com
*广洲市科委重点项目(97-Z-48-10)
作者简介：陈卫民，男1963年生；1998年毕业于中山大学；博士，副教授；电话：85148177
参考文献
1 Thomson AW, Starzl TE. New immunosuppressive drugs:mechanistic insights,and potential therapeutic advances. Immunol Rev. 1993,136:71
2 Wennberg L, Karlsson PA, Sundberg B et al. Efficacy in immunosuppr essive drugs in islet xenotransplantation：leflunomide in combination with cyclosporine and mycophenolate mofetil prevents is let xenograft rejection in the pig-to-rat model.Transplantation, 1997, 63(9):1234
, http://www.100md.com
3 Bartlett RR. 5-methylisoxazole-4-carboxylicacid 4-(trifluoromethyl) anilide and its metabolite for treatment of organ transplant rejection, Ger offen DE 4127737, 1993, Feb 25
4 Menozzi G, Mosti L, Schenone P. Reaction of 2-dimethylaminomethyl-ene-1, 3-diones with dinucleophiles.VI. synthesis of ethyl or methyl 1, 5-disubstituted 1H-pyrazole-4-carboxylates, J Hetercyclic Chem,1987, 24：1669
5 Schenone P, Fossa P, Menozzi G. Reactionof 2- dimethylaminomethy lene-1, 3-diones with dinucleophiles. X. synthesis of 5-substituted ethyl or methyl 4-isoxazolecarboxylates and methyl 4- (2, 2-dimethyl-1-oxopropyl)-5-isoxazolecarboxylate, J Hetercyclic Chem,1991, 28：453
(收稿日期：1998-10-23), 百拇医药
单位：第一军医大学药物研究所，广州，510515
关键词：来氟米特；免疫抑制剂；合成
新型免疫抑制剂来氟米特合成的改进摘要：目的 合成新型免疫抑制剂来氟米特。方法 以乙酰乙酸乙酯为原料与N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛反应，所得产物同盐酸羟胺反应合成5-甲基-4-异噁唑甲酸乙酯；后者经水解、酰氯化，与对三氟甲基苯胺反应合成出来氟米特。结果 所得产品结构均经IR、1HNMR、MS等光谱鉴定。
中图分类号：O623
Improvement of synthesis of leflunomide as immunosuppressive drug
, http://www.100md.com Chen Weimin, Xu Jihong
Institute of Pharmaceutical Sciences, First Military Medical University, Guangzhou, 510515
Abstract：Objective To synthesize the new immunosuppressive drug, Leflunomide. Methods Reaction of ethyl acetoacetate with N,N-dimethylfomamide dimethyl acetal gave ethyl 2-dimethylaminomethyleneacetoac-etate which reacted with hydroxylamine hydrochloride to afford 5-methyl-4-isoxazolecarboxylate. The ester was hydrolyzed to the corresponding carboxylic acid which reacted with thionyl chloride to yield 5-methyl-4-isoxazolecarboxylic acid chloride. Final reaction of the acid chloride with p-trifluoromethylaniline produced the Leflunomide. Results The structures of the products were identified by IR, 1HNMR, MS.
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Key words：leflunomide; immunosuppressive drug; synthesis
来氟米特(leflunomide，LEF)是一种新型免疫抑制剂[1]，最近的研究显示该化合物与环孢素合用可延长动物器官移植的存活[2]。我们在参考有关文献[3～5]的基础上对该化合物的合成工艺进行了研究,合成路线如下：
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂 熔点用X4型显微熔点测定仪测定(温度未校正)；红外光谱(IR)用NICOLET FT-IR红外光谱仪测定(KBr压片)；核磁共振氢谱(1HNMR)用JOEL FX90Q核磁共振光谱仪测定(CDCl3为溶剂，TMS为内标)；质谱(MS)用VG ZAB-HS 质谱仪 测定(FAB)。
, http://www.100md.com
1.2 N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛的合成 N，N-二甲基甲酰胺58.4 g(0.8 mol)加硫酸二甲酯100.8 g(0.8 mol)于500 ml的三口瓶中，N2保护下先室温反应1 h，然后升温于60～80℃反应2 h。冰盐浴冷却反应瓶至0℃，滴加甲醇钠(18.4 g钠与260 ml绝对甲醇反应制得)，控温于0℃左右，约1 h加完。于室温搅拌2 h。常压下蒸出甲醇。最后分馏出产品66.8 g (收率：70.2%)，104~105℃/97.5 kPa (731.3 mmHg ) 。
1.3 5-甲基-4-异噁唑甲酸乙酯(3)的合成 36.4 g(0.28 mol)乙酰乙酸乙酯加41 g(0.34 mol)N，2. N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛，3. 搅拌回流1 h。减压蒸出过量的缩醛，4. 得橙红色溶液。加300 ml甲醇，5.21 g(0.3 mol)盐酸羟胺，6.回流1 h。蒸出约200 ml甲醇，7. 冷置，8. 加水300 ml。以二氯甲烷萃取(100 ml 4次)，9.合并萃取液，10.水洗(100 ml 2次)。无水硫酸镁干燥。蒸去二氯甲烷，11.减压蒸馏，12.收集90~ 95℃/2.67 kPa (20.03 mmHg) 馏分，13.得无色透明液体31g(收率：71.4%)。IR υ(cm-1):1 720, 1 613, 1 483, 1 420, 1 384; 1HNMR δ(ppm)：1.37 (3 H, t, EtCH3), 2.2.69 (3 H, s, CH3-5), 4.35 (2 H, q, CH2), 8.47 (1 H, s, H-3).
, 百拇医药
1.4 5-甲基-4-异噁唑甲酸(4)的合成 37 g(0.24 mol)化合物3加100 ml浓盐酸，加热回流1 h。放冷，加70 ml水，再蒸去溶剂，得灰色固体。加50 ml丙酮，再蒸去丙酮。以甲苯重结晶，得25.1 g产品(回收率：83.7%)。mp：145~147℃。IR (KBr) υ(cm-1)：3200~ 2500, 1696, 1615, 1490, 1 462, 1HNMR δ(ppm)：2.71(3 H, s, CH3), 8.52 (1 H, s, H-3), 12.07 (1 H, s, COOH) 。
1.5 5-甲基-4-异噁唑甲酰氯(5)的合成 20g(0.16mol)化合物 4 置于250 ml三口瓶中，滴加70 ml氯化亚砜。滴完后于120℃加热回流1h。冷至室温，蒸去过量的氯化亚砜。加乙腈(20ml 2次)，并减压蒸出。所得溶液立即用于下一步反应。
, http://www.100md.com 1.6 来氟米特的合成 将45 g(0.28 mol)对三氟甲基苯胺溶于360ml干燥的乙腈中，滴加22.5 g(0.15mol)5的60ml乙腈溶液，室温搅拌1 h。抽滤。滤液蒸干。以210ml甲苯重结晶，得32.8 g产品(回收率：81%), mp：162~ 163 ℃。IR (KBr) υ(cm-1)：3332(-NH)，1 693 (C=O)，1609，1539，1321，1 117，1 060，1HNMR δ(ppm)：2.74(3 H，s，-CH3)，7.56 (2 H，d，benzene H-2，H-6)，7.90 (2 H，d，benzene H-3，H-5)，8.99 (1 H，s，H-3)，10.86 (1H，s，-MS m/z (%)：271 (M+1，100%)，162，150。
2 结果与讨论
来氟米特的合成已有文献报道[3]，但该专利文献只描述了终产品的合成。我们参照有关文献[4，5]从易得原料入手，对其进行全合成。并对工艺进行了合理的改进：(1) 改进了N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛的合成，采用N2保护使无水操作易于进行，产率提高；(2) 由化合物 1合成3采用一锅法，避免了文献方法合成2的分子蒸馏方法，使操作更简单；(3) 由化合物4合成6也不分离纯化5，而是直接将5与对三氟甲基苯胺反应，使产率得以提高。
, http://www.100md.com
*广洲市科委重点项目(97-Z-48-10)
作者简介：陈卫民，男1963年生；1998年毕业于中山大学；博士，副教授；电话：85148177
参考文献
1 Thomson AW, Starzl TE. New immunosuppressive drugs:mechanistic insights,and potential therapeutic advances. Immunol Rev. 1993,136:71
2 Wennberg L, Karlsson PA, Sundberg B et al. Efficacy in immunosuppr essive drugs in islet xenotransplantation：leflunomide in combination with cyclosporine and mycophenolate mofetil prevents is let xenograft rejection in the pig-to-rat model.Transplantation, 1997, 63(9):1234
, http://www.100md.com
3 Bartlett RR. 5-methylisoxazole-4-carboxylicacid 4-(trifluoromethyl) anilide and its metabolite for treatment of organ transplant rejection, Ger offen DE 4127737, 1993, Feb 25
4 Menozzi G, Mosti L, Schenone P. Reaction of 2-dimethylaminomethyl-ene-1, 3-diones with dinucleophiles.VI. synthesis of ethyl or methyl 1, 5-disubstituted 1H-pyrazole-4-carboxylates, J Hetercyclic Chem,1987, 24：1669
5 Schenone P, Fossa P, Menozzi G. Reactionof 2- dimethylaminomethy lene-1, 3-diones with dinucleophiles. X. synthesis of 5-substituted ethyl or methyl 4-isoxazolecarboxylates and methyl 4- (2, 2-dimethyl-1-oxopropyl)-5-isoxazolecarboxylate, J Hetercyclic Chem,1991, 28：453
(收稿日期：1998-10-23), 百拇医药