高压氧治疗对Ⅱ型糖尿病患者循环内皮细胞影响的初步探讨
作者：曾祥义 许利民 冯素贞
单位：第三军医大学附属大坪医院内分泌科 重庆，400042
关键词：高压氧；非胰岛素依赖型糖尿病；循环内皮细胞
Effect of hyperbaric oxygen on circulating endothelial cells in patients with nonEffect of hyperbaric oxygen on circulating endothelial cells in patients with non-insulin-dependent diabetes mellitus
提要 目的：研究高压氧治疗对糖尿病(DM)患者循环内皮细胞(CEC)的影响。方法：按1985年WHO标准选择糖尿病患者40例，并以10例健康献血员作对照，高压氧治疗每10天为1疗程，一般作2～3个疗程。治疗前后作CEC计数及血流变学、凝血功能测定。结果：经高压氧治疗后患者CEC数量下降，血流变学和凝血功能明显恢复。结论：高压氧对糖尿病血管并发症有一定治疗作用，可能与患者凝血功能和血液流变学改善有关。
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中图法分类号 R459.6;R587.1
糖尿病血管损害的原因尚不完全清楚，糖尿病的血管并发症已成为糖尿病(DM)防治工作的重点和难点。本实验观察了糖尿病患者在常规治疗基础上辅以高压氧(HBO)治疗对循环内皮细胞的影响，以探索HBO对糖尿病血管并发症的防治的临床价值。
1 对象和方法
1.1 观察对象
Ⅱ型糖尿病患者(按1985年WHO诊断标准)40例。20例无血管并发症者为Ⅰ组，男性8例，女性12例，平均年龄48.6(36～61岁)，平均病程3.6(0.4～6.0)年。20例伴血管并发症者为Ⅱ组，男性7例，女性13例，平均年龄51.2(41～70)岁，平均病程5.2(3.5～15)年。具有下列一项或一项以上者为合并血管并发症：(1)眼底检查有糖尿病视网膜病变；(2)糖尿病肾病；(3)脑梗塞；(4)糖尿病性肢端坏疽；(5)心电图检查有缺血性心脏病。在控制饮食、口服降糖药物或胰岛素治疗基础上辅以HBO治疗2～3疗程。10例正常对照为本院健康献血员，男性5例，女性5例，平均年龄42.6(40～50)岁。
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1.2 方法
用高压氧治疗，匀速加压约20 min至0.15 mPa，稳压面罩吸纯氧30 min，休息10 min后再吸纯氧30 min，匀速减压约20 min出舱。每日1次，连续10 d为1疗程。
1.3 检测指标
1.3.1 CEC的分离与计数 (1)清晨抽静脉血4.5 ml，用3.8%枸橼酸钠抗凝，将标本以395×g离心20 min收集上清；(2)将0.1%ADP液0.2 ml加入上清中，并置于yKH-Ⅱ型液体混合器中振荡10 min；(3)将(2)液再离心20 min(395×g)；(4)将(3)所得上清以2 100×g离心20 min，去其上清，其沉淀物含CEC，并经免疫莹光染色证实；(5)将生理盐水0.1 ml加入试管振荡10 min备检；(6)取上述悬液少许滴于血细胞计数池中，光镜下计数，同一标本计数4次，取其均值，单位n/0.9μl。
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1.3.2 血液流变学及凝血功能检查 (1)肝素抗凝血3.5 ml，FAS-92全自动连续切变血液粘度快测仪检测血液流变学各项指标；(2)10%枸橼酸钠抗凝血3.0 ml，TYXN-91智能血液凝集仪检测血浆纤维蛋白原(Fg)含量及血小板聚集功能(PAG)。
1.4 统计学处理
检测结果以x±s表示，组内及组间比较采用t检验。
2 结果
各组CEC计数，凝血机能和血液流变学各指标检测结果见表1和表2。与对照组比较，糖尿病Ⅰ组和Ⅱ组HBO治疗前CEC、凝血功能及血液粘滞度明显增高，尤其Ⅱ组更为明显，但两组比较差异无显著性(P>0.05)。
在经HBO治疗2～3疗程后，CEC计数及高粘滞血症、高凝状态显著降低，接近正常水平，治疗后的CEC计数及血流变学，凝血功能各项指标与对照组差异无显著性(P>0.05)。
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表1 Ⅱ型糖尿病患者HBO治疗后CEC及Fg、PAG变化(x±s)
项目
对照组
(10例)
Ⅰ组(20例)
Ⅱ组(20例)
治疗前
治疗后
治疗前
治疗后
CEC(n/0.9μl)
1.76±0.79
, 百拇医药
3.12±1.10※
1.97±0.83△
3.40±0.97※
2.06±0.95△
Fg(g/L)
2.20±0.46
2.97±0.52※
2.11±0.45△
3.16±0.61※
2.14±0.48△
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PAG(%)
56.30±10.98
76.20±12.12※
59.44±4.76△
80.04±16.26※
61.48±10.24△
与对照组比较※：P<0.01;HBO治疗前后比较△：P<0.01表2 Ⅱ型糖尿病患者HBO治疗后血液流变学变化(x±s)
项目
对照组
(10组)
, http://www.100md.com
Ⅰ组(20例)
Ⅱ组(20例)
治疗前
治疗后
治疗前
治疗后
高切(200/s)
4.10±0.46
5.29±0.41※※
4.05±0.39△△
5.88±0.46※※
, 百拇医药
4.01±0.33△△
全血粘度
中切(30/s)
5.22±0.60
6.98±0.69※※
5.16±0.66△△
7.20±0.62※※
5.32±0.60△△
低切(3/s)
8.56±1.60
, 百拇医药
12.45±1.48※※
3.34±1.40△△
16.66±1.68※※
9.39±1.49△△
血浆粘度
1.40±0.14
1.78±0.14※※
1.36±0.12△△
1.99±0.18※※
1.40±0.13△△
, 百拇医药
红细胞压积
0.40±0.05
0.50±0.06※
0.41±0.05
0.52±0.07※※
0.40±0.04△△
红细胞还原粘度
7.12±1.86
8.61±1.96※
7.06±1.76
8.96±2.01※※
, http://www.100md.com
7.04±1.80△△
红细胞变形指数
0.77±0.22
0.92±0.26※※
0.76±0.23△△
0.99±0.28※※
0.74±0.24△△
与对照组比较※：P<0.05,※※:P<0.01;HBO治疗前后比较△：P<0.05，△△：P<0.01。
3 讨论
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CEC是指在生理或病理情况下从循环血中获得的脱落的血管内皮细胞[1]。由于CEC是目前在活体内唯一可以特异而直接反映血管损伤的指示物，因而CEC计数可以从某个方面反映血管内皮损伤的情况[2]。本实验观察到DM患者在HBO治疗后CEC明显下降，提示HBO治疗对DM患者血管内皮具有一定保护作用。
HBO在医学上已广泛运用并得以迅速发展。研究表明其在抗感染、抗肿瘤[3～6]、创伤修复及免疫调节等方面均有显著治疗作用。对糖尿病而言HBO可能通过抑制糖皮质激素，生长激素及胰高血糖素的分泌使其拮抗胰岛素的作用减弱。从而增加S肽分泌，提高组织对胰岛素的敏感性，达到降低血糖和稳定糖代谢作用[7]。此外，高压氧治疗后高粘滞血症、高凝状态可得到明显改善，提示高粘滞血症，可能是糖尿病血管并发症的一个重要发病机制。
作者简介：曾祥义，男，40岁，主治医师，讲师，学士
, 百拇医药
参考文献
1 杨映波.循环内皮细胞研究的意义及动向.国外医学心血管分册，1992(3).158
2 Marin M L, Gordon R E, Hordy M A,et al. Immunomodu-Lation of vascular endothelium. J Surg Res,1990,48(2):134
3 Grim P S, Gottlied L J, Boddie A, et al. Hyperbaric oxygen therapy. JAMA,1990,263(10)：2216
4 Delapaz M A, Patrinely J R, Marines H M, et al. Adjunctive hyperbaric oxygen in treatment of bilateral cerbrorhino-orbital mucormycosis. Am J Ophthalmol,1992,114(2):208
, 百拇医药
5 Sealy R. Hyperbaric oxygen in the radiation treatment of head and neck cancers. Radiother Oncol,1991,20(1):75
6 Inamoto Y, Okumo F, Saito K, et al. Effect of hyperbaric oxgyenation on macrophage function in mice. Biochem Biophys Res commun,1991,179(2):886
7 滕燕生，吕占平主译.高压氧疗法的基础与临床.青岛：青岛海洋大学出版社，1992.255～259
(收稿：1998-04-25；修回：1998-12-20), http://www.100md.com
单位：第三军医大学附属大坪医院内分泌科 重庆，400042
关键词：高压氧；非胰岛素依赖型糖尿病；循环内皮细胞
Effect of hyperbaric oxygen on circulating endothelial cells in patients with nonEffect of hyperbaric oxygen on circulating endothelial cells in patients with non-insulin-dependent diabetes mellitus
提要 目的：研究高压氧治疗对糖尿病(DM)患者循环内皮细胞(CEC)的影响。方法：按1985年WHO标准选择糖尿病患者40例，并以10例健康献血员作对照，高压氧治疗每10天为1疗程，一般作2～3个疗程。治疗前后作CEC计数及血流变学、凝血功能测定。结果：经高压氧治疗后患者CEC数量下降，血流变学和凝血功能明显恢复。结论：高压氧对糖尿病血管并发症有一定治疗作用，可能与患者凝血功能和血液流变学改善有关。
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中图法分类号 R459.6;R587.1
糖尿病血管损害的原因尚不完全清楚，糖尿病的血管并发症已成为糖尿病(DM)防治工作的重点和难点。本实验观察了糖尿病患者在常规治疗基础上辅以高压氧(HBO)治疗对循环内皮细胞的影响，以探索HBO对糖尿病血管并发症的防治的临床价值。
1 对象和方法
1.1 观察对象
Ⅱ型糖尿病患者(按1985年WHO诊断标准)40例。20例无血管并发症者为Ⅰ组，男性8例，女性12例，平均年龄48.6(36～61岁)，平均病程3.6(0.4～6.0)年。20例伴血管并发症者为Ⅱ组，男性7例，女性13例，平均年龄51.2(41～70)岁，平均病程5.2(3.5～15)年。具有下列一项或一项以上者为合并血管并发症：(1)眼底检查有糖尿病视网膜病变；(2)糖尿病肾病；(3)脑梗塞；(4)糖尿病性肢端坏疽；(5)心电图检查有缺血性心脏病。在控制饮食、口服降糖药物或胰岛素治疗基础上辅以HBO治疗2～3疗程。10例正常对照为本院健康献血员，男性5例，女性5例，平均年龄42.6(40～50)岁。
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1.2 方法
用高压氧治疗，匀速加压约20 min至0.15 mPa，稳压面罩吸纯氧30 min，休息10 min后再吸纯氧30 min，匀速减压约20 min出舱。每日1次，连续10 d为1疗程。
1.3 检测指标
1.3.1 CEC的分离与计数 (1)清晨抽静脉血4.5 ml，用3.8%枸橼酸钠抗凝，将标本以395×g离心20 min收集上清；(2)将0.1%ADP液0.2 ml加入上清中，并置于yKH-Ⅱ型液体混合器中振荡10 min；(3)将(2)液再离心20 min(395×g)；(4)将(3)所得上清以2 100×g离心20 min，去其上清，其沉淀物含CEC，并经免疫莹光染色证实；(5)将生理盐水0.1 ml加入试管振荡10 min备检；(6)取上述悬液少许滴于血细胞计数池中，光镜下计数，同一标本计数4次，取其均值，单位n/0.9μl。
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1.3.2 血液流变学及凝血功能检查 (1)肝素抗凝血3.5 ml，FAS-92全自动连续切变血液粘度快测仪检测血液流变学各项指标；(2)10%枸橼酸钠抗凝血3.0 ml，TYXN-91智能血液凝集仪检测血浆纤维蛋白原(Fg)含量及血小板聚集功能(PAG)。
1.4 统计学处理
检测结果以x±s表示，组内及组间比较采用t检验。
2 结果
各组CEC计数，凝血机能和血液流变学各指标检测结果见表1和表2。与对照组比较，糖尿病Ⅰ组和Ⅱ组HBO治疗前CEC、凝血功能及血液粘滞度明显增高，尤其Ⅱ组更为明显，但两组比较差异无显著性(P>0.05)。
在经HBO治疗2～3疗程后，CEC计数及高粘滞血症、高凝状态显著降低，接近正常水平，治疗后的CEC计数及血流变学，凝血功能各项指标与对照组差异无显著性(P>0.05)。
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表1 Ⅱ型糖尿病患者HBO治疗后CEC及Fg、PAG变化(x±s)
项目
对照组
(10例)
Ⅰ组(20例)
Ⅱ组(20例)
治疗前
治疗后
治疗前
治疗后
CEC(n/0.9μl)
1.76±0.79
, 百拇医药
3.12±1.10※
1.97±0.83△
3.40±0.97※
2.06±0.95△
Fg(g/L)
2.20±0.46
2.97±0.52※
2.11±0.45△
3.16±0.61※
2.14±0.48△
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PAG(%)
56.30±10.98
76.20±12.12※
59.44±4.76△
80.04±16.26※
61.48±10.24△
与对照组比较※：P<0.01;HBO治疗前后比较△：P<0.01表2 Ⅱ型糖尿病患者HBO治疗后血液流变学变化(x±s)
项目
对照组
(10组)
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Ⅰ组(20例)
Ⅱ组(20例)
治疗前
治疗后
治疗前
治疗后
高切(200/s)
4.10±0.46
5.29±0.41※※
4.05±0.39△△
5.88±0.46※※
, 百拇医药
4.01±0.33△△
全血粘度
中切(30/s)
5.22±0.60
6.98±0.69※※
5.16±0.66△△
7.20±0.62※※
5.32±0.60△△
低切(3/s)
8.56±1.60
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12.45±1.48※※
3.34±1.40△△
16.66±1.68※※
9.39±1.49△△
血浆粘度
1.40±0.14
1.78±0.14※※
1.36±0.12△△
1.99±0.18※※
1.40±0.13△△
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红细胞压积
0.40±0.05
0.50±0.06※
0.41±0.05
0.52±0.07※※
0.40±0.04△△
红细胞还原粘度
7.12±1.86
8.61±1.96※
7.06±1.76
8.96±2.01※※
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7.04±1.80△△
红细胞变形指数
0.77±0.22
0.92±0.26※※
0.76±0.23△△
0.99±0.28※※
0.74±0.24△△
与对照组比较※：P<0.05,※※:P<0.01;HBO治疗前后比较△：P<0.05，△△：P<0.01。
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CEC是指在生理或病理情况下从循环血中获得的脱落的血管内皮细胞[1]。由于CEC是目前在活体内唯一可以特异而直接反映血管损伤的指示物，因而CEC计数可以从某个方面反映血管内皮损伤的情况[2]。本实验观察到DM患者在HBO治疗后CEC明显下降，提示HBO治疗对DM患者血管内皮具有一定保护作用。
HBO在医学上已广泛运用并得以迅速发展。研究表明其在抗感染、抗肿瘤[3～6]、创伤修复及免疫调节等方面均有显著治疗作用。对糖尿病而言HBO可能通过抑制糖皮质激素，生长激素及胰高血糖素的分泌使其拮抗胰岛素的作用减弱。从而增加S肽分泌，提高组织对胰岛素的敏感性，达到降低血糖和稳定糖代谢作用[7]。此外，高压氧治疗后高粘滞血症、高凝状态可得到明显改善，提示高粘滞血症，可能是糖尿病血管并发症的一个重要发病机制。
作者简介：曾祥义，男，40岁，主治医师，讲师，学士
, 百拇医药
参考文献
1 杨映波.循环内皮细胞研究的意义及动向.国外医学心血管分册，1992(3).158
2 Marin M L, Gordon R E, Hordy M A,et al. Immunomodu-Lation of vascular endothelium. J Surg Res,1990,48(2):134
3 Grim P S, Gottlied L J, Boddie A, et al. Hyperbaric oxygen therapy. JAMA,1990,263(10)：2216
4 Delapaz M A, Patrinely J R, Marines H M, et al. Adjunctive hyperbaric oxygen in treatment of bilateral cerbrorhino-orbital mucormycosis. Am J Ophthalmol,1992,114(2):208
, 百拇医药
5 Sealy R. Hyperbaric oxygen in the radiation treatment of head and neck cancers. Radiother Oncol,1991,20(1):75
6 Inamoto Y, Okumo F, Saito K, et al. Effect of hyperbaric oxgyenation on macrophage function in mice. Biochem Biophys Res commun,1991,179(2):886
7 滕燕生，吕占平主译.高压氧疗法的基础与临床.青岛：青岛海洋大学出版社，1992.255～259
(收稿：1998-04-25；修回：1998-12-20), http://www.100md.com